Asesor: Dr. Benjamín Florán Garduño, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

SISTEMA ENDOCANABINOIDES. USOS TERAPÉUTICOS.

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SISTEMA ENDOCANABINOIDES. USOS TERAPÉUTICOS.

Abarca Ovando Rebeca Yarely, Instituto Tecnológico de Acapulco. Asesor: Dr. Benjamín Florán Garduño, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Si bien sabemos la enfermedad del Parkinson es considerada la segunda enfermedad neurodegenerativa crónica del sistema nervioso central más común, actualmente no se ha encontrado alguna cura para dicha enfermedad. Afecta principalmente a la áreas del cerebro encargados del control del movimiento y  es definida como la muerte de las neuronas de una zona del cerebro denominada sustancia nigra pars compacta, encargadas de la producción de dopamina, una de las moléculas neurotransmisoras necesarias para que las señales viajen adecuadamente por el cerebro, y esta falta de dopamina es la que altera la señalización de los ganglios basales, encargados del control de movimiento. Puesto que afecta al sistema motor, es considerada una de las enfermedades que más disminuyen la calidad de vida del paciente.  El tratamiento que reciben las personas enfermas de parkinson solo sirven para mejorar los síntomas motores derivados del déficit dopaminérgico, en particular temblor, rigidez y bradicinesia. Sin embargo el tratamiento beneficia por unos 5-7 años, luego aparecen complicaciones motoras derivadas del tratamiento como lo son: Desaparición/aparición muy brusca de los síntomas propios del párkinson. Retardo en hacer efecto la primera dosis de mañana. Disminución del efecto de la medicación entre tomas. Discinesias. Contracciones involuntarias y sostenidas de grupos musculares. Los endocannabinoides son sustancias que se caracterizan por tener una estructura carbocíclica con 21 carbonos formado por 3 anillos: un ciclohexeno, un tetrahidrofurano y benceno. Influye en el aprendizaje y la memoria, la emoción, el comportamiento adictivo, en la alimentación y el metabolismo, el dolor y la neuroprotección, se ve involucrado en la modulación de distintos procesos a nivel cardiovascular e inmunológico, entre otros. Debido a esto,  investigaciones actuales apuestan por el uso de cannabinoides ya que, cuando los síntomas aparecen el sistema endocannabinoide se hiperactiva a la vez que se produce dopamina, debido a la degeneración de las  neuronas dopaminérgicas nigroestriatales.   Es conocido que el sistema endocannabinoide modula la transmisión de dopamina en los ganglios basales al actuar sobre los receptores CB1. También puede hacerlo por otras vías como por ejemplo por la formación de heterómeros CB1 con D1 o con D2, entre otros. Se cree que el sistema endocannabinoide puede ser manejable farmacológicamente, y así conseguir una liberación de dopamina y una mejora en los síntomas como el temblor,  Mientras que, con la bradicinesia, los resultados positivos han sido con los antagonistas del receptor CB1.

METODOLOGÍA

Para evaluar la participación de los cannabinoides en la actividad sináptica, se realizó las siguientes técnicas. OBTENCIÓN DE REBANADAS IN VIVO. Se ocupan cerebros de ratas los cuales son decapitados, posteriormente se expone el cerebro para hacer los cortes, para ello ya debe estar preparada una solución base la cual se compone por:   NaCl _____________ 1.24 𝛍m KCl ______________ 0.025 𝛍m MgCl2 ____________ 0.065 𝛍m NaH2PO4 _________ 0.26 𝛍m NaHCO3 __________ 0.26 𝛍m CaCl2 ____________ 0.24 𝛍m Glucosa __________  2.5 𝛍m Hay que tener en cuenta que se debe manejar un pH de 7.3 - 7.4. Y una temperatura fría para mantener las neuronas. El espesor de las rebanadas es de 300 uM, para ello se ocupa un vibratomo, el cual es un dispositivo que sirve para preparar cortes en fresco. Para mantener en óptimas condiciones el cerebro para realizar los cortes se realiza una solucion colina: Colina  KCl ____________  0.025 𝛍m MgCl2 __________  0.065 𝛍m NaHCO3 ________  0.26 𝛍m NaH2PO4 ________ 0.012 𝛍m CaCl2 ___________ 0.24 𝛍m Glucosa _________ 2.5 𝛍m Al obtener las rebanadas, estas se dejan incubando en O2/Co2 por una hora antes de iniciar los registros electrofisiológicos. ELECTROFISIOLOGÍA. Técnica que sirve para medir corriente eléctrica que pasa a través de la membrana en un canal sencillo en células, llamada patch clamp hace uso de las rebanadas obtenidas anteriormente, es usada para estudiar células excitables, aquellas que producen una pequeña corriente eléctrica cuando se estimulan. Estas incluyen principalmente células nerviosas y fibras musculares, se realiza de la siguiente manera. Se usa una micropipeta de vidrio con un diámetro suave con una abertura de aproximadamente 1um. Esto contrasta con microelectrodos nítidos que se usan con frecuencia en otras técnicas electrofisiológicas. La pipeta se llena con una solución en este compuesta por:   C5Cl ______________  260 𝛍m CaCl2 _____________  1.5 𝛍m MgCl2 _____________  6.0 𝛍m EGTA _____________ 15.0 𝛍m HEPES ____________ 10.0 𝛍m MaATP ____________  8.0 𝛍m GTP  Un electrodo de metal en contacto con esta solución conduce cambios eléctricos a un amplificador de voltaje. Este está presionado contra la membrana celular y se aplica succión para absorber la membrana dentro de la pipeta con el electrodo para formar un sello eléctricamente apretado de giga-ohm. La corriente en la célula puede ser anclada a la corriente y grabar los cambios de voltaje.

CONCLUSIONES

El sistema endocannabinoide es aquel que hace referencia a un sistema endógeno de producción de cannabinoides estos están implicados en varios procesos fisiológicos, en el transcurso de este verano aprendí que los cannabinoides pueden ser utilizados para usos terapéuticos tal es el caso de la enfermedad del parkinson pues se ha descubierto que los cannabinoides ayudan a aliviar los síntomas propios de la enfermedad. Asi como tambien a utilizar la tecnica de obtencion de rebanadas in vivo y electrofisiologia, la cual tiene como finalidad registrar una corriente de un ion en pico amperios a través de un canal celular dispuesto en una membrana esta permite la medida directa de la actividad individual de los canales de membrana, técnica que permite evaluar la participación de los cannabinoides en la función de los ganglios basales.

Asesor: Dr. Alejandro Morales Blake, Universidad de Colima

PROLIFERACIONES ALGALES TOXICAS Y/O NOCIVAS Y SU RELACION CON LA OCEANOGRAFíA EN LAS BAHíAS DE MANZANILLO, COL.

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PROLIFERACIONES ALGALES TOXICAS Y/O NOCIVAS Y SU RELACION CON LA OCEANOGRAFíA EN LAS BAHíAS DE MANZANILLO, COL.

Abundiz Dircio Cristian Jubenal, Universidad Autónoma de Guerrero. Maciel Sotelo Julio Cesar, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Alejandro Morales Blake, Universidad de Colima

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Es necesario conocer la oceanografía del lugar para entender mejor el desarrollo  de los fenómenos marinos, por lo que se debe estudiar la biología en conjunto con la oceanografía para así conocer la dinámica del desarrollo de las proliferaciones algales toxicas y nocivas principalmente su presencia, desarrollo, especies y condiciones ambientales que las acompañan.

METODOLOGÍA

Se consulto información de especies de microalgas que producen este fenómeno (artículos, claves y catálogos) para conocer la morfología externa de lo principales grupos de fitoplancton. Se realizaron muestreos quincenales en la bahía de Manzanillo para colectar muestras de fitoplancton utilizando una red conica de 20 µm y una botella niskin.             Se recabaron datos oceanográficos utilizando el disco de secchi y el CTD, también se midió el porcentaje de oxígeno con ayuda del oxímetro. Al concluir el monitoreo la muestra viva fue analizada y se realizaron filtraciones para análisis posteriores de clorofila en agua de mar, así también los datos del CTD fueron descargados. Las muestras de los últimos 6 años se les identifico la especie y contada su concentración celular por ml y un litro de agua, con ayuda de una celda de conteo (sedgewick rafter) en las cuales se encontraron Noctiluca scintillans, Myrionecta rubra, Alexandrium sp. y una especie nueva en manzanillo.                           Por último, se extrajeron y procesaron los datos del CTD del presente año, realizando gráficas verticales y de variación temporal.  

CONCLUSIONES

Se conocieron las especies que han producido marea roja en los últimos años, así como la concentración de estas células en agua de mar. Con los resultados obtenidos por los perfiles verticales de temperatura y densidad de agua de mar, se aprecio que entre mas somera se encuentre la termoclina y picnoclina, el desarrollo de las proliferaciones es mas consistente, por lo que se favorece el mantenimiento y la proliferación de estas debido al proceso en el cual los organismos migran verticalmente para adquirir nutrientes y después suben para realizar la fotosíntesis.

Asesor: M.C. María del Rosario Ortega Murillo, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

ANÁLISIS DEL FITOPLANCTON PARA DETERMIINAR LA CALIDAD DEL AGUA EN EL ESTANQUE DE BIOLOGIA ÁCUATICA DE LA UNIVERSIDAD MICHOACANA.

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ANÁLISIS DEL FITOPLANCTON PARA DETERMIINAR LA CALIDAD DEL AGUA EN EL ESTANQUE DE BIOLOGIA ÁCUATICA DE LA UNIVERSIDAD MICHOACANA.

Aburto Carbajal Francisco, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: M.C. María del Rosario Ortega Murillo, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

  La presente investigación se realizó en el estanque artificial que se encuentra en laboratorio de Biología Acuática de la Facultad de Biología de la Universidad Michoacana de San Nicolás Hidalgo. El fitoplancton se refiere a los organismos que se encuentran flotando en la superficie del sistema acuático y esta formado principalmente por las microalgas, los cuales son organismos microscópicos que presentan varias funciones entre las cuales se destacan como productores primarios y además por su utilización como indicadores de la calidad del agua, dichos organismos han sido poco estudiados en dicho estanque, motivo por el cual surge el interés de realizar el presente trabajo, para conocer las condiciones ambientales que influyen en la distribución de las microalgas en un ciclo de 24 horas.

METODOLOGÍA

Durante la permanencia se realizó 5 muestreos en las siguientes horas 12, 18, 24, 6 y 12 del día 28 y 29 de junio 2019 en el estanque de Biología acuática. Se efectuó el análisis de 6 parámetros fisicoquímicos, así como las colectas del material biológico de tres maneras: para el análisis cualitativo se realizaron dos recolectas con una red de cuchara de 39 micrones, efectuando el arrastre de forma horizontal a manera de ocho, una para ver los organismos en vivo y la otra se fijó con formol al 4%. También se colecto una muestra directa de 250 ml para el análisis cuantitativo, fijándose con formol al 4%. Todos los frascos se etiquetaron con sus datos correspondientes y se depositaron en laboratorio de Biología Acuática J. Javier Alvarado Díaz. Se revisaron 3 gotas del material vivo, mientras que del de la recolecta fijada, se efectuaron tres preparaciones semipermanentes con gelatina de tipo A y fenol; tanto el material en vivo y fijado se observaron con un microscopio compuesto de marca IROSCOPE, revisando con el lente de 10X y enfocando los organismos con el lente de 40X  dicho análisis se realizó en forma de zigzag, se utilizó la bibliografía especializada para determinación de la especie, así como fotografía. Las diatomeas fueron limpiadas con la técnica de Johasen (1940). Para la cuantificación se realizó una sedimentación en cubetas, colocándose 0.5 ml de muestra colectada y se le agrego agua destilada a 1ml de, dichas cubetas fueron analizadas en un microscopio invertido de marca Zeiss y el objetivo de 32 

CONCLUSIONES

Resultados De la revisión de las recolectas efectuadas a diferentes horarios  de los microorganismos del fitoplancton se determinaron 50 taxa a nivel de especie. Encontrando que las Cyanophyceae (algas azul verde) presentan los valores altos de riqueza de taxa. Las especies de Cosmarium bioculatum y Parvodinium inconspiccum encabezaron la abundancia entre las demás especies encontradas.  Conclusiones Se concluye que en la representación de mayor número de especies de algas azul verde indican la presencia de material orgánico en descomposición llegando a formar la capa húmica en el fondo de los cuerpos de agua o en litoral, así como la contribución al mantenimiento de los suelos fértiles, indicando un enriquecimiento de nitrógeno, también son consideradas extensos filtros sobre la superficie de los cuerpos de agua que absorben el agua reduciendo la erosión del suelo, además son indicadores de aguas cálidas, detectando temperaturas arriba de los 18oC, lo anterior se ve reflejado en el estanque. Con respecto a Cosmarium bioculatum, que es una charophyceae, es indicador de bajas profundidades, cosa que sucede en el estanque detectando una profundidad de 60 cm en la orilla del cuerpo de agua. Parvodinium inconspicumm, es un dinoflagelado, dicho grupo en temperatura cálidas y altas concentraciones de nutrimentos llega a formar florecimientos algales, sucediendo lo anterior en el estanque, detectando organismos incompleto.

Asesor: Dr. Irlanda Lagarda Diaz, Universidad de Sonora

ACTIVIDAD ANTIPROLIFERATIVA DE LA LECTINA DE LEGUMINOSAS EN LíNEAS CELULARES CANCERíGENAS

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ACTIVIDAD ANTIPROLIFERATIVA DE LA LECTINA DE LEGUMINOSAS EN LíNEAS CELULARES CANCERíGENAS

Acosta Garcia Andrea Fernanda, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Irlanda Lagarda Diaz, Universidad de Sonora

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El cáncer de mama es el cáncer más frecuente en las mujeres tanto en los países desarrollados así como en los países en desarrollo. La incidencia de cáncer de mama está aumentando en el mundo en desarrollo debido a la mayor esperanza de vida, el aumento de la urbanización y la adopción de estilos de vida occidentales. Este tipo de cáncer, con más de 410,000 defunciones cada año, representa cerca de 14% de todas las muertes debidas al cáncer en las mujeres y un 1.6% de todas las defunciones femeninas en todo el mundo. En México el cáncer de mama se ha convertido en un importante problema de salud pública. Con el tiempo, la mortalidad y el número de casos se han incrementado. A partir de 2006, se constituye como la primera causa de muerte por neoplasia maligna entre las mujeres mayores de 25 años de edad.

METODOLOGÍA

Se utilizaron dos líneas celulares de cáncer de mama MDA-MB-231 y T47D que fueron donadas por el  Laboratorio de Biofísica del Departamento de Física de la UNISON. Se descongelaron las células y se estuvieron cultivando por un periodo de dos semanas, se incubaron a 37°C y  CO2 al 5.0%. Para medir la viabilidad celular se realizó un ensayo de Rezasurina:  Se sembraron células en una microplaca y se incubó 24 horas, se utilizaron 3 concentraciones de lectina PF2 (C1= 500 µg/ml, C2= 200 µg/ml y C3= 50 µg/ml) para cada una de las líneas celulares. Se incubó la microplaca por 24 horas con la lectina PF2. Se agregó a cada pozo Rezasurina y se incubó por 4 horas, después se midió la absorbancia a dos longitudes de onda. Se registraron los datos y se utilizó la fórmula para obtener el porcentaje de viabilidad celular a la exposición a la lectina PF2 a diferentes concentraciones y desviación estándar. Los resultados fueron graficados y comparados entre ambas líneas celulares. Para la prueba de biorreconocimiento se realizó: Extracción de proteínas totales Se preparó el búfer de lisis celular, antes de agregar el búfer de lisis se centrifugaron los tubos con los dos tipos de células suspendidas en medio y se hicieron lavados con PBS, después se centrifugaron a condiciones recomendadas. Se agregó el búfer de lisis a los tubos solo con el sedimento y se suspendieron las células. Se colocaron en el sonicador con una amplitud del 25%  y se centrifugaron a 10000 rpm por 20 minutos. Se retiró el sobrenadante de ambos tubos. Se utilizó el método Bradford utilizando el espectrofotómetro para la medición de proteínas totales de la muestra obtenida de cada tipo celular. Electroforesis SDS- PAGE en gel de poliacrilamida Se preparó el gel de separación al 12% para cámara chica y el gel superior (Stacking). Se prepararon las muestras de proteínas totales de células MDA y T47D con búfer muestra 2x. En los pocillos, además de las muestras se agregó marcador de peso molecular y también marcador de peso molecular teñido. Se corrió el gel a 100 V. Al terminar la corrida, se cortó el gel para teñir una parte con azul de Comassie y la otra parte para Western Blot.  Ensayo de Lectino-detección En general el Western Blot consta de cuatro fases:  Transferencia de proteínas del gel a una membrana de nitrocelulosa en la cámara de transferencia Bloqueo de la membrana  Unión del ligando (lectina PF2 biotinilada) Revelado

CONCLUSIONES

Durante la estancia realizada se obtuvieron conocimientos teóricos y prácticos sobre las líneas celulares de cáncer de mama MDA-MB-231 y T47D y su mantenimiento, así como técnicas medición de proteínas, biorreconocimiento y viabilidad celular. El porcentaje de viabilidad de las células no fue afectado significativamente al exponerlas con lectina PF2 en las diferentes concentraciones, pero fue notable un cambio morfológico en células MDA y T47D. La lectina PF2 reconoce a glicoproteínas presentes en las células, observándose un mayor reconocimiento hacia proteínas presentes en células MDA. Los resultados obtenidos pueden contribuir con futuras investigaciones de blancos terapéuticos gracias al reconocimiento que poseen las lectinas, específicamente la PF2 hacia las líneas celulares MDA y T47D.

Asesor: Dr. Alejandra Piñón Gimate, Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas (IPN)

COMPOSICIóN ELEMENTAL DE TRES GRUPOS DE MACROALGAS EN LA BAHíA DE LA PAZ Y BAHíA GUAYMAS COMO INDICADOR DE DISTINTAS FUENTES DE NUTRIENTES

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COMPOSICIóN ELEMENTAL DE TRES GRUPOS DE MACROALGAS EN LA BAHíA DE LA PAZ Y BAHíA GUAYMAS COMO INDICADOR DE DISTINTAS FUENTES DE NUTRIENTES

Acosta Jimenez Eylin Ximena, Instituto Politécnico Nacional. Asesor: Dr. Alejandra Piñón Gimate, Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Composición elemental de tres grupos de macroalgas en la Bahía de La Paz y Bahía Guaymas como indicador de distintas fuentes de nutrientes Asesor: Dra. Alejandra Piñón Gimate, Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas Estudiante: Eylin Ximena Acosta Jiménez, Centro de Estudios Científicos y Tecnológicos No.18, IPN El enriquecimiento de nutrientes en exceso dentro de las zonas marinas en México, específicamente en la Bahía de la Paz, Baja California Sur y Bahía de Guaymas, Sonora, han perjudicado a los diferentes ecosistemas pertenecientes a dichas regiones. Estos problemas conllevan enormes repercusiones ecológicas que, con el tiempo, también podrían llegar a afectar zonas aledañas a estas regiones y posteriormente a mares y océanos de todo el mundo. En México, Según el estudio Algas como indicador de fuentes de nutrientes, realizado en 2005 por la Universidad del Valle, dice que la contaminación ambiental es uno de los factores con mayor incidencia en el deterioro de los recursos acuáticos del planeta. El análisis de sus causas y consecuencias, al igual que los mecanismos involucrados en su identificación y mitigación, es materia de preocupación entre las autoridades ambientales y de actualidad entre la comunidad científica mundial. La mayor problemática que se presenta por parte del enriquecimiento de nutrientes dentro de estas zonas marinas pertenecientes al Mar de Cortes, es el poder aprovechar las cualidades químicas de las macroalgas, tanto en aprovechamiento como en función, para poder identificar la principal fuente de emisión de nutrientes a los ecosistemas marítimos estudiados. Y así, encontrar una manera de identificar cuáles son aquellos compuestos o elementos que se encuentran en mayor concentración y poder evitar que sigan afectando enormemente a la flora y fauna acuáticas.

METODOLOGÍA

En el desarrollo de actividades dentro de la estancia de investigación se encuentra la creación de una base de datos digital donde se plasmó la colección de macroalgas colectadas por los maestros y profesores del laboratorio de macroalgas. Cada macroalga fue registrada con su número de catálogo, especie, familia, recolector, hábitat, fecha de recolección y nombre. Se registro un total de 2863 ejemplares de herbario. También se tuvo asistencia y participación dentro del ciclo de seminarios y conferencias del CICIMAR-IPN, un ejemplo es el seminario titulado Lluvia en BCS y Sistemas Meteorológico, dirigido por el Dr. Luis Farfán Molina. Así mismo también se asistió a exámenes profesionales de grado como el titulado Variabilidad espacial y temporal en de Thalassia Testidium en el Caribe mexicano como indicador de impacto antropogénico. Al igual que se llevó a cabo el etiquetado de muestras homogenizadas para la determinación de isotopos estables como lo fueron δ13 C y δ15N , dicho proceso consistió en 3 pasos: Organizar y ordenar muestras Reetiquetado de muestras para evitar perdida de información Almacenamiento de muestras Durante el transcurso de la tercera semana de estancia, dentro del programa de actividades se tuvo relación con la macroalga registrada como Sargazo. Con el objetivo de realizar una cosecha de dicha macroalga para poder realizar y aportar al proyecto a cargo de la Dra. Margarita Casas, se realizaron expediciones con el fin de recolectar suficiente cantidad para el proyecto. Así como también se colectaron otras especies de macroalgas pertenecientes a la zona geográfica. Dichas se identificaron y posteriormente se almacenaron. Algunas de ellas se identificaron como: Laurencia Codium Diyctiota Gracilaria Ulva Verde-azul (Cyanofita) Además, se realizó la preparación de muestras para análisis elemental, dividido en tres pasos: MACERAR: Homogenizar muestras ALMACENAR: Pesaje de 0.02 g de muestra para ser analizados en concentración de fosforo e isotopos ETIQUETAR: Separar de su replica Durante los primeros 3 días de esta semana se realizo la segunda salida programada con el fin de colectar macroalgas, toma de parámetros hidrofílicos y colecta de muestras de agua para análisis de nutrientes y clorofila α de la columna de agua. Estos tres procesos se repitieron en los tres sitios visitados (Tecolote, San Juan de la Costa y el Malecón o Casa del Marino) Cabe destacar que en cada sitio se colectaron diferentes macroalgas a fin de hacer una comparación entre sitios. Después de cada colecta, se proseguía a limpiar cada muestra de macroalga, secarla a 60° C y posteriormente almacenarla.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró adquirir conocimientos teóricos de las diferentes especies de macroalgas existentes, así como también de los tres tipos qué existen dentro del ecosistema acuático, su aprovechamiento y función en relación a sus propiedades químicas y como estas son útiles para indicar algún cambio dentro de su ambiente. Dentro de estos conocimientos teóricos, se adquirió una basta información sobre como las macroalgas son organismos vivos que son parte fundamental de su ambiente acuático y estas al mismo tiempo repercuten en la vida terrestre que llevamos día con día.   Dichas propiedades nos brindaron el resultado esperado en función a la identificación de la principal fuente de nutrientes dentro de las bahías antes mencionadas, el cual resulto ser de origen antropogénico. Sin embargo, no se logró completar con el registro digital de muestras de herbario.          

Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

DETERMINACIóN DE LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL Y DINáMICA POR RMN

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DETERMINACIóN DE LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL Y DINáMICA POR RMN

Acosta Roman Ronaldo, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La aminas secundarias son compuestos de gran interés en síntesis orgánica, una de las maneras de obtenerlas es a través de la condensación de un aldehído o cetona con una amina primaria. En esta investigación se utilizará cinamaldehído que es un producto natural utilizado en la industria farmacéutica y en la perfumería y se usará una diamina como es el 1,2-diamino propano. Se probaran condiciones de reacción de acuerdo con la química sustentable o actualmente llamada química verde, la cual se basa en utilizar condiciones libres de disolventes, control de la temperatura y que tengan economía atómico además de que los reactivos sean accesibles. Una vez preparada la diamina secundaria con un centro estereogénico se analizarán sus interacciones supramoleculares por la inclusión a la beta-ciclodextrina.

METODOLOGÍA

Se sintetizó la di-imina correspondiente, utilizando Trans-Cinnamaldehído y 1,2-diaminopropano en una relación molar 2:1 respectivamente. En un vial se depositó una pequeña barra magnética y en el mismo se adicionaron 0.4 g de sulfato de sodio anhidro, posteriormente se vertieron 1.25 mL de Trans-Cinnamaldehído utilizando una pipeta Pasteur de 1 mL y se agregó 0.42 mL de 1,2-Diaminopropano con otra pipeta Pasteur diferente, una vez adicionado todo, se cerró el vial con su tapa y se colocó en un agitador magnético con las revoluciones al nivel 2 durante 3 días. Después de los 3 días de reacción se quitó el vial del agitador magnético y se le agregó 1 mL de cloruro de metileno para disolver y se filtró la solución obtenida en otro vial previamente etiquetado y pesado utilizando un mini embudo con un pedazo de algodón y una pipeta Pasteur. Una vez filtrado se tomaron 20 gotas con ayuda de una pipeta Pasteur y se vertieron en otro vial. Después se sometió a flujo de aire durante 2 horas para eliminar completamente el disolvente. Ya seco se pesó el vial y posteriormente se le adicionaron 0.8mL de cloroformo deuterado con la pipeta especial para este. Luego con otra pipeta Pasteur se pasó todo el contenido a un tubo de resonancia posteriormente etiquetado para enviarse a procesar en el espectrómetro de resonancia magnética nuclear de 500 MHz para espectros de 1H y 13C. Una vez procesado los espectros de resonancia magnética nuclear de 1H y 13C, se analizaron en SpinWorks 4 y MestReNova. De dichos espectros se confirmó que se encontraba la di imina esperada a un alto nivel de pureza con un 97% de rendimiento de la reacción. Ya que se confirmó que se obtuvo la di imina esperada, se continuo por hacer la reducción con Borohidruro de sodio con una relación de 1 a 4 de producto y Borohidruro de sodio respectivamente. Se añadió en un vial una pequeña cantidad del producto, 0.0740 g de la di imina para hacer una reducción de prueba, luego se pesaron 0.0377 g de NaBH4 en otro vial utilizando la balanza analítica. Después se añadieron 3 mL de Metanol y la barra magnética en el vial con la di imina y se colocó el vial en un plato con hielo, el cual se colocó en un agitador magnético en la campana de extracción. Luego se le fue adicionando el NaBH4 poco a poco y posteriormente se sacó el vial del hielo y se dejó en el agitador magnético reaccionando durante un día. Al día siguiente se retiró el vial del agitador magnético y se pasó el contenido a un embudo de separación utilizando una pipeta Pasteur manteniendo la barra magnética, pero lavándola con acetato de etilo para limpiarla y pasar el contenido al embudo de separación. Se añadieron 5 mL de acetato de etilo en el embudo y luego 3 mL de agua destilada ambos utilizando probetas de 10 mL para hacer una separación de fase acuosa y fase orgánica las cuales fueron separadas por decantación haciendo tres lavados y el resultado final colocado en un matraz Erlenmeyer. Ya hecha la separación se pasó la fase orgánica del matraz Erlenmeyer a un matraz bola utilizando una pipeta Pasteur. El matraz bola se colocó en el rotavapor a 67 °C y 85 rmp para evaporar el disolvente. Ya evaporado el disolvente se le agregaron 0.8 mL de cloroformo deuterado al matraz bola y se pasó todo el contenido con una pipeta Pasteur a un tubo de resonancia el cual fue enviado al espectrómetro de resonancia magnética nuclear de 500 MHz para procesar espectros de RMN de 1H y 13C.

CONCLUSIONES

Se tomó el tiempo necesario para optimizar las condiciones de reacción en la obtención de la di-imina. Tras analizar los espectros de resonancia magnética nuclear de 1H y 13C se confirmó que se obtuvo la di-imina deseada con una alta pureza. En la última semana se realizará la reducción de los compuestos y los experimentos de inclusión a la beta-ciclodextrina.

Asesor: Dr. Ricardo Vivas Reyes, Corporación Universitaria Rafael Núñez (Colombia)

USE OF SOME CANNABINOIDS COMPOUNDS AS POSSIBLE ANTICANCER THERAPIES

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USE OF SOME CANNABINOIDS COMPOUNDS AS POSSIBLE ANTICANCER THERAPIES

Adoño Marroquin Jose Pablo, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Ricardo Vivas Reyes, Corporación Universitaria Rafael Núñez (Colombia)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Cancer caused over 8 million deaths worldwide in 2013 and has moved from the third leading cause of death in 1990 to the second leading cause behind cardiovascular disease in . According to estimates from the World Health Organization (WHO) in 2015, cancer is the third leading cause of death before age 70 years in Mexico and Colombia. In the context of a breast cancer that is positive for estrogenic receptors, there are already first-line therapies for the treatment of this, however, a relapse rate of up to 80% coined to estrogen receptor mutations has recently been reported, which leaves this sector with a high mortality rate. This is why new lines of research have been opened that deal with this type of mutations, some promising compounds are cannabinoids and derivatives thereof, for their multiple targets of attack against cancer.

METODOLOGÍA

The quantitative structure-activity relationships (QSAR) allow research to establish in silico models in a reliable way to predict the activity of new molecules before their synthesis. 3D-QSAR models have been used successfully to generate models of various chemotherapeutic agents. To study and infer a correlation between structure and biological activities, QSAR studies were carried out using the comparative molecular field analysis (CoMFA) for new analogues that antagonize estrogen receptors in breast cancer. This model, together with the derived contour maps, reveals the relevance of steric and electrostatic fields.

CONCLUSIONES

It is expected at the end of this study, a good bioactive agent capable of antagonizing the estrogenic receptors present in breast cancer, as well as the estrogenic receptors that have been mutated, and that this combined with its multiple benefits on cancer cells and angiogenesis is found, of guideline to a new chemotherapeutic for breast cancer.

Asesor: Dr. Daniel Ricardo Delgado, Universidad Cooperativa de Colombia (Colombia)

ESTUDIO TERMODINáMICO DE LA SOLUBILIDAD DEL TRICLOCARBAN EN MUESTRAS COSOLVENTES ETILENGLICOL + AGUA.

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ESTUDIO TERMODINáMICO DE LA SOLUBILIDAD DEL TRICLOCARBAN EN MUESTRAS COSOLVENTES ETILENGLICOL + AGUA.

Aguiar Sevilla Jesús Uriel, Instituto Tecnológico de Tepic. Duarte Arcadia Elissa, Instituto Tecnológico de Tepic. Asesor: Dr. Daniel Ricardo Delgado, Universidad Cooperativa de Colombia (Colombia)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

¿Cómo afecta la composición cosolvente y la temperatura la solubilidad del Triclocarban? La cuantificación de la solubilidad de fármacos en medios acuosos es el primer paso para el desarrollo de cualquier forma farmacéutica, por lo que la industria farmacéutica además de laboratorios de investigación invierte una gran cantidad de recursos en esta etapa. Por tanto, la determinación experimental de la solubilidad de fármacos en diferentes sistemas co-solvente en función de la temperatura, arroja datos de gran relevancia que permiten elucidar de mejor manera los mecanismos involucrados en las interacciones moleculares fármaco-solvente.

METODOLOGÍA

En la mezcla de disolvente {Ethane-1,2-diol (1) + Agua (2)} se agregó una cantidad suficiente de triclocarbán (TCC) hasta saturar la solución en matraces de vidrio oscuro tapados. La experimentación se realizó basándose en diez diferentes concentraciones, en un aumento de 0.1 en 0.1 en fracción másica, siendo la décima etilenglicol del 99%. Los matraces se colocaron en termostatos de enfriamiento (Medingen K-22 / T100, Alemania) mantenidos a 318.15 (± 0.05) K durante dos días para alcanzar el equilibrio. Durante esos se requería agitación de cada uno de los matraces para que pudieran alcanzar la condición necesaria de la experimentación. Previamente se realizó una curva de calibración mediante la técnica de absorbancia de luz UV para así poder determinar la concentración de TCC de cada solución realizando una interpolación de la curva de calibración gravimétrica espectrofotométrica UV construida anteriormente. (espectrofotómetro UV / VIS EMC-11-UV, Alemania). Se realizó la misma experimentación a 308.15 K, 298.15 K y 288.15 K.   

CONCLUSIONES

La solubilidad de TCC en los disolventes de la mezcla investigada aumentó con el aumento de la temperatura; estos resultados indican que el proceso de disolución es endotérmico, la energía de Gibss de igual manera, y solo en el frasco que presentaba una masa total de agua se obtuvo un valor de entropía negativo, lo que nos indica un mayor ordenamiento de klas moléculas en el proceso; por lo tanto, las funciones termodinámicas obtenidas son útiles para comprender el proceso de disolución de TCC en los diferentes disolventes orgánicos. 

Asesor: Dr. David Alejandro López de la Mora, Universidad Lamar

OBTENCIóN DE NANOPARTíCULAS DE HIDROXIAPATITA PARA EL TRATAMIENTO DE PROBLEMAS DE HIPERSENSIBILIDAD DENTAL

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OBTENCIóN DE NANOPARTíCULAS DE HIDROXIAPATITA PARA EL TRATAMIENTO DE PROBLEMAS DE HIPERSENSIBILIDAD DENTAL

Aguilar Botello Sara Lizbeth, Universidad de Guadalajara. Lopez Bobadilla Brisamar, Universidad Autónoma de Sinaloa. Vallejo Perez Diana Martha, Universidad de Guadalajara. Vea Cervantes Esmeralda Guadalupe, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. David Alejandro López de la Mora, Universidad Lamar

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hipersensibilidad dental se considera un padecimiento que se presenta en aproximadamente del 8% al  57% de la población en general, esta es referida como un dolor intenso y de corta duración que surge por la dentina expuesta. Uno de sus potenciadores son las técnicas de blanqueamiento dental tratados con peróxido de hidrógeno a 36%, el cual causa daños irreversibles al tejido dentinario dando como consecuencia desmineralización de la dentina, aumento de diámetro de los túbulos y de número de los túbulos dentinarios lo cual da como resultado la presencia de hipersensibilidad dental.  

METODOLOGÍA

Sintetizamos nanopartículas de hidroxiapatita e hicimos daño a los dientes con peróxido de hidrógeno aplicando luz UV y posteriormente llevamos a caracterizar las nanopartículas para ver su tamaño aproximado así como tambien caracterizamos los dientes para observar el tamaño de los poros en el esmalte, sintetizamos un gel con las nanoparticulas de hidroxiapatita y le aplicamos el gel a los dientes dañados y llevamos a caracterizar para ver el efecto que se tenia. 

CONCLUSIONES

Hemos observado que con el gel con nanoparticulas de hidroxiapatita se ha producido una disminución en el tamaño de los poros en el esmalte. 

Asesor: Dr. Osvaldo Eric Ramírez Bravo, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

CONSERVACIóN DE LA BIODIVERSIDAD

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CONSERVACIóN DE LA BIODIVERSIDAD

Aguilar Cabrera Carlos Gustavo, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Pérez Rodríguez Alexis Enrique, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas. Pérez Rodríguez Jose Luis, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas. Salas Picazo Roxana Iveth, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Osvaldo Eric Ramírez Bravo, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Este proyecto fue elaborado en la Benemérita Universidad Autónoma de Puebla,  se elaboraron diferentes proyectos con el tema de la conservación de la biodiversidad,  en donde se llevaron a cabo tanto en campo como al igual que en oficina. Los proyectos principales fueron la investigación sobre el tráfico animal; animales exóticos que se encuentran a la venta en diferentes puntos de la república Mexicana que están o pueden llegar a estar en peligro de extinción, la elaboración de juegos didácticos que puedan promover la conservación de la flora, fauna y/o ecosistemas, se llevó a cabo una reforestación en un poblado de Puebla llamado Cuautinchan y se hizo la difusión en redes sociales elaborados con vídeos sobre los animales que se encuentran en peligro de extinción. Se midieron los tiempos ya que solo contábamos con siete semanas para terminar los proyectos, se fueron dividiendo los tiempos de cada proyecto para que cada proyecto tuviera el tiempo necesario para planearlo, elaborarlo y llevarlo a cabo.

METODOLOGÍA

Los proyectos realizados fueron empleados con diferentes materiales, ya que algunos fueron realizados en el campo y otros fueron llevados a cabo en oficina. Para el primer proyecto con el cual empezamos, se necesitaron diferentes juegos de mesa; aproximadamente diez juegos, al igual se utilizaron materiales como yeso elástico, hojas de corchos, fommy elástico, utensilios para moldear, tijeras, pinturas de diferentes colores y brochas. Al principio se empezó a jugar los diferentes juegos de mesa, en donde se tomó por máximo tres días en jugarlos. Después de terminar de jugar todos los juegos, se empezó a realizar lluvia de ideas; en cómo se pueden modificar los juegos para que sean con temática de conservación de la biodiversidad y/o al medio ambiente, ya teniendo planeado en cómo se puede modificar, se escribieron las reglas y el método en como jugarlo. Al final se realizaron dummies (los juegos de mesa se hicieron a mano; el tablero, las fichas, los premios, etc.). En donde al final se realizaron tres juegos de mesa, los cuales se pueden llevar acabo en comunidades o escuelas para enseñar a las personas sobre la conservación y el medio ambiente y él porque es tan importante protegerlo. Para el segundo proyecto, el cual fue la reforestación en Cuautinchan, se utilizaron materiales como lo son picos, palas, cinta de medición, estacas y madera, clavos y un taladro para armar un aparato A. El aparato A se utilizó para realizar las curvas de nivel, en donde se fueron haciendo las mediciones para realizar los orificios de las medidas exactas. Para reforestación se plantaron maguey.  En el proyecto de difusión de información sobre animales en peligro de extinción, se utilizaron cámaras, computadoras, guiones y la utilización de las redes sociales. En donde para este trabajo se eligieron tres animales que están en peligro de extinción, los cuales fueron, el mono araña, el tucán y el tigrillo. Se eligieron estos animales ya que también se estaba trabajando con el tráfico ilegal de animales. Se realizaron tres videos, en donde primero investigo las características de cada animal y después se realizaron los guiones para poder grabar. Al final se editaron los videos para poder subirse a las plataformas de Facebook e Instagram. Para el proyecto final se utilizaron solo la computadora, la NOM-059- SEMARNAT y las redes sociales como Facebook e Instagram, esto para poder recopilar datos sobre los tipos de animales exóticos que se ponen a la venta con las fechas de enero a julio del 2019. Con esto se tomaron los datos como el tipo de animal exótico que está en venta, su sexo, la cantidad de especies en venta, si es cría, juvenil o adulto, el costo, si está registrado o tiene autorización, si el animal esta en jaula o en una instalación y el tipo de anunciante, si es tienda, veterinaria, criadero o individuos.  Se priorizaron buscar animales que se encuentran dentro de la NOM-O59-SEMARNAT-2010. 

CONCLUSIONES

La importancia de estos proyectos, son para informar a la gente sobre la importancia de la conservacion de especies tanto como flora y fauna, al igual que la conservacion de los ecosistemas. Cada proyecto fue inducido para crear conciencia entre la poblacion. Con los juegos de mesa creemos que tendra mas impacto con alumnos de diferentes grado de escolaridad, ya que pueden crear conciencia jugando y aprendiendo sobre la conservacion. Ya que las redes sociales estan de moda, se hicieron videos para llevar informacion a las personas sobre lo que significa "extincion de especies" y para dar informacion que especies estan en peligro y que se debe de hacer para ayudar, este seria una manera de pasar informacion a diferentes personas que no tenian idea de los tipos de animales que se encuentran en peligro de desaparecer. Cada uno de los proyectos fueron llevados a cabo para llevar informacion a terceras personas, para que esas personas puedan enseñar a sus familiares o amigos, llevando asi una cadena de informacion que puede ayudar a la conservacion de la biodiversidad. 

Asesor: Dr. Juan Carlos Pérez Jiménez, Colegio de la Frontera Sur (CONACYT)

HáBITOS ALIMENTARIOS DE LA RAYA PINTA (AETOBATUS NARINARI) Y LA RAYA BALá (HYPANUS AMERICANUS) DEL SUR DEL GOLFO DE MéXICO.

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HáBITOS ALIMENTARIOS DE LA RAYA PINTA (AETOBATUS NARINARI) Y LA RAYA BALá (HYPANUS AMERICANUS) DEL SUR DEL GOLFO DE MéXICO.

Aguilar Ortiz Carlos Mario, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas. Asesor: Dr. Juan Carlos Pérez Jiménez, Colegio de la Frontera Sur (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En Campeche hay embarcaciones rivereñas enfocadas a la captura de elasmobranquios como la raya pinta (Aetobatus narinari) y la raya blanca o balá (Hypanus americanus); siendo la primera la de mayor valor comercial y la raya balá la más capturada por los pescadores. Analizar la dieta de las rayas ayuda a entender la relación que existe entre el depredador y la presa, además de aportar información sobre su biología y ecología. Debido a que todavía se desconoce el rol que desempeñan estas especies en la red trófica de la región, pasamos por alto la disminución gradual de su población. Conocer de qué manera se lleva a cabo el transporte de materia y energía entre especies en un ecosistema ayuda a prevenir que estas tengan que migrar o la población disminuya drásticamente debido a su sobreexplotación y/o colecta de sus presas. Aunado a esto, el saber de qué presas se alimentan puede ser utilizado para trazar una red trófica ontogénica de la dieta asimilada por medio de isotopos estables.

METODOLOGÍA

En las localidades pesqueras de Isla Arena e Isla Aguada pertenecientes al estado de Campeche, se realizaron muestreos basados en los desembarcos de los pescadores y cooperativas. Fueron tomados los siguientes datos: fecha, localidad, arte de pesca, distancia y profundidad a la cual se realizó la captura; de las rayas se tomó el ancho de disco, longitud total, sexo y estadio. Luego se le realizo una disección a cada ejemplar para extraer el estómago y el intestino, los cuales fueron etiquetados y guardados en diferentes bolsas de plástico en una hielera con hielo para detener el proceso de digestión. En el laboratorio de ecología pesquera en El Colegio de la Frontera Sur (ECOSUR), el estómago e intestino fueron descongelados, se revisó el porcentaje de llenado y se le asignó una categoría, en donde la categoría 1 representa a estómagos con 1% a 25% de llenado; categoría 2 de 26% a 50% de llenado; categoría 3 de 51% a 75% de llenado; y categoría 4 de 76% a 100% de llenado. Posteriormente se abrieron los estómagos y se filtró el contenido en un tamiz de 1 mm de apertura. A cada presa se le asignó un grado de digestión; se colocó en grado 1 a las presas recién ingeridas. En el grado 2 a las presas que presentaban pérdida de alguna parte corporal o donde sólo se puede apreciar el músculo. El grado 3 se asignó a las presas en las que sólo se podían observar restos óseos (esqueletos o exoesqueletos) y algunas quelas de crustáceos. Para el grado 4 se consideraba la presencia de estructuras duras como: otolitos de peces o picos de cefalópodos. Y 5 cuando el contenido estomacal está digerido y es irreconocible. De cada estómago se tomó el peso con contenido y sin él. Las presas encontradas en el contenido estomacal de las rayas, fueron identificadas a su máximo nivel taxonómico, para posteriormente pesarlas y cuantificarlas. Para moluscos (gasterópodos y bivalvos), las características para su identificación fueron coloración, textura, forma, opérculos, ojos y rádulas; para los crustáceos se usaron partes duras como cefalotórax, quelas y ojos. Ya que los gasterópodos y crustáceos cuentan con estructuras duras que resisten la digestión, la identificación de estos grupos fue más fácil y exacta, pudiendo llegar en algunos casos a nivel de especie o familia. En el caso de bivalvos, la ausencia de conchas, dificultó la identificación por lo cual nos limitamos a separarlos por color y forma del pie. Del análisis del contenido estomacal se obtuvieron tres estimaciones, que combinadas permiten conocer la importancia total de cada presa: Frecuencia de ocurrencia (%FO). Es la proporción de estómagos en la cual una presa fue encontrada.  Abundancia numérica (%N). Porcentaje del número de individuos de un tipo de presa particular en relación con el total de presas en todos los contenidos estomacales combinados.  Abundancia gravimétrica (%G). Porcentaje en peso que comprende un tipo de presa del total de peso de todo el contenido estomacal, para ello se usó el peso húmedo con una balanza de precisión de 0.01 g.  Índice de Importancia Relativa (IIR). Para visualizar la importancia de la presa por separado (por localidad y sexo) se usó el porcentaje por número (N), porcentaje gravimétrico en peso (G) y la proporción de estómagos que contienen cada tipo de presa (F), y se calculó el Índice de Importancia Relativa (Pinkas et al. 1970) 𝐼𝐼𝑅 = (%𝑁 + %𝐺)(%𝐹)

CONCLUSIONES

Durante la estancia pudimos identificar que las especies presa más importantes en la dieta de A. narinari  son los gasterópodos y crustáceos. Entre sus presas favoritas está el caracol Strombus pugilis, el caracol oliva (Americoliva reticularis) y el cangrejo ermitaño (Petrochitus diogenes). Para la Hypanus americanus en el contenido estomacal se encontró que las presas más importantes (basado en el IIR) en su dieta son los camarones, las jaibas y los pulpos. Por falta de tiempo no se pudo identificar hasta especie. Con los resultados obtenidos podemos suponer que no hay un traslape trófico entre estas dos especies a pesar de ser capturadas en la misma zona; lo que beneficia a ambas especies en evitar la competencia y por lo tanto podría ser un caso de repartición de recursos.

Asesor: Dr. Melesio Gutierrez Lomeli, Universidad de Guadalajara

CARACTERIZACIóN MOLECULAR DE BACTERIóFAGOS CONTRA ESCHERICHIA COLI.

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CARACTERIZACIóN MOLECULAR DE BACTERIóFAGOS CONTRA ESCHERICHIA COLI.

Aguilar Paz Ricardo, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Melesio Gutierrez Lomeli, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Actualmente, el biocontrol mediante bacteriófagos ha sido poco estudiado en las distintas etapas de formación de las biopelículas. A pesar de que este método ha sido probado en células planctónicas en la Unión Europea y en Estados Unidos, este último es el único país que cuenta con legislaciones acerca del uso de bacteriófagos en alimentos, incluso han desarrollado kits comerciales a base de fagos aprobados por la FDA para la desinfección de diversos géneros de bacterias formadores de biopelículas aisladas en la industria alimentaria de cada país, estableciendo un precedente para las futuras legislaciones que regulen estos métodos. Por estas razones la siguiente pregunta de investigación: ¿Los bacteriófagos aislados serán diferentes molecularmente?

METODOLOGÍA

Activación de bacteriófagos específicos de Escherichia coli.   Se preparó 5 mL de caldo soya tripticaseína en el cual se inóculo una cepa de Escherichia coli MGA-EC-25 del laboratorio de microbiología del CUCIénega, se dejó incubar durante 18 horas a 37°C. A continuación, se añadió 1 mL del inóculo a 3 matraces con 250 mL de caldo soya tripticaseína y se incubó a 37°C por 6 horas con agitación de 129 rpm. Pasado este tiempo, se agregó 1 mL de los bacteriófagos aislados, y después de la incubación a 37°C durante 20 minutos sin agitación, las muestras se incubaron durante 18 horas con agitación rigurosa (129 rpm).   2. Propagación y concentración de los bacteriófagos. Se adicionó a cada una de las muestras 10 g de NaCl y se mezcló, incubando a 0°C por 1 hora. Transcurrido este tiempo, se transfirieron a 6 tubos Corning 40 mL por muestra de fago y se centrifugaron a 11, 000 xg a 4°C durante 10 minutos. Transfiriendo el sobrenadante a otro tubo Corning y una vez transferido, se adicionó 25 g PGE (10%) por fago para posteriormente incubarlo a 0°C durante toda la noche. En seguida, nuevamente se centrifugo a 11, 000 xg a 4°C por 10 minutos, resuspendiendo con 1.5 mL de Buffer de fosfato por tubo. Se incorporó un volumen de cloroformo y se mezcló durante 30 segundos para después centrifugar a 3, 000 xg a 4°C por 15 minutos. Finalmente se vertió el sobrenadante en otro tubo Corning. El sobrenadante se filtró a través de una membrana (.45 micras de diámetro de poro, respectivamente). El filtrado se recuperó en un tubo cónico estéril de 50 mL.   3. Determinación de la presencia de bacteriófagos. Se esterilizaron tubos con 3 mL de agar soya tripticaseína suave (CST + 0.4 % de agarosa) y se mantuvieron a 45°C en termobaño. A cada tubo se le agregó 1 mL de cultivo, se agitó suavemente y el agar suave se distribuyó sobre una placa de agar soya tripticaseína previamente preparada, identificada con la cepa usada. Se dejó solidificar el agar soya tripticaseína y se colocaron 5 mL de cada filtrado fágico para evidenciar la presencia de lisis bacteriana en caso de que hubiera presencia de bacteriófagos específicos contra esa cepa. Se dejó que la gota se absorbiera en el agar suave y se incubaron a 24 h a 37°C. Se calculó el título del fago propagado mediante la técnica del doble agar sembrando las diluciones 102, 104, 106, 108, 1010 y 1012. 4. Extracción y análisis de la calidad del DNA de los bacteriófagos. Se preparó un gel de agarosa al 1%, en donde en el pocillo 1 se cargó 3 µL del marcador de peso molecular más 2 µL colorante, en el siguiente pocillo se cargó con 3 µL del DNA del fago A, 1 µL colorante, 1 µL jugo azul. En el carril 3 se cargó con 3 µL del DNA del fago B, 1 µL colorante, 1 µL jugo azul y en carril 4 se cargó con 3 µL del DNA del fago C, 1 µL colorante, 1 µL jugo azul. Se aplicó un voltaje de 90 V durante 20 minutos y finalmente, transcurrido este tiempo, se observó en el transiluminador para electroforesis.   5. Análisis del patrón de restricción con las enzimas EcoRI, EcoRV y BamHl del DNA de los bacteriófagos. Se prepararon 3 pool para las 3 diferentes enzimas de restricción con 91 µL de H2O, 13 µL de Buffer Universal 10x, 13 µL de la enzima correspondiente y se mezclaron en el agitador vortex. Se transfirió una alícuota de 18 µL en 9 tubos eppendorf estériles. Una vez realizado esto, se añadió 2 µL del DNA del fago A, B y C a 3 tubos eppendorf a 3 enzimas diferentes. Se incubó durante toda la noche para correr la reacción a 37°C y enseguida, se pasaron los tubos al termoblock durante 20 minutos, se dio un spin y se congelaron. Se preparó un gel de agarosa al 0.8 % y se cargó el gel: el pocillo 1 con 4 µL de marcador de peso molecular más 1 µL de colorante, el pocillo 2-10 con 2 µL de jugo azul, 2 µL colorante y 10 µL de la restricción de cada una de las reacciones por pocillo. Se aplicó un voltaje de 90 V durante 40 minutos y finalmente, transcurrido este tiempo, se observó en el transiluminador para electroforesis.

CONCLUSIONES

Al finalizar la estancia de verano se logró adquirir conocimientos teóricos acerca de los bacteriófagos específicos contra Escherichia coli y ponerlos en práctica con las técnicas de aislamiento, propagación y concentración de fagos, así como, en la técnica de extracción de DNA fágico y las técnicas de digestión de enzimas de restricción. Con las pruebas realizadas se podría decir que los fagos son iguales, pero aún falta realizar pruebas extras para confirmar lo anterior.

Asesor: Dr. Patricia Nayeli Alva Murillo, Universidad de Guanajuato

ESTANDARIZACIóN DE UNA TéCNICA DIAGNóSTICA DE MASTITIS SUBCLíNICA EN CABRAS

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ESTANDARIZACIóN DE UNA TéCNICA DIAGNóSTICA DE MASTITIS SUBCLíNICA EN CABRAS

Aguilar Perez Paulina Irais, Instituto Tecnológico del Valle de Morelia. Asesor: Dr. Patricia Nayeli Alva Murillo, Universidad de Guanajuato

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Guanajuato es el 2do lugar en producción de leche caprina a nivel nacional, con una producción muy cercana a la de Coahuila, al reportar 43 mil 767 de litros de leche, generando una ganancia de 227,454,920 de pesos mexicanos. La industria lechera caprina puede sufrir mermas económicas por diferentes enfermedades, entre ellas la mastitis, la cual se define como la inflamación de la glándula mamaria. El origen de esta patología puede ser infeccioso o traumático. La mastitis caprina puede llegar a presentarse en forma clínica y subclínica. La primera se Caracteriza por signos como calor, dolor de la ubre al tacto, enrojecimiento, secreciones purulentas o coágulos sanguíneos presentes en la leche, entre otros. En la forma subclínica los signos clínicos no son visibles, haciendo más difícil su detección, ya que solo varia el conteo de células somáticas (CS) presentes en la leche. Para el diagnóstico de la mastitis subclínica en cabras se realiza una prueba modificada de Wisconsin, el reactivo utilizado logra lisar las CS y libera material genético al medio, generándose una viscosidad que debería ser proporcional al número de células en la muestra. Los parámetros para esta prueba ya están establecidos para ganado bovino; sin embargo, en ganado caprino aún no se ha realizado dicha validación. Por lo que el objetivo de este trabajo es validar una técnica diagnóstica de la mastitis subclínica en cabras, basada en el conteo de células somáticas (CCS) presentes en la leche.

METODOLOGÍA

Se realizó la toma de muestra de leche caprina de animales sanos y enfermos elegidos al azar. En el establo se hizo la prueba de modificada de Wisconsin (diagnóstico de mastitis) y se registró el volumen remanente de cada prueba. Una vez obtenidas las muestras de leche, se llevaron al laboratorio para realizar el análisis microbiológico en agar LB, MacConkey y Sangre, previamente preparados. Se llevó a cabo el análisis macroscópico de las colonias bacterianas. Se realizó la tinción Gram de los aislamientos bacterianos recuperados y el análisis en el microscopio. Todos los aislamientos bacterianos se criopreservaron a -80°C en glicerol. Se realizó el aislamiento del ADN genómico de dichos aislamientos, para su posterior análisis molecular. Las CS presentes en la leche se limpiaron por centrifugación, para realizar el conteo de células somáticas con (i) cámara de Neubauer y (ii) citometría de flujo (tamaño vs complejidad).

CONCLUSIONES

Hasta el momento se ha realizado la toma de muestra de 30 ubres (15 cabras), de las cuales 4 presentaban signos claros de inflamación (mastitis clínica), estas muestras se utilizarán como controles positivos para la estandarización. Hasta el momento no se ha encontrado una correlación adecuada (R2=0.22) entre el volumen remanente de la prueba modificada de Wisconsin y el CCS. No obstante, hace falta tomar más muestras (~n=100) para realizar el análisis estadístico adecuado. De 30 muestras,  22 presentaron crecimiento bacteriano, formando 76 colonias, de las cuales  64 son gram-positivas y 12 gram-negativas. Durante la estancia de verano se lograron adquirir conocimientos teóricos y prácticos de la masitis subclínica.

Asesor: M.C. Ramón Guzmán Mejía, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

ESTERIFICACIóN DE L-AMINOáCIDOS UTILIZANDO MICROONDAS COMO FUENTE DE ENERGíA

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ESTERIFICACIóN DE L-AMINOáCIDOS UTILIZANDO MICROONDAS COMO FUENTE DE ENERGíA

Aguilar Uribe Alexia Montserrat, Instituto Tecnológico Superior de Apatzingán. Asesor: M.C. Ramón Guzmán Mejía, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En las últimas dos décadas la preparación de compuestos orgánicos facilitada por las microondas se ha convertido en uno de los procedimientos más utilizados y apreciados en síntesis química. Se ha demostrado que la energía proporcionada por radiación de microondas conduce a una reducción notable de los tiempos de reacción, así como a un aumento en los rendimientos de esta. Además, se ha observado una disminución en la formación de productos secundarios o generación de residuos, de modo que los productos de interés se obtienen en mayor rendimiento que el encontrado bajo condiciones de calentamiento tradicional. Es así que en el presente trabajo se describe la esterificación de L-fenilalanina y L-triptófano utilizando energía de microondas.

METODOLOGÍA

Se realizó la destilación de disolventes que se utilizaron en las reacciones químicas involucradas en el proyecto como diclorometano y metanol.  Se partió de 100 mg de L-fenilalanina y L-triptófano, los cuales se sometieron a tratamiento con metanol y ácido clorhídrico (HCl) como catalizador. La mezcla de reacción se llevó a un reactor de microondas y se hizo reaccionar a 100 watts, 80°C por 15 minutos. Después de la extracción y evaporación del disolvente se obtuvo un producto el cual fue caracterizado por métodos espectroscópicos.

CONCLUSIONES

Se realizó la esterificación de los aminoácidos L-fenilalanina y L-triptófano utilizando como fuente de energía radiación de microondas con una potencia de 100 watts. Los aminoácidos O-metilados se obtuvieron con 15 minutos de reacción, comparados con la metodología convencional reportada en la literatura, en la cual la reacción se lleva a cabo en agitación por un periodo de 12 horas. Los productos se obtuvieron en buenos rendimientos después de su purificación por cromatografía en columna y cristalización.

Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

SíNTESIS DE α-METIL-N-(1-FENILETILIDINA)BENCILMETANAMINA A PARTIR DE ACETOFENONA Y α-METILBENCILAMINA UTILIZANDO DESTILACIóN AZETRóPICA Y AGENTES DESECANTES

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SíNTESIS DE α-METIL-N-(1-FENILETILIDINA)BENCILMETANAMINA A PARTIR DE ACETOFENONA Y α-METILBENCILAMINA UTILIZANDO DESTILACIóN AZETRóPICA Y AGENTES DESECANTES

Aguirre Pedroza Hilda Patricia, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La síntesis de iminas a partir de cetonas y aminas primarias es una reacción reversible que puede ser desplazada cuando se elimina el agua producida. Los métodos encontrados para la síntesis de α-metil-N-(1-feniletilidina) bencilmetanamina utilizan benceno como azeótropo para favorecer la reacción; sin embargo, el uso del benceno no está de acuerdo con los principios de la química verde, ya que al evaporarlos de la muestra contaminan el medio ambiente y ponen en peligro la salud de las personas que manipulan la muestra. Debido a que no se han encontrado las condiciones adecuadas para obtener el mayor rendimiento de la síntesis de la imina considerando condiciones apegadas a la química verde, el presente trabajo considerará el uso del sulfato de sodio como desecante y el metanol como azeótropo.

METODOLOGÍA

Síntesis 1. Se agitaron durante 19 h cantidades estequiométricas de acetofenona y α-metilbencilamina; posteriormente, se filtró sobre sulfato de sodio anhidro con la finalidad de secar la muestra y se analizó por Resonancia Magnética Nuclear (RMN) 1H y 13C. Obteniendo un rendimiento del 18.2%. Síntesis 2. Se realizó la misma síntesis agregando cantidades equimolares de acetofenona y α-metilbencilamina. La mezcla se dejó reaccionar durante 30 minutos. Posteriormente, se filtró el producto y se analizó una muestra por RMN. Síntesis 3 - 6. Se utilizaron 100.7 mg de sulfato de sodio anhidro con cantidades estequiométricas de acetofenona y a-metilbencilamina. Éste se dejó en agitación durante 23 horas. Después la mezcla fue filtrada y del producto se tomó una muestra que fue analizada por medio de RMN. Obteniendo el 28.95% de rendimiento.             En la segunda síntesis se le añadieron 101.3 mg de sulfato de sodio anhidro y cantidades estequiométricas de acetofenona y de a-metilbencilamina se agitó durante 6 horas, después se añadieron 400.1 mg de sulfato de sodio anhidro. La reacción se dejó en agitación con un total de 48 horas, después se filtró el producto y se analizó la muestra por RMN. Se obtuvo un rendimiento de la reacción de 58.84%.             Para la tercera reacción se midieron la misma cantidad de reactivos, se vertieron en un matraz Erlenmeyer, al cual se le adicionó un agitador magnético plano, se le añadió 50.8 mg de sulfato de sodio anhidro y se dejó en la parrilla de agitación durante 40 horas, después se filtró el producto y se analizó una muestra por RMN. El rendimiento obtenido fue del 17.32%. La cuarta reacción se realizó simultáneamente a ésta, la variante fue la cantidad de sulfato de sodio y el tamaño del matraz, a ésta se le añadieron 400.0 mg y se utilizó un matraz de 50 mL. Se obtuvo un rendimiento de 36.73% Síntesis 7 - 8 En un matraz bola se colocó el agitador magnético, y se le adicionaron cantidades equimolares acetofenona y α-metilbencilamina, utilizando metanol como agente azeotrópico. La reacción se dejó en agitación durante 3 horas. Posteriormente, se armó un sistema de destilación azeotrópica, utilizando una trampa de Dean-Stark. Después de 17 h se colocó la muestra sobre un baño de aceite entre 70 - 80°C y se mantuvo en agitación durante 1 hora 50 minutos. Se aumentó la temperatura hasta 95°C y se mantuvo en reflujo durante 1 hora 10 minutos. Posteriormente se procedió con la destilación. Se eliminó el resto de metanol-agua con el rotavapor. Una muestra del producto se analizó por RMN. El rendimiento final fue de 36.01%. Se realizó una segunda síntesis con este método utilizando la misma cantidad de reactivos y adicionando 40 mL de metanol. El matraz se puso sobre un baño de aceite con una temperatura de 90°C y en agitación. La reacción se mantuvo en reflujo durante 1 hora. Después, se destiló y se eliminó el resto de metanol-agua utilizando el sistema de alto vacío y con un baño de arena a una temperatura de 50°C. Al terminar se preparó una muestra para enviar a resonancia. El rendimiento obtenido fue del 17.01%.

CONCLUSIONES

Se obtienen rendimientos moderados de la imina con condiciones suaves. Haciendo una comparación de los resultados obtenidos en cada síntesis de la imina con distintas cantidades de sulfato de sodio anhidro y variando la superficie de contacto se pude concluir lo siguiente: (a) se observa que a medida que aumenta la cantidad de sulfato de sodio anhidro aumenta el rendimiento de la reacción, (b) a medida que se aumentaba la cantidad de Na2SO4 anhidro en la reacción menor es la captación de agua por molécula; sin embargo, es suficiente para desplazar el equilibrio hacia reactantes. El mayor rendimiento obtenido fue 58.84 % correspondiente a la síntesis 4. Los rendimientos obtenidos en la síntesis 9 y 10 fueron del 36.01% y 17.01%, contando con una diferencia de 19.00%, esta diferencia puede estar influenciada por las condiciones que variaron entre ambas síntesis, como el volumen del metanol, la rampa de temperatura, el tiempo de la reacción y la evaporación del metanol-agua restante. La identificación de los productos y el cálculo de las proporciones de los mismos se hizo mediante la técnica de RMN, la cual se estudió su fundamento durante el verano de investigación. En los espectros obtenidos se puede apreciar que se obtuvieron ambos estereoisómeros E y Z en distintas proporciones.

Asesor: Dr. Viviana Matilde Mesa Cornejo, Universidad de Guadalajara

RESPUESTA DE DROSOPHILA MELANOGASTER A PARACETAMOL

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RESPUESTA DE DROSOPHILA MELANOGASTER A PARACETAMOL

Agustin Palacios Flor Emilia, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Viviana Matilde Mesa Cornejo, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El paracetamol es uno de los medicamentos más utilizados por el ser humano debido a que es un analgésico y antipirético, sin embargo se desconocen los efectos acumulativos de su consumo. Debido a que la experimentación en humanos está prohibida, en este proyecto se presenta el uso de la Drosophila melanogaster como modelo biológico para identificar las posibles alteraciones en el ciclo de vida de la mosca, al incluir el fármaco en su medio de cultivo.

METODOLOGÍA

Se prepararon 4 medios de cultivo enriquecidos con levadura, a 3 de ellos se les adicionó 166.66 mg del medicamento y el otro se mantuvo como control. En cada frasco de medio, se sembraron 5 hembras y 5 machos y se mantuvieron a 23 ° C. · Se realizó monitoreo diario de temperatura y progreso del ciclo de vida, tomando en cuenta las fechas de aparición de huevos, larvas, pupas y adultos. · Al ver las primeras pupas se debe realizar un conteo para tener un número aproximado de moscas nacidas. · Al identificar el tercer estadío de pupa se extraen los progenitores para evitar endogamia. · Se realiza conteo de total de moscas F1 nacidas.    Los primeros adultos o F1 se siembran en las mismas condiciones que los medios iniciales y se realizan los mismos monitoreos.

CONCLUSIONES

El ciclo de vida del primer cultivo fue mas largo que lo esperado con un promedio de 34 días.  El cultivo control de F2 obtuvo una mayor cantidad de descendientes, a pesar de haberse mantenido sólo 21 días. · La relación entre el número de descendientes de F1 fue casi 1:1 entre el control y medios con medicamento, aunque en F2 la situación fue casi 2:1 entre el control y el promedio de los medios con medicamento. · Tanto en F1 como en F2, el número de hembras fue mayor con respecto al número de machos. · Los resultados no son lo suficientemente concluyentes debido al poco tiempo de duración de los experimentos, se requiere analizar mas número de generaciones para lograr una relación entre el paracetamol y su influencia en el ciclo de vida de Drosophila melanogaster.

Asesor: Dr. Genaro Diarte Plata, Instituto Politécnico Nacional

CRECIMIENTO DEL PULPO PIGMEO PAROCTOPUS DIGUETI EN LA LAGUNA DE OHUIRA, AHOME, SINALOA.

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CRECIMIENTO DEL PULPO PIGMEO PAROCTOPUS DIGUETI EN LA LAGUNA DE OHUIRA, AHOME, SINALOA.

Ahumada Elizalde Damaris Natali, Universidad Autónoma de Occidente. Asesor: Dr. Genaro Diarte Plata, Instituto Politécnico Nacional

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los pulpos tienen cuerpo corto, en forma de saco, sin aletas laterales; manto con una abertura grande;  la mayoría son animales bentónicos. La familia está representada en todo el mundo, y vive desde la zona litoral hasta por lo menos 1000 m de profundidad. Muchas especies tienen hábitos crípticos, escondiéndose durante el día en grietas de roca, conchas vacías y praderas de plantas marinas y saliendo a la caza de alimento de noche, mientras otras viven sobre fondos arrastrables.Las especies particularmente crípticas muestran un comportamiento territorial bien desarrollado, debido a lo cual raramente forman agrupaciones. Zona de captura: Zonas someras y rocosas, con profundidad máxima de 80 m. Específicamente Octopus hubbsorum se pesca desde el "Golfo de Ulloa", Baja California Sur hasta Oaxaca, incluyendo el Golfo de California. En la costa del Pacífico de Baja California Sur con profundidad máxima de 80 m con trampa; y 30 m de profundidad con buceo y gancho desde el Golfo de California hasta Salina Cruz, Oaxaca. Se ha observado que existe una estratificación de tallas donde el pulpo más grande se encuentra en zonas más profundas. Octopus bimaculatus se captura desde Punta Eugenia hasta el Golfo de Ulloa y en el interior del Golfo de California, principalmente en Bahía de los Angeles y algunos puntos del Norte del Golfo de California. Octopus bimaculoides, se captura en las Lagunas Ojo de Liebre y Guerrero Negro.(FAO 1995; CARTA NACIONAL PESQUERA 2017). En el presente estudio se evalúa el crecimiento de P. digueti segun su peso y talla del manto, en la laguna de Ohuira, Ahome, Sinaloa

METODOLOGÍA

Para la captura de la muestra se realizaron inmersiones por buceo con snorkel (30min) en las islas Patos, Bledos y Bleditos considerando la parte anterior y posterior de las mismas (se tomaron los parámetros fisicoquímicos como temperatura, salinidad y profundidad) Se conservaron los organismos y sus refugios de manera individual en bolsas de plástico colocándose en hielo, para ser transportadas al laboratorio de inmunología del Ciidir Sinaloa. En el laboratorio  las muestras fueron procesadas de la siguiente manera: se identificaron a los organismos empleando las claves de la FAO (1995)  se realizaron biometrías como la medicion del manto con un vernier (0.1mm) y el peso total (con una balanza tipo ohaos)  y se identificaron los sexos a partir de la observación del color y forma de la gónada. Se realizaron histogramas de frecuencia del manto para obtener la variable de crecimiento para el modelo de Von Berthalanfy utilizando el programa FISAT (por el modelo ELEFANT). Se realizaron curvas de crecimiento en manto y peso utilizando un modelo potencial.  

CONCLUSIONES

La talla máxima de crecimiento en manto  para hembra fue de 43mm y para macho de 33mm, mientras que la mínima fue  de 8mm para hembra y de 10mm para macho. La edad para la L∞  de la población fue de 6 años, para hembras  4.5 años y para machos 3.5 años según el modelo de von Berthalanfy. El pulpo P. digueti presento un crecimiento alométrico negativo (b=1.0954) con un índice de determinación de  R²= 0.8656.    

Asesor: Dr. Rodrigo Erick Escartín Pérez, Universidad Nacional Autónoma de México

EVALUACIóN DE LOS EFECTOS DE LA ACTIVACIóN DE LOS RECEPTORES CB2 DEL NúCLEO ACCUMBENS EN LA INGESTIóN DE UNA DIETA PALATABLE

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EVALUACIóN DE LOS EFECTOS DE LA ACTIVACIóN DE LOS RECEPTORES CB2 DEL NúCLEO ACCUMBENS EN LA INGESTIóN DE UNA DIETA PALATABLE

Aké Ortíz Melinna Itzel, Consejo Quintanarroense de Ciencia y Tecnología. Bejarano Ponce Juan Pablo, Universidad de Colima. Asesor: Dr. Rodrigo Erick Escartín Pérez, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La conducta alimentaria, así como otros procesos fisiológicos que lleva a cabo el organismo están altamente regulados por señales periféricas y centrales, mediante la liberación de neurotransmisores y péptidos. El hipotálamo tiene, entre otras, la función de la regulación homeostática mediante la estimulación o inhibición de la ingesta de alimento y el gasto energético, mientras que el núcleo accumbens es parte del circuito de la recompensa que permite que los estímulos como el alimento tengan propiedades reforzantes y/o hedónicas (Cortés-Salazar et al., 2012). El desequilibrio de los mecanismos reguladores puede llevar a conductas alimentarias inadecuadas, algunas de ellas, relacionadas con la génesis de la obesidad. Debido a que la obesidad es un factor de riesgo para el desarrollo de enfermedades no transmisibles como la Diabetes Mellitus, trastornos del aparato locomotor, enfermedades cardiovasculares, entre otras más (OMS, 2018), el estudio de los factores que favorecen su ocurrencia es de gran relevancia. Actualmente, se considera que el sistema endocannabinoide está involucrado en la regulación neuronal y existen receptores a estas moléculas en el núcleo paraventricular, en el área hipotalámica lateral, el núcleo ventromedial y el núcleo accumbens (entre otras), afectando así la modulación de la ingesta de alimento y el gasto energético (Cortés-Salazar et al., 2012). Se sugiere que los cannabinoides modifican el comportamiento alimentario mediante la modulación de la homeostasis de la energía y el sistema de recompensa (Gardner et al., 2005). Específicamente el receptor CB2 se encuentra localizado de manera diferente al CB1R, expresándose mayoritariamente en la periferia, como el sistema hematopoyético y el sistema inmunitario, no obstante, estudios más recientes han demostrado que también puede ser encontrado en el sistema nervioso central (Cortés-Salazar et al., 2012).  Considerando en conjunto la evidencia descrita, y dado que los receptores  a cannabinoindes CB2 se expresan en el núcleo accumbens, es posible que estos contribuyan con la regulación de la ingesta de alimento palatable en la condición en la que el alimento se consume por sus propiedades hedónicas. Así, el propósito de este estudio es evaluar el efecto de la activación del receptor CB2 de la corteza del núcleo accumbens sobre la ingestión de leche condensada con sacarosa al 10% en ratas presaciadas.

METODOLOGÍA

Se utilizaron 7 ratas Wistar macho con un peso entre los 270-310 g al inicio. Cada animal fue colocado en una caja individual, en un cuarto con una temperatura de 21±1°C y un ciclo de luz-oscuridad 12x12 horas, contaron con una alimentación ad libitum (libre acceso a alimento estándar y agua) previo a las sesiones de habituación a la dieta palatable (leche condensada con sacarosa al 10%). Se realizó la cirugía estereotáxica, donde las ratas fueron canuladas unilateralmente en el núcleo accumbens con las siguientes coordenadas, -0.6 lateromedial, +1.5 anteroposterior y -6.0 dorsoventral con respecto a bregma (Paxinos y Watson, 1998). Tuvieron un periodo de recuperación quirúrgica (4 días) y posteriormente fueron adaptadas a un paradigma alimentario, el cual consistió en la privación del alimento estándar por 22 horas, posteriormente se otorgó acceso al alimento estándar por una hora y finalmente se daba acceso a un alimento altamente palatable durante una hora (leche condensada con sacarosa al 10%), el consumo de ambas dietas fue cuantificado. En el momento en el cual los animales presentaron menos del 20% de variación en el consumo de alimento estándar o la dieta palatable, se comenzó con las administraciones farmacológicas. Se formaron dos grupos de manera aleatoria, el grupo 1 recibió 0.5 µL de solución salina a 0.2 µL/min, mientras que el grupo 2, fue administrado con un mismo volumen, pero con diferentes concentraciones del agonista de CB2R (0.125, 0.25 y 0.5 nmol en sesiones diferentes separadas por 2 días entre inyecciones). Cabe destacar que la manipulación farmacológica se realizó después del periodo de ingesta de alimento estándar. Al finalizar el experimento, los animales serán sacrificados con una dosis letal de Pentobarbital Sódico, se extraerá el cerebro y se conservará en formaldehído al 10% durante dos días, para después realizar cortes de 300 µm en el plano coronal verificándose el sitio donde la cánula fue colocada. Se excluirán del estudio a los animales que no presentaron una correcta canulación.

CONCLUSIONES

Con el reciente descubrimiento de la expresión del receptor CB2 en el cerebro, se desea conocer el papel que desempeña su activación en el Núcleo Accumbens sobre la conducta alimentaria. Estudios anteriores confirman que el sistema endocannabinoide a través del receptor CB1 regula la conducta alimentaria modificando las propiedades hedónicas de los alimentos (sistema de recompensa) y la modulación de la homeostasis de la energía. Entonces, como el mecanismo transduccional del receptor CB1 es similar al del receptor CB2, se espera que el receptor CB2 estimule el consumo de una dieta palatable en la condición en la que los sujetos consumen la dieta por su palatabilidad y no por el balance energético negativo. BIBLIOGRAFÍA Cortés-Salazar, F., Mancilla-Díaz, J.M., López-Alonso, V. E., Gonzales-Hernández, B.G & Escartín-Pérez, R. E. (2012). Relationship between CB1 receptors in the nucleus accumbens shell and the hedonic value of food. Nova Science Publishers, 5 (1).  Gardner, E. L. (2005). Endocannabinoid signaling system and brain reward: Emphasis on dopamine. Pharmacology, Biochemistry and Behavior, 81(2), 263-284. Organización Mundial de la Salud. (2018). Obesidad y sobrepeso. Disponible en: https://www.who.int/es/news-room/fact-sheets/detail/obesity-and-overweight. Recopilado el 23 de julio de 2019. Paxinos, G. and Watson, Ch. (1998). The brain in stereotaxic coordinates. New York: Academic Press.

Asesor: Dr. Ma. Dolores González Hernández, Instituto de Ecología (CONACYT)

IDENTIFICACIóN DE HONGOS DEL SUELO DE LA RESERVA ECOLóGICA YUMKá, EN VILLAHERMOSA, TABASCO CON MéTODOS MOLECULARES Y SU POTENCIAL PARA LA BIOTECNOLOGíA

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IDENTIFICACIóN DE HONGOS DEL SUELO DE LA RESERVA ECOLóGICA YUMKá, EN VILLAHERMOSA, TABASCO CON MéTODOS MOLECULARES Y SU POTENCIAL PARA LA BIOTECNOLOGíA

Alanis Rodriguez Lizeth Amairani, Universidad Autónoma de Tamaulipas. Asesor: Dr. Ma. Dolores González Hernández, Instituto de Ecología (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Yumká, que en maya-chontal quiere decir "duende que cuida la selva", es un centro recreativo ambiental que ofrece la oportunidad de conocer los ecosistemas de selva, sabana y laguna propias de la región. Se encuentra en el municipio del Centro en el ejido Dos Montes a 17 km de la ciudad de Villahermosa. Cubre una superficie de 101 hectáreas con los siguientes tipos de vegetación: selva mediana subperennifolia (32 has) y pastizales inducidos (47 has). El clima es cálido húmedo con lluvias en verano, cuenta con una media anual de 2000 mm. El tipo de suelo es luvisol, con un horizonte arcilloso, acido de color pardo amarilloso. Debido a que es una zona con distintos ecosistemas, además de ser un área natural protegida, existen pocos trabajos sobre las especies de hongos del suelo que se encuentran en esa área. Además, se desconoce si algunos de estos hongos pudieran tener alguna aplicación biotecnológica. Por ello, el objetivo de este trabajo fue aislar e identificar algunos de estos hongos para probar la actividad como biocontroladores de plagas a futuro.  

METODOLOGÍA

Al obtener nuestra muestra de hojas del suelo de esta reserva ecológica procedimos a realizar lo siguiente: 1.- Se prepararon cámaras húmedas, colocando en frascos de vidrios papel filtro humedecido con agua destilada y se esterilizaron 15 minutos. De la muestra colectada de distribuyó en 7 frascos diferentes donde estando nuestras hojas de esta reserva ecológica se les agregó un poco de agua destilada para que se humedecieran. 2.- Las muestras de hoja se colocaron en los frascos estériles humedecidos para activar su crecimiento. 3.- Después de este procedimiento, se transfirieron las hojas a cajas Petri con medio Potato Dextrose Agar (PDA) donde se dejaron para iniciar el crecimiento 4.- Al obtener crecimiento de algún hongo en las placas que fueron transferidas se tomó, con ayuda de una navaja, la muestra de hongo crecido para transferirlo a una caja limpia con medio PDA con una adición de estreptomicina para que inhibir el crecimiento bacteriano. 5.- Para garantizar un cultivo puro se realizó de nuevo una transferencia a otra caja con medio PDA Todo esto se realizó con las muestras en los 7 frascos 6.- Después de tener cultivos puros y registrar las características de estos hongos se realizó lo siguiente: EXTRACCIÓN DE ADN Al obtener los cultivos puros se realizó la extracción de ADN 1.- Para realizar esta extracción se transfirió a un matraz con medio líquido potato dextrose broth, y con la ayuda de una navaja, una porción del hongo creciendo en PDA 2.- En los matraces de obtuvo el crecimiento de 2 a 3 días 3.- Al tener el crecimiento se procedió al filtrar con ayuda de un matraz kitazato y un embudo al que se le colocó papel filtro 4.- Se filtró la muestra y en el papel filtro fue donde quedo nuestra muestra 5.- La muestra se colocó en un tubo eppendorf donde se añadió Buffer de extracción y RNAsa donde se quedó un día de reposo a temperatura ambiente 6.- Se incubó a 65ºC durante 1.5 horas 7.- Se centrifugo a 13200 RPM durante 5 minutos 8.- Se transfirió el mayor volumen del buffer de extracción a un tubo nuevo y rotulado donde se añadieron 500 microlitros de cloroformo-alcohol isoamílico donde se agito durante 5 minutos muy suavemente 9.- Se centrifugó a 13000 RPM durante 10 minutos y se transfirió la fase acuosa a un tubo limpio 10.- Se añadió 50 microlitros de acetato de sodio y 1 ml de etanol absoluto y se precipitó durante 1 hora a -20ºC 11.- Se centrifugó durante 10 minutos a 13000 RPM, se obtuvo el precipitado y se decantó el sobrenadante 12.- Se lavó el precipitado centrifugando con 300 microlitros de etanol frio al 70% 13.- Se centrifugó durante 5 minutos a 13000 RPM y se decantó en sobrenadante 14.- Se secó el precipitado en un evaporador rotatorio por 5 minutos 15.- Se re-suspendió el ADN con 60 microlitros de agua destilada estéril 16.- Se verificó la concentración del ADN en un gel de agarosa 17.- Al obtener nuestras bandas se prosiguió al realizar una PCR para amplificar la región intergénica del ADN ribosomal nuclear 18.- Al obtener nuestra PCR se realizó una electroforesis horizontal y al finalizar visualizamos el gel y se cortaron las bandas 19.- Se realizó la purificación de las bandas de agarosa con ayuda de un kit 20.- Se realizó una reacción de secuenciación cíclica para obtener las secuencias de los hongos aislado

CONCLUSIONES

De acuerdo a los resultados obtenidos a través de una secuenciación y de realizar un blast en el Banco Mundial de Secuecias de GenBank, se obtuvo como resultado que uno de los hongos que se encontró de las muestras de la reserva Yumká probablemente es del género Talaromyces.  Como dato importante al obtener los resultados del crecimiento del hongo puro, este presento una peculiar caracteristica la cuál fue el pigmento rojo que genero este hongo. Dos veces se obtuvo este resultado en distintas muestras, uno se identificó como Talaromyeces purpureogenus y otro como Talaromyeces siamensis. No obstante, aun queda realizar más investigación para tener un resultado más confiable. Aunque el trabajo todavía no está finalizado, el tener este resultado es algo muy importante ya que este género aun no esta descrito en nuestro país y el poderlo registrarlo para México es una buena oportunidad para futuras investigaciones.

Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

ESTABLECIMIENTO DE LAS CONDICIONES DE FERMENTACIÓN PARA LA OBTENCIÓN DE ÁCIDO LÁCTICO A PARTIR DE ALMIDÓN EXTRAÍDO DE SEMILLA MANGO.

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ESTABLECIMIENTO DE LAS CONDICIONES DE FERMENTACIÓN PARA LA OBTENCIÓN DE ÁCIDO LÁCTICO A PARTIR DE ALMIDÓN EXTRAÍDO DE SEMILLA MANGO.

Alcantar Huerta Esmeralda, Instituto Tecnológico de Morelia. Díaz Aguilar Juan Jose, Instituto Tecnológico de Morelia. Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

  El ácido láctico es un ácido orgánico ampliamente utilizado en diversas industrias como lo son la industria alimentaria, plásticos, fertilizantes, entre muchas otras. La producción biotecnológica del ácido láctico ha adquirido gran importancia debido a los beneficios ambientales y al uso de recursos renovables en lugar de los petroquímicos. Al aprovechar un desecho orgánico como lo es la semilla de mango se ofrece una alternativa rentable y sustentable ofreciendo múltiples ventajas como lo es el alto rendimiento del almidón además de la facilidad de recolección y abundancia del diseño en la mayor parte del año en comparación con otras investigaciones sobre el desarrollo de métodos biotecnológicos para la producción de ácido láctico, con el objetivo de hacer el proceso más eficiente y económico. De acuerdo a lo reportado en la literatura, se propuso establecer las condiciones de fermentación, a fin de obtener mejores resultados en el proceso homofermentativo para la producción de ácido láctico.

METODOLOGÍA

Se comenzó por abrir el hueso de mango y se extrajo el cotiledón, el cual posteriormente se llevó a un horno de secado a 30°C por 96 horas. Se molió hasta obtener un tamaño de partícula de 0.125 mm aproximadamente. Se hidrolizó el almidón con ácido sulfúrico utilizando concentraciones de 2, 3 y 4% v/v para ser llevado a él autoclave por 15 minutos a 15 psi y 115°C. El proceso para aislar el lactobacilo del suero de leche consistió en preparar medio agar MRS en cajas de Petri, para posteriormente llevar a cabo la siembra del mismo y mantener en incubación por 48 horas a 30°C. Para poder llevar a cabo el establecimiento de las condiciones de fermentación se optó por neutralizar el hidrolizado con NaOH 1M para llevar a cabo la prueba de DNS propia para identificar los azúcares reductores. Finalmente se prepararon en 4 matraces Erlenmeyer de 250 ml, 2 preinoculos de 100 y 2 más de 50 ml donde estos contenían el hidrolizado de almidón previamente neutralizado, acetato de sodio, extracto de levadura, sulfato de magnesio heptahidratado y fosfato de sodio en los cuales se sembró el lactobacilo aislado para mantener en incubación por 72 horas a 100 rpm a 37°C. Finalmente se determinó la concentración celular (célula/ml).

CONCLUSIONES

Al realizar la prueba de DNS para azúcares reductores en las concentraciones de 2, 3 y 4% de ácido sulfúrico v/v, se determinó que en la concentración al 3% es donde se presentó una concentración de 37.9962 g/L, mientras que para las concentraciones de 2 y 4% se obtuvieron valores de 23.0251 g/L y 13.3764 g/L respectivamente. Después de observar los resultados obtenidos, se volverá a repetir la misma metodología, pero evaluando concentraciones más cercanas al 3% a fin de determinar si existe la posibilidad de obtener una concentración aún más alta a la ya obtenida.

Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

ESTUDIO COMPARATIVO DE LA EFECTIVIDAD DE DISTINTOS SUSTRATOS PARA EL DESARROLLO DE LA KOMBUCHA

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ESTUDIO COMPARATIVO DE LA EFECTIVIDAD DE DISTINTOS SUSTRATOS PARA EL DESARROLLO DE LA KOMBUCHA

Alcaraz Ríos Víctor Axel, Instituto Tecnológico de Morelia. Valencia Barajas Fryda Sofía, Instituto Tecnológico de Morelia. Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La "kombucha" o medusomyces gisevi cuenta con propiedades benéficas para la salud por contener antioxidantes, flavanoles, flavonoides, catequinos y polifenoles. Por su contenido de catequinas, posee propiedades anti-inflamatorias y neuroprotectoras; puede ayudar en la regulación del apetito y por su afinidad con los receptores cannabinoides disminuir el dolor y la náusea, así como ayudar a reducir la cantidad de azúcar en sangre y los niveles de lipoproteinas de baja densidad (LDL), conocidas erróneamente como colesterol malo   Durante la estancia de investigación se tuvo el interés de comparar el desarrollo de la kombucha utilizando distintos sustratos principalmente herbales, para determinar en cual se da un mejor crecimiento del consorcio microbiano y verificar con cuál medio se puede obtener una solución con mayor capacidad antioxidante. Si se obtiene uno o varios cultivos con las propiedades anteriormente mencionadas, se podrían desarrollar varios productos a partir de esta materia prima, sin embargo, es necesario determinar cómo varían tanto la composición y/o el crecimiento del Scoby respecto de la capacidad antioxidante del mismo cuando se varían los sustratos.

METODOLOGÍA

Cultivo del Scoby o Kombucha de reserva Se pesaron 5 gramos de té negro, 5 gramos de té verde y 50 g de azúcar para cada preparado. Se hirvieron en 2 vasos de precipitado 600 ml de agua para cada preparado, y una vez alcanzada la temperatura de ebullición se incorporan los 5 gramos de hierbas y 50 gramos de azúcar, dejando aun hervir por 10 a 15 minutos. Se esterilizaron en autoclave durante 5 minutos los frascos donde se fermentaron los tés y se procedió a realizar el cultivo en una campan de flujo laminar en condiciones de esterilidad. A cada frasco se le inoculo un fragmento de scoby madre y posteriormente se cubrieron con manta de cielo la boca de los frascos para permitir la fermentación aerobia Se dejan fermentar los frascos de 5 a 7 días hasta que se alcanza un pH de entre 2.5 a 4. Posteriormente, se repite el procedimiento para trasladar la kombucha y el sobrenadante se filtra y se almacena a 4 °C.     Cultivo en los sustratos prueba Una vez se teniendo los cultivos fermentados de kombucha se esterilizaron los frascos con capacidad para 200 ml en la autoclave. Luego de esto se hirvieron 3 litros de agua en vasos de precipitado y se vaciaron en 14 frascos, 200 ml en cada uno junto a mechero para asegurar esterilidad; se pesaron 1 gramo de cada uno de los sustratos de prueba y 10 gramos de azúcar por cada sustrato prueba (exceptuando el refresco de cola y el jugo comercial) y se adicionaron a los frascos con agua hervida volviéndose a calentar hasta la ebullición, manteniéndolos así de 10 a 15 minutos parcialmente tapados. Una vez hervidos se trasladaron a la campana la cual se preparó de la misma manera que en el procedimiento anterior y se realizó el cultivo en los sustratos prueba dejándose fermentar de 5 a 7 días. Posterior a eso se filtraron y almacenaron los sobrenadantes para realizar las pruebas posteriores Prueba de cuantificación de polifenoles Para cada sustrato se hizo una dilcuion 1:4. En microtubos se agregaron 250 microlitros de reactivo de Folin, 20 microlitros de muestra y 480 microlitros de agua destilada; se dejó reposar en oscuridad 8 minutos y posteriormente se agregaron 1250 microlitros de carbonato de sodio al 20 %, una vez hecho esto se dejaron reposar de 30 minutos a 2 horas y se leyeron en el espectrofotómetro a 750 nanómetros   Prueba DPPH Se pesaron 0.00195 g de DPPH y se pusieron en un matraz aforado de 50 ml que previamente había sido cubierto de aluminio para protegerlo de la luz. Se aforó con 50 ml de metanol al 80%. Se protegieron los tubos de ensaye con aluminio de la luz y se agregaron 1.5 ml de sustrato y 1.5 ml del DPPH y se dejaron reposar en la oscuridad por media hora. Se calibró el espectrofotómetro a 520 nanómetros.

CONCLUSIONES

Se evaluaron como medios para el desarrollo de la kombucha distintos tés de hierbas o bebidas variadas como: Árnica, Manzanilla con Mastranto, Salvia, Té negro con Manzanilla, Albahacar, Té negro con Albahacar, Caléndula, Pasiflora, Hierba del Cáncer, Magnolia, Gordolobo, Mastranto, Jugo comercial sabor durazno, Refresco de Cola Coca Cola. Se monitoreo el pH durante los días de fermentación y posteriormente se realizó la prueba de determinación de polifenoles. Una vez obtenida la cuantificación de polifenoles, se seleccionaron los sustratos con el mejor resultado siendo: Té negro, Té Verde, Hierba del Cáncer, Mezcla Negro-Manzanilla, Mezcla Manzanilla-Mastranto; a los cuales se les aplicó una prueba de actividad antioxidante con una solución DPPH.

Asesor: Dr. Lucrecia Arellano Gámez, Instituto de Ecología (CONACYT)

DIVERSIDAD DE ESPECIES DE ESCARABAJOS DEL ESTIéRCOL EN SISTEMAS PRODUCTIVOS AFECTADOS POR UN INCENDIO NO CONTROLADO EN ÚRSULO GALVáN, VERACRUZ

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DIVERSIDAD DE ESPECIES DE ESCARABAJOS DEL ESTIéRCOL EN SISTEMAS PRODUCTIVOS AFECTADOS POR UN INCENDIO NO CONTROLADO EN ÚRSULO GALVáN, VERACRUZ

Alfaro Gastelum Tabeely Michelle, Instituto Tecnológico de Culiacán. Asesor: Dr. Lucrecia Arellano Gámez, Instituto de Ecología (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Úrsulo Galván es un Municipio de Veracruz, donde se realizan actividades agropecuarias ocupando 84.5 km2 de suelo y vegetación (INEGI, 2016). Una de las prácticas agropecuarias más comunes es la quema de espacios para que el pasto se renueve y haya una mayor cantidad temporal de nutrientes. Sin embargo, esta práctica puede salir de control y pueden incendiarse espacios más amplios que los planeados. En el CBTA 17, bachillerato ubicado en ese municipio, se registró un incendio accidental no controlado, de baja intensidad, sin llegar a la copa de los árboles del terreno, en el mosaico de usos de suelo para enseñanza, el 17 de marzo de 2019. En México existen pocos trabajos donde se evalúe el efecto de los incendios en los insectos y no existen estudios sobre el efecto de los incendios sobre la diversidad de escarabajos estercoleros en paisajes tropicales. Entonces, el objetivo de esta investigación fue conocer si este siniestro afectó la biodiversidad de los escarabajos del estiércol y en qué magnitud.  

METODOLOGÍA

Zona de Estudio El estudio se llevó a cabo dentro de las instalaciones del Centro de Bachillerato Tecnológico Agropecuario (CBTa 17), ubicado en el Municipio de Úrsulo Galván en Veracruz. Del 20-22 de junio se realizaron muestreos de escarabajos del estiércol en el CBTA 17 en los siguientes usos de suelo: potreros sin árboles (monocultivos var. CT115), sistemas silvopastoriles intensivos de guaje (Leucaena leucocephala), potreros donde se efectúa el pastoreo racional Voisin (PRV), caña de azúcar, hileras de árboles de Melina (Gmelina arbórea), y en hileras de Roble (Quercus sp). Dentro de cada uno de los sitios antes descritos fueron establecidos transectos con 3-9 trampas de caída cebadas (según la extensión y forma del campo). La separación entre trampas fue de 50 m y en hábitats lineales fue de 30 m. Se dejó un borde desde la orilla de cada parcela de 15 m. Las trampas consistían en un envase plástico de 1 litro marca Samsonite. Se usaron dos tipos de trampas (Halffter y Arellano, 2002): 1) botes de plástico con una capacidad de 1l con 200 ml de agua y con una malla que contenía el cebo sujeto a la tapa; 2) botes de plástico de la misma capacidad con 200 g de suelo en el fondo y el cebo encima de la tierra. Los cebos usados fueron excremento de vaca, excremento de cerdo y pescado fresco. Las trampas fueron colocadas al ras del suelo y posteriormente se cubrieron con platos para evitar la entrada de lluvia o la desecación del estiércol por el sol, pero permitiéndole el paso a los escarabajos y otras especies. El tiempo de exposición de las trampas fue de 48 horas. Transcurrido este tiempo se retiraron para ser revisadas y lavadas, y de esta forma, recuperar los insectos capturados dentro de las trampas. Los escarabajos estiércol que se colectaron se almacenaron con alcohol al 70% y se secaron para hacer posible su identificación.

CONCLUSIONES

A partir de la base de datos obtenida, se están realizando los análisis de la información. Se espera menor diversidad de especies y abundancia de escarabajos en las áreas afectadas por el fuego que en las áreas no afectadas.

Asesor: Dr. Humberto Quiroz Martinez, Universidad Autónoma de Nuevo León

EFECTO DEL FÁRMACO FLUOXETINA EN LA LONGITUD Y PESO DE LARVAS DE LUCILIA SERICATA (DIPTERA: CALIPHORIDAE)

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EFECTO DEL FÁRMACO FLUOXETINA EN LA LONGITUD Y PESO DE LARVAS DE LUCILIA SERICATA (DIPTERA: CALIPHORIDAE)

Almazan Luna Rafael, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Humberto Quiroz Martinez, Universidad Autónoma de Nuevo León

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La Entomología Forense es el campo del saber donde la entomología es empleada como herramienta en la investigación de criminalística  y otros casos forenses, cuando el cadáver es hallado bajo condiciones extraordinarias, resultando insuficientes los métodos de la Patología Clásica. Es así que la Entomología Forense representa una ayuda invaluable en casos de cuerpos muy descompuestos, como ocurre en las muertes por homicidio, muerte repentina como la anafilaxis por picadura de abeja o accidentes de tránsito, donde los restos humanos son colonizados por insectos. El entomólogo forense participa en la identificación de los artrópodos y en el análisis de la data entomológica, en la interpretación de esta y así, contribuye con la determinación del tiempo o Intervalo Post-Mortem (I.P.M.) y lugar de la muerte (Mavárez et al.,). La mosca verde o Green Bottle Fly, Lucilia sericata es una mosca cosmopolita con un alto grado de sinantropía, es decir, en estrecha relación con los asentamientos humanos; es de importancia para las ciencias forenses y médicas,  está referenciada como una de las primeras especies colonizadoras que predomina en la fauna cadavérica (Pinilla et al., 2010). En las últimas décadas, las muertes relacionadas con el consumo de antidepresivos han llamado la atención de los investigadores en la medicina forense, existe una diversidad de fármacos dentro del grupo de los antidepresivos entre ellos la fluoxetina; su empleo tiene lugar en pacientes con trastornos con depresión mayor, trastornos de la alimentación, trastorno de angustia, trastorno obsesivo compulsivo, trastorno por estrés postraumático y síndrome de Tourette. El objetivo del proyecto de investigación fue evaluar el efecto del antidepresivo fluoxetina en la longitud y peso de las larvas de Lucilia sericata. La Entomología Forense ha alcanzado un estatus importante dentro de las ciencias forenses. Sin embargo, son escasos los trabajos referentes afectación de larvas de moscas por el consumo de medicamentos por personas en tratamientos específicos con algún tipo de antidepresivo.

METODOLOGÍA

HIPÓTESIS El fármaco fluoxetina influenciará en el desarrollo larval de la mosca Lucilia sericata. Larvas tratadas con el fármaco Fluoxetina presentarán menor longitud y peso que larvas sin tratamiento. DISEÑO UTILIZADO Se elaboró trampas de botella con hígado de res como cebo con el fin de recolectar ejemplares de moscas y obtener sus huevos para elaborar el proyecto de investigación, fueron colocadas en las ventanas del Laboratorio de Entomología y Artrópodos de la Facultad de Ciencias Biológicas en la Universidad Autónoma de Nuevo León; también fueron colocadas 8 trampas de botella en el río de la Silla, Monterrey-Guadalupe, Nuevo León, sin embargo aquí no se colectaron ejemplares a causa de la desaparición  de trampas de botella por efecto carroñero. INSTRUMENTOS DE MEDICIÓN APLICADOS Para el conteo de huevos se necesitó de una aguja de disección para trasladar los huevos que se encontraron en el hígado de las trampas de botella a un hígado fresco para después separarlos en una pasta de hígado con y sin tratamiento. El peso de las larvas se realizó en una balanza analítica de la marca ADAM y la longitud se midió con un Vernier de marca PRETUL, además se utilizó un Estereoscopio de marca ZEISS para observar las estructuras taxonómicas de identificación. PROCEDIMIENTO Masas de huevos de mosca Lucilia sericata  fueron obtenidas colocando trampas de botella con hígado de res a la intemperie en las ventanas del Laboratorio de Entomología y Artrópodos de la Facultad de Ciencias Biológicas en la Universidad Autónoma de Nuevo León. Después de 24 horas de exposición fue seleccionada la masa de huevos que presentó a simple vista mayor volumen. La masa de huevos se dividió en dos parte procurando distribuirla en dos frascos, la cantidad fue de 61 huevos en cada uno en los que fue vertida la pasta de hígado a su vez  evitando en lo más posible el manipuleo y exposición al calor del material biológico para no causar algún estrés que afectara al insecto.  El proyecto de investigación inició con la elaboración de una pasta de 500 g de hígado de res y dividiendo estas dos en partes de 250 g; una de ellas fue colocada en un frasco al cual se le agregó una mezcla de agua destilada con el polvo de una tableta de fluoxetina de 20 mg, el resto de la pasta fue el control. El siguiente paso fue colocar en los recipientes de plástico por separados 100 g de la pasta con y sin el fármaco, enseguida fueron incorporadas las masas de huevos. Posteriormente  se siguió un registro del peso y longitud de 3 larvas cada 24 horas y el conteo de huevos y larvas muertas durante 3 días con el fin de hacer una tabla de vida.   ANÁLISIS DE DATOS Se llevó a cabo la realización de una tabla de vida entre las moscas control y las moscas sometidas a fluoxentina con la finalidad de estudiar el impacto que tiene el fármaco como causa de muerte en las larvas de Lucilia sericata. Se caracterizó por finalizar con la muerte de todas las larvas y la diferencia fundamental entre las tablas la constituyó la velocidad con que se alcanzó ese final. Con la ayuda de la prueba estadística “t de Student” se determinó estadísticamente si las medias de los valores recogidos presentaban o no diferencia significativa en el tratamiento.

CONCLUSIONES

El inhibidor selectivo de la recaptación de la serotonina, fluoxentina, afectó el crecimiento de las larvas de Lucilia sericata afectando el peso, la longitud y esperanza de vida de vida. Estadísticamente no hubo diferencia significativa en el peso y longitud de larvas, solamente lo hubo en la esperanza de vida.  Por lo tanto la presencia de esta sustancia en cadáveres puede llegar a alterar la estimación del intervalo post-mortem.  

Asesor: Dr. Jesus Javier Espinosa Aguirre, Universidad Nacional Autónoma de México

MODULACIóN IN VIVO DEL CITOCROMO P450 1A1 POR LA ADMINISTRACIóN DE BENZO[A]PIRENO Y NARINGENINA.

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MODULACIóN IN VIVO DEL CITOCROMO P450 1A1 POR LA ADMINISTRACIóN DE BENZO[A]PIRENO Y NARINGENINA.

Alvarado Mayo Fatima Roxeli, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Jesus Javier Espinosa Aguirre, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En la zona metropolitana de la ciudad de México actualmente se estiman emisiones superiores a 300 mil toneladas de contaminantes al año, de los contaminantes presentes en dichas emisiones existe una alta presencia de hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAPs) los cuales tienen un efecto tóxico bien conocido (Quijano, 2014) esto aunado con los hábitos alimenticios y consumo de cigarro que también son una fuente de dichos compuestos. En un estudio poblacional en jóvenes de la zona metropolitana de la ciudad de México, después de un análisis estadístico se encontró una alta incidencia de aductos de Benzo[a]pireno en el DNA de los mismos (Poirier, 2004). Se conoce que de dicho compuesto sus metabolitos tienen capacidad carcinogénica, después de ser metabolizado por el Citocromo P450 1A (Narendra, 2015). En este proyecto se busca evaluar compuestos naturales presentes en alimentos comunes como la Naringenina a la cual se le atribuyen propiedades protectoras (Sik, 1997), mediante la evaluación de la presencia del Citocromo P450 1A1 en hígados de ratas tratadas con Benzo[a]pireno y Naringenina.

METODOLOGÍA

El modelo de estudio in vivo fue de un grupo de 20 ratas dividido en cuatro grupos a las cuales se les suministro benzo[a]pireno (50 mg/Kg) vía intraperitoneal y naringenina (50 mg/Kg) vía oral, al primer grupo se les administró el vehículos (aceite de maíz) por trece días, el segundo grupo se trató con naringenina por trece días, el tercer grupo se trató a partir del día once con benzo[a]pireno por tres días y al cuarto grupo se le administró naringenina trece días y benzo[a]pireno a partir del día once, por tres días. Los animales se sacrificaron al día catorce. Se obtuvo la fracción microsomal de los hígados de las ratas. Se cuantificó la proteína total por la técnica de Bradford. El citocromo P450 1A1 será evaluado por Western Blot una técnica para identificar proteínas específicas, por medio de una separación de proteínas de la fracción microsomal por electroforesis y la identificación de la proteína con anticuerpos específicos.

CONCLUSIONES

Conforme los datos sean obtenidos esperamos observar el efecto protector de la naringenina frente al benzo[a]pireno, en la presencia del Citocromo P450 1A1, donde esperamos una disminución en el cotratamiento de la naringenina y el benzo[a]pireno respecto al tratamiento con benzo[a]pireno y dar lugar a futuras investigaciones más específicas como un estudio de inhibición de formación de aductos, un estudio epidemiológico y la evaluación de mecanismos de acción de la naringenina que le atribuirían esa propiedad protectora. Este trabajo de investigación forma parte del proyecto RIESGO A LA SALUD POR EXPOCISIÓN ESTACIONAL A MATERIAL PARTICULADO. BUSQUEDA DE AGENTES PROTECTORES del Instituto de Investigaciones Biomédicas-UNAM.

Asesor: Dr. Ali Margot Huerta Flores, Universidad Autónoma de Nuevo León

CREACIóN DE ELECTRODOS EN VIDRIO ITO, POR TéCNICA DE SPIN COATING CON PELíCULAS DE NANOMATERIALES.

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CREACIóN DE ELECTRODOS EN VIDRIO ITO, POR TéCNICA DE SPIN COATING CON PELíCULAS DE NANOMATERIALES.

Alvarado Mercader Laura Michelle, Consejo Quintanarroense de Ciencia y Tecnología. Asesor: Dr. Ali Margot Huerta Flores, Universidad Autónoma de Nuevo León

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hematita es un semiconductor abundante y estable, y con buena respuesta bajo luz visible. Por este motivo, en este trabajo se planteó la preparación de foto ánodos de hematita combinados con C3N4, el cual es un semiconductor que también presenta excelentes propiedades. Con este arreglo, se espera mejorar la actividad fotoelectroquímica en la reacción de oxidación del agua en una celda PEC para la producción de combustibles solares.

METODOLOGÍA

Primeramente, se prepararon las soluciones que sirvieron para hacer las capas sobre el vidrio ITO a través de la técnica de spin coating. Los compuestos con los que se trabajaron fueron hematita (Fe2O3), C3N4 y ZnO. Se hicieron diferentes combinaciones de estos para comprobar sus desempeños, resultando en las siguientes: Hematita, C3N4 y ZnO (simples), Hematita-C3N4 y Hematita-ZnO (dobles) y una última con hematita-C3N4-ZnO (triple).   El vidrio ITO fue cortado en rectángulos con medidas de 2x1 cm. Una vez cortados, con ayuda de una pipeta graduada, se depositó la primera capa para después ser calcinada. Para los vidrios que les correspondía tener 2 o 3 capas, se repitió este proceso hasta obtener la combinación deseada.    Una vez que el vidrio estuvo listo, se construyó un electrodo. Este electrodo consiste en la adhesión de un cable de cobre de aproximadamente 17 cm al vidrio con una solución conductora de plata. Esta plata se endureció aplicando calor directo, y una vez que ya estaban unidos, se aplicó silicón para cubrir tanto la plata como las orillas restantes del vidrio ITO.    Así, cuando el electrodo estuvo listo, se sometieron a diferentes pruebas. En primer lugar se le hicieron pruebas de espectroscopia de ultravioleta visible, para obtener la absorción óptica y la energía de banda prohibida. También se realizó la caracterización estructural, mediante difracción de rayos X (DRX) y el análisis morfológico y elemental mediante microscopia electrónica de barrido (SEM) acoplada con análisis de espectroscopia dispersiva de rayos X (EDS)  Después, la muestra se analizó en un potenciostato-galvanostato dentro de una solución con NaOH 0.1 M como electrolito, en donde se le hicieron análisis tales como espectroscopia de impedancia electroquímica, para obtener las curvas de Mott Schottky y Nyquist, Cronoamperometría a potencial impuesto, voltamperometría cíclica, y la medición del potencial de Circuito Abierto (OCP, por sus siglas en inglés). Seguidamente se analizó el perfil corriente-potencial de los electrodos mediante voltamperometría cíclica usando la misma solución de electrolito, pero con la adición de H2O2 como secuestrador de huecos para calcular la eficiencia de inyección de cargas. Como análisis final, se evaluó la producción de hidrógeno en un sistema fotocatalítico bajo luz visible, empleando el electrodo que arrojó la mayor eficiencia de fotoconversión en las pruebas fotoelectroquímicas.  

CONCLUSIONES

En cuanto a la fotorespuesta de los materiales desarrollados en presencia de luz visible evaluada en la prueba de voltamperometría cíclica, el electrodo con mayor fotocorriente resultó ser el electrodo doble de combinación Hematita-ZnO, mientras que en la prueba de cronoamperometría, la mayor respuesta fue mostrada por  el electrodo triple (hematita-C3N4-ZnO). Estos resultados demuestran que la formación de heteroestructuras multicapa promueve la separación y recolección eficiente de cargas en la superficie del electrodo. Por otro lado, el C3N4 resultó tener el desempeño más deficiente, debido a su alta inestabilidad. Sin embargo, este comportamiento se inhibió cuando es incorporado en las heteroestructuras con ZnO y hematita.

Asesor: Dr. Noé Valentín Durán Figueroa, Instituto Politécnico Nacional

COMPLEMENTACIóN DE LA FUNCIóN DEL GEN RB1 EN ARABIDOPSIS THALIANA

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COMPLEMENTACIóN DE LA FUNCIóN DEL GEN RB1 EN ARABIDOPSIS THALIANA

Alvarado Molina Dania Valeria, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Noé Valentín Durán Figueroa, Instituto Politécnico Nacional

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El  gen RB1 es un regulador clave de entrada en la división celular, presenta una secuencia conservada entre especies, tales como Homo sapiens, Mus musculus, Podarcis muralis, Ovis aries, Sus scrofa, entre otras, dicho gen codifica para la proteína RB1 que, en mamíferos, está relacionada con retinoblastoma, tumor maligno congénito que surge de las capas nucleares de la retina. La proteína RB1 controla procesos de diferenciación celular, incluyendo desarrollo de las células madre en plantas como Arabidopsis thaliana, considerada un modelo de la biología molecular debido a características como tamaño del genoma y brevedad de su ciclo vital. El gen RB1 en Arabidopsis codifica para una proteína homóloga de la proteína RB1 denominada RBR1, la cual controla la proliferación nuclear en el gametofito femenino, también influye en la correcta diferenciación de los tipos de células gametofíticas masculinas; regula el mantenimiento de las células madre ubicadas en la raíz, es un regulador negativo del ciclo celular en fase G1 y juega un papel importante en el control de la diferenciación mesofílica. La mutación del gen RBR1 repercute en la producción de óvulos en las silicuas, disminuyendo la producción de éstos, lo que es considerado como un efecto de semi esterilidad.   La presente investigación pretende realizar el estudio del gen RB1 al complementar la función de RBR1 de Arabidopsis thaliana con el gen RB1 humano, en semillas amiGO (microRNA artificial para supresión de silenciamiento génico), las cuales tienen silenciados la región 3’ UTR de la proteína RBR1. Estos estudios de biología molecular nos podrían aportar una herramienta para complementar a su vez la función del mismo gen en plantas con interés agrobiotecnológico como lo son Oryza sativa (arroz) y Zea mays (maíz), en el cual el gen RBR1 está conservado.  

METODOLOGÍA

Se realizaron lavados con cloro a las semillas wild type de la planta Arabidopsis thaliana con ecotipo Columbia para su posterior germinación en placas con medio MS. Posteriormente se transformaron por choque térmico de células de E. coli TOP10 del vector R777 y se seleccionaron las colonias transformadas en un medio con antibiótico. Se extrajo el ADN plasmídico por medio de lisis alcalina con fenol cloroformo. Después se realizó una PCR de baja fidelidad del vector R777 con la enzima Taq DNA polymerase 2x Master Mix RED, para amplificar el casete del gen RB1 humano utilizando los primers JAB1020 y JAB1021, con la finalidad de estandarizar la temperatura de alineación en un rango entre 50-60 °C. Se reveló el resultado en un gel de agarosa al 1%. Posteriormente se realizó una PCR del ADN plasmídico R777 para estandarizar una temperatura óptima ente 50-55 °C. El revelado se hizo en gel de agarosa al 1%. Más tarde se realizó una PCR de alta fidelidad con Phusion High-Fidelity Polymerase del gen RB1 humano a la temperatura de alineación óptima (53 °C), variando el tiempo de extensión del amplificado. Después se llevó a cabo una PCR con la enzima iProof para probar las condiciones ya estandarizadas, y  obtener un amplificado de alta fidelidad. PCR del gen RB1 humano en un volumen mayor para obtener más amplificado con la finalidad de purificarlo. Revelar en gel de agarosa al 1% con Sybr safe para ver en luz azul y cortar la banda con el fin de purificarla con el kit Wizard® SV Gel and PCR Clean-Up System. Posteriormente se realizó una digestión del casete RB1 utilzando las enzimas de restricción NotI y SmaI así como la digestión del vector destino pRI35SNos utilizando las enzimas de restricción NotI y SmaI. Purificación de ambas digestiones mediante el kit Wizard® SV Gel and PCR Clean-Up System. Ligación para insertar en el vector pRI35SNOs el gen de interés RB1 humano con la enzima T4 DNA ligase® en un relación molar 3:1. Transformación por choque térmico de Escherichia coli  TOP10  y se plaqueó en medio LB con antibiótico de selección. Lisis alcalina con fenol cloroformo del plásmido pRI35SNos con casete RB1 insertado. Lavado de semillas WT de Arabidoosis thalina ecotipo columbia. Confirmación de la transformación mediante reacción en cadena de la polimerasa del casete del gen  RB1 con oligos JAB1020 y JAB2021, así como del  casete completo desde promotor hasta terminador con oligos JAB547 y JAB550 con enzima Taq DNA polymerase 2x Master Mix RED. Revelado del amplificado mediante electroforesis en gel de agarosa al 1%. Pasar plantas WT de Arabidopsis thaliana a tierra para su posterior transformación. Transformación de Agrobacterium tumefaciens cepa LBA4404 con vector pRI35SNos con gen RB1 insertado utilizando método de choque térmico o por electroporación, selección en medio YEB con el antibiótico de selección kanamicina. Confirmación de la transformación de Agrobacterium tumefaciens haciendo reacción en cadena de la polimerasa de colonia del casete del gen  RB1 con oligos  JAB1020 y JAB2021, así como del  casete completo desde promotor hasta terminador con oligos JAB547 y JAB550 con enzima Taq DNA polymerase 2x Master Mix RED. Inóculo de Agrobacterium tumefaciens en matraz de 250mL medio YEB para transformación de Arabidopsis thaliana. Transformación de Arabidopsis thaliana mediante el método de floral dip. Por último, secar plantas para posterior análisis de transformación.

CONCLUSIONES

Hasta la fecha de este informe,  se ha logrado obtener el vector final pRI35SNos con el gen RB1 insertado, con una previa subclonación en el vector pBSKS. Lo que se espera realizar por consiguiente es la transformación de Agrobacterium tumefaciens (causante de tumores en plantas dicotiledóneas) con este vector final para después transformar con el mismo a Arabidopsis thaliana, y finalmente realizar las pruebas correspondientes para corroborar dicha transformación.

Asesor: Dr. Paula Lidia Enríquez Rocha, Colegio de la Frontera Sur (CONACYT)

DIVERSIDAD DE AVES EN LOS HUMEDALES DE MONTAñA EN LA CIUDAD DE SAN CRISTóBAL DE LAS CASAS, CHIAPAS

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DIVERSIDAD DE AVES EN LOS HUMEDALES DE MONTAñA EN LA CIUDAD DE SAN CRISTóBAL DE LAS CASAS, CHIAPAS

Alvarado Sosa María Edith, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas. Baca Ramírez Jesús Antonio, Instituto Tecnológico de Los Mochis. Morales Castillo Jafet, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Ramírez Vázquez Dulce Aidé, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Rojas Soto Diana Laura, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Paula Lidia Enríquez Rocha, Colegio de la Frontera Sur (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los humedales son áreas inundables permanentes o temporales que llegan a tener una profundidad de hasta 6 metros. Estos sistemas ecológicos albergan una gran diversidad de especies de flora y fauna. Además proporcionan una gran variedad de servicios ecosistémicos valiosos, incluyendo la purificación del agua, la filtración, la retención de nutrientes, el control de inundaciones, la recarga de agua subterránea y proporcionando hábitat para una variedad de especies (Boyer & Polasky 2004). Los humedales de montaña son ecosistemas dulceacuícolas característicos por presentarse en altitudes superiores a los 2000 msnm (COP 2002). Sin embargo, son de los ecosistemas más amenazados ya que se han reducido por demanda en espacios habitacionales, poca planeación urbana, expansión ganadera, sobreexplotación de recursos, mal manejo de residuos, contaminación urbana y agroquímica. En la ciudad de San Cristóbal de las Casas, Chiapas ha existido una elevada necesidad de vivienda, junto con la falta de regulación municipal y los fuertes intereses económicos que se derivan de la demanda de espacio habitacional, están propiciando la pérdida y reducción de los humedales naturales de montaña (Calderón-Cisneros et al. 2012). Esta transformación del hábitat original ha tenido un impacto negativo sobre las comunidades de aves y otros grupos faunísticos, reduciendo la biodiversidad y la cantidad del hábitat original, interrumpiendo procesos ecológicos y modificando su composición (Dirzo & García 1992, Daily et al. 2001). Para abordar esta problemática se estudian las aves debido a que pueden indicar la integridad (salud o condición) de un paisaje y los humedales individuales (Adamus 2002). En este estudio el objetivo fue determinar la diversidad de las aves en los humedales de montaña en San Cristóbal de las Casas, Chiapas y analizar el uso de suelo en los sitios de muestreo durante los periodos 2001, 2011 y 2019.

METODOLOGÍA

  El presente estudio se llevó a cabo en la ciudad de San Cristóbal de Las Casas, Chiapas, México. Se seleccionaron 8 puntos de muestreo mediante el programa ArcMap 10.1 tomando como criterio la presencia de humedales, la cercanía a zonas urbanas y la presencia de áreas verdes. El muestreo se realizó la segunda semana de julio del 2019 por el método puntos de conteo, con distancias variables, de 7:30 a 9:30 am. Cada punto se visitó 2 veces y se utilizaron binoculares (8x42) para la observación de aves, para la identificación se utilizó la guía de aves de San Cristóbal de las Casas (Huffman 2011). Las especies identificadas fueron registradas en un formato donde se indicó el número de individuos, la hora y la actividad que la especie realizaba. Los datos se incluyeron en una página de Excel para su posterior análisis. La abundancia se estimó como la media de individuos de cada especie para cada sitio y para todos los sitios. De igual modo, se realizó el índice de diversidad de Simpson. Se utilizaron imágenes de satélite de Google Earth (años 2001, 2011 y 2019), donde se rodalizaron los ocho puntos de muestreo. En cada punto de muestreo se hizo un buffer de 500 metros y dentro del área, se clasificó el uso de suelo en diferentes categorías: zona urbana, zona arbórea, zona de cultivo, cuerpos de agua y áreas de infiltración. Posteriormente se analizó la rodalización en ArcGis 10.2.1, y se obtuvo el área en metros de estas cinco categorías, para cada punto de muestreo. La información se incluyó en una base de datos en Excel y se realizó una comparación de las áreas de estudio entre los años analizados.

CONCLUSIONES

En total se registraron 36 especies de aves en los ocho puntos de monitoreo. El punto número 7 (Moxviquil) fue el sitio con mayor riqueza presentando un total de 15 especies que representa el 41% total, esto se asocia a una mayor área de vegetación (321,210 m2) en comparación con el resto de los puntos. El punto 1(Cocos) y 5 (CBTIS) presentaron un total de 13 especies, seguido del punto 4 (Cerrito) con un total de 12 especies. Estos puntos se caracterizaron principalmente por la presencia de cuerpos de agua cercanos a los puntos de muestreo, específicamente el punto 4 presentó una mayor área de cuerpo de agua. Los puntos 2, 3, 6 y 8 obtuvieron la menor riqueza de especies debido a que presentaron una mayor área de urbanización cercana a los puntos de muestreo.  Las especies más abundantes fueron el zanate (Quiscalus mexicanus; 28.49%), el copetón (Zonotrichia capensis; 17.21%), la golondrina (Hirundo rustica; 7.40%) y el gorrión doméstico (Passer domesticus; 5.46%).  De acuerdo con el índice de Simpson, el punto número 4 (0.1432), 5 (0.1597) y 3 (0.1656) presentaron la mayor diversidad en comparación con el resto de los sitios. Finalmente, la rodalización analizada de uso de suelo del 2001 al 2011 indica que existe un cambio poco significativo para todos los sitios de estudio. Sin embargo, en un periodo de menos tiempo del 2011 para el 2019 si existieron cambios significativos. La urbanización ha sido la principal causan de cambio de uso de suelo, ya que el área total ocupada por la zona urbana para el 2001 fue de 186,727 m2, para el 2011 fue de 209,606 m2 y para el 2019 de 313,613 m2.  De este modo, se puede concluir porque el zanate (Q. mexicanus) es la especie más abundante y esto debido a que la urbanización ha incrementado desmedidamente en los últimos años y esta favorece el éxito de esta especie.

Asesor: Dr. Yvonne Herrerias Diego, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

BIOLOGíA REPRODUCTIVA DE XENOTOCA DOADRIOI EN LA PRESA DE SAN SEBASTIAN DEL OESTE JALISCO, MéXICO

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BIOLOGíA REPRODUCTIVA DE XENOTOCA DOADRIOI EN LA PRESA DE SAN SEBASTIAN DEL OESTE JALISCO, MéXICO

Alvarez Agustiniano Osiris, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Yvonne Herrerias Diego, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Xenotoca doadrioi se encuentra en la presa de San Sebastián del Oeste en Jalisco, es una familia que pertenece a la familia de los Goodeidos que se caracteriza por que son especies vivíparos y son endémicos del centro de México. La reproducción que presentan los xenotocas se produce después de una fecundación interna, por lo que sólo es necesario tener machos y hembras que hayan llegado a la madurez sexual para que comiencen a aparearse y poder reproducirse. La gestación puede durar entre seis y ocho semanas; las hembras suelen incrementar de peso eso debido por el tamaño de los alevines que se llegan a ver a través de la gravidez.  Xenotoca doadrioi se conoce por manantiales pequeños y una presa en áreas altamente afectadas por actividades humanas que han sido fuertemente modificadas. Debido a lo anterior esta especie, hoy día, se recomienda que se considere como una especie en peligro de extinción.  Algunos factores que pueden estar influenciando el declive de sus poblaciones, al igual que otras especies endémicas de Goodeidos que se encuentran amenazadas o en posible riesgo de extinción, es el uso indiscriminado de agroquímicos y la falta de tratamiento de aguas negras antes de ser vertidas en ríos. La Norma Oficial Mexicana NOM-59-SEMARNAT-2010, establece, Protección ambiental-Especies nativas de México de flora y fauna silvestres-Categorías de riesgo y especificaciones para su inclusión, exclusión o cambio-Lista de especies en riesgo. Xenotoca doadrioi se encuentra en una presa que se ve afectada por la introducción de especies exóticas y la modificación del hábitat las cuales  se cree que puede ser una de las causas principales de que Xenotoca doadrioi este en posible riesgo de extinción y esto afecta a que pueda tener una buena reproducción, por ello es  importante observar si X. doadrioi se está reproduciendo de manera exitosa dentro de la presa, por esta razón el objetivo principal de este trabajo es describir la biología reproductiva de X. doadrioi.

METODOLOGÍA

Para esta investigación se colectaron 51 individuos, 28 machos y 23 hembras de X. doadrioi, en San Sebastián del Oeste Jalisco con una red tipo chinchorro de 4 m de ancho y 15 m de largo con una abertura de malla de 1 cm, estos se colocaron en frascos de vidrios con formol al 4% y después en alcohol al 80%, para ser trasportados al laboratorio de biología acuática de la Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Se midieron y pesaron con la ayuda de un vernier y una báscula granataria.  Se registraron los siguientes datos peso, la longitud patrón, sexo, el largo del intestino, peso de la gónada, estadio gonadal, peso del hígado, y peso eviscerado se obtuvieron las gónadas.  Para lo anterior se realizó una disección desde el ano hasta las branquias y con la ayuda de unas pinzas de relojero se extraían para ser colocadas en bolsitas con su respectiva etiqueta.  Con esos valores se determinó la estructura de tallas en tres categorías (chicos, medianos y grandes).  Además de que se obtuvieron las tallas se calculó el índice gonadosomático, la fertilidad, estadios gonadales, talla de primera madurez, se sacó una tabla dinámica para hembras y machos, se sacaron tres intervalos para tallas (chico, mediano y grande) y tipo de crecimiento para los individuos.

CONCLUSIONES

Con base a los resultados obtenidos tenemos que Xenotoca doadrioi:   Presenta desde cinco hasta trece embriones por hembra grávida. Tanto machos como hembras presentan un tipo de crecimiento anometrico positivo, es decir que crecen más en peso que en talla. Para machos la talla de primera madurez es 23.4 Para hembras la talla de primera madurez es 25.1 Se obtuvieron seis categorías de estadios gonadales. De acuerdo a los datos y gráficos que se obtuvieron, la talla que les favorece a X. doadrioi para poder reproducirse en ambos sexos (machos y hembras) es la segunda.

Asesor: Dr. Armando Navarro Ocaña, Universidad Nacional Autónoma de México

CARACTERIZACIóN DE ESCHERICHIA COLI AISLADA DE BOVINOS POR MéTODOS FENOTíPICOS Y MOLECULARES.

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CARACTERIZACIóN DE ESCHERICHIA COLI AISLADA DE BOVINOS POR MéTODOS FENOTíPICOS Y MOLECULARES.

Alvarez Cirerol Giselle del Carmen, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Armando Navarro Ocaña, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Actualmente en México las infecciones intestinales son un reto para la Salud Pública, donde las enterobacterias, como Escherichia coli están relacionadas con la etiología de las diferentes enfermedades. Esta enterobacteria es capaz de provocar ciertas manifestaciones clínicas y presentar factores de virulencia tales como los descritos en la clasificación de grupos diarreagénico (DEC), de los cuales se reconocen seis grupos DEC, también conocidos como patotipos: E. coli productora de la toxina Shiga (STEC), enterotoxigénica (ETEC), enteropatógena (EPEC), enteroinvasiva (EIEC) y enteroagregativa (EAEC), agregativa difusa (DAEC) y recientemente se adicionó el grupo EAEC/STEC (Nataro, 1998; Clements, 2012; Croxen, 2013). Con respecto a STEC, este es un patógeno zoonótico emergente que agrupa a más de 200 serovariedades (Luna, 2014). STEC tiene como reservorio natural a los bovinos, ovinos y cabras, por lo que estos animales son vehículo importante de transmisión de la bacteria hacia la población humana. Por otra parte, ETEC es la principal causa de diarrea del viajero en adultos de países industrializados y niños que viven en países subdesarrollados. Una de las características de ETEC es su capacidad para producir toxinas termolábiles (LT) y termoestables (STa/STb) codificadas por plásmidos (Nataro et al., 1998). En particular los bovinos, son portadores potenciales de cepas DEC, sin embargo, hay pocos datos disponibles sobre los reservorios animales, la epidemiología, la patogenicidad humana en México. Estudios recientes reportaron la presencia de E. coli híbrida (STEC-ETEC) de fuentes humanas y animales (Nyholm et al., 2015, Kusumoto et al 2016; Johura, 2017). En este estudio, se propone analizar la diversidad antigénica, las características los perfiles genéticos de las cepas de E. coli aisladas de bovinos de diferentes hatos de vacas lecheras en México.

METODOLOGÍA

Se realizó la identificación fenotípica y antigénica de cepas de E. coli empleando reacciones de aglutinación con un sistema de 187 sueros anti-antígenos somáticos (O) y 53 sueros anti-antígenos flagelares (H) (Orskov, 1984). Mediante la reacción de la polimerasa (PCR) se estableció la presencia de los factores de virulencia de STEC (stx1, stx2, eae) (Fratamico, 1995; Sjöling, 2015) y genes los arpA, chuA, yjaA y tsp4 (Clermont, 2014), para conocer los grupos filogenéticos en los que se ubican las cepas STEC, así como los genes lt, stp, sth, bfp y el gen ST131 de la clona O25:H4 (Clermont, 2009).

CONCLUSIONES

Se analizaron 45 cepas, el perfil bioquímico de cepas correspondió a E coli. Dichas cepas se obtuvieron de diferentes hatos en México (Lagos de Moreno, Jalisco en 2004 y en 2005; Culiacán, Sinaloa en 2005; Hermosillo, Sonora en 2005). La tipificación serológica reveló la presencia de los serogrupos O26, O103, O105ab, O141, O142, O145, O157, así como una variedad de serotipos, siendo los más frecuentes los O26:H32, O103:H48, O142:H29, O146:H21, O157:H7. Se registraron 5 cepas como no móviles (H-). El análisis considerando únicamente el reporte de los serotipos en la literatura, mostró que 16 (35.6%) cepas fueron determinadas como EPEC/STEC, 15 (33.3%) cepas como ETEC/STEC, 5 (11.1%) cepas como EHEC/STEC y 2 (4.4%) cepas como EHEC.   Por otra parte, el análisis molecular mostró que todas las cepas fueron negativas para gen stx1 y sólo 4 de ellas fueron positivas al gen stx2 (8.8%), por lo que sólo esas cepas pueden considerarse de los patotipos STEC y EHEC al presentar los genes asociados a la toxina Shiga. En todas las cepas la PCR multiplex reveló la ausencia de los genes lt y sth, sólo 5 cepas fueron positivas para eae (11.1%) y 3 cepas a bfp (6.6%), por lo que de sólo estas últimas podrían considerarse pertenecientes al patotipo EPEC atípicas, por el hecho de que ninguna de las cepas presenta ambos genes. La presencia de los diferentes genes para definir grupos filogenéticos mostró que todas las cepas fueron positivas a arpA (100%), 13 fueron positivas a chuA (28.9%), 6 fueron positivas a yjaA (13.3%) y 31 fueron positivas a tsp4 (68.9%). De acuerdo con la presencia de los genes anteriores, la ubicación de las cepas en grupos filogenéticos fue la siguiente: en el grupo A, 7 (15.6%) cepas; grupo B1, 25 (55.6%) cepas; grupos E, 12 (26.7%) y una (2.2%) sin definir el filogrupo. Finalmente, el análisis del gen ST131 de la clona O25:H4 reveló que todas las cepas fueron positivas (100%) para este gen. Por lo que hace necesario realizar más pruebas para determinar sí las cepas analizadas pertenecen a dicho grupos clonal de E. coli. Las cepas de E. coli ST131 se relacionan con infecciones de vías urinarias con distribución universal y con presencia de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE). Por lo que se puede inferir que la presencia de bacterias con este gen en bovinos podría ser otra fuente de contaminación para los humanos, tal como se ha visto con cepas de este serotipo aisladas de infecciones urinarias. Agradezco a la bióloga Delia Licona Moreno y al técnico Luis Antonio León Alamilla por su apoyo y entrega durante el verano, sin ellos no hubiera sido posible realizar de forma satisfactoria el proyecto.

Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

REVISIóN MORFOLóGICA A REMIPEDIOS (CRUSTACEA: NECTIOPODA) EN LA ISLA COZUMEL, QUINTANA ROO

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REVISIóN MORFOLóGICA A REMIPEDIOS (CRUSTACEA: NECTIOPODA) EN LA ISLA COZUMEL, QUINTANA ROO

Alvarez Echeverria Carla Pamela, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Remipedia es una Clase de Crustacea cuya mayor diversidad y abundancia se encuentra localizada en el Caribe. Se describen como pequeños crustáceos con el cuerpo blanco o transparente dividido en cabeza y un tronco alargado. La cabeza está cubierta por un escudo cefálico cuadrangular, con un surco transversal mediano, sin ojos, con anténulas y antenas birrámeas; las primeras multiarticuladas y con largas setas en su base; las antenas, cortas, con el endopodido curvo y en endopodito en forma de lámina o paleta. Las mandíbulas no presentan palpo, son asimétricas. Presenta además maxilípedos prensores y maxílulas con forma de arpón con los que inyecta veneno a sus presas. Todos los segmentos del tronco tienen un par de palpos para nadar con agilidad, los adultos tienen la facultad de seguir añadiendo segmentos y palpos a su anatomía hasta que mueren, regularmente su tamaño alcanza desde los 9 hasta los 45 milímetros. Al ser organismos habitantes de cuevas, se caracterizan por la ausencia de ojos definidos, la presencia de antenas largas para lograr mayor sensibilidad y la posesión de antenas cortas para llevar a cabo procesos filamentosos. Los primeros remipedios fueron descritos por primera vez en 1979 con base en un ejemplar encontrado en una cueva anquihalina localizada en las Bahamas. Se estima que la especiación de estos organismos se debe a un fenómeno alopátrico, donde las barreras geográficas juegan el rol más importante. La morfometría de ejemplares Remipedios se emplea en este caso, con la intención de cuantificar la variación morfológica entre poblaciones y abre paso a posteriormente estudiar los componentes genético y ambiental que alteran tal variación.

METODOLOGÍA

Para la experimentación se empleó un total de 16 especímenes Remipedios recolectados de 4 locaciones distintos en la isla Cozumel. La primer locación es llamada Cenote Chempita con ubicación geográfica en 20°34.683 N 86°97.562 W, la segunda locación está también dentro de la isla: Chankanaab (20°26 45N 86°59 40W), la tercer locación se encuentra en Tulum, Quintana Roo: Mayan Blue (20°11’47.68’’N 87°30’04.14’’W) y por último 27 pasos Akumal (20.4062945 -97.3279727) Quintana Roo, México. De cada espécimen analizado se recabaron datos morfométricos, tales como la longitud total, número de segmentos dorsales, longitud caudal, así como la longitud de cada antena y anténula. Los datos fueron tabulados según sus respectivas locaciones y posteriormente se analizó a cada población con métodos estadísticos con el fin de conocer la interrelación de caracteres realizando una gráfica de modelo ajustado para cada conjunto de características comparadas, que en este caso se emplea la longitud total del espécimen versus el número de segmentos dorsales que poseen.

CONCLUSIONES

Al comparar la longitud total y número de segmentos, el gráfico resultante arroja una relación entre ambas características donde el valor dependiente se define como el número de segmentos y el valor independiente como la longitud total.  Las rectas que corresponden a las poblaciones en cuestión resultaron similares, poseen muy pocos residuos. Podría interpretarse con un porcentaje de confianza del 95% y el p valor en 0.01 que la longitud total está relacionada con el número de segmentos que poseen los especímenes de las distintas locaciones. Desde el punto de vista filogenético los análisis basados en morfología indican que los Remipedia podrían ser los crustáceos vivientes más primitivos. Una de las razones que sostiene este argumento es la división corporal con un solo tronco en lugar de los habituales tórax y abdomen del resto de crustáceos. Incluso con análisis filogenéticos que emplean datos morfológicos y moleculares, la posición filogenética de los remipedios es imposible de definir con certeza, la adquisición de caracteres ventajosos para la vida subterránea fueron cobrando notoriedad en las poblaciones de diferentes especies. La suma de estos procesos selectivos ha modelado a estos animales a desarrollarse en condiciones que las cuevas anquihalinas ofrecen en la isla Cozumel y la costa de Quintana Roo, mostrando un aspecto que los ha definido como animales troglobios.

Asesor: Dr. Miguel Vásquez Bolaños, Universidad de Guadalajara

HORMIGAS DE MéXICO

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HORMIGAS DE MéXICO

Alvarez Mexia Melissa Michelle, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Miguel Vásquez Bolaños, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

México por su ubicación transicional entre la región Neártica y la Neotropical alberga una gran diversidad de organismos en todos los ecosistemas que comprende, en especial el grupo de las hormigas siendo tan diverso (Vásquez-Bolaños et al., 2013). En la actualidad se han descrito un total de 12,672 especies de Formicidae en todo el mundo, para México se tiene registro de 927 especies distribuidas en 93 géneros y 11 subfamilias (Agosti y Johnson, 2005; Fernández, 2003a; Fernández y Sendoya, 2004; Fisher y Cover, 2007; Vásquez-Bolaños, 2011, 2015). Las hormigas tienen un papel de gran importancia en los ecosistemas alterando física y químicamente los suelos, son una pieza clave en la red trófica y las podemos ver ocupando una gran variedad de nichos. Todo esto las posiciona como el grupo de insectos con más éxito en los ambientes terrestres y como objeto de múltiples estudios debido a su organización social (Agosti y Johnson, 2005). En México aún hace falta mucha información sobre la diversidad de fauna que posee, los datos que existen aunque escasos, son muy importantes para comprender cambios en las poblaciones, dinámica de los ecosistemas, manejo y conservación de especies.  El proyecto "Hormigas de México" de la Colección Entomológica del Centro Universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias de la Universidad de Guadalajara consiste en documentar y registrar las especies de la familia Formicidae presentes en nuestro país.

METODOLOGÍA

Para el proyecto se consultó literatura de Formicidae de México a partir de la lista en la clave Encuentro con las hormigas de México (Vásquez-Bolaños, 2018), así como otras claves, libros y una sesión introductoria con el Dr. Miguel Vásquez Bolaños dedicada a anatomía y diversidad de hormigas.  Los ejemplares de hormigas se obtuvieron mediante múltiples muestreos en distintas localidades de México, posteriormente se determinaron hasta el mínimo taxón posible y se etiquetaron para la colección de la Universidad de Guadalajara. Los muestreos fueron realizados por diversos investigadores desde 2011, depositados en la Colección Entomológica de la UdeG, también se contó con muestras recientes colectadas por mí con la orientación del Dr. Vásquez. Para los muestreos se emplearon diferentes métodos de muestreo, desde colecta manual, uso de necrotrampas permanentes, cernidores de hojarasca, revisión de hongos y trampas de intercepción de vuelo para la colecta de reproductores. Las localidades visitadas en los muestreos son las siguientes: Centro Universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias (CUCBA), Zapopan, Jalisco, México. Centro Ecotirístico Amixtlán, Zapotitlán de Vadillo, Jalisco, México. Zona Arqueológica Guachimontones, Teuchitlán, Jalisco, México. Volcán de Tequila, Tequila, Jalisco, México. Hacienda Tres Carmelitas, San Sebastián del Oeste, Jalisco, México. Molango, Hidalgo, México. Tlanchinol, Higalgo, México. Huautla, Hidalgo, México. Tlaxcala, México. Veracruz, México. Entre otras.

CONCLUSIONES

El proyecto "Hormigas de México" me permitió adquirir conocimientos teóricos a cerca de taxonomía, anatomía y diversidad de la familia Formicidae que hay en México, como también conocimientos prácticos para la colecta de ejemplares mediante distintos métodos de muestreo. De esta estancia de verano me llevo una visión general y más amplia de toda la riqueza de especies que hay en nuestro país.  En México existen registros de 11 subfamilias de Formicidae: Dolichoderinae Formicinae Ponerinae  Ectatomminae Heteroponerinae Amblyoponinae Proceratinae Agroecomyrmecinae Dorylinae Pseudomyrmecinae Myrmecinae En cada una de las localidades muestreadas la subfamilia mejor representada es Myrmecinae, en cuanto a riqueza y abundancia.  REFERENCIAS Vásquez-Bolaños, M., G. Castaño-Meneses, A. Cisneros-Caballero, G. A. Quiroz-Rocha y J. L. Navarrete-Heredia. 2013. Formicidae de México. Orgánica Editores, Guadalajara, Jalisco. Agosti, D. 2005. Productive ants run ahead. Systematic Entomology, 30: 175-176. Fernández, F. y T. M. Arias-Penna. 2008. Las hormigas cazadoras den la region Neotropical. Pp. 3-39. En: Jiménez, E., F. Fernández, T. M. Arias y F. H. Lozano-Zambrano (Eds.). Sistemática, biogeografía y conservación de las hormigas cazadoras de Colombia. Instituto de Investigaciones de Recursos Biológicos Alexander von Humboldt, Bogotá D. C., Colombia. Fisher, B. L. and S. P. Cover. 2007. Ants of North America. A Guide to the Genera. University of California Press. Los Angeles CA. Vásquez-Bolaños, M. 2011. Lista de especies de hormigas (Hymenoptera: Formicidae) para México. Dugesiana,18 (1): 95-133. Vásquez-Bolaños, M. 2015. Taxonomía de Formicdae (Hymenoptera) para México. Métodos en Ecología y Sistemática,10 (1): 1-53. Vásquez-Bolaños, M. 2018. Claves para los  géneros de hormigas (Hymenoptera: Formicidae) de México. Pp. 53-63. En: Material de apoyo. Primer curso de hormigas de México. Zapopan, Jalisco.    

Asesor: Dr. Minerva Concepcion Maldonado Garcia, Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste (CONACYT)

DETERMINACIóN DE MOTILIDAD Y CAMBIOS DE LOCALIZACIóN PROTEICOS EN ESPERMATOZOIDES EN JUREL Y CABRILLA.

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DETERMINACIóN DE MOTILIDAD Y CAMBIOS DE LOCALIZACIóN PROTEICOS EN ESPERMATOZOIDES EN JUREL Y CABRILLA.

Álvarez Navarro Jorge Adolfo, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Minerva Concepcion Maldonado Garcia, Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El estudio de células germinales es de vital importancia para determinar la tasa de reproducción y supervivencia de una especie, en especial si la especie es de gran valor comercial, como lo es en el caso de Seriola rivoliana (jurel) y cabrilla. Las técnicas de estos estudios pueden variar en dependencia de lo que se desee analizar. El estudio de células germinales es de vital importancia para determinar la tasa de reproducción y supervivencia de una especie, en especial si la especie es de gran valor comercial, como lo es en el caso de Seriola rivoliana (jurel) y cabrilla. Las técnicas de estos estudios pueden variar en dependencia de lo que se desee analizar. Tanto la cabrilla como el jurel, son especies de peces marinos con un importante valor comercial y esta investigación pueden arrojar una gran cantidad de información que puede ser de interés aplicado para los acuicultores.  En este caso se analizó el tiempo de motilidad y el cambio de localización de proteínas específicas presentes en los espermatozoides de estas dos especies antes mencionadas. 

METODOLOGÍA

Obtención de muestra: Para obtener a los espermatozoides, se canularon los peces previamente dormidos con aceite esencial de clavo, se mantuvieron los espermatozoides a 25 grados centígrados y se fijaron con formaldehído y glutaraldehído. Estructura celular: Mediante microscopía electrónica de barrido se analizó la ultra estructura de los espermatozoides en el laboratorio de microscopía. Observación de proteínas en el espermatozoide: Mediante técnicas de inmunofluorescencia indirecta observamos la presencia del citoesqueleto de actina y de otras proteínas de diferente índole, como lo fueron Fyn (proteína de señalización), RhoB (remodeladora de citoesqueleto) e Izumo (proteína de fertilidad). 

CONCLUSIONES

Se puede concluir que los espermatozoides requieren agua marina para activarse, su tiempo de motilidad es de 5 a 7 minutos, su longitud promedio del flagelo es de micras y su cabeza es esférica, midiendo 2.5 micras de diámetro. El citoesqueleto de actina se relocaliza durante esos minutos, indicando que este evento es clave para determinar reproductores machos de alta calidad espermática.

Asesor: Dr. Roberto Alejandro Arreguin Espinosa de los Monteros, Universidad Nacional Autónoma de México

PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE TOXINAS CON ACTIVIDAD DE FOSFOLIPASA (PLA2) EN CONUS XIMENES Y CONUS PERPLEXUS

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PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE TOXINAS CON ACTIVIDAD DE FOSFOLIPASA (PLA2) EN CONUS XIMENES Y CONUS PERPLEXUS

Álvarez Rosales Paulette Carolina, Universidad de Sonora. Campillo Badilla Dalila, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Roberto Alejandro Arreguin Espinosa de los Monteros, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los caracoles del género Conus son moluscos marinos depredadores que comprenden alrededor de ~750 especies y son caracterizados por capturar a sus presas utilizando una glándula venenosa que produce un veneno paralizante (conotoxina) de acción rápida inyectado a través de una rádula dentada hipodérmica.  Las conotoxinas producidas por el género Conus, son péptidos pequeños (10 a 40 residuos y 2 a 4 puentes disulfuro). Los mecanismos de acción de las toxinas incluyen acciones sobre diversos órganos y sistemas, por ejemplo, el sistema nervioso, canales iónicos, operando como agonistas o antagonistas de receptores de neurotransmisores e inhibiendo los transportadores de los mismos, entre otras acciones. La gran diversidad que ofrecen las conotoxinas del veneno de los caracoles marinos (~100-400 toxinas venenosas distintas), hace de estos organismos una excelente fuente de moléculas con potencial farmacoterapéutico debido a su actividad biológica altamente específica y selectiva.  A pesar de la tremenda diversidad y potencial de descubrimiento de fármacos de los venenos de Conus, solo alrededor del 0,2% de la biblioteca de péptidos de conotoxinas se ha catalogado.  El trabajo enfocado durante la estancia de investigación fue sobre la actividad fosfolipasa de las toxinas, esto es debido a que los productos de hidrólisis de la reacción de estos en ácidos grasos pueden ser importantes como depósitos de energía, como segundos mensajeros, precursores de eicosanoides, importantes en la señalización celular, la remodelación de fosfolípidos y la perturbación de la membrana. Con base a lo anterior, se trabajó con las conotoxinas dentro del aparato venenoso de dos caracoles del género Conus: C. ximenes y C. perplexus mediante la separación del mismo en sus tres partes principales: bulbo, conducto y rádula, para su posterior caracterización y la determinación de actividad de fosfolipasa (PLA2).

METODOLOGÍA

A varios caracoles marinos, Conus perplexus y C. ximenes, se les extrajo el aparato venenoso, utilizando un estuche de disección. Posteriormente este se dividió en bulbo, conducto y rádula. La disección se llevó a cabo utilizando especialmente agujas de tipo entomológicas, pinzas y bisturí, y apoyándose también de un estereoscopio. Las estructuras disectadas fueron congeladas.  Después, cada muestra se homogenizó con nitrógeno líquido y luego se suspendió en agua Milli-Q. Luego, todas las muestras resuspendidas se centrifugaron a 14,000 rpm durante 10 minutos a 4°C con el fin de descartar todo lo que no fuera veneno, por lo que solo se recogió el sobrenadante. Posteriormente, las diferentes muestras decantadas se sometieron a un proceso de secado a través de la utilización del Speed Vac.   Después, las muestras fueron diluidas en 1000 μl de agua Milli-Q para realizar la cuantificación de proteínas por Nanodrop. Cada uno de los diferentes tipos de muestras que se introdujeron al HPLC, se estandarizaron a una misma concentración (1500 μg/ml). Además, los parámetros que se siguieron fueron los siguientes: el tipo de columna que se empleó correspondió a una de tipo C18 de silica, el volumen de inyección fue de 130 μl, el flujo al cual se sometió la muestra fue de 0.700 ml/min, las longitudes de onda que se determinó que revelara el detector fueron las de 220 y 280, los solventes que se utilizaron para la fase móvil fueron agua Milli-Q más 0.1% de TFA y acetonitrilo más 0.1% de TFA. Luego se realizaron pruebas por triplicado en una microplaca para determinar actividad fosfolipasa, en donde cada pozo contenía 50 μl de un solo tipo de muestra, 25 μl de mezcla de liposomas y 25 μl de buffer reacción. Los blancos y controles también se hicieron por triplicado, en donde los primeros estaban conformados por 50 μl tanto de buffer reacción como de substrato, y los segundos estaban compuestos por 25 μl de buffer reacción, 25 μl de la fosfolipasa PLA2 y 50 μl de substrato. Una vez agregadas todas las sustancias a la microplaca, esta se cubrió con aluminio y se dejó incubando durante 10 minutos, para después ser analizada a través de un lector de microplacas.      Las pruebas de espectrometría de masas fueron realizadas con un total de 1 μg por cada una de las tres estructuras aisladas del aparato venenoso, y llevadas a cabo por el Laboratorio de Cromatografía perteneciente al Instituto de Química.

CONCLUSIONES

De acuerdo con los materiales y métodos descritos, se puede concluir que se logró aislar el veneno de cada una de las partes del aparato venenoso (bulbo, conducto y rádula) y obtener su purificación mediante la polaridad de cada una de las partes por medio de HPLC en fase reversa. Adicionalmente, es preciso señalar que de las pruebas realizadas para la actividad de fosfolipasa, solamente la estructura radular obtuvo un resultado positivo. No obstante, debido la complejidad de las conotoxinas y al largo proceso que se tiene que llevar a cabo para la purificación de estas, no fue posible obtener todos los resultados propuestos, como fue el caso de la determinación de masas moleculares mediante la espectrometría de masas (MALDI-TOF).

Asesor: Mtro. Paula Montserrat García Sánchez, Instituto Tecnológico de Estudios Superiores de Zamora

EXTRACCIóN DEL RESVERATROL COMO COMPUESTO ANTIOXIDANTE A PARTIR DE LA SEMILLA Y EL HOLLEJO DE LA UVA ("VITIS VINíFERA") EN LA REGIóN DE ZAMORA, MICHOACáN.

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EXTRACCIóN DEL RESVERATROL COMO COMPUESTO ANTIOXIDANTE A PARTIR DE LA SEMILLA Y EL HOLLEJO DE LA UVA ("VITIS VINíFERA") EN LA REGIóN DE ZAMORA, MICHOACáN.

Andrade Fernandez Jazmin Esperanza, Instituto Tecnológico de Jiquilpan. Martínez Rosales Ana Karen, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Renteria Garcia Marisol, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Tejeda Suárez Julieta Guadalupe, Instituto Tecnológico de La Piedad. Asesor: Mtro. Paula Montserrat García Sánchez, Instituto Tecnológico de Estudios Superiores de Zamora

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Hace unos años después del proceso de vinificación, una vez que la uva había sido prensada y el mosto extraído para la elaboración del vino, la materia restante como son las semillas, el hollejo y la pulpa seca, muchas veces se desechaba sin saber qué hacer con estos residuos. En la actualidad el procesado de la uva en la industria vinícola genera una gran cantidad de residuos. En concreto, según datos de la Organización Internacional del Vino (OIV), por cada 100 kilos de uva se producen unos 25 kilos de residuos, de los que la mitad es hollejo de uva, el 25% tallos y el 25% restante semillas. Desperdiciando completamente el hollejo y las semillas, los cuales contienen mayor cantidad de resveratrol el cual tiene propiedades antiinflamatorias, antivirales y antitumorales.

METODOLOGÍA

El procedimiento llevado a cabo comenzó con la recolección de uva morada y verde, a continuación se lavó y se separó en 3 partes: semilla, hollejo y pulpa. La semilla y el hollejo fueron pesados y se analizó su actividad acuosa y humedad; posteriormente se colocaron en el horno a 25 °C y se pesaron las muestras diariamente hasta conseguir un peso constante. Cada una de las muestras fueron sometidas a distintos solventes como lo son metanol, etanol y agua destilada llevadas al agitador durante 24 horas con cada solvente, con el fin de extraer resveratrol e identificar con que solvente se obtiene una mayor cantidad de la molécula de interés. Para concluir, se analizaron las muestras en el espectro DART-MS verificando la presencia de dicho compuesto. Además de hacer una búsqueda de documentación bibliográfica para obtener una mejor interpretación de los resultados.

CONCLUSIONES

Al haber aplicado el método de extracción de resveratrol con distintos solventes como lo fueron etanol, metanol y agua destilada, se encontró que el resveratrol está presente en las dos partes de la uva (semilla y hollejo) tanto en uva morada como verde. Después de la interpretación de los resultados arrojados por el espectro DART-MS se pudo ver la presencia de resveratrol en algunas muestras; se observó que el solvente que mejor favoreció para dicha extracción fue el etanol.

Asesor: Dr. Jesús Bernardino Velázquez Fernández, Centro de Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco, A.C. (CONACYT)

PRUEBAS ENZIMáTICAS CONTRA PARED FúNGICA DE BACTERIAS AISLADAS DE MUESTRAS AMBIENTALES

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PRUEBAS ENZIMáTICAS CONTRA PARED FúNGICA DE BACTERIAS AISLADAS DE MUESTRAS AMBIENTALES

Andrade Flor Carolina, Instituto Tecnológico Superior de Cajeme. Asesor: Dr. Jesús Bernardino Velázquez Fernández, Centro de Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco, A.C. (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La agricultura en México es considerada como el sector productivo más importante desde un punto vista económico, social y ambiental, ya que de ésta depende la alimentación primaria de millones de personas. La zona dedicada a la producción agrícola en México es muy amplia ya que ocupa poco más del 13 % del total del territorio nacional, lo que equivale a 145 millones de hectáreas dedicadas a esta actividad, donde el maíz y el frijol representan más del 80 por ciento de la producción agrícola al ser los productos que más se cultivan en toda la República. Por otra parte, una de las problemáticas más tangibles que existen y afectan el desarrollo agrícola, es el estrés biótico causado por diferentes patógenos, entre ellos los más importantes son normalmente las bacterias y los hongos, este último con mayor frecuencia ya que es causante deterioro patológico de frutas, hojas, tallos, y productos subterráneos, así pues, si no se aplican medidas fitosanitarias correspondientes, provocan pérdidas hasta del 90 % en la producción. El género Fusarium, es un fitopatógeno distribuido ampliamente a nivel mundial (en más 32 países) y afecta a más de 80 cultivos de importancia comercial. En el tratamiento de enfermedades causadas por Fusarium spp. y otros hongos se utilizan fungicidas sistémicos como los benzimidazoles, en este grupo se incluyen el benomil, carbendazim, tiabendazol, y tiofanato. Sin embargo, es probable que estos fungicidas sean agentes mutagénicos de las plantas, así como que pudieran incrementar el grado de resistencia de los patógenos ante su efecto. Una opción más sustentable es el uso de bacterias que podemos utilizar como controladores de plagas de hongos, que además presenten otras ventajas como el ser promotoras de crecimiento para la planta.

METODOLOGÍA

Para la determinación de enzimas afectadoras de la pared celular del hongo en estudio (Fusarium solani), fue necesario analizar el crecimiento de 20 bacterias del cepario de la Unidad de Tecnología Ambiental del CIATEJ. Estas bacterias fueron aisladas de suelos de ambientes contaminados y complejos (residuos agroindustriales, suelos halófilos, con hidrocarburos y muestras de aire). Cada bacteria fue cultivada en medios minerales selectivos con quitina, celulosa y grenetina, como modelos de los componentes principales de la pared fúngica. Con el fin de analizar el hidrólisis de los compuestos, examinando el comportamiento de la bacteria frente al medio y la producción de biomasa durante de 48 h a 30°C. Las 20 bacterias fueron inoculadas en placas divididas en 4 partes donde se sembró la bacteria 3 veces y se dejó un espacio para el control. Las placas contienen sales, extracto de levadura 1.0 g/L y suplementado con 1% (p/v) de quitosan, 0.2% (p/v) celulosa o 1% (p/v) gelatina para detectar capacidad quitinolítica, glucanolítica o proteolítica de las bacterias. Los cultivos activos se inocularon por puntos en medio de sales e incubado a 30 °C durante 2 d.  Los resultados se basaron en la medición de micelio (hidrólisis) de la bacteria en el medio.

CONCLUSIONES

La producción de enzimas degradadoras de la pared celular llevadas cabo por la mayoría de las bacterias estudiadas fue altamente efectiva, ya que estas bacterias llevaron a cabo la hidrólisis de quitina, celulosa y grenetina en la mayoría de los experimentos. Así pues, conforman una excelente alternativa como agentes de control biológico para esta plaga tan persistente.

Asesor: Dr. Genaro Diarte Plata, Instituto Politécnico Nacional

COMPORTAMIENTO DEL PULPO PIGMEO PARACTOPUS DIGUETI EN LA LAGUNA DE OHUIRA, AHOME, SINALOA

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COMPORTAMIENTO DEL PULPO PIGMEO PARACTOPUS DIGUETI EN LA LAGUNA DE OHUIRA, AHOME, SINALOA

Angulo Castro Ana Cristina, Universidad Autónoma de Occidente. Asesor: Dr. Genaro Diarte Plata, Instituto Politécnico Nacional

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En lo que respecta al pulpo pigmeo mexicano Paroctopus digueti (Perrier y Rochebrune, 1894) está estrechamente relacionado con el pulpo pigmeo del Atlántico Octopus joubini. Es una especie de pulpo pigmeo que se distribuye en México, dentro del Golfo de California y costa del Pacífico a la mitad del sur de la Península de Baja California. Dentro de las características morfológicas distintivas de P. digueti es una mayor talla en los machos, lígulas largas y puntiagudas (órganos intromitentes) (Voight 1990 Con un desarrollo embrionario con presencia de huevos individuales tipo capsulas (0.9 a 1.0 cm de largo), los cuales por lo regular están adheridos al interior de conchas de bivalvos, gasterópodos u otro objeto que brinde un refugio adecuado (botellas de vidrio, latas de metal, etc.) para la incubación, eclosionando en forma de paralarvas (Mangold 1987, FAO 1995, García-Flores 2017, Diarte-Plata et al. 2019). P. digueti es una especie bentónica que habita en bancos arenosos, fangosos y rocosos de las zonas de mareas (FAO 1995), un ciclo de vida corto, una elevada tasa de crecimiento, un desarrollo directo y se adapta fácilmente a vivir en cautiverio (DeRusha et al., 1987, Jereb et al., 2016). En el Pacifico mexicano, los estudios son escasos sobre biología de la especie, y ninguno de tecnología de captura, industrialización y comercialización por lo que su pesquería no se ha desarrollado plenamente (López-Uriarte et al. 2000). La falta de estos elementos científicos básicos, ha retrasado el establecimiento de medidas de manejo para regular su aprovechamiento de manera sostenida, por lo que en el presente estudio aporta información sobre algunos aspectos básicos bio-ecológicos del comportamiento del pulpo pigmeo mexicano P. digueti en la bahía Ohuira, Ahome, Sinaloa, México.  

METODOLOGÍA

Para la captura de la muestra se realizaron inmersiones por buceo con snorkel (30min) en las islas patos, bledos y bleditos considerando la parte anterior y posterior de las mismas (se tomaron los parámetros fisicoquímicos como temperatura, salinidad y profundidad). Se conservaron sus organismos y sus refugios de manera individual en bolsas de plásticos. En el laboratorio de inmunología las muestras se separaron (pulpos) de cada uno de los refugios y se identificó el tipo de refugio. Posteriormente se separaron los epibiontes de cada uno de ellos, para su identificación taxonómica utilizando la clave de la FAO (1995), Ortiz -Arellano (2005). Se realizaron biometrías e identificación del sexo. Se evaluaron las diferencias mediante ji cuadrada para epibiontes y elección de refugios.

CONCLUSIONES

Los resultados más sobresalientes fueron: En la isla bleditos se obtuvieron mayor frecuencia de machos. En la parte posterior el resultado más alto fue en la isla bleditos. El refugio más elegido de P. digueti fue las valvas de la almeja levicardium elatum. Epibiontes con mayor abundancia fueron los poliquetos.

Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

EVALUACIóN DE LA PRESENCIA DE AUXINAS Y GIBERELINAS EN LA SEMILLA DE PERSEA AMERICANA (AGUACATE)

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EVALUACIóN DE LA PRESENCIA DE AUXINAS Y GIBERELINAS EN LA SEMILLA DE PERSEA AMERICANA (AGUACATE)

Aniceto Teofilo Carmela, Universidad Autónoma de Guerrero. Galeana Hernández Jaeli, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

México cuenta con una gran biodiversidad vegetal y cultural, lo que permite el aprovechamiento de diversas especies que crecen en los campos de cultivo y jardines domésticos (Gentry et al., 2010).  El jitomate (Lycopersicon esculentum) es una de las hortalizas más consumidas en el mundo y México es el principal proveedor a nivel mundial (SAGARPA, 2016).  Por lo tanto, se buscan alternativas que permitan garantizar la germinación de las semillas, así como la obtención de plantas más vigorosas en el menor tiempo posible. Una de estas alternativas es la utilización de fitohormonas que son compuestos orgánicos que actúan en concentraciones muy bajas y afectan la función de diferentes tipos celulares, tejidos u órganos (Garay-Arroyo et al., 2010). Entre las principales fitohormonas se encuentran las giberelinas y auxinas, las primeras tienen propiedades estimuladoras de la germinación, la elongación celular y la emergencia de la radícula a través del endospermo (Fraile-Robayo et al., 2012), mientras que las segundas participan en todos los procesos de desarrollo de las plantas y, a nivel celular, intervienen en los procesos de división, elongación y diferenciación celular (Garay-Arroyo et al., 2010).   Una manera de obtener las fitohormonas es utilizando los subproductos o desechos que se generan de los productos vegetales, pero para ello, es necesario conocer cuáles son sus cualidades. Por tal motivo este trabajo propuso evaluar la presencia de auxinas y giberelinas en la semilla de Persea americana (aguacate) utilizando bioensayos de Lycopersicon esculentum. 

METODOLOGÍA

Se utilizó como materia prima la semilla de aguacate seco, para posteriormente realizar el proceso de macerado, el cual consistió en usar 1 g de la semilla en 8 ml de metanol y 2 ml de ácido acético, para un volumen final de 10 ml. Transcurridas 24 h se filtró el extracto obtenido. A continuación, éste se sometió a un ensayo de cromatografía en capa fina (CCF), y para ello se preparó la cámara cromatográfica utilizando como fase móvil cloroformo-metanol en proporción 8:2, dejándola saturar durante 1 h. Para la fase estacionaria se utilizó una placa de sílice, en la cual se aplicaron los estándares comerciales: 1. Ácido Indolacético (auxinas), 2. Ácido Giberélico (giberelinas), 3. Zeatina (citocininas); y el extracto de aguacate. Una vez corrida la placa, ésta se revelo con ayuda de una lámpara UV a fin de identificar bandas con frentes de referencia similares a los Rf´s de los estándares comerciales. Una vez identificados compuestos de interés se procedió a nuevamente realizar el mismo proceso para la cromatografía en capa fina, pero ahora en placas de vidrio de 20x20 cm.  Nuevamente se aplicaron los estándares comerciales y el extracto de la semilla del aguacate, de los cuales se aplicaron entre 5 µl a 10 µl para los estándares y 200 µl del extracto. Transcurrido el tiempo la placa se retiró de la cámara y se revelo con la lámpara UV. Posterior a esto, se marcaron los compuestos observados en la placa para después rasparlos y colocarlos en microtubos, donde se le añadió 1 ml de DMSO al 1%. Para evaluar la actividad de las posibles giberelinas presentes en el extracto, se realizaron ensayos de germinación con semillas de Lycopersicon esculentum, a las cuales se les sometió a tratamiento tanto con las fracciones como con el ácido giberélico comercial. Como control las semillas se incubaron solo en presencia de agua. Para comprobar la actividad de las posibles auxinas, se realizaron ensayos de fototropismo, utilizando la fracción con el frente de referencia correspondiente. Para estos ensayos se germinaron semillas de jitomate, y a las plántulas de aproximadamente 2 semanas se les corto el ápice, el cual contiene auxinas que permiten que la plántula se oriente hacia el sol. Las plántulas se asperjaron con una solución que contenía auxinas a fin de corroborar si las plántulas recuperaban su capacidad para orientarse hacia la luz solar. Como control, las plántulas se asperjaron solo con agua.

CONCLUSIONES

Se determinó la presencia de giberelinas y auxinas en la semilla de aguacate, corroborándolo en las semillas de jitomate, donde los tratamientos evaluados en base a diferentes concentraciones de giberelinas, se obtuvo un mejor resultado en el extracto de 200 µl con un porcentaje de 80% de germinación. A través del bioensayo de auxinas, se logró observar la recuperación del efecto de fototropismo en las plantas de jitomate sin ápice al ser asperjadas con la solución que contenía las posibles auxinas, confirmando así la presencia de las mismas en la semilla del aguacate.

Asesor: Dr. Rodrigo Macip Ríos, Universidad Nacional Autónoma de México

ESTRUCTURA POBLACIONAL Y OBSERVACIONES ECOLóGICAS DE LA TORTUGA MEXICANA (KINOSTERNON INTEGRUM) EN JALISCO Y MICHOACAN

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ESTRUCTURA POBLACIONAL Y OBSERVACIONES ECOLóGICAS DE LA TORTUGA MEXICANA (KINOSTERNON INTEGRUM) EN JALISCO Y MICHOACAN

Antelo Barbosa Fernando Daniel, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Rodrigo Macip Ríos, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La tortuga mexicana (Kinosternon integrum) hoy en día es la especie con el mayor rango de distribución en el país. Esto según los expertos es gracias a su plasticidad genética y otros factores que le hacen responder de manera positiva a los requerimientos del clima. Debido a ésta razón, es una especie que se puede considerar como invasora y desplazadora de las especies nativas, ya que en los últimos años se han realizado avistamientos en cuerpos de agua en donde originalmemte no se tenían registros.  Es importante conocer el estado actual de las poblaciones en cuestión, para porsteriormente hacer investigaciones de como es que está influyendo en el comportamiento ecológico de las especies nativas.

METODOLOGÍA

Las tortugas se capturaron  por medio de trampeo, el procedimiento consistía en salir a explorar el lugar para encontrar el sitio de colecta adecuado, una vez localizado, a las trampas se les colocaba carnada para posteriormente acomodarlas de manera estratégica para que los organismos que entraran  no se quedaran sin oxígeno. A los ejemplares recolectados se les tomaron biometrías tales como: largo de caparazón, ancho de caparazón, alto, largo de plastrón, ancho de plastrón y peso. Ademas de que cada organismo fué marcado con un número específico en el caparazón para posibles estudios posteriores de captura y recaptura. 

CONCLUSIONES

En los sitios de muestreo que se trabajó, los cuales cuentan con su propia especie nativa, se obtuvo una proporción mayormente abrumadora de la especie colonizadora. Al hacer los análisis ecológicos se concluyó que el estado actual de la especie  catalogada como "invasora" son característicos de poblaciones totalmente estables, con la mayor parte de los organismos capturados entrando en la categoría de adultos y de los cuales más de la mitad fueron sexados como hembras. Lo cual también nos habla de una proporción sexual favorable para el desarrollo de la población.

Asesor: Dr. José Luis Ortíz Galindo, Instituto Politécnico Nacional

MANTENIMIENTO Y ALIMENTACIóN DE PECES REPRODUCTORES DE VERDILLO PARALABRAX NEBULIFER (PERCIFORMES: SERRANIDAE) CON FINES DE EXPERIMENTACIóN

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MANTENIMIENTO Y ALIMENTACIóN DE PECES REPRODUCTORES DE VERDILLO PARALABRAX NEBULIFER (PERCIFORMES: SERRANIDAE) CON FINES DE EXPERIMENTACIóN

Aparicio Moreno Reynaldo, Universidad Autónoma de Guerrero. Guzmán Graff Esthela Ana Luci­a, Instituto Politécnico Nacional. Asesor: Dr. José Luis Ortíz Galindo, Instituto Politécnico Nacional

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El verdillo Paralabrax nebulifer es un pez que se considera el recurso escama más importante en la costa del Pacífico de Baja California Sur. Hasta el momento, en el CICIMAR-IPN ha sido posible completar su ciclo biológico y se ha criado exitosamente bajo condiciones controladas hasta el periodo juvenil. Sin embargo, aún no se ha formulado un alimento inerte que permita reemplazar al alimento fresco con el cual se pueda controlar su reproducción bajo dichas condiciones. Por lo cual, el objetivo de la presente estancia fue aprender el mantenimiento y las condiciones de alimentación de un lote de reproductores de verdillo Paralabrax nebulifer con alimento fresco e inerte, con el fin de lograr el desove voluntario.

METODOLOGÍA

A partir de peces capturados en el campo y acondicionados previamente en el laboratorio, se distribuyeron los peces en un sistema de circulación cerrada de inducción al desove (SCID) en una proporción sexual (3H: 2M) por tanque. El sistema consta de seis tanques de fibra de vidrio con capacidad de 1,100 l, una bomba centrífuga, un filtro mecánico, un filtro de luz ultravioleta, un filtro biológico, un espumador de albúmina y una sopladora para la aireación. El oxígeno y la temperatura se determinaron mediante un oxímetro marca YSI modelo Pro 20, mientras que el amonio y los nitritos se cuantificaron con ayuda de un espectrofotómetro SPEC-2000. Para inducir la maduración gonádica, se mantuvieron condiciones de fotoperiodo de 13:11 horas luz: oscuridad, una temperatura de 21 a 23 °C y se alimentaron a los reproductores con trozos de juveniles de mojarras (Eucinostomus spp.), calamar (Doryteuthis opalescens) y alimento inerte. Los juveniles de mojarra de diversas especies del género Eucinostomus, fueron capturados en las playas adyacentes al CICIMAR y se les aplicó un baño con agua dulce durante 15-30 minutos para eliminar ectoparásitos; el calamar fue comprado congelado en una casa comercial y el alimento inerte utilizado, fue formulado con base en la información obtenida de los reproductores de verdillo en medio silvestre (análisis bromatológicos, ácidos grasos altamente insaturados y carotenoides) y complementada con los requerimientos nutricionales de su especie filogenéticamente más cercana (Paralabrax maculatofasciatus). Los peces fueron alimentados a saciedad (tres tanques con alimento inerte y tres con alimento fresco). Adicionalmente, se probaron tres esquemas de alimentación en los peces con alimento fresco (alimentación diaria de mojarra alternando entre días con calamar; alimentación diaria con mojarra y calamar; alimentación cada tercer día con mojarra alternando con calamar) y dos con los de alimento inerte (todos los días y cada tercer día).

CONCLUSIONES

Las condiciones experimentales obtenidas fueron las siguientes: temperatura (21.6 ± 0.1 °C); oxígeno (6.9 ± 0.2 mg/l); amonio (0.8 ± 0.04 mg/l); nitritos (1.3 ± 0.2 mg/l).  Los peces del tratamiento alimentario fresco consumieron en promedio 197 ± 47g y los de alimento inerte 46 ± 3.7g, lo cual constituyó el 4% y el 1% del peso corporal de cada ejemplar, respectivamente. El tercer esquema de alimentación del alimento fresco y el segundo del alimento inerte, promediaron los mayores consumos del experimento (221.9 ± 28g; 71.1 ± 5.8g, respectivamente), así como el desove voluntario de los peces de ambos tratamientos alimentarios. Los resultados del presente estudio podrían confirmar que los ejemplares de verdillo, requieren una frecuencia de alimentación de cada tercer día para fines reproductivos. El experimento donde se probará el efecto de los tratamientos alimentarios (alimento fresco e inerte) sobre el desempeño reproductivo, actualmente se encuentra en curso, ya que las condiciones controladas de fotoperiodo y temperatura, así como el esquema de alimentación que se establecieron, favorecieron el inicio de los desoves voluntarios, aunque se requiere que aumente la frecuencia de los desoves para poder evaluar la calidad.

Asesor: Dr. Oscar Luis Briones Villarreal, Instituto de Ecología (CONACYT)

DEMOGRAFíA Y EFECTO DE LA DESECACIóN EN HELECHOS DEL BOSQUE NUBLADO.

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DEMOGRAFíA Y EFECTO DE LA DESECACIóN EN HELECHOS DEL BOSQUE NUBLADO.

Aparicio Rivera Ruben Antonio, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Asesor: Dr. Oscar Luis Briones Villarreal, Instituto de Ecología (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los helechos o pteridofitas, son un grupo de plantas vasculares que no producen semilla, siendo esta una estrategia reproductiva de divergencia evolutiva temprana. El registro fósil data su origen en el devónico, sin embargo, se diversificaron y dominaron a finales del cretácico, es decir, son plantas que convivieron con los dinosaurios. En México, se han reportado 1014 especies de las cuales 188 son endémicas. Se presentan con mayor abundancia en los estados del sureste donde el clima húmedo favorece su proliferación, sobre todo en Chiapas, Oaxaca y Veracruz. Son particularmente más diversos en el Bosque Nublado o Bosque Mesófilo, el cual, a pesar de representar sólo el 1% del territorio nacional, contiene más del 60% de la diversidad vegetal del país ya que en él las plantas encuentran una gran diversidad de formas de crecimiento. Así pues, resulta necesario comprender cómo responden fisiológicamente ante diferentes condiciones que se pueden presentar en su hábitat, pero también es importante analizar la dinámica demográfica de distintas especies de helechos de cada tipo de forma de crecimiento (epífita, arborescente y arbustiva) en Bosque Nublado, ya que el cambio climático amenaza a la diversidad pteridológica.

METODOLOGÍA

En el laboratorio de Ecofisiología Vegetal se han realizado varios censos anuales a distintas especies de helechos. El plan de trabajo contempló mi incorporación a los proyectos que se estaban -y están- desarrollando, por ello, se brindó apoyo para la selección y marcaje de Thelypteris rudis en "El Riscal", una zona conservada de bosque mesófilo o bosque nublado en el municipio de Coatepec. La zona de estudio fue dividida en distintos polígonos y transectos con anterioridad, dentro de los cuales se censaron 353 helechos de dicha especie los cuales fueron marcados con cinta para darles seguimiento en los siguientes años. Debido a que los individuos serán clasificados en categorías según su tamaño, se registraron las siguientes variables morfométricas: longitud del tronco, número de frondas, número de frondas fértiles y longitud de la fronda más grande. La fecundidad de los helechos fue estimada con el número de esporas producidas por longitud de la fronda para tener así una aproximación práctica para el trabajo en campo. Para ello, se muestrearon 100 helechos en la zona antes mencionada y se registró el número de frondas tanto totales como fértiles, así como la longitud de la fronda más grande. Si el individuo tenía soros, se contaron las pínulas de la fronda fértil más larga y se colectó una pínula intermedia de un tamaño promedio que no tuviera daños por herbivoría. Se tomaron fotografías de las pínulas con soros acompañadas de una referencia métrica para su posterior análisis mediante el software ImageJ para obtener así la longitud y el ancho de la pínula; además, se contaron los soros totales en cada pínula. Posteriormente, se cortaron 15 soros -acompañados con tejido foliar adyacente- aleatorios de las mismas pínulas teniendo precaución de no romper el soro o mezclar esporangios. Se tomaron fotografías de los soros utilizando el microscopio multifocal para contar el número de esporangios por soro y así finalmente lograr la estimación de la fecundidad, sin embargo, a día de hoy no se ha realizado el análisis estadístico necesario para correlacionar el largo de la fronda con el número de pínulas que tiene y esto a su vez con el número de esporas con las que cuenta. El efecto de la desecación en helechos no pudo realizarse debido a desfase con el calendario de jornadas de campo, por lo cual se optó por apoyar otro proyecto de investigación que tiene como objetivo registrar la actividad fotosintética de un cacto columnar del bosque seco tropical de Veracruz. Este cacto fue sometido con anterioridad a tres condiciones de luz. Debido a que los cactos columnares realizan fotosíntesis CAM (Metabolismo Ácido de las Crasuláceas), su actividad fotosintética puede ser estimada por medio de la determinación de ácidos orgánicos, para lo cual se estarán realizando titulaciones hasta el fin de la estancia.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano, se logró adquirir conocimientos tanto teóricos como prácticos, no sólo en cuanto a lo que se menciona en este resumen, sino de muchos más aspectos cinetíficos como lo son las técnicas de germinación de esporas, las condiciones óptimas para el establecimiento del gametofito, la diversidad pteridológica de Veracruz, sistemas de georreferenciación, técnicas para análisis de ecofisiología vegetal y, sobre todo, he podido experimentar lo que es el trabajo de investigación en el área que me gusta y con el grupo de organismos que más me apasiona. El trabajo en el laboratorio de Ecofisiología Vegetal me ha dejado aun más encantado con la Biología y me ha abierto la perspectiva para llevar a cabo investigaciones en mi Universidad. Hasta el día de hoy, no se han analizado estadísticaemente los resultados del estudio demográfico y de las titulaciones, ya que son trabajos extensos que exceden la capacidad de la estancia.

Asesor: Dr. Claudia Araceli Contreras Celedón, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

ESTUDIO DE LAS REACCIONES DE IMINACIÓN UTILIZANDO ALDEHIDOS Y AMINAS AROMÁTICAS.

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ESTUDIO DE LAS REACCIONES DE IMINACIÓN UTILIZANDO ALDEHIDOS Y AMINAS AROMÁTICAS.

Aragon Chica Maria Paulina, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Morales Herrejon Yuliza Guadalupe, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Claudia Araceli Contreras Celedón, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Durante el periodo de investigación compredido del 17 de junio hasta la fecha, se llevó a cabo el estudio de las reacciones de iminación utilizando aldehídos y aminas arómaticas así como la optimización de las condiciones de reacción

METODOLOGÍA

VD-01-RX En esta reacción se colocó benzaldehído y anilina como reactivos, utilizando como disolventes una mezcla de ChCl y p-tSOH. Se dejó  la reacción durante 16 horas, no se observó  producto alguno al realizar la placa cromatografía. VD-05-RX   Para está reacción se colocó igualmente benzaldehído y anilina como reactivos, cambiando el disolvente por ChCl y urea, se dejó reaccionar por 20hrs. Al realizar la extracción y la placa cromatografía, se pudo observar corrimiento tanto de las materias  primas como de la mezcla de estas. VD-07-RX   Se procedió a realizar la misma reacción cambiando únicamente la amina, en esta ocasión utilizando P. toluidina. Después  de 7 horas en reacción se realizó la extracción al igual que una placa cromatografía, observando corrimiento tanto de las materias primas como de producto de la reacción. VD-10-RX Para está reacción  utilizamos como la  amina m- toluidina y como aldehído al benzaldehído, el disolvente utilizado fue el ChCl y urea. Después de 2hrs de reacción no se observó producto en las mismas condiciones de reacción. VD-14-RX En esta reacción se utilizó la 2- bromoanilina y el benzaldehído, como disolvente se utilizó ChCl y urea nuevamente. Al cabo de 3 horas se realizó la extracción y realización de la placa cromatografía sin mostrar producto alguno. VD-17-RX Se colocó el mismo aldehído  y el mismo disolvente cambiando únicamente la amina, se utilizó el cloro anilina, mostrando producto a las 2hrs de reacción. VD- 20- RX  En esta reacción se  cambió la amina por 3-aminofenol y benzaldehído, se trabajó con el mismo disolvente ChCly urea. Se continuó la reacción sin producto aparente.      

CONCLUSIONES

Durante el verano delfín se llevó a cabo la optimización de las condiciones de reacción para la formación de iminas, en cada una de las reacciones que llevamos acabo, en el caso de la primera reacción se utilizó como solvente una mezcla de ChCl y p-tSOH, teniendo como resultado, sin obtención de producto aparentemente. La amina resulta ser insoluble en el solvente. Parala segunda reacción setrabajó con las mismas materias primas cambiando el solvente por ChCl y urea, en las reacciones posteriores se trabajó con el mismo solvente cambiando únicamente la amina, utilizando p-toluidina y m-toluidina , en donde para la p-toluidina después de 7 horas de reacción se observó producto de la reación, en caso contrario la m-toluidina no se observó producto en las mismas condiciones.

Asesor: Dr. Martha Legorreta Herrera, Universidad Nacional Autónoma de México

EFECTO DE LA TESTOSTERONA SOBRE LA ACTIVIDAD Y EXPRESIóN GéNICA DE GPX EN HíGADO Y CEREBRO DE RATONES CBA/CA INFECTADOS CON PLASMODIUM BERGHEI ANKA.

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EFECTO DE LA TESTOSTERONA SOBRE LA ACTIVIDAD Y EXPRESIóN GéNICA DE GPX EN HíGADO Y CEREBRO DE RATONES CBA/CA INFECTADOS CON PLASMODIUM BERGHEI ANKA.

Arce Valdez Dayan Argenis, Universidad Autónoma de Occidente. Asesor: Dr. Martha Legorreta Herrera, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La malaria es una enfermedad ocasionada por el parásito Plasmodium sp. Aunque la incidencia de la enfermedad es igual en los hombres que en las mujeres, los varones cursan con infecciones más severas y tienen mayor mortalidad que las mujeres, es decir, se presenta dimorfismo sexual. Los esteroides sexuales además de afectar al sistema inmune, también alteran la expresión de los genes y las conductas que influencian la susceptibilidad y la resistencia a la infección, sin embargo; los mecanismos precisos que generan esas diferencias entre los esteroides sexuales se desconocen. La glutatión peroxidasa (GPx) es una de las enzimas que participan en las transformaciones de especies reactivas del oxígeno, cataliza la reducción del peróxido de hidrógeno a agua, para lo cual utiliza como agente reductor al glutatión reducido. Esta enzima desempeña un importante papel en la defensa antioxidante por su localización en todos los órganos y tejidos, como parte del sistema antioxidante del glutatión, por lo que está involucrada en la fisiopatología de varias enfermedades, como la malaria.Dado que no se ha descrito el efecto de la testosterona sobre la actividad de esta enzima en malaria. Por lo anterior, en este trabajo se analizó el efecto de administrar testosterona a ratones CBA/Ca machos que posteriormente se infectaron con P. berghei ANKA.

METODOLOGÍA

Se utilizaron ratones de la cepa CBA /Ca de 12 semanas de edad a los cuales se administró testosterona o vehículo (aceite de almendras dulces) durante 3 semanas. Posterior al último día de tratamiento se infectaron con 1x103 glóbulos rojos parasitados con Plasmodium berghei ANKA. Durante 8 días se siguió la progresión de la parasitemía por medio de frotis sanguíneo en capa fina teñido con Giemsa. Al octavo día post-infección se sacrificaron a los animales y se les extrajeron los tejidos de hígado y cerebro de donde se realizaron dos alícuotas para la evaluación de la actividad, así como, la expresión génica de la enzima GPx. Para evaluar la actividad específica de GPx se utilizó el estuche RANSEL y se relacionó con la cantidad de proteína presente en la muestra. Por otra parte, para evaluar la expresión génica, se extrajo el ARN mensajero, se cuantificó espectrofotométricamente, se retrotranscribió para generar ADN complementario al ARN mensajero ese ADN complementario se utilizará para amplificar el gene de GPX por medio de PCR en tiempo real.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se adquirieron conocimientos teóricos sobre malaria y se trabajaron experimentalmente las técnicas de extracción de ARN y se han retrotranscrito todas las muestras experimentales, por lo que resta realizar el ensayo de PCR en tiempo real. Actualmente, realizo el proceso de calibración de la técnica de PCR en tiempo real para el análisis de la expresión génica de GPx. Los resultados que espero obtener es demostrar si la testosterona modifica la expresión de la enzima GPx.

Asesor: Dr. Laura Beatriz Rivera Rodríguez, Universidad Autónoma de Sinaloa

LAS ESPECIES DE FLORA Y FAUNA EN EL MUNICIPIO DE CONCORDIA, SINALOA, COMO UN RECURSO NATURAL PARA APROVECHAR POR TURISMO SUSTENTABLE.

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LAS ESPECIES DE FLORA Y FAUNA EN EL MUNICIPIO DE CONCORDIA, SINALOA, COMO UN RECURSO NATURAL PARA APROVECHAR POR TURISMO SUSTENTABLE.

Arevalo Miranda Luis Gerardo, Universidad de Colima. Asesor: Dr. Laura Beatriz Rivera Rodríguez, Universidad Autónoma de Sinaloa

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La falta de educación ambiental en la sociedad actual, es un tema al que no le damos la suficiente importancia, nuestra falta de interés con respecto a nuestro ambiente, nos ha llevado a un punto en el cual, es momento de reaccionar y tomar un poco de conciencia de todo lo que malo que está pasando con nuestro planeta y el severo daño que estamos causando por no tener educación ambiental, valores y la falta de conocimiento de los beneficios y servicios ambientales que las especies de flora y fauna nos brindan. Debido a su biodiversidad y afluencia turística, Concordia es una localidad de importancia, en la que es necesario crear conciencia tanto de los pobladores como de sus visitantes sobre los beneficios de las especies que predominan y realizar así un turismo sustentable, que lleve un equilibrio entre la sociedad de ese municipio y las especies de flora y fauna. Nosotros como personas estamos contribuyendo a la fragmentación del hábitat de las especies, con el cambio de uso de suelo destinando grandes áreas para actividades económicas como la agricultura, ganaderías y la minería, haciendo que las especies emigren a otra zona afectando a los depredadores que se alimentan de las especies predominantes de la zona.

METODOLOGÍA

Se viajó al municipio de Concordia, Sinaloa para recibir unas pláticas e información impartidas por el B.P. Felipe Piña, que además tiene de oficio la alfarería y que debido a su conocimiento sobre las especies de flora y fauna silvestre y su importancia ha juntado sus dos actividades en donde realiza piezas con ilustraciones de especies de la localidad para difundir la importancia de las mismas. Después de concluir con las pláticas, se visitó el museo del municipio de Concordia para saber sobre su historia y apreciar todas las reliquias que se encontraron en la entidad. Se revisó bibliografía de investigaciones realizadas sobre las especies de flora y fauna silvestre en Concordia para obtener la información correspondiente que ayudará en la realización de las fichas técnicas y un cartel con el fin de brindar el conocimiento necesario a los pobladores y visitantes sobre los beneficios y servicios ambientales. Se propuso realizar unas fichas científicas que contenga la información necesaria sobre los bienes y servicios ambientales que las especies de flora y fauna del municipio de Concordia, Sinaloa brindan a los pobladores, con el fin de dar a conocer la importancia de las especies que habitan en la zona, fortalecer y fomentar la educación ambiental tanto en los pobladores y a los visitantes del municipio de Concordia, Sinaloa y que el museo cuente con el material y la información correspondiente a las especies para completar el servicio del recorrido por el museo.   RESULTADOS Se elaboraron, 12 fichas técnicas de especies de flora y fauna silvestre presente en la zona. Adicionalmente se elaboró un cartel de la importancia del turismo sustentable y los servicios ambientales que proveen mismo que se donará al Museo de Concordia, junto con fotografías de flora y fauna del Municipio Las especies que se trabajaron en las fichas técnicas fueron 12 de las cuales 6 son aves, la Chara pinta (Cyanocorax dickeyi), la Chara sinaloense (Cyanocorax beecheii), el Halcón gris (Buteo nitidus), la Urraca copetona (Calocitta colliei), el Cacique mexicano (Cassiculus melanicterus) y el Carpintero Pico Plateado (Campephilus guatemalensis) y 6 felinos. Jaguar (Panthera onca), Gato montés (Lynx Rufus), Tigrillo (Leopardus wiedii), Puma (Puma concolor), Ocelote (Leopaldus pardalis nelsoni) y el  Jaguarundi  (Herpailurus yagouaroundi) En el caso de los felinos, así como el Halcón gris, se trabajaron estas especies por su importancia ya que sirven como predador tope que mantienen controladas poblaciones de especies que de aumentar su número podría afectar el ecosistema o ser nocivas. El resto de las aves, son dispersoras de semillas y también un atractivo turístico. Algunas de estas especies se encuentran protegidas por la NOM-059-SEMARNAT-2010, como el jaguarundi (amenazada), el tigrillo y ocelote (peligro de extinción), el carpintero pico plateado (Sujeta a protección especial). Tanto la visita al museo como la compra de artesanía con imágenes e información de los ecosistemas y las especies ayudará a generar conciencia en los pobladores y los visitantes que debemos de cuidar y mantener a las especies, porque se encuentran en un estado de conservación vulnerable.

CONCLUSIONES

Es un hecho que a sectores productivos y grupos de personas puede importarles en mayor o menor medida el estado del ambiente. Lo cierto es que son varios los motivos por los cuales debemos aceptar que es relevante la conservación de la biodiversidad y los ecosistemas ya que nos brindan servicios esenciales para el bienestar humano. Es muy importante que exista una buena difusión de este material en aspectos de gestión ambiental, así como la práctica de turismo sustentable para un mejor aprovechamiento de los recursos naturales.

Asesor: Dr. Raúl Gerarado Paredes Guerrero, Universidad Nacional Autónoma de México

EFECTOS DE LA FORMACIóN DEL VíNCULO DE PAREJA Y CONDUCTAS SOCIO-SEXUALES SOBRE SINAPTOGéNESIS EN EL TOPILLO DE LA PRADERA.

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EFECTOS DE LA FORMACIóN DEL VíNCULO DE PAREJA Y CONDUCTAS SOCIO-SEXUALES SOBRE SINAPTOGéNESIS EN EL TOPILLO DE LA PRADERA.

Arias Díaz María Fernanda, Universidad de Guanajuato. Asesor: Dr. Raúl Gerarado Paredes Guerrero, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El topillo de la pradera (Microtus ochrogaster) se caracteriza por ser una especie monógama y formar vínculos de pareja, los cuales se establecen cuando los animales copulan al menos 6 horas. Debido a que los mecanismos de plasticidad neuronal de esta conducta no han sido completamente establecidos el objetivo del proyecto es estudiar si la formación del vínculo de pareja y de la exposición social a un conespecífico del sexo opuesto, aumentan la sinaptogénesis en el núcleo de accumbens en animales adultos.

METODOLOGÍA

Se tendrán 3 grupos de estudio 1.- Control: Animales alojados individualmente sin estimulación socio-sexual 2.- Exposición social: Machos y hembras que sólo podrán verse, olfatearse y escucharse pero que no copularan. 3.- Cohabitación social con cópula: Topillos que copularan libremente por 6 horas para formar vínculos de pareja - Prueba conductual (6 horas) -Sacrificio a las 48 horas mediante sobredosis de pentobarbital sódico -Perfusión intracardiaca -Procesamiento de los cerebros en la tinción de Golgi -Ensayos de Inmunofluorescencia para sinaptofisina y PSD-95 -Obtención de las imágenes para la observación de cambios en espinas dendríticas y en la expresión de proteínas sinápticas mencionadas en el área neuronal de interés.

CONCLUSIONES

  Con los resultados que se obtengan después de terminar el proyecto se determinará si la sinaptogénesis es uno de los mecanismos neurobiológicos involucrados en el establecimiento de vínculos de pareja inducidos por la cópula y en la exposición social a un conespecífico del sexo opuesto.

Asesor: Dr. Alonso Alexis López Zavala, Universidad de Sonora

INHIBICIóN DE LA HEMOLISINA DEPENDIENTE DE LECITINA DE VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS PATóGENO PARA CAMARóN

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INHIBICIóN DE LA HEMOLISINA DEPENDIENTE DE LECITINA DE VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS PATóGENO PARA CAMARóN

Arias Rivera Ana Luisa, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Alonso Alexis López Zavala, Universidad de Sonora

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El cultivo de camarón es una de las industrias más importantes en México ya que genera empleos en zonas no productivas para la agricultura. La mayoría de las granjas camaronícolas se encuentra en los estados de Sonora y Sinaloa. Tomando en cuenta la producción desde 2005 hasta el 2015, según datos de CONAPESCA; tan solo en Sonora se obtuvo un promedio de producción de 52,485 toneladas de camarón de cultivo. Se sabe que existen enfermedades que afectan al camarón produciendo una muerte masiva de estos, con lo que llega a afectar a los trabajadores con una pérdida económica además de a los productores de camarón. En el periodo desde 2010-2012 en Sonora, hubo una disminución de hasta el 50% de la producción por infecciones virales y otras enfermedades de origen bacteriano. La vibriosis es uno de los problemas más persistentes que se presentan en las granjas de camarón, causado por diversas especies de vibrio como: V. alginolyticus , V. harveyi, V. parahaemolyticus, entre otros. Esta es una enfermedad sistémica del organismo que es caracterizado por septicemia, necrosis en el órgano digestivo y lesiones de cutícula, entre otras. Vibrio parahaemolyticus (Vp) es encontrado naturalmente en ambientes acuáticos incluidos granjas de camarones y este tiene factores de virulencia severas como hemolisinas. La hemolisina dependiente de lecitina encontrada en Vp tiene actividad hemolítica y actividad de fosfolipasa del tipo A y similitud de fosfolipasa B que hidroliza la fosfatidilcolina a lisofosfatidilcolina. El cultivo de camarón es una de las industrias más importantes en México ya que genera empleos en zonas no productivas para la agricultura. La mayoría de las granjas camaronícolas se encuentra en los estados de Sonora y Sinaloa. Tomando en cuenta la producción desde 2005 hasta el 2015, según datos de CONAPESCA; tan solo en Sonora se obtuvo un promedio de producción de 52,485 toneladas de camarón de cultivo. Se sabe que existen enfermedades que afectan al camarón produciendo una muerte masiva de estos, con lo que llega a afectar a los trabajadores con una pérdida económica además de a los productores de camarón. En el periodo desde 2010-2012 en Sonora, hubo una disminución de hasta el 50% de la producción por infecciones virales y otras enfermedades de origen bacteriano. La vibriosis es uno de los problemas más persistentes que se presentan en las granjas de camarón, causado por diversas especies de vibrio como: V. alginolyticus , V. harveyi, V. parahaemolyticus, entre otros. Esta es una enfermedad sistémica del organismo que es caracterizado por septicemia, necrosis en el órgano digestivo y lesiones de cutícula, entre otras. Vibrio parahaemolyticus (Vp) es encontrado naturalmente en ambientes acuáticos incluidos granjas de camarones y este tiene factores de virulencia severas como hemolisinas. La hemolisina dependiente de lecitina encontrada en Vp tiene actividad hemolítica y actividad de fosfolipasa del tipo A y similitud de fosfolipasa B que hidroliza la fosfatidilcolina a lisofosfatidilcolina.

METODOLOGÍA

Se realizó la  transformación de la bacteria de con E. coli rosetta 2 por el método de shock térmico, de esta manera se añade el plásmido que contiene el gen sintético que codifica para la TLH, utilizando IPTG como inductor. La TLH fue obtenida como cuerpos de inclusión, los cuales fueron lavados y solubilizados en urea 8M. Utilizando cromatografía de afinidad a metales (IMAC) se purificó para después corroborar que se obtuviera la proteína del tamaño requerido 47.5 kDa aproximadamente, se realizó una electroforesis SDS PAGE 12%. Se replegó in vitro mediante diálisis, con lavados desde urea 8M hasta urea 0M. Realizando ensayos espectrofotométricos usando para-nitrofenil laurato como sustrato se confirmó la actividad enzimática. Los inhibidores utilizados fueron Mn2+, Cu2+, PMSF y βME.

CONCLUSIONES

Los resultados indicaron que existe inhibición de la hemolisina dependiente de lecitina utilizando Cu2+ y PMSF. Cu2+ y PMSF en concentración de 1mM, la actividad enzimática es menor, con una inhibición de 93.74% y 45.6% respectivamente. En el caso de βME y Mn2+ no se observó una disminución importante en la actividad enzimática de la TLH. Sera necesario realizar más ensayos para corroborar las concentraciones de la inhibición de la TLH.

Asesor: Dr. Hector Palencia R, University of Nebraska (Estados Unidos de America)

SíNTESIS DE NUEVOS COMPUESTOS ANTIBACTERIALES EN LA LUCHA CONTRA LA RESISTENCIA HACIA LOS ANTIBIóTICOS

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SíNTESIS DE NUEVOS COMPUESTOS ANTIBACTERIALES EN LA LUCHA CONTRA LA RESISTENCIA HACIA LOS ANTIBIóTICOS

Arias Rodriguez Emerson Francisco, Universidad Autónoma de Nayarit. Asesor: Dr. Hector Palencia R, University of Nebraska (Estados Unidos de America)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las bacterias tienen la facultad de mutar naturalmente, adquiriendo así, características diferentes para adaptarse a su entorno; sin embargo, cuando estas mutaciones tienen un efecto que anula la función de un antibiótico, se le considera como una bacteria resistente a los antibióticos. Actualmente el mal uso de antibióticos tanto en su prescripción como administración, ha contribuido a un rápido desarrollo de bacterias resistentes a los antibióticos, mismo que supera al de los tratamientos, lo cual representa un problema de salud pública puesto que las bacterias mueren con mayor dificultad, desencadenando diversos problemas entre los que destacan infecciones prolongadas de compleja erradicación, un incremento en la reproducción de estos microorganismos y, por lo tanto, un alza en los contagios. Se han desarrollado diferentes estrategias para combatir la resistencia antimicrobiana hacia los antibióticos, las cuales se enfocan a la inhibición de mecanismos biológicos específicos en las bacterias. En este contexto, la presente investigación se enfoca en la síntesis de compuestos organometálicos de plata o cobre (y de sus precursores) con posible actividad antibacteriana, capaces de superar los mecanismos de defensa desarrollados por las bacterias con resistencia a los antibióticos, atacando diferentes mecanismos, tales como la alteración del DNA, proteínas y la membrana celular.

METODOLOGÍA

La síntesis de los intermediarios se llevó a cabo siguiendo procedimientos estándar de síntesis orgánica, como ejemplo se describe la siguiente síntesis: Síntesis de 2-(1H-imidazol-1-il)-1-feniletan-1-ona: se disolvieron 186.7 mg de hidruro de sodio (95 %) en 10 mL de tetrahidrofurano (THF) con atmósfera de argón y, separado, 400 mg de imidazol purificado en 5 mL de THF; se mezclaron ambas soluciones entre sí durante una hora con atmósfera de argón. Después, se añadieron 1.17 g de 2-bromo-1-feniletan-1-ona disueltos en 5 mL de THF en la mezcla y se dejó reaccionar (12 h, 60 °C). La mezcla se enfrió y se neutralizó con metanol, se introdujo en medio acuoso (agua desionizada estéril), se extrajo el producto con 4 lavados de acetato de etilo (EtOAc) 20 mL cada uno, se secó con MgSO4, se filtró en vacío con gel de sílice y una solución de EtOAc-hexano (8:2) y se concentró en rotavapor con alto vacío. Síntesis de bis(3-(1-hexadecil-1H-benzo[d]imidazol-3-io-3-il)propan-1-sulfonato de plata)plata (I): En una cámara de guantes se mezclaron 250 mg de 3-(1-hexadecil-1H-benzo[d]imidazol-3-io-3-il)propan-1-sulfonato y 274 mg de óxido de plata (I) disueltos en 6 mL de metanol anhidro, reaccionó la mezcla en ausencia de luz 24 h y TA, el crudo se filtró al vacío con gel de sílice y concentrado en rotavapor (65 °C, 1 atm), se lavó 3 veces con 1.5 mL de n-pentano, se disolvió en una solución de 1.5 mL EtOAc-hexano 1:3 con agitación durante 30 min, después el líquido se decantó y el sólido se secó en alto vacío. Los análisis de los intermediarios y productos se realizaron por resonancia magnética nuclear con 20 mg de muestra y .8 mL de disolvente, como ejemplos se tiene: bis(3-(2,6-dimetilfenil)-1-(3-sulfonato propil)-1H-imidazol-3-io-2-il)plata (I) disuelto en DMSO; 1H y COSY 1H-1H. 3-(1-hexadecil-1H-benzo[d]imidazol-3-io-3-il)propan-1-sulfonato disuelto en CDCl3; 1H , 13C, DEPT 90, DEPT135, COSY 1H-1H y HMBC. bromuro de 3-decil-1-metil-1H-imidazol-3-io disuelto en CDCl3; 1H.

CONCLUSIONES

Algunos compuestos de plata son inestables o dieron mezclas complejas, difíciles de separar, esto puede deberse a la sensibilidad que tienen hacia la luz y el calor, además, al impedimento estérico que pueda tener la molécula, por lo que deberán repetirse extremando una mayor precaución y modificando los procedimientos. Sin embargo, los compuestos 3-(1-hexadecil-1H-benzo[d]imidazol-3-io-3-il)propan-1-sulfonato y bromuro de 3-decil-1-metil-1H-imidazol-3-io fueron sintetizados exitosamente. La síntesis de compuestos de plata y cobre se lleva cabo con la finalidad de someterlos a las pruebas biológicas.

Asesor: Dr. Margarita Loredo Cancino, Universidad Autónoma de Nuevo León

SíNTESIS HIDROTERMAL DE CARBóN A PARTIR DE LOS RESIDUOS LIGNOCELULóSICOS DE LOS MOLINOS DE MAíZ.

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SíNTESIS HIDROTERMAL DE CARBóN A PARTIR DE LOS RESIDUOS LIGNOCELULóSICOS DE LOS MOLINOS DE MAíZ.

Arriola Gil Yair Yosias, Consejo Quintanarroense de Ciencia y Tecnología. Asesor: Dr. Margarita Loredo Cancino, Universidad Autónoma de Nuevo León

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El proceso de nixtamalización requiere gran cantidad de agua para obtener nejayote. El nejayote es un subproducto del proceso de nixtamalización con un pH alcalino y temperaturas de descarga elevadas. Las características fisicoquímicas del nejayote descritas por varios autores superan lo establecido por la Norma Oficial Mexicana NOM-002-ECOL-1996 que establece los límites máximos permisibles de contaminantes en las descargas de aguas residuales a los sistemas de alcantarillado urbano o municipal, sin embargo el nejayote no entra en el campo de aplicación de la norma ocasionando que se descargue en el alcantarillado e incluso directamente en el suelo sin ningún tipo de tratamiento. El nejayote contiene una gran carga de materia orgánica y otros contaminantes, descargarlos sin algún tipo de tratamiento al alcantarillado o directamente al suelo implica un grave deterioro ambiental.

METODOLOGÍA

Se realizó nixtamal en laboratorio colocando maíz, óxido de calcio (cal) y agua, posteriormente se colocaron a 90 °C por 40 minutos, se dejó reposar por 18 horas. Una vez pasado el tiempo de reposo se enjuagó el maíz con suficiente agua para purificar el maíz obteniendo como resultado nejayote. Se utilizó un potenciómetro para medir pH del nejayote. Sólidos totales fueron medidos con lo establecido en la norma NMX-AA-034-SCFI.  Para el proceso hidrotermal la muestra se colocó en contenedores de teflón con capacidad de 100 mL, posteriormente se colocaron dentro de la coraza de acero inoxidable. Se colocaron los reactores en un horno a temperatura y tiempo establecidos por el diseño de experimentos.   Los datos del diseño de experimento fueron obtenidos del programa Minitab 18.1.0.

CONCLUSIONES

Los resultados del proceso hidrotermal fueron tres productos: sólido, líquido y gas. El sólido resultó con tonalidad café a pH ácidos y alcalinos. El líquido mostró tonalidad amarilla. El gas escapaba al momento de abrir el reactor. Durante la estancia de verano se adquirieron conocimientos científicos sobre la tecnología hidrotermal, sus ventajas y desventajas, su importancia y la situación actual del método hidrotermal. Se fortalecieron habilidades de redacción para documentos científicos. Se obtuvo información sobre la problemática actual de los molinos de nixtamal.  

Asesor: Dr. María Elena Calderón Segura, Universidad Nacional Autónoma de México

ANáLISIS DE DAñO EN ADN EN CéLULAS OVáRICAS DE DROSOPHILA MELANOGASTER CEPA OREGON EXPUESTAS AL PLAGUICIDA COMERCIAL CETOENOL MOVENTO® 240 SC

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ANáLISIS DE DAñO EN ADN EN CéLULAS OVáRICAS DE DROSOPHILA MELANOGASTER CEPA OREGON EXPUESTAS AL PLAGUICIDA COMERCIAL CETOENOL MOVENTO® 240 SC

Ascencio Gutiérrez Guillermo David, Universidad de Colima. Asesor: Dr. María Elena Calderón Segura, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En los últimos años, la presencia de enemigos naturales en la agricultura ha incrementado considerablemente, es por esto que el uso de plaguicidas es una tarea común alrededor del mundo. Todos los plaguicidas representan un riesgo importante para el ambiente y para organismos no deseados; con esto en mente se han elaborado nuevas clases de plaguicidas derivados del ácido tetrónico o cetoenoles, los cuales actúan inhibiendo la síntesis de lípidos a través de la enzima acetil-Coenzima A carboxilasa. Movento® 240SC (cis-3- (2, 5-dimetilfenil) -8-metoxi-2-oxo-1-azaespiro [4, 5] dec-3-en-4-il-etil carbonato, RSCO-INAC-0103Z-301-409-015); es un insecticida de acción sistémica con spirotetramat como sustancia activa, es muy efectivo para controlar Bemisia tabaci, Brevicoryne brassicae y Thrips tbaci en cultivos agrícolas como cucurbitáceas, tomate y uvas. Actualmente los plaguicidas presentan un problema de la salud muy importante para la población mexicana, debido a su exposición recurrente a través del agua y alimentos contaminados. Aunado a esto, diversos estudios han demostrado que la mayoría de los agroquímicos producen alteraciones del ADN y sistema reproductor, afectando en gran escala en problemas de tasa de fertilidad o daños estructurales importantes para la reproducción. El ensayo cometa alcalino, es un biomarcador de efecto temprano, muy eficaz para detectar fragmentación del ADN inducido por agroquímicos. Esta prueba es fácil, rápida, de bajo costo y universalmente validada para evaluar genotoxicidad inducida por los plaguicidas. Drosophila melanogaster es un modelo biológico ideal y bien establecido para el estudio de enfermedades humanas y reprotoxicidad debido a su gran homología genética, además de que el mantenimiento y manejo de ejemplares de esta especie es sencilla y económica.

METODOLOGÍA

Se utilizó como modelo de estudio al ovario de la mosca Drosophila melanogaster cepa silvestre Oregon, para la evaluación del daño en moléculas de ADN en células ováricas, para lo cual se mantuvieron y reprodujeron a una temperatura de 21-23˚C en recipientes apropiados con acceso a oxígeno y alimento aséptico (como fuente de energía y agua). Grupos de 10 moscas vírgenes fueron expuestas oralmente a 0, 60 y 100µM del plaguicida Movento® 240SC durante 72 horas. Después del tratamiento se  disectaron los ovarios para realizar el ensayo cometa alcalino. Se cuantificaron la longitud, intensidad y momento de la cauda de los cometas observados en 100 núcleos en un microscopio de fluorescencia con el software Comet Assay IV. El análisis estadistico  (con el software Graphpad Prisma 8) de los resultados de los parámetros genotóxicos, evidenció que el insecticida Movento® 240SC induce daño en el ADN en células ováricas de Drosophila melanogaster Oregon, comparado con el grupo testigo (0µM de insecticida Movento).

CONCLUSIONES

Los resultados del ensayo cometa alcalino en el ovario de Drosophila melanogaster expuesto a insecticida cetoenol Movento® 240SC, indican que este plaguicida es un agente genotóxico, al aumentar la frecuencia de cometas, la intensidad, el momento y la longitud de la cauda del cometa, lo cual representa riesgo potencial para los organismos no blanco o especies de insectos benéficos para los ecosistemas. Cabe mencionar que este trabajo de investigación es pionero y original.

Asesor: Dr. José López Bucio, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PARTICIPACIóN DE LA RNA POLIMERASA II, NRPB2, SOBRE EL DESARROLLO DE LA RAíZ DE ARABIDOPSIS THALIANA

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PARTICIPACIóN DE LA RNA POLIMERASA II, NRPB2, SOBRE EL DESARROLLO DE LA RAíZ DE ARABIDOPSIS THALIANA

Ávalos Rangel Adrián, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. José López Bucio, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las plantas responden y se adaptan a las diferentes señales ambientales a través de un estricto control de la expresión génica, involucrando la participación del complejo Mediador y la RNA polimerasa II (Pol II). Sin embargo, se desconoce a detalle el papel de cada una de las subunidades que conforman estos reguladores transcripcionales sobre el desarrollo vegetal. Estudiar y determinar la función de subunidades esenciales en el ensamblaje y funcionamiento de la Pol II, ej. NRPB2, sobre el desarrollo de la raíz de Arabidopsis thaliana, permitirá entender la función de estos elementos en dicho proceso.

METODOLOGÍA

Para determinar la función de la subunidad de la Pol II, NRPB2, sobre el desarrollo de la raíz, se utilizó la línea mutante nrpb2-3 de Arabidopsis, previamente descrita. Está línea se sembró y creció en medio de cultivo para tejido vegetal bajo condiciones axénicas. Para esto, se utilizó sales comerciales Murashine and Skoog (MS) 0.2x como base del medio de cultivo, adicionado con sacarosa como fuente energética y agar como gelificante. El pH del medio de cultivo se ajustó a pH7 para posteriormente ser sometido a un proceso de esterilización en una autoclave bajo una presión de 15 lbs por 20 minutos. Posteriormente, el medio de cultivo y con la ayuda de una campana de flujo laminar, fue vertido en cajas Petri estériles. Ya gelificado el medio, las semillas de Arabidopsis previamente desinfectadas superficialmente con etanol y cloro fueron sembradas y germinadas sobre el medio de cultivo. Las placas Petri con las semillas fueron colocadas en una cámara de crecimiento vegetal bajo condiciones óptimas. La desinfección de las diferentes líneas de Arabidopsis, así como la preparación del medio de cultivo se realizó bajo el mismo protocolo para los diferentes experimentos planteados. Para analizar la participación de NRPB2 en la señalización por auxinas, se movilizó el marcador molecular de respuesta a auxinas DR5:GFP al fondo genético mutante, nrpb2-3. Cinco y diez días después de la germinación de las semillas, se analizaron diferentes marcadores del desarrollo de la raíz, incluyendo crecimiento de la raíz principal, formación de raíces laterales y la integridad celular del meristemo apical de la raíz, el cual fue analizado utilizando ioduro de propidio, como marcador de viabilidad celular y observado por microscopia confocal.

CONCLUSIONES

La mutante nrpb2-3 presenta un crecimiento determinado en la raíz. La mutación en NRPB2 activa procesos de muerte celular programada en los meristemos apicales de la raíz principal y de raíces laterales. La pérdida de función de NRPB2 induce una sobre expresión de DR5:GFP en el tejido vascular de la raíz RNPB2 es un elemento clave en la integridad celular y en la regulación de la señalización por auxinas para el correcto desarrollo de la raíz de Arabidopsis thaliana.

Asesor: Dr. Jesús Campos García, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

EFECTO DE LA MUTACIóN DEL GEN HSCA EN LA CEPA ETANOLOGéNICA DE ESCHERICHIA COLI SOBRE SU TOLERANCIA Y PRODUCCIóN DE ETANOL.

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EFECTO DE LA MUTACIóN DEL GEN HSCA EN LA CEPA ETANOLOGéNICA DE ESCHERICHIA COLI SOBRE SU TOLERANCIA Y PRODUCCIóN DE ETANOL.

Avelino Castillo Sarai Avelino Castillo, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Jesús Campos García, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En la actualidad el consumo de los combustibles ha incrementado sustancialmente, lo cual representa una oportunidad para la producción de éstos mediante procesos biotecnológicos. Sin embargo, el impacto que estos ocasionan al medio ambiente es negativo, por lo cual se han planteado alternativas para solucionar o atenuar los problemas generados. El bioetanol ha sido visto como un buen candidato como combustible, considerando su fácil transporte, su costo de producción y sobre todo su bajo efecto negativo sobre el medio ambiente. Lo cual puede influir en potencializar la disminución de la contaminación ambiental. La obtención principal de este alcohol es a partir de la biomasa procedente de  plantas o microorganismos. Los microorganismos genéticamente modificados se han propuesto como biocatalizadores alternativos a los de naturaleza nativa. El uso de la biomasa procedente de los microorganismos mediante fermentación sigue siendo ampliamente estudiada. Escherichia coli se cultiva fácilmente en laboratorio y es fácilmente susceptible de manipulación genética, lo cual hace de este microorganismo un modelo muy utilizado para estudios de mejoramiento genético con fines industriales. La cepa KO11 es una cepa etanologénica de E. coli, la cual ha sido modificada genéticamente para producir mayor cantidad de etanol, de manera similar a la levadura de Saccharomyces cerevisiae. La tolerancia al etanol es un factor que influye en los niveles de etanol producidos durante la fermentación, por lo cual los microorganismos que presentan incrementada su tolerancia deberían producir mayores cantidades de etanol. Se sabe que los genes hscBA que codifican para el sistema de chaperona hscA/hscB han sido involucrados en el mecanismo de tolerancia al etanol en bacterias del género Pseudomonas. Por lo que en este trabajo se evaluará la tolerancia y la producción de etanol en una mutante en el gen hscA usando como modelo de estudio una cepa de E. coli etanologénica.

METODOLOGÍA

-Cepa bacteriana usada de E. coli KO11 (etanologénica). -Condiciones de crecimiento de la bacteria y fermentación. Los medios de cultivo LB con 10% de glucosa se inocularon con cultivo bacteriano crecido durante toda la noche a una densidad óptica determinada a 590 nm de 0.05. Se incubaron a 30 grados centígrados con agitación (100 rpm), se determinó el crecimiento bacteriano por 144 horas a 30 grados centígrados y muestras fueron colectadas para la determinación de los parámetros microbianos y fermentativos. -Análisis de perfiles de ácidos grasos, usando el método de los esteres metílicos de ácidos grasos (FAME). -Parámetros fermentativos. Velocidad de crecimiento, consumo de glucosa, producción de etanol, producción de ácidos orgánicos, rendimiento y productividad.

CONCLUSIONES

La mutación en el gen hscA en la cepa etanógena E. coli KO11 causó una disminución de la tolerancia al etanol. El mutante fue complementado con el plásmido pJC10 que contiene el grupo de genes isc, causando un aumento en el nivel de tolerancia al etanol. La modificación de ácidos grasos se describió como un mecanismo de adaptación sobre los efectos tóxicos del etanol, el análisis de FAME indicó que el gen hscA no tiene efecto sobre la modificación de ácidos grasos; sin embargo mejoró el nivel de tolerancia a etanol mediante la homeostasis de especies reactivas de oxígeno y hierro libre. La modificación genética causó en la cepa un incremento en la cantidad de etanol producido y disminución de ácidos orgánicos de cadena corta.

Asesor: Dr. Nidia Gary Pazos Salazar, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

DESARROLLO DE ESTáNDAR DE DIAGNóSTICO PARA PARVOVIRUS CANINO.

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DESARROLLO DE ESTáNDAR DE DIAGNóSTICO PARA PARVOVIRUS CANINO.

Avila Martínez Diana Victoria, Universidad Veracruzana. Asesor: Dr. Nidia Gary Pazos Salazar, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El parvovirus canino es el principal agente etiológico responsable de gastroenteritis en perros, favoreciendo una alta tasa de mortalidad en varias partes del mundo. En los años de 1970s se identificó por primera vez el CPV en un brote donde caninos de diferentes partes, presentaban un cuadro clínico con características muy similares, más tarde este fue denominado CPV-2 para distinguirlo del Virus Diminuto Canino (MVC o CPV-1), responsable de muertes neonatales en cachorros. En la última década ha cobrado importancia ya que del genotipo original se generaron dos variantes de importancia epidemiológica. Actualmente la detección de Parvovirus Canino no es una prueba rutinaria y el diagnostico se limita a pruebas serológicas de poca especificidad que no distinguen entre perros vacunados y perros infectados. Una mejor alternativa es la implementación de pruebas de diagnósticos molecular que salvaría la vida de miles de caninos en el mundo.

METODOLOGÍA

Con la implementación de programas digitales como Clostal, Oligo analizer, Oligo explorer, BLAST, Nebcutter y con base en la revisión de artículos científicos, se diseñaron primers únicos para el reconocimiento de una secuencia de interés en Parvovirus Canino. Se realizo la clonación de productos de PCR por medio del CloneJet PCR Kit, en donde las condiciones de ligación para este caso fueron las siguientes (según la concentración de los productos de PCR): Buffer de reacción 2X: 10µL Productos de PCR: 3µL Vector: 1µL H2O: 5µL T4 DNA, Ligasa: 1µL Volumen final: 20µL Se procedió a dar vórtex a la mezcla de reacción brevemente y centrifugar durante 3-5 s. y se incubo la mezcla de ligación a temperatura ambiente (22 ° C) durante 5 minutos, de donde se obtuvo DNA plasmídico, el cual se refirió como pJET1.2-st283CPV. Posteriormente se realizó la transformación en donde el método de elección fue “transformación bacteriana por CaCl2” en donde se prepararon células competentes partiendo de la cepa E. coli TOP10 y de DNA plasmídico pJET1.2-st283CPV, previamente extraído.  Obtenida la cepa transformante E. coli TOP10-pJET1.2-st283CPV se continuo con la extracción del plásmido, inoculando una colonia de la cepa transformada en 3ml de CST más el factor de selección cloranfenicol a 37° por 18 horas. Se cosecho el vector bacteriano centrifugando por 1 minuto a 14000 rpm, posterior a eso se añadieron 200µL de cada buffer de extracción, resuspendiendo entre cada uno. Se centrifugo a 14000 rpm por 15 minutos y se recuperó el sobrenadante teniendo cuidado de no tocar el botón. Se adiciono 1mL de isopropanol frío e incubo durante 15 minutos a -30 °C. Nuevamente se centrifugo a 14,000 rpm durante 15 minutos y se elimina el sobrenadante. Se procedió a lavar el botón con 1mL de etanol al 70 % frío e Incubar durante 15 minutos a -30 °C para centrifugar a 14,000 rpm/15 minutos y decantar. Por último, se dejó secar el tubo por 10 minutos y se resuspendio en 40µL de agua desionizada estéril. Para observar los resultados se tomó una alícuota de 10µL y se realizó una electroforesis en gel de agarosa al 1% por 40 minutos, en donde se observaron bandas que correspondieron al plásmido.   Se continuo con la caracterización para el estándar de diagnostico en donde se utilizó la restricción enzimática para determinar el tamaño del constructo y para conocer las veces que se encontraba el inserto dentro del vector. Se utilizaron Bgl II que libera al inserto y Xba I que linealiza al vector. Para lo cual las condiciones de restricción fueron las siguientes (reacciones separadas en mismas condiciones): Enzima Bgl ll o Xbal l: 2µL Buffer: 2µL Plásmido: 3µL H2O: 13µL   Volumen final: 20µL Posteriormente se incubaron ambas reacciones a 37°C por 4 horas. Por último, se realizó una electroforesis en gel de agarosa al 2% por 75 minutos, en donde se obtuvieron bandas correspondientes al tamaño del inserto en el caso de Bgl ll y del tamaño del constructo en el caso de Xba I; de esta manera se pudo garantizar que el inserto se encontrara solo una vez en el vector y que el tamaño del constructo correspondiera al de interés. Para conocer la orientación del inserto se realizo una PCR de colonia con las siguientes condiciones: Molde 1 col susp 10µL: 3µL CPV- F1 (25pmol/µL): 0.75µL CPV-B1 (25pmol/µL): 0.75µL dNTPS(2Mm): 2µL Enzima TapDNAPolRecombinante (1u/µL): 1.25µL -NH4SO4 (10X): 2µL +MgCl2 (25mM): 1.6µL ADIE: 8.65µL Volumen final: 20µL Se realizo una electroforesis en gel de agarosa al 1% por una hora, en donde se observaron bandas que correspondían a las del inserto orientado.  

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano de investigación mediante la implementación de técnicas de biología molecular como lo son la clonación de plásmidos para DNA recombinante, transformación bacteriana, extracción de plásmidos, restricción enzimática y PCR se obtuvieron resultados que caracterizan un estándar de diagnóstico de Parvovirus Canino, así tambien se diseñaron primers especificos para CPV de los cuales se obtuvieron nuevos conocimientos teoricos que se aplicaron en la tecnicas complementarias del desarrollo del estándar, sin embargo al ser un extenso trabajo que hasta el momento continua en desarrollo no se pueden mostrar los datos obtenidos.

Asesor: Dr. Ali Margot Huerta Flores, Universidad Autónoma de Nuevo León

HETEROESTRUCTURAS FOTOFUNCIONALES HíBRIDAS PARA SU USO EN PROCESOS PARA LA REMEDIACIóN AMBIENTAL Y LA GENERACIóN DE ENERGíA

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HETEROESTRUCTURAS FOTOFUNCIONALES HíBRIDAS PARA SU USO EN PROCESOS PARA LA REMEDIACIóN AMBIENTAL Y LA GENERACIóN DE ENERGíA

Ayala Estrada María Paula, Consejo Quintanarroense de Ciencia y Tecnología. Asesor: Dr. Ali Margot Huerta Flores, Universidad Autónoma de Nuevo León

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Debido a los numerosos problemas medio ambientales a los que nos debemos enfrentar en la actualidad, es necesario desarrollar distintas tecnologías que permitan reducir el daño ocasionado por los distintos contaminantes que perturaban la composición de la biodiversidad. En los últimos años, la contaminación producida por los productos de la industria textil ha significado una gran preocupación, es aquí dónde la degradación de colorantes representaría una alternativa prometedora. Es por ello que en este trabajo se busca analizar la degradación del colorante Índigo Carmín (IC, uno de los más antiguos, importantes y tóxicos de la industria) por medio de la fotocatálisis, utilizando como base los materiales ZnO, Bi2O3 y Fe2O3. En adición, se evaluó el desempeño de estos materiales en la generación fotoelectroquímica de hidrógeno en una celda PEC, contribuyendo de esta manera al desarrollo de tecnologías para la remediación ambiental y generación limpia de energía

METODOLOGÍA

Se prepararon 5 diferentes películas (3 de materiales puros y 2 mezclas) mediante la metodología sol-gel y utilizando el sistema de depósito spin-coating: ICDA, ICDB, ICDC, ICDD e ICDE; esto tanto en sustrato de ITO como en películas de vidrio, siendo esta última en capas gruesas. Posteriormente se analizó las propiedades electroquímicas, ópticas y morfológicas de los mismos, esto mediante las técnicas de Difracción de Rayos X (DRX), Espectrofotometría de Ultravioleta Visible (UV-Vis), Microscopía lectrónica de Barrido (SEM) y finalmente pruebas de OCP, Voltametría Cíclica (CV), Cronoamperometría y Electroscopia de Impedancia Electroquímica (EIS) para obtener información sobre el tipo de conductividad de los materiales (p ó n), la densidad de donadores, el potencial de banda plana y la eficiencia de fotoconversión. Las pruebas de degradación fotocatalítica se desarrollaron en un reactor pyrex usando 200 mL de solución de índigo carmín 30 ppm y utilizando como fotocatalizador soportado las películas heteroestructuradas preparadas. El reactor se iluminó con una lámpara tipo pluma de 440 W/cm2 y la cinética de reacción fue estudiada tomando alícuotas del reactor cada 30 minutos. Estas muestras fueron evaluadas en un Espectrofotómetro de UV-Vis para determinar la concentración de índigo carmín en cada muestreo durante 4 horas.

CONCLUSIONES

Las pruebas fotocatalíticas demostraron que los materiales desarrollados en este trabajo logran degradar el colorante índigo carmín en más de un 80%. Asimismo, esta eficiencia se incrementó en las heteroestructuras híbridas. La película ICDB mostró una degradación de índigo carmín en más del 90% durante la primera hora de reacción. Esta película se evaluó también en la producción fotocatalítica de hidrógeno, mostrando resultado prometedores, lo que nos indica que los materiales desarrollados representan una buena opción para la degradación de índigo carmín y la producción de hidrógeno.

Asesor: Dr. Paula Lidia Enríquez Rocha, Colegio de la Frontera Sur (CONACYT)

DIVERSIDAD DE AVES EN LOS HUMEDALES DE MONTAñA EN LA CIUDAD DE SAN CRISTóBAL DE LAS CASAS, CHIAPAS

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DIVERSIDAD DE AVES EN LOS HUMEDALES DE MONTAñA EN LA CIUDAD DE SAN CRISTóBAL DE LAS CASAS, CHIAPAS

Alvarado Sosa María Edith, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas. Baca Ramírez Jesús Antonio, Instituto Tecnológico de Los Mochis. Morales Castillo Jafet, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Ramírez Vázquez Dulce Aidé, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Rojas Soto Diana Laura, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Paula Lidia Enríquez Rocha, Colegio de la Frontera Sur (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los humedales son áreas inundables permanentes o temporales que llegan a tener una profundidad de hasta 6 metros. Estos sistemas ecológicos albergan una gran diversidad de especies de flora y fauna. Además proporcionan una gran variedad de servicios ecosistémicos valiosos, incluyendo la purificación del agua, la filtración, la retención de nutrientes, el control de inundaciones, la recarga de agua subterránea y proporcionando hábitat para una variedad de especies (Boyer & Polasky 2004). Los humedales de montaña son ecosistemas dulceacuícolas característicos por presentarse en altitudes superiores a los 2000 msnm (COP 2002). Sin embargo, son de los ecosistemas más amenazados ya que se han reducido por demanda en espacios habitacionales, poca planeación urbana, expansión ganadera, sobreexplotación de recursos, mal manejo de residuos, contaminación urbana y agroquímica. En la ciudad de San Cristóbal de las Casas, Chiapas ha existido una elevada necesidad de vivienda, junto con la falta de regulación municipal y los fuertes intereses económicos que se derivan de la demanda de espacio habitacional, están propiciando la pérdida y reducción de los humedales naturales de montaña (Calderón-Cisneros et al. 2012). Esta transformación del hábitat original ha tenido un impacto negativo sobre las comunidades de aves y otros grupos faunísticos, reduciendo la biodiversidad y la cantidad del hábitat original, interrumpiendo procesos ecológicos y modificando su composición (Dirzo & García 1992, Daily et al. 2001). Para abordar esta problemática se estudian las aves debido a que pueden indicar la integridad (salud o condición) de un paisaje y los humedales individuales (Adamus 2002). En este estudio el objetivo fue determinar la diversidad de las aves en los humedales de montaña en San Cristóbal de las Casas, Chiapas y analizar el uso de suelo en los sitios de muestreo durante los periodos 2001, 2011 y 2019.

METODOLOGÍA

  El presente estudio se llevó a cabo en la ciudad de San Cristóbal de Las Casas, Chiapas, México. Se seleccionaron 8 puntos de muestreo mediante el programa ArcMap 10.1 tomando como criterio la presencia de humedales, la cercanía a zonas urbanas y la presencia de áreas verdes. El muestreo se realizó la segunda semana de julio del 2019 por el método puntos de conteo, con distancias variables, de 7:30 a 9:30 am. Cada punto se visitó 2 veces y se utilizaron binoculares (8x42) para la observación de aves, para la identificación se utilizó la guía de aves de San Cristóbal de las Casas (Huffman 2011). Las especies identificadas fueron registradas en un formato donde se indicó el número de individuos, la hora y la actividad que la especie realizaba. Los datos se incluyeron en una página de Excel para su posterior análisis. La abundancia se estimó como la media de individuos de cada especie para cada sitio y para todos los sitios. De igual modo, se realizó el índice de diversidad de Simpson. Se utilizaron imágenes de satélite de Google Earth (años 2001, 2011 y 2019), donde se rodalizaron los ocho puntos de muestreo. En cada punto de muestreo se hizo un buffer de 500 metros y dentro del área, se clasificó el uso de suelo en diferentes categorías: zona urbana, zona arbórea, zona de cultivo, cuerpos de agua y áreas de infiltración. Posteriormente se analizó la rodalización en ArcGis 10.2.1, y se obtuvo el área en metros de estas cinco categorías, para cada punto de muestreo. La información se incluyó en una base de datos en Excel y se realizó una comparación de las áreas de estudio entre los años analizados.

CONCLUSIONES

En total se registraron 36 especies de aves en los ocho puntos de monitoreo. El punto número 7 (Moxviquil) fue el sitio con mayor riqueza presentando un total de 15 especies que representa el 41% total, esto se asocia a una mayor área de vegetación (321,210 m2) en comparación con el resto de los puntos. El punto 1(Cocos) y 5 (CBTIS) presentaron un total de 13 especies, seguido del punto 4 (Cerrito) con un total de 12 especies. Estos puntos se caracterizaron principalmente por la presencia de cuerpos de agua cercanos a los puntos de muestreo, específicamente el punto 4 presentó una mayor área de cuerpo de agua. Los puntos 2, 3, 6 y 8 obtuvieron la menor riqueza de especies debido a que presentaron una mayor área de urbanización cercana a los puntos de muestreo.  Las especies más abundantes fueron el zanate (Quiscalus mexicanus; 28.49%), el copetón (Zonotrichia capensis; 17.21%), la golondrina (Hirundo rustica; 7.40%) y el gorrión doméstico (Passer domesticus; 5.46%).  De acuerdo con el índice de Simpson, el punto número 4 (0.1432), 5 (0.1597) y 3 (0.1656) presentaron la mayor diversidad en comparación con el resto de los sitios. Finalmente, la rodalización analizada de uso de suelo del 2001 al 2011 indica que existe un cambio poco significativo para todos los sitios de estudio. Sin embargo, en un periodo de menos tiempo del 2011 para el 2019 si existieron cambios significativos. La urbanización ha sido la principal causan de cambio de uso de suelo, ya que el área total ocupada por la zona urbana para el 2001 fue de 186,727 m2, para el 2011 fue de 209,606 m2 y para el 2019 de 313,613 m2.  De este modo, se puede concluir porque el zanate (Q. mexicanus) es la especie más abundante y esto debido a que la urbanización ha incrementado desmedidamente en los últimos años y esta favorece el éxito de esta especie.

Asesor: Dr. Marco Antonio Villanueva Méndez, Universidad Nacional Autónoma de México

AISLAMIENTO DE DOS PROTEíNAS DE SYMBIODINIUM MICROADRIATICUM QUE SE FOSFORILAN EN TREONINA EN RESPUESTA A LA LUZ

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AISLAMIENTO DE DOS PROTEíNAS DE SYMBIODINIUM MICROADRIATICUM QUE SE FOSFORILAN EN TREONINA EN RESPUESTA A LA LUZ

Baeza Gómar Rubén Felipe, Instituto Tecnológico de La Piedad. Asesor: Dr. Marco Antonio Villanueva Méndez, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En un trabajo previo (Castillo-Medina et al., 2019) se identificó un grupo de proteínas que se fosforilan en treonina en respuesta a la luz, en el cual se caracterizó a una proteína que está presente en diferentes filotipos de Symbiodinium con un peso molecular de 75 kDa; sin embargo otras proteínas observadas en ese análisis aún no se han caracterizado. Entre estas proteínas fosforiladas en treonina se encuentran dos con pesos moleculares de 29 y 43 kDa, por lo que es de principal importancia llevar a cabo su identificación. En este trabajo se llevó a cabo la identificación de las fracciones de extractos de Symbiodinium microadriaticum para poder aislar las proteínas de 29 kDa (P29) y la de 43 kDa (P43). Observando una característica muy particular de P29 que en presencia de luz azul se intensifica su fosforilacion en treonina.

METODOLOGÍA

Electroforesis de proteínas en gel de poliacrilamida desnaturalizante (SDS-PAGE). En éste método las proteínas se separan por su peso molecular en geles desnaturalizantes discontinuos al 12% de acrilamida en la zona de separación, y 4 % en la zona de apilamiento. Para la separación fue necesario utilizar buffer de corrida, cargando 5 µl de cada una de las muestras de proteínas, y 2 µl del marcador de peso molecular en los pozos del gel de apilamiento y se corrieron a 10 mA durante 2 h. Inmunodetección (western blot) teniendo separadas las proteínas en los geles, se transfirieron a membranas. Poniendo en contacto la membrana y el gel haciendo un sándwich con esponjas y papeles filtro, que se ensambló en un soporte, y se colocó en la cámara con el buffer de transferencia eplicandole una corriente de 350 mA por 1 h. Las membranas con las proteínas se incubaron en solución de bloqueo a 50⁰C por 1 h. Después se enjuagó con PBS-T y se le agregó el anticuerpo primario anti-Fosfotreonina, y se dejó a temperatura ambiente toda la noche. Después, se retiró el anticuerpo primario y las membranas se lavaron con PBS-T. Posteriormente, se agregó el anticuerpo secundario anti-conejo-AP, y se dejó agitando a temperatura ambiente por 2 h. Se retiró el anticuerpo secundario y las membranas se lavaron con PBS- T. Después, se dejaron estabilizar en buffer alcalino. Finalmente, se usó una solución de revelado. Isoelectroenfoque de proteínas.  Las fracciónes en la cuales se detectó la presencia de P29, se concentraron en un filtro. La proteína concentrada se precipitó con un Kit, según las especificaciones del fabricante. El precipitado se mezcló con 500 µl de buffer de rehidratación. La solución se dividió en dos, de la cual se usó la mitad. La solución se pasó a la placa para rehidratación distribuyendo 125 µl en cada canal. Las tiras usadas para el isoelectroenfoque fueron de 7 cm con un rango de pH de 4-7, se le dio un periodo de rehidratación de 1.5 h a 18⁰C y se virtieron 3 ml de aceite mineral en cada uno de los canales con las tiras, dejándolas rehidratando 12 h a 18⁰C. Después, se pasaron a la placa para el isoelectroenfoque, y se cubrieron nuevamente con 3 ml de aceite mineral. La placa se conectó al equipo Protean® i12™ IEF Cell de BioRad, el cual fue programado para realizar el isoelectroenfoque en gradiente de los canales que contuvieron las tiras, durante 5 h a 18⁰C, para que las proteínas puedan ser separadas. Después se extrajeron las tiras, para iniciar los lavados con 1.5 ml del buffer de equilibrio I buffer de equilibrio II. Separación y aislamiento de P29. Las células fueron expuestas a una luz azul durante 30 min, con una agitación cada 5 min. Se centrifugaron a 3,000 x g por 1 min, el sobrenadante se descartó y al precipitado se le añadió buffer de extracción hasta un volumen de 5 ml. La lisis celular se realizó en una prensa con presión de 20,000 psi. Después se centrifugó el extracto a 20,000 x g y el sobrenadante recuperado se usó para una cromatografía por columna de DEAE-SEPHACEL. Una vez ubicadas las fracciones eluidas de la columna en las que se encontró P29, se realizó un isoelectroenfoque para separar las proteínas en estas fracciones. Después se les realizó SDS-PAGE y western blot para determinar la ubicación de P29.  Solubilización de P43. Las células fueron suspendidas en 300 µl de buffer de extracción con 2% (v/v) de Tritón realizando la lisis celular. Una vez teniendo el extracto, se tomó una alícuota y se agregó buffer de Laemmli 4X, lo demás se dividió en dos tubos dejándolos incubar 30 min en hielo. La muestra fue centrifugada a 20,000 x g por 30 min a 4⁰C, tomando una alícuota del sobrenadante de 20,000 x g y el resto se guardó a -80⁰C. Por otro lado, el precipitado de 20,000 x g se resuspendio en buffer de extracción con 2% (v/v) de Tritón X-100, y el otro en buffer de extracción con 2% (v/v) de Tritón X-100 más 8 M urea. Posteriormente, las muestras se dividieron en 3 tubos cada una, se les agregó una concentración diferente de CHAPS. Se dejaron incubar en hielo durante 30 min, para después ser centrifugados a 20,000 x g por 30 min a 4⁰C. Después, se tomó una alícuota del sobrenadante de 20,000 x g y se le agregó buffer de Laemmli 4X, y el precipitado se llevó a un volumen de 300 µl con buffer de Laemmli 1X, resuspendiendo nuevamente. Posteriormente el extracto total, el sobrenadante y el precipitado de 20,000 x g se calentaron en agua y se centrifugaron para clarificar las muestras. Se realizó SDS- PAGE y western blot.

CONCLUSIONES

En esta estancia, se logró adquirir conocimientos teóricos y prácticos de los métodos utilizados para purificar proteínas, como son el isoelectroenfoque que separa las proteínas en base a su punto isoeléctrico, y la electroforesis de proteínas en gel de poliacrilamida desnaturalizante, que separa las proteínas en base a su peso molecular. Sin embargo, el trabajo para poder aislar las proteínas de 29 kDa y 43 kDa es muy extenso, por lo que se le dio prioridad a la proteína de 29 kDa la cual ya está lista para su secuenciación. Por otro lado, para la proteína de 43 kDa solo se llegó hasta la prueba de solubilidad y aún estamos en espera de los resultados.

Asesor: Dr. Petra Sánchez Nava, Universidad Autónoma del Estado de México

FASES LARVARIAS DE TREMÁTODOS EN GASTROPODOS DE CUERPOS DE AGUA ALEDAÑOS AL CAMPUS EL CERRILLO PIEDRAS BLANCAS, TOLUCA ESTADO DE MEXICO

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FASES LARVARIAS DE TREMÁTODOS EN GASTROPODOS DE CUERPOS DE AGUA ALEDAÑOS AL CAMPUS EL CERRILLO PIEDRAS BLANCAS, TOLUCA ESTADO DE MEXICO

Baños Garduño Angela Carina, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Petra Sánchez Nava, Universidad Autónoma del Estado de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los trematodos constituyen el grupo de parásitos (platelmintos) de mayor abundancia con ciclos de vida complejos que involucran a más de un hospedero intermediario, en sus primeras fases larvarias (esporocisto, redia y cercaría) infectan a moluscos de la clase Gastropoda, entre ellos varias especies del género Physella y Lymnea.  La fase de metacercaria infecta a vertebrados e invertebrados y un gran número de ellos son de importancia veterinaria afectando a animales domésticos y de vida silvestre y otros de importancia médica humana. Las fases larvarias no suelen ser objeto de estudio, sin embargo son una parte fundamental en la infeccion a muchos organismos entre ellos al ser humano. Por lo que estudiar las fases larvarias de trematodos en Physella acuta en cuerpos de agua aledaños al Cerrillo Piedras blancas, nos ofrece un excelente modelo de estudio para abordar y responder las siguientes preguntas ¿Cuáles son las especies de trematodos que parasitan a la especie  Physella acuta? ¿Existe parasitismo múltiple de fases larvarias de tremátodos en éstos moluscos? Por lo tanto el objetivo de este trabajo fue conocer, analizar e identificar las fases larvarias de Tremátodos en el gastropodo dulceacuícola Physella acuta.

METODOLOGÍA

Se realizaron recolectas de caracoles en dos cuerpos de agua aledaños al campus con una red de cuchara de malla fina en los bordes de la laguna; los caracoles obtenidos se colocaron en un recipiente de plástico con agua y vegetación del medio. Los caracoles fueron traslados al laboratorio y ahí se colocaron de manera individual  en recipientes de plástico con vegetación y agua del medio y su procesamiento se realizó en las siguientes 48-72 horas. La extracción de las fases larvarias se realizó por medio de aplanamiento del espécimen mediante dos placas de vidrio de 10x10, se retiró la concha del caracol y el cuerpo del organismo se observó bajo microscopio estereoscópico en busca de las fases larvarias. Las fases larvarias de trematodos fueron extraídas con pinceles finos y algunas de ellas fueron colocadas entre porta y cubreobjeto para observar la morfología en microscopio óptico; otras larvas fueron fijadas con  formol caliente al 4% y se conservaron en alcohol al 70%. De las fases larvarias conservadas se realizaron tinciones con Paracarmín de Mayer, se montaron con bálsamo de Canadá y se dejaron secar a una temperatura de 40 °C por espacio de una semana. De las preparaciones temporales y permanentes se procedió a tomaron fotografías de cada una de las fases para su identificación, la cual se llevó a cabo con las claves de Yamaguti 1975.  

CONCLUSIONES

Se recolectaron 17 caracoles de la especie Physella acuta y de éstos solo uno (5.88%) se encontró infectado, en este caracol se obtuvieron las fases larvarias (intramolusco): esporocisto, redias madres, redias hijas y cercarías pertenecientes al género Noticotylus. La cercaría es en forma alargada, con una cola no bifurcada y sin velo; presenta ciegos intestinales que llegan a cubrir las dos terceras partes del cuerpo. Los gasterópodos Physella acuta de los cuerpo de agua aledaños al Cerrillo Piedras blancas se encuentran parasitados por fases intramoluscos: esporocisto, redias madres, redias hijas y cercarías del género Notocotylus.

Asesor: Dr. Néstor Mendoza Muñoz, Universidad de Colima

OPTIMIZACIóN DE LA PREPARACIóN DE NANOPARTíCULAS DE COPOLíMEROS DE POLIMETILVINILéTER/áCIDO MALEICO CARGADAS CON AMITRIPTILINA: EFECTO DEL SURFACTANTE.

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OPTIMIZACIóN DE LA PREPARACIóN DE NANOPARTíCULAS DE COPOLíMEROS DE POLIMETILVINILéTER/áCIDO MALEICO CARGADAS CON AMITRIPTILINA: EFECTO DEL SURFACTANTE.

Barajas Sánchez Aída Alejandra, Instituto Tecnológico de Colima. Asesor: Dr. Néstor Mendoza Muñoz, Universidad de Colima

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La nanotecnología comprende una serie de disciplinas que estudian y trabajan con compuestos y materiales a nanoescala, pudiendo aplicarse a diversos campos con impactos muy convenientes y útiles. Uno de estos campos es la nanomedicina, la cual está enfocada al diseño y desarrollo de nanosistemas que puedan aplicarse a la elaboración, administración y liberación de fármacos y con ello mejorar y revolucionar la medicina convencional, ya que se lograría que el medicamento actúe de manera más rápida al permitir nuevas vías de administración, como la nasal, con lo cual se evita el metabolismo de segundo paso y la unión a proteínas plasmáticas. Entre estos nanosistemas se encuentran las nanocápsulas, las cuales consisten en un sistema núcleo-coraza que pueden formarse por distintos métodos dependiendo el tamaño deseado y las propiedades fisicoquímicas del núcleo y del interior.   Los métodos más comunes para elaborar nanocápsulas son nanoprecipitación, emulsióndifusión y evaporación de solvente. En este caso, en el laboratorio en el que realicé el verano, se trabajó con el método de nanoprecipitación, en el cual las nanocápsulas son formadas al crear una suspensión coloidal entre dos fases: La fase orgánica está compuesta por una mezcla de solventes orgánicos y la fase acuosa es una mezcla de solventes que forman una película de superficie. La fase orgánica, en la cual se agrega el medicamento que se desea encapsular, es inyectada a la fase acuosa que se encuentra en agitación, formando así la suspensión coloidal con nanocápsulas en ella. Uno de los problemas cuando se sigue este método es que las nanocápsulas obtenidas se unen entre ellas, lo cual provoca que su tamaño aumente considerablemente y sus aplicaciones se vean limitadas. Es por ello que se buscó emplear distintos surfactantes que se unieran a ellas y les confirieran una carga total o parcial que evitara su unión y posterior aglomeración. 

METODOLOGÍA

Para evaluar el efecto del surfactante, se realizó un diseño factorial completo, el cual arrojó que tenían que realizarse diluciones acuosas a 3 concentraciones distintas de los surfactantes a evaluar (Alcohol Polivinílico, Polisorbato 60 y Polaxámero 127), siendo dichas concentraciones al 1, 2 y 3%. Para dar validez al estudio, cada preparación se realizó por triplicado, elaborando además un blanco con etanol y agua, con lo cual se obtuvieron 3 lotes de 10 preparaciones. Posteriormente, se diluyeron 50mg de copolímero Polimetilviniléter/ácido maleico (marca comercial Gantrez S-97® donado por Ashland (EUA)) en 20ml de acetona, utilizando para ello agitación magnética (500 RPM durante 4.5h), agregando 25mg de amitriptilina tras la disolución y manteniendo la agitación por 30min más. Para la obtención de las nanopartículas, la mezcla Amitriptilinacopolímero-Acetona se agregó por goteo con ayuda de una jeringa a soluciones 1:1 de surfactante:etanol, a un volumen total de 40ml, y agitando a 700 RPM. Una vez realizado lo anterior, cada muestra se rotavaporó en un Rotavapor R-3 de Buchi, a presiones de vacío de 80mbar para la completa remoción de etanol y acetona. Para la medición de tamaño, se empleó un zetámetro, ZetaPlus Potencial Analizer de Brookhaven Instrument Corporation, realizando 3 corridas de 1 minuto para cada muestra en condiciones de 90° con un índice refractivo de 1.52 y teniendo agua a 25°C como medio de dispersión.  Las lecturas del tamaño de partículas se realizaron los días 0 a 5, 7, 14, 21 y 28 días, y una vez obtenidos los datos se analizaron con ayuda de Excel, para lo cual se elaboraron tablas con el promedio de cada lote, y se graficaron dichos valores contra el día de lectura, lo cual permitió observar y analizar el comportamiento de los surfactantes. 

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró obtener nanopartículas cargadas con amitriptilina, así como estudiar el efecto de los tres distintos surfactantes empleados, los cuales fueron Alcohol Polivinílico, Poláxamero 127 y Polisorbato 60. Se encontró que estos influyen tanto en el tamaño de las nanopartículas obtenidas como en su estabilidad, observando comportamiento distinto para cada uno: A mayor concentración de PVA, se obervó un mayor tamaño de las nanopartículas obtenidas, pero su estabilidad fue poca en las 3 concentraciones, ya que se observó que en los días 0-2 el tamaño se mantenía un poco, en el 3-4 aumentaban notablemente y presentaban un decaimiento en los días 5 y 6 o 7, tiempo después del cual el tamaño aumentaba nuevamente. Para el Polaxámero 127 se encontró que a mayor concentración del surfactante mayor era el tamaño de las partículas, pero la estabilidad disminuía, encontrando que la mejor concentración fue al 1%, puesto que las variaciones de tamaño eran menores que en las otras concentraciones. Con el Polisorbato 60 no se obtienen resultados concluyentes, debido a que la estabilidad fue nula (hubo mucha variación en el tamaño de las partículas) y el tamaño era muy grande.  En el blanco se obtuvieron moléculas muy grandes que en promedio se deshicieron después de los 21 días.  Sin embargo, se observa la necesidad de seguir midiendo el tamaño de las partículas obtenidas por un mínimo de 3 meses para completar resultados, ya que es lo requerido cuando se realizan estudios de estabilidad.

Asesor: Dr. Patricia Rios Chavez, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

DETERMINACIóN DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA Y COMPOSICIóN QUíMICA DE CALLISTEMON VIMINALIS

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DETERMINACIóN DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA Y COMPOSICIóN QUíMICA DE CALLISTEMON VIMINALIS

Baranda Alonzo Jasmín, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Patricia Rios Chavez, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Callistemon viminalis es una planta originaria de Australia, que ha sido introducida en varios países como planta ornamental. Forma parte de la familia de las Myrtaceae. Existen reportes acerca de la capacidad antimicrobiana de Callistemon citrinus, y se atribuye esta propiedad a todo el género Callistemon, sin embargo C. viminalis no ha sido ampliamente estudiada. El objetivo de este trabajo fue determinar la capacidad antimicrobiana de Callistemon viminalis. 

METODOLOGÍA

 Los materiales utilizados fueron hojas de C. viminalis frescas jóvenes y maduras, medio de cultivo Luria, cepas bacterianas (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y Salmonella typhimurium) y como antibiótico se usó cefotaxima. Se realizó un extracto etanólico de hojas maduras y otro de hojas jóvenes. Se utilizó el método de difusión en agar.

CONCLUSIONES

Como resultado de esto se encontró que ambos extractos presentaron actividad antimicrobiana, sin embargo esta fue menor a la producida por el antibiótico, lo cual se demuestra por el tamaño de los halos de inhibición. El antibiótico cefotaxima produjo halos de inhibición de tamaño entre 21 y 30 milimetros. El extracto de hojas jóvenes produjo halos con tamaño entre 9 y 11 mm, y el extracto de hojas maduras produjo halos de entre 11 y 12 mm. Los extractos de C. viminalis presentaron actividad antimicrobiana sobre las bacterias Gram positivas Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus y sobre las bacterias Gram negativas Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhimurium. El extracto de hojas maduras tuvo mayor efecto bactericida, sin embargo ambos extractos tuvieron menos actividad que el antibiótico usado (cefotaxima).

Asesor: Dr. Juan Carlos González Hernández, Instituto Tecnológico de Morelia

CARACTERIZACIóN MOLECULAR DE LEVADURAS OBTENIDAS DE AGUAMIEL DE AGAVE MAPISAGA

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CARACTERIZACIóN MOLECULAR DE LEVADURAS OBTENIDAS DE AGUAMIEL DE AGAVE MAPISAGA

Barragán Franco Damaris Eleonor, Instituto Tecnológico de Morelia. Asesor: Dr. Juan Carlos González Hernández, Instituto Tecnológico de Morelia

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Dentro del amplio universo de los microorganismos, las levaduras juegan desde hace siglos un papel fundamental y muy beneficioso en las relaciones con los seres humanos. Las levaduras han sido usadas durante años como una fuente de proteína de alta calidad en las dietas para animales, de igual manera, algunos de los metabolitos secundarios producidos por la levadura, como las enzimas, minerales, vitaminas y otros nutrientes o factores de crecimiento se pueden utilizar como prebióticos. Los prebióticos son sustancias no digeribles que promueven el crecimiento y la actividad de bacterias beneficiosas para el intestino, su acción tiene lugar en el intestino grueso o colon, donde determinadas especies beneficiosas del microbiota intestinal fermentan dichas sustancias. El estado de Michoacán es de los principales productores de agave en México, lo que lo convierte en un potencial productor de prebióticos, ya que se sabe que las levaduras se encuentran en gran cantidad en los agaves, que son una familia de plantas suculentas (Agavaceae) de América. Dada la amplia importancia de las levaduras y su industrialización, el uso de herramientas de caracterización molecular para aumentar la cantidad y calidad de los productos de levaduras se ha incrementado y popularizado en las industrias. Estas técnicas se basan en la amplificación o análisis por enzimas de restricción de una porción del ADN genómico de levadura y se clasifican de acuerdo a su capacidad de resolución taxonómica para discriminar a nivel inter o intraespecífica.

METODOLOGÍA

Se utilizaron ocho cepas diferentes obtenidas del aguamiel de Agave mapisaga los cuales fueron conservados en glicerol a -80°C (85, 96, 97, 99, 103, 104, 105 y 106) respectivamente; posteriormente se dio comienzo a la activación de los distintos microorganismos alojados en el aguamiel, para lo que se utilizó el medio YPD (Yeast Extract- Peptone- Dextrose) más agar bacteriológico, donde se inocularon los ocho viales en cajas de Petri, y se dejaron incubando 24 horas, posteriormente fueron sometidos a una observación microscópica, para poder determinar la presencia de levaduras. En la mayoría de los cultivos, se hicieron presentes distintitas colonias, de las cuales se fueron aislando únicamente en las que se hacían presentes levaduras, a pesar de eso cuatro cepas seguían contaminadas debido a la presencia de bacterias, por lo que se les aplicó un tratamiento con geneticina (10 mg/mL), lo que permitió conseguir los cultivos totalmente axénicos. Posteriormente, se dio comienzo con su caracterización haciendo tanto un análisis microscópico como un análisis macroscópico, que consiste en ir recaudando información acerca de aspectos morfológicos, respecto a su consistencia, densidad, elevación, tamaño de colonia, color etc. Terminado la observación se comenzó  la extracción de ADN genómico de las ocho cepas siguiendo el método de Sambrook y Rusell (2001), el cual consiste primeramente en inocular las cepas en 5 mL medio YPD líquido en tubos Falcon, y se dejaron inoculando 7-8 horas, después, se recupera la mayor cantidad de biomasa en tubos Eppendorf, se agrega el buffer TSNTE (2% Triton X-100, 1% SDS, 100 mM NaCl, 10 mM Tris HCl con pH de 8, EDTA 1 mM), y se realiza la lisis de las células con perlas de vidrio. Posteriormente, los tubos se centrifugaron a 13000 rpm por 5 minutos y se transfirió a tubos nuevos la interfase formada. Después el ADN fue purificado con dos lavados de etanol al 100% y al 70%. Para finalizar, los sedimentos de ADN se resuspenden en 50L de agua libre de nucleasas estéril y con 2.5 L RNasa A (10 mg/mL) y se dejaron incubar a 37° C durante 5 minutos. Posteriormente, la calidad del ADN obtenido se analizó mediante electroforesis con un gel de agarosa al 0.5% en TAE 1X con bromuro de etidio. La electroforesis se llevó acabo en 45 minutos a 90 V. Las imágenes fueron captadas al exponer los geles a transiluminador de UV en fotodocumentador con cámara CCD acoplada y analizadas con el software Gel Doc XR (Bio Rad Laboratorios Limited, Hemel Hempstead, UK). 

CONCLUSIONES

Durante la estancia se logró adquirir conocimientos teóricos, pero sobre todo prácticos respecto a lo que es la biología molecular y lo que implica una caracterización molecular. Con los resultados obtenidos hasta ahora, se observa que al menos 4 de las levaduras a caracterizar (85, 96, 105 y 106), son muy similares respecto al análisis macroscópico, ya que su consistencia, homogeneidad, elevación, textura de las colonias, forma y color son casi idénticas; sin mencionar que en el análisis microscópico presentaron forma, movilidad y tamaño celular muy similar. En general, en todas las cepas analizadas (85, 96, 97, 99, 103, 104, 105 y106) se encontraron levaduras, ya que en todas se observaron la forma y el tamaño prescrito para una levadura, así como también se observó la gemación, que es su forma de reproducción.

Asesor: Dr. Katy Juarez Lopez, Universidad Nacional Autónoma de México

REDUCCIÓN DE SE (VI) A SE (0) Y FORMACIÓN DE NANOPARTÍCULAS DE SELENIO POR LA BACTERIA SHEWANELLA SP.

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REDUCCIÓN DE SE (VI) A SE (0) Y FORMACIÓN DE NANOPARTÍCULAS DE SELENIO POR LA BACTERIA SHEWANELLA SP.

Barrera Cervantes Rubi, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Katy Juarez Lopez, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El selenio es considerado un micronutriente esencial para el ser humano, de este elemento dependen una serie de reacciones químicas vitales para la mayoría de organismos (Papaqui, 2018).  Sin embargo, es considerado nocivo para el ambiente y seres vivos cuando se encuentra en altas concentraciones. Se0 y SeO2 son liberados a la atmósfera, particularmente, en actividades como la minería, incineración de caucho, papel y residuos (Hodges et al., 1995; Oberdörster, Oberdörster & Oberdörster, 2005; Rica, 2013). La liberación de Se6+  y Se4+  son generados por actividad agrícola y la industria petrolera (Tastet, Schaumlöffel & Lobinski, 2008). Tanto el selenato como el selenito, son considerados las formas oxidadas de selenio más peligrosas, esto debido a su alta solubilidad y biodisponibilidad (Papaqui, 2018).                Se han descubierto diversos microorganismos que poseen la capacidad de reducir oxoaniones de selenio. Como ejemplo existen bacterias de algunos géneros, entre ellos Shewanella, que tienen la capacidad de respirar Se6+,4+ y reducirlo hasta su forma elemental (Se0) de acuerdo a Roux et al., (2001) y Lee et al., (2007). En este trabajo se analizará la capacidad de resistencia y reducción de selenio de una cepa aislada a partir de sedimentos provenientes de jales mineros El Fraile, localizados en el área de  Taxco de Alarcón, Guerrero. Dicha cepa fue identificada por 16s DNA  ribosomal como Shewanella sp.

METODOLOGÍA

Crecimiento de Shewanella sp. en medio NBF-L en condiciones anaerobias a diferentes concentraciones de Na2SeO4 Reactivos sólidos y líquidos empleados para la elaboración del medio NBF-L fueron pesados y medidos. El medio preparado fue gaseado en una estación de intercambio gaseoso. Posteriormente fueron sellados y esterilizados. A los medios de cultivo se adicionó Na2SeO4 (2M) para obtener una concentración final de 50, 100 y 200 mM. La inoculación del medio NBF-L se efectuó a partir de un cultivo de Shewanella sp. De cada cultivo se extrajo una muestra para medir su absorbancia inicial. Luego de esto, fueron puestos a incubar para medir su absorbancia cada 24 h. En otro ensayo con medio NBF-L anaerobio se adicionó extracto de levadura (E. L.) al 5% y Na2SeO4 (2 M) anaerobio con inóculo de Shewanella sp. De estos cultivos, se extrajeron muestras para medir absorbancia. Fueron puestos a incubar para monitorear absorbancia cada 24 h. Crecimiento de Shewanella sp. en medio LB líquido en condiciones aerobias a diferentes concentraciones de Na2SeO4 Un stock de Na2SeO4 (2 M) fue preparado y esterilizado por filtración. En seguida, tubos de ensayo fueron esterilizados en autoclave. En los tubos ya esterilizados se preparó medio de cultivo LB líquido a 50, 100 y 200 mM de Na2SeO4 y se inocularon con Shewanella sp. Se midió la absorbancia de los cultivos y se incubaron para medir absorbancia cada hora. En otro ensayo se prepararon medios de cultivo LB líquido con Na2SeO4 para obtener concentraciones de 300, 400 y 500 mM y se inocularon con Shewanella sp. La absorbancia de los cultivos fue medida. Se llevaron a incubar para monitorear su crecimiento cada hora. El ensayo de Shewanella sp. fue repetido a 500 mM de Na2SeO4 y su absorbancia inicial fue medida. Fueron puestos a incubar para monitorear su crecimiento cada hora. Cultivo de Shewanella sp. en medio LB-agar a 200 mM de Na2SeO4  Fue preparada una mezcla de Na2SeO4 y LB- agar fundido, misma que se vertió en caja de Petri. El medio fue inoculado usando un cultivo fresco de Shewanella sp. en LB-agar. La caja fue puesta en incubación durante 72 h. Para la observación en TEM se tomó  una muestra del cultivo y se resuspendió en medio LB líquido siguiendo con su centrifugación del. El pellet generado fue usado para verse directamente. Preparación de muestra de Shewanella sp. 500 mM de Na2SeO4 para observación a TEM y STEM: Los cultivos de Shewanella sp. crecidos a 500 mM de Na2SeO4 fueron cosechados por centrifugación. Uno de los pellets fue dejado sin procesar para observar directamente. Los pellets restantes sin sobrenadante fueron suspendidos en glutaraldehído y PBS e incubados en hielo. Posteriormente el pellet fue centrifugado y el sobrenadante fue retirado, el pellet obtenido fue suspendido en PBS y puesto a incubar en hielo. El proceso de centrifugado, retiro de sobrenadante y suspensión fue repetido empleando etanol. El paquete celular precipitado fue embebido en resina para realizar cortes de muestra, los cuales fueron observados en microscopio electrónico de transmisión (por sus siglas en inglés TEM).

CONCLUSIONES

Shewanella sp, tiene la capacidad de tolerar 500 mM de Na2SeO4 en cultivos aerobios y generar partículas esféricas de selenio y tamaños nanométricos. Esto sucede a concentraciones de selenio muy altas. La reducción de selenio se efectúa en 24 h aproximadamente. Sin embargo, también se ha observado reducción de selenio a concentraciones de 200 mM, aunque las partículas no son tan definidas como en las de concentración a 500 mM. A su vez, se observó que el proceso de reducción requiere de condiciones específicas de medio de cultivo. La prueba realizada con medio NBF-L a 50, 100 y 200 mM de selenio, no generó el crecimiento de la cepa esperado, por ende, tampoco la síntesis de selenio, incluso adicionando extracto de levadura. Esto hace del medio LB la mejor opción de medio de cultivo para el crecimiento de la cepa y el proceso de reducción de selenio. Los análisis de cortes de muestra de Shewanella sp. a 500 mM muestran nanopartículas de selenio en el interior de las células. Sugiriendo que la reducción se efectúa intracelularmente con posterior excreción al exterior a través de un exopolisacárido. Se espera que los posteriores análisis de STEM verifiquen la naturaleza de las partículas formadas.

Asesor: Dr. Leticia Casas Godoy, Centro de Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco, A.C. (CONACYT)

REVALORIZACIóN DEL RESIDUO DE LA INDUSTRIA CERVECERA

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REVALORIZACIóN DEL RESIDUO DE LA INDUSTRIA CERVECERA

Barrera Martínez Araceli, Instituto Tecnológico de Acapulco. Molina Guzmán Bertha Montserrat, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Leticia Casas Godoy, Centro de Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco, A.C. (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

 La cerveza es una de las bebidas alcohólicas más consumidas en todo el mundo, con una producción mundial anual estimada de 39 millones de toneladas (Lynch, et al., 2016). Esta industria utiliza como principal materia prima en su proceso cebada malteada, la cual es sometida a un proceso de cocción y maceración del que resulta el mosto cervecero, licor que luego continúa hacia la etapa de fermentación para la elaboración de la cerveza. En este proceso se producen cantidades importantes de residuo insoluble, conocido localmente como bagazo cervecero e internacionalmente como Brewer’s spent grain (BSG) (Lynch, et al., 2016).  Actualmente, el destino más común dado por la industria para este subproducto es su disposición para alimentación animal, a pesar de ser una buena fuente de fibra, particularmente la insoluble (Buffington, 2014). El bagazo de cervecería es un material de alto valor, que contiene hemicelulosa, lignina y alto contenido de proteína (Fillaudeau, et al., 2006), monosacáridos de xilosa, glucosa y arabinosa, minerales y aminoácidos (Mussatto, 2009). La gestión ambiental de los residuos tiene costo para todas las empresas. .  Es por eso que el objetivo de este proyecto fue revalorizar los residuos de la industria cervecera como medio de cultivo para el crecimiento de levaduras. .

METODOLOGÍA

Para el desarrollo de este proyecto se llevó a cabo la prodcción del jarabe, en el cual se utilizó el residuo de malta. 1. Se pesó el residuo de malta y se agregó lo suficiente de agua destilada para tuvieran una buena agitación. 2. Se colocó en matraces para su agitación, la cual duro dos horas. 3.Posterior a las dos horas se filtró. 4. Una vez filtrada, se cuantificarón los azucares reductores por medio de la tecnica DNS. Se prepararón cuatro medios: Medio control, medio jarabe, Medio jarabe más una fuente de nitrógeno y Medio Jarabe con dos fuentes de nitrógeno. Para la producción de biomasa: 1. Se reactivarón las cepas. (Levadura 1 que fue la comercial, levadura 2 la cual fue la pigmentadaya y levadura 3 la no convencional) 2.Se realizó un precultivo. 3. Se inocularon en los cuatro medios. 4. Se mantuvo en incubación y agitación. 5. Se tomarón muestras a 24, 48 y 72 horas. Se utilizó la técnica de peso seco, en donde se pesarón los micro tubos, se lavó la biomasa, posterior a eso, se dejó secar en el horno, por 48 horas, y se pesarón los micro tubos con la biomasa, se realizarón los calculós y se analizarón los resultados.

CONCLUSIONES

El crecimiento de las cepas en el medio control comparado con los medios elaborados apartir del jarabe del residuo de malta, demostrarón que dicho medio puede implementarse satisfactoriamente en el cultivo de levaduras, lo que permite la reutilización de los residuos de la industria cervecera. La revalorización de estos residuos representa una estrategia competitiva que abre la puerta a nuevas posibilidades de negocios.

Asesor: Dr. Martha Legorreta Herrera, Universidad Nacional Autónoma de México

ESTANDARIZACIÓN DE AMPLIFICACIÓN DE IFN GAMMA

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ESTANDARIZACIÓN DE AMPLIFICACIÓN DE IFN GAMMA

Barreras Sánchez Saúl Ramón, Universidad Autónoma de Occidente. Asesor: Dr. Martha Legorreta Herrera, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La malaria es un problema mundial de salud por el número de muerte y casos al año en diferentes países del mundo. Es transmitido por la picadura del mosquito Anopheles hembra. Durante décadas se busca erradicar esta enfermedad a través de medidas de saneamiento básico y control del mosquito vector; sin embargo, múltiples problemas de orden técnico, socioeconómico y político han impedido el éxito de los programas de erradicación. Un factor protector importante es la producción temprana de IFN-γ  que es una citocina pro-inflamatoria, es producida por macrófagos y linfocitos T en respuesta al estímulo antigénico que actúa sinérgicamente a través de sus receptores específicos sobre células T y NK. Esta citocina se puede cuantificar con la técnica PCR tiempo real, esta requiere una calibración. El objetivo de este proyecto es realizar la estandarización de la técnica por PCR punto final.

METODOLOGÍA

Se utilizaron diferentes controles en la técnica (Bazo, cerebro y sangre), partiendo desde estos, se preparó una mezcla de reacción con los siguientes reactivos: H2O, amortiguador de PCR, MgCl2, DMSO, ROX, Primer FW, Primer RV, Sonda TaqMan, Taq y el DNAc. Los volúmenes de estos reactivos se calcularon por el número de reacciones que se utilizarían en la técnica para amplificar el gen de interés. Toda la mezcla se añadió a un tubo Eppendorf. También se usó un control negativo el cual no contenía muestra, solo la mezcla de reacción. Los tubos eppendorf se colocaron en el Termociclador y se usó un programa de ciclaje específico con las temperaturas ideales de desnaturalización, hibridación y elongación del gen. Para la estandarización de la técnica de PCR punto final, se tomaron en cuenta diferentes condiciones que hicieran que fuera más específica y exacta. Para ello fue necesario: generar un control positivo, se trabajaron diferentes concentraciones de magnesio y un gradiente de temperatura.

CONCLUSIONES

En el tiempo transcurrido de la estancia no se ha logrado calibrar la técnica. Se logró la amplificación de la banda esperada, sin embargo, la amplificación no fue única debido a que la sonda reconoció la región del ADN genómico al igual que el ARN mensajero. Se propone utilizar nuevos controles o tratar con DNAsa los ARN obtenidos para evitar esta interferencia.

Asesor: Dr. Zaira del Rocío López López, Universidad de Guadalajara

MéTODO DE CRIOPRESERVACIóN PARA PARAMECIUM CAUDATUM

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MéTODO DE CRIOPRESERVACIóN PARA PARAMECIUM CAUDATUM

Barreto Rodríguez Cruz Elena, Universidad de Colima. Asesor: Dr. Zaira del Rocío López López, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Paramecium es un organismo eucariótico unicelular ciliado, que lleva a cabo todas las funciones normales que se requieren para sostener y propagar la vida, en las que se incluyen el crecimiento, el metabolismo y la reproducción (Görtz, 1988). Se caracteriza por soportar un amplio rango de temperaturas y por no requerir nutrientes especiales. Mantenerlos con vida es muy sencillo, sólo necesitan un medio rico pero el cambio de este debe ser constante, por lo que es necesario encontrar una técnica que permita conservarlos por un tiempo prolongado. Es por eso que en el presente trabajo se implementó un método para la criopreservación de Paramecium ya que esta tiene como objetivo el mantenimiento de la viabilidad y funcionabilidad celular a bajas temperaturas (Mábel Ávila-Portillo et al., 2006). La criopreservación no es un concepto nuevo en ciencias biológicas y para la mayoría de los protocolos implica un enfriamiento controlado de la biota a temperaturas de congelación para lograr un cese biológico y preservar la viabilidad (Coy, Alsante, Van Etten, & Wilhelm, 2019). Sin embargo, aunque desde hace mucho tiempo se han implementado protocolos para, estos son aún subóptimos en la mayoría de los casos (Mábel Ávila-Portillo et al., 2006). Existen muchos factores que afectan la crioconservación exitosa de las células, algunos de estos pueden ser, en primera instancia, el tipo de célula, tamaño, fase de crecimiento celular, el contenido de agua celular, el contenido de lípidos y la composición. En segundo lugar, puede depender de la composición del medio de congelación, la velocidad de enfriamiento, la temperatura de almacenamiento, la duración del almacenamiento y la velocidad de calentamiento y el medio de recuperación (Chian & Quinn, 2010). Aunque ocasionalmente se ha observado una buena tasa de supervivencia de células congeladas sin un agente protector, un crioprotector adecuado suele aumentar la tasa de supervivencia (Chian & Quinn, 2010). Los crioprotectores son sustancias hidrosolubles de baja toxicidad de los cuales se pueden distinguir tres tipos, los alcoholes, azúcares y el dimetilsulfóxido, y a su vez, pueden clasificarse también en agentes penetrantes y no penetrantes de acuerdo a la permeabilidad celular (Mábel Ávila-Portillo et al., 2006). Hoy en día, los crioprotectores más utilizados son glicerol, dimetilsulfóxido, etilenglicol y propilenglicol. Cabe destacar que la acción crioprotectora de cada tipo de agente crioprotector debe ser similar, pero aunque se han propuesto muchas hipótesis para explicar su mecanismo de acción, aún no está claro qué papel desempeñan realmente en las soluciones de congelación (Chian & Quinn, 2010).

METODOLOGÍA

Se cultivó una cepa de Paramecium caudatum en medio rico de leche por cuatro días hasta que se obtuvo una concentración de 50 - 60 paramecios por cada 10 µL analizados. Después de obtener esta concentración, se centrifugaron los paramecios a 4500 rpm a 10 °C por 10 minutos, el pelet obtenido se resuspendió en un medio pobre de stigmasterol por tres días. Pasados los tres días, se centrifugaron los paramecios en las condiciones antes descritas, pero en esta ocasión el pelet de paramecios se resuspendió en 3 mL de una solución de stigmasterol con biotina en una concentración de 1 mg/L y BSA al 3%. Posteriormente, se preparó la solución crioprotectora en medio pobre (stigmasterol) y con una concentración de vitaminas de 1 mg/mL, DMSO al 15% y BSA al 3%. Para iniciar el proceso de criopreservación, en un tubo eppendorf se mezclaron 500 µL de paramecios en medio de stigmasterol + Biotina + BSA y 500 µL de la solución crioprotectora y en seguida se llevó al congelador. Pasada una semana se retiró el tubo eppendorf del congelador y después de dos minutos a temperatura ambiente se centrifugó el vial a 10,000 rpm por 10 min a 10°C, rápidamente se retiró el sobrenadante y el pelet resultante se resuspendió en 10 mL del medio de Stigmasterol + BSA + Biotina. Después de la crioconservación el proceso de centrifugación y cambio de medio se llevó a cabo cada 4 días. El desarrollo de los paramecios después del congelamiento se observó en un estereoscopio.

CONCLUSIONES

El método propuesto de criopreservación de Paramecium caudatum se considera exitoso porque se logró una recuperación parcial de paramecios después de un tiempo prolongado de congelación.

Asesor: Dr. Gloria Pérez Rubio, Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias Ismael Cosío Villegas

ESTANDARIZACIÓN Y MEDICIÓN DE RNAM DE CHRNA5 EN MUESTRAS DE ESPUTO INDUCIDO

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ESTANDARIZACIÓN Y MEDICIÓN DE RNAM DE CHRNA5 EN MUESTRAS DE ESPUTO INDUCIDO

Bastida Pote Alexander, Universidad de Ixtlahuaca. Asesor: Dr. Gloria Pérez Rubio, Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias Ismael Cosío Villegas

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El gen CHRNA5 codifica para una subunidad que forma parte de los receptores colinérgicos muscarínicos; ubicados en el músculo liso de la vía aérea, son los encargados de producir el efecto parasimpático de broncoconstricción (Abad, 2003), la nicotina activa a estos receptores afectando su expresión (Jiang, 2019). Existe fuerte evidencia de que, la expresión de este gen a nivel pulmonar se asocia a mayor riesgo de padecer cáncer de pulmón o enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC). (Brenna,2010). A nivel genético, existen polimorfismos en CHRNA5 asociados a EPOC, sin embargo, se desconoce la afectación de su expresión en EPOC secundaria a humo proveniente de la quema de biomasa.

METODOLOGÍA

Se realizó la toma de muestras de esputo inducido siguiendo las guías de la Sociedad Respiratoria Europea (ERS) previa firma del consentimiento informado, posteriormente el esputo se disgrego por acción mecánica, y se separó el componente celular del sobrenadante. A partir de las células se efectuó la extracción de RNA utilizando el kit de la marca FAVORGEN Biotech Corp® tratando las muestras como lo indica el proveedor para células animales, seguido se llevo a cabo la cuantificación del RNA obtenido mediante espectrofotometría en un equipo NANODROP 2000 de la marca Thermo SCIENTIFIC. Se utilizo el kit ReverAid First Strand cDNA Synthesis para la conversión de RNA a cDNA. El control de amplificación se realizó mediante PCR punto final probando las sondas proporcionadas por el proveedor (GAPDH, producto de 496 pb) y finalmente se realizó electroforesis empleado gel de agarosa al 1%. Se realizo PCR en tiempo real empleando la modalidad de expresión relativa cuantitativa en un equipo StepOnePlus empleando GAPDH como control endógeno.

CONCLUSIONES

Se incluyeron 3 casos con EPOC, 5 expuestos al humo de biomasa sin enfermedad y 8 controles sin exposición a biomasa. Para realizar la amplificación de GAPDH, la concentración mínima de cDNA debía ser 1 ng/µL, el 100% de las muestras obtenidas tenía al menos 6.6 ng/µL, y contaban con pureza óptima (cociente 260/280 entre 1.7-2.0). En la evaluación cuantitativa, se obtuvo lectura para el gen endógeno, sin embargo, no obtuvimos lectura para el gen problema (CHRNA5). Se logró estandarizar la obtención de cDNA de buena calidad y concentración para realizar ensayos de expresión, sin embargo, en la muestra de esputo inducido no fue posible cuantificar CHRNA5.

Asesor: M.C. Ruben Hernandez Morales, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE TALOS DE GRACILARIA CERVICORNIS (RHODOPHYTA) PROVENIENTES DEL SISTEMA ARRECIFAL VERACRUZANO EN EL GOLFO DE MÉXICO Y ULVA LACTUCA (CHLOROPHYTA) DE LAS COSTAS DE MICHOACÁN, MÉXICO.

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EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE TALOS DE GRACILARIA CERVICORNIS (RHODOPHYTA) PROVENIENTES DEL SISTEMA ARRECIFAL VERACRUZANO EN EL GOLFO DE MÉXICO Y ULVA LACTUCA (CHLOROPHYTA) DE LAS COSTAS DE MICHOACÁN, MÉXICO.

Bautista Aguilar Miriam Lizbeth, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: M.C. Ruben Hernandez Morales, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Estudios relacionados a la patogenicidad de bacterias en afecciones a la salud humana exhiben que al inicio del XXI se han detonado nuevas enfermedades provocadas por microorganismos patógenos, los cuales en su mayoría han mutado, manifestando resistencia a antibióticos comerciales, por lo cual la industria farmacéutica se ha enfocado a la búsqueda de nuevos compuestos bactericidas, además de mejorar los ya existentes con fórmulas de primera, segunda y tercera generación. En éste contexto se ha documentado que las macroalgas marinas son una fuente de compuestos bioactivos disponible, con actividad antimicrobiana de respuesta favorable. Sin embargo la cantidad y calidad de dichos compuestos está asociada a variaciones interespecíficas, geográficas, a condiciones temporales e incluso a adaptaciones locales incluyendo a las asociaciones biológicas. Por lo cual, la presente investigación tiene como objetivo determinar si dos especies de macroalgas provenientes del pacífico mexicano y el golfo de México presentan actividad antimicrobiana y con ello determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) de los extractos que presentaron inhibición del crecimiento bacteriano en tratamientos de sensibilidad a compuestos con potencial bactericida.

METODOLOGÍA

Se recolectaron talos de macroalgas marinas de la playa de Carrizalillo en la costa de Michoacán, México, correspondientes al género Ulva, así como talos macrófitos del arrecife Hornos, en el sistema arrecifal veracruzano en el Golfo de México, correspondientes al género Gracilaria. En campo se efectuó una limpieza para remover residuos (epifitas, materia orgánica y macroinvertebrados) y posteriormente una línea de talos fue fijada con agua marina formolada para el análisis taxonómico, mientras que el resto de los talos fue transportado en hielo para el análisis bioquímico. En laboratorio los talos macrófitos con agua formolada fueron liqueados, para evitar el colapso celular, y se determinaron a nivel específico con literatura especializada. En cuanto al material transportado a punto de congelación, fue sometido a una limpieza exhaustiva con agua de mar y posteriormente se sometió a desecación por convección a una temperatura de 50 °C, hasta sequedad en un periodo de 24 a 48 horas. Posteriormente se trituro hasta obtener un polvo con el cual se efectuó la extracción por medio de dos métodos; un etanólico y un cetónico. La extracción se efectuó en dos contenedores, con diferente solvente, en el primero se utilizó etanol y en el segundo se trabajó con acetona durante 4 días (96 horas). Transcurrido este tiempo los extractos se filtraron a vacío con filtros GF/A y se concentraron por destilación. Posteriormente se evaluó el rendimiento del extracto de cada macroalga por medio de gravimetría, obteniendo la cantidad en µg/L de los compuestos del alga. Para los ensayos con bacterias, se obtuvieron seis sepas provenientes de un humedal adjunto al Lago de Pátzcuaro, de las cuales cuatro se determinaron a nivel específico y genérico con el auxilio de pruebas bioquímicas y pruebas de sensibilidad a antibióticos, correspondiendo a los siguientes géneros y especies: Arthrobacter sp., Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, Enterobacter aerogenes. En la implementación de tratamientos se efectuaron cinco diluciones en Ulva lactuca; 3 diluciones distintas en extracto etanólico y 2 diluciones más en extracto cetónico, mientras que en Gracilaria cervicornis no se realizó ninguna dilución debido al rendimiento del extracto. La implementación de los tratamientos de sensibilidad a los compuestos bioactivos de macroalgas marinas, se efectuó utilizando agar Mueller Hinton y discos estériles, embebidos con las diluciones del extracto del alga, o bien del extracto directo, los cuales fueron expuestos a las cuatro bacterias distintas aisladas e identificadas en la presente investigación.

CONCLUSIONES

Se obtuvieron seis cepas de bacterias patógenas del hombre y de vegetales, de las cuales cuatro fueron purificadas, correspondiendo una a la familia Micrococcaceae del grupo de las gram +, patógena de vegetales: el género Arthrobacter, mientras que las otras tres corresponden al grupo de las gram -, dentro de la familia Enterobacteriaceae: Escherichia coli, Enterobacter aerogenes y Klebsiella oxytoca. Se obtuvo un rendimiento de 2.21 mg/mL de Gracilaria cervicornis en extracto etanólico, mientras que de Ulva lactuca se obtuvo un rendimiento de 22.57 mg/mL en extracto cetónico y 24.88 mg/mL en extracto etanólico. En los tratamientos de sensibilidad de compuestos bioactivos al crecimiento bacteriano (antibiogramas), se pudo observar un halo de inhibición del extracto etanólico de Gracilaria cervicornis en las cepas de Enterobacter aerogenes y Klebsiella oxytoca de hasta 9 mm, mientras que el extracto etanólico de Ulva lactuca inhibió el crecimiento de Arthrobacter, Escherichia coli, Enterobacter aerogenes y Klebsiella oxytoca con un halo de 15 mm, mientras que el extracto cetónico de Ulva lactuca inhibió el crecimiento bacteriano de Klebsiella oxytoca y Enterobacter aerogenes con halos de inhibición de 7 mm.

Asesor: Dr. Ali Margot Huerta Flores, Universidad Autónoma de Nuevo León

PREPARACIóN DE PELíCULAS DELGADAS DE WO3 PURO Y DOPADO (FE, CU Y BI) Y SU EVALUACIóN FOTOELECTROQUíMICA.

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PREPARACIóN DE PELíCULAS DELGADAS DE WO3 PURO Y DOPADO (FE, CU Y BI) Y SU EVALUACIóN FOTOELECTROQUíMICA.

Becerra Quintana Rubén Darío, Universidad de Pamplona (Colombia). Asesor: Dr. Ali Margot Huerta Flores, Universidad Autónoma de Nuevo León

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La búsqueda de soluciones a los problemas energéticos existentes, ha llevado a la creación de nuevos materiales que mejoren o produzcan combustibles limpios, como es el caso de compuestos tipo óxidos los cuales tienen propiedades fotocatalíticas y fotoelectroquímicas, como ZnO, TiO2, y WO3. En este trabajo se prepararon y se caracterizaron películas delgadas de WO3 y con los respectivos dopajes, WO3-Fe, WO3-Cu, WO3-Bi, WO3-FeCu, WO3-FeBi, WO3-CuBi y WO3-FeCuBi a los cuales se les evaluó sus propiedades fotoelectroquímicas mediante Espectroscopia de Impedancia Electroquímica (EIS).    

METODOLOGÍA

Se prepararon 8 diferentes películas mediante la metodología sol-gel y utilizando el sistema de depósito spin-coater: WO3, WO3-Fe, WO3-Cu, WO3-Bi, WO3-FeCu, WO3-FeBi, WO3-CuBi y WO3-FeCuBi. Las propiedades estructurales, morfológicas, ópticas y eléctricas de los materiales se estudiaron mediante las técnicas de Difracción de Rayos X (DRX), Microscopia electrónica de barrido (SEM), Espectroscopía de Ultravioleta Visible (UV-Vis) y Espectroscopia de Impedancia Electroquímica (EIS). La actividad de los materiales desarrollados se evaluó en reactores fotocatalíticos y fotoelectroquímicos.

CONCLUSIONES

Se logró la obtención de las fases puras de WO3 en las películas monocapa y en las heteroestructuras, lo cual se corroboró mediante DRX. Los análisis morfológicos confirmaron la homogeneidad de las partículas depositadas sobre los sustratos de ITO, así también, mediante el análisis EDS se corroboró la composición de las películas. A través de UV-Vis, se determinó el band gap (energía de banda prohibida) de los materiales, y los análisis electroquímicos permitieron determinar el tipo de conductividad de los materiales (n o p), así como el flat band potential y la densidad de donadores de los materiales. Finalmente, se determinó la actividad de los materiales para la producción fotocatalítica y fotoelectroquímica de hidrógeno, obteniendo hasta 4178,8 mmol g-1h-1, donde el material dopado con Fe exhibió una actividad 31 veces mayor 0,45mA/cm2 comparada con WO3 puro 0,01341mA/cm2 en monocapa. Esta actividad es competitiva comparada a diferentes películas reportadas en literatura.

Asesor: Dr. Rodrigo Erick Escartín Pérez, Universidad Nacional Autónoma de México

EVALUACIóN DE LOS EFECTOS DE LA ACTIVACIóN DE LOS RECEPTORES CB2 DEL NúCLEO ACCUMBENS EN LA INGESTIóN DE UNA DIETA PALATABLE

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EVALUACIóN DE LOS EFECTOS DE LA ACTIVACIóN DE LOS RECEPTORES CB2 DEL NúCLEO ACCUMBENS EN LA INGESTIóN DE UNA DIETA PALATABLE

Aké Ortíz Melinna Itzel, Consejo Quintanarroense de Ciencia y Tecnología. Bejarano Ponce Juan Pablo, Universidad de Colima. Asesor: Dr. Rodrigo Erick Escartín Pérez, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La conducta alimentaria, así como otros procesos fisiológicos que lleva a cabo el organismo están altamente regulados por señales periféricas y centrales, mediante la liberación de neurotransmisores y péptidos. El hipotálamo tiene, entre otras, la función de la regulación homeostática mediante la estimulación o inhibición de la ingesta de alimento y el gasto energético, mientras que el núcleo accumbens es parte del circuito de la recompensa que permite que los estímulos como el alimento tengan propiedades reforzantes y/o hedónicas (Cortés-Salazar et al., 2012). El desequilibrio de los mecanismos reguladores puede llevar a conductas alimentarias inadecuadas, algunas de ellas, relacionadas con la génesis de la obesidad. Debido a que la obesidad es un factor de riesgo para el desarrollo de enfermedades no transmisibles como la Diabetes Mellitus, trastornos del aparato locomotor, enfermedades cardiovasculares, entre otras más (OMS, 2018), el estudio de los factores que favorecen su ocurrencia es de gran relevancia. Actualmente, se considera que el sistema endocannabinoide está involucrado en la regulación neuronal y existen receptores a estas moléculas en el núcleo paraventricular, en el área hipotalámica lateral, el núcleo ventromedial y el núcleo accumbens (entre otras), afectando así la modulación de la ingesta de alimento y el gasto energético (Cortés-Salazar et al., 2012). Se sugiere que los cannabinoides modifican el comportamiento alimentario mediante la modulación de la homeostasis de la energía y el sistema de recompensa (Gardner et al., 2005). Específicamente el receptor CB2 se encuentra localizado de manera diferente al CB1R, expresándose mayoritariamente en la periferia, como el sistema hematopoyético y el sistema inmunitario, no obstante, estudios más recientes han demostrado que también puede ser encontrado en el sistema nervioso central (Cortés-Salazar et al., 2012).  Considerando en conjunto la evidencia descrita, y dado que los receptores  a cannabinoindes CB2 se expresan en el núcleo accumbens, es posible que estos contribuyan con la regulación de la ingesta de alimento palatable en la condición en la que el alimento se consume por sus propiedades hedónicas. Así, el propósito de este estudio es evaluar el efecto de la activación del receptor CB2 de la corteza del núcleo accumbens sobre la ingestión de leche condensada con sacarosa al 10% en ratas presaciadas.

METODOLOGÍA

Se utilizaron 7 ratas Wistar macho con un peso entre los 270-310 g al inicio. Cada animal fue colocado en una caja individual, en un cuarto con una temperatura de 21±1°C y un ciclo de luz-oscuridad 12x12 horas, contaron con una alimentación ad libitum (libre acceso a alimento estándar y agua) previo a las sesiones de habituación a la dieta palatable (leche condensada con sacarosa al 10%). Se realizó la cirugía estereotáxica, donde las ratas fueron canuladas unilateralmente en el núcleo accumbens con las siguientes coordenadas, -0.6 lateromedial, +1.5 anteroposterior y -6.0 dorsoventral con respecto a bregma (Paxinos y Watson, 1998). Tuvieron un periodo de recuperación quirúrgica (4 días) y posteriormente fueron adaptadas a un paradigma alimentario, el cual consistió en la privación del alimento estándar por 22 horas, posteriormente se otorgó acceso al alimento estándar por una hora y finalmente se daba acceso a un alimento altamente palatable durante una hora (leche condensada con sacarosa al 10%), el consumo de ambas dietas fue cuantificado. En el momento en el cual los animales presentaron menos del 20% de variación en el consumo de alimento estándar o la dieta palatable, se comenzó con las administraciones farmacológicas. Se formaron dos grupos de manera aleatoria, el grupo 1 recibió 0.5 µL de solución salina a 0.2 µL/min, mientras que el grupo 2, fue administrado con un mismo volumen, pero con diferentes concentraciones del agonista de CB2R (0.125, 0.25 y 0.5 nmol en sesiones diferentes separadas por 2 días entre inyecciones). Cabe destacar que la manipulación farmacológica se realizó después del periodo de ingesta de alimento estándar. Al finalizar el experimento, los animales serán sacrificados con una dosis letal de Pentobarbital Sódico, se extraerá el cerebro y se conservará en formaldehído al 10% durante dos días, para después realizar cortes de 300 µm en el plano coronal verificándose el sitio donde la cánula fue colocada. Se excluirán del estudio a los animales que no presentaron una correcta canulación.

CONCLUSIONES

Con el reciente descubrimiento de la expresión del receptor CB2 en el cerebro, se desea conocer el papel que desempeña su activación en el Núcleo Accumbens sobre la conducta alimentaria. Estudios anteriores confirman que el sistema endocannabinoide a través del receptor CB1 regula la conducta alimentaria modificando las propiedades hedónicas de los alimentos (sistema de recompensa) y la modulación de la homeostasis de la energía. Entonces, como el mecanismo transduccional del receptor CB1 es similar al del receptor CB2, se espera que el receptor CB2 estimule el consumo de una dieta palatable en la condición en la que los sujetos consumen la dieta por su palatabilidad y no por el balance energético negativo. BIBLIOGRAFÍA Cortés-Salazar, F., Mancilla-Díaz, J.M., López-Alonso, V. E., Gonzales-Hernández, B.G & Escartín-Pérez, R. E. (2012). Relationship between CB1 receptors in the nucleus accumbens shell and the hedonic value of food. Nova Science Publishers, 5 (1).  Gardner, E. L. (2005). Endocannabinoid signaling system and brain reward: Emphasis on dopamine. Pharmacology, Biochemistry and Behavior, 81(2), 263-284. Organización Mundial de la Salud. (2018). Obesidad y sobrepeso. Disponible en: https://www.who.int/es/news-room/fact-sheets/detail/obesity-and-overweight. Recopilado el 23 de julio de 2019. Paxinos, G. and Watson, Ch. (1998). The brain in stereotaxic coordinates. New York: Academic Press.

Asesor: Dr. Samuel Hernández Anzaldo, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

DETERMINACIóN DEL EFECTO ANTIOXIDANTE DE COMPONENTES DE LA RUTA GRAVEOLENS EN BENCENO Y SU ESTUDIO POR RESONANCIA MAGNéTICA NUCLEAR.

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DETERMINACIóN DEL EFECTO ANTIOXIDANTE DE COMPONENTES DE LA RUTA GRAVEOLENS EN BENCENO Y SU ESTUDIO POR RESONANCIA MAGNéTICA NUCLEAR.

Belmonte Campos Nayeli Anaid, Instituto Tecnológico de Estudios Superiores de Zamora. Asesor: Dr. Samuel Hernández Anzaldo, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La medicina alternativa tiene su auge en la actualidad ya que muchos medicamentos tienen efectos secundarios no deseados lo que puede hacerlos de uso limitado. La búsqueda de alternativas se enfoca en las plantas medicinales y/o productos derivados de ellos. Se sabe que la Ruta Graveolens es reconocida por sus propiedades antioxidantes, pero se desconoce cuáles son los principios activos que le da esta función cómo antioxidantes. Esta investigación tiene como objetivo extraer con diferentes disolventes los compuestos e identificar la afinidad que tiene el benceno con los compuestos de la Ruta Graveolens y relacionarlos con las propiedades biológicas.

METODOLOGÍA

1.REACTIVOS Durante el desarrollo del trabajo experimental se emplearon reactivos adquiridos con las casas distribuidoras de Sigma Merck y se utilizarán sin previa purificación. 2.EQUIPOS UV vis, DU series 7000, Beckman, celdas de cuarzo de 1 cm. HPLC MS. Espectrómetro de  RMN 3.PROCEDIMIENTO 3.1.PREPARACIÓN DE EXTRACTO DE RUTA GRAVEOLENS La planta Ruta Graveolens fue obtenida en el Jardín Botánico de Ciudad Universitaria de la Benemérita Universidad Autónoma de Puebla y la especie fue verificada por el mismo Jardín Botánico. Se cortaron cuidadosamente aproximadamente 3 gramos de hoja de planta y se dejaron secar en una mufla durante 1 día a 100 °C. Posteriormente, se agregaron 20 mL de benceno y se calentó a 70 ° C durante un intervalo de tiempo de 2 hrs. con agitación constante. Como resultado se obtuvo un extracto líquido de benceno más ruda (ERGB) con el que se trabajó posteriormente técnicas de separación. 3.2.ESPECTRO UV VIS Se utilizó el ERGB y se realizaron 3 diluciones de este para medir en el espectro. Cada una con diferentes concentraciones de ERGB cada una También, de las fases A, B y C que se obtuvieron después de la cromatografía por columna se midió la capacidad antioxidante que estas tienen sobre el radical libre DPPH, En el espectro de luz visible se analizaron las muestras A, B y C sin ser diluidas en algún otro compuesto para conocer su absorbancia a una longitud de onda de 515 nm ya que es cuando posteriormente, al agregar cantidades conocidas de A, B y C podremos visualizar y monitorear que el DPPH en su forma de radical libre sufre reducción por un antioxidante.  3.3.ESPECTRO INFRARROJO Para medir la muestra en IR a la pastilla de KBr se le agregaron 25 µL del ERGB. La pastilla necesita ser prensada para asegurar que sea translucida.  El análisis de IR solo es para propósitos cualitativos y compararlo con extractos con otros disolventes.   3.4.TLC La cromatografía es una técnica analítica rápida que permite la separación e identificación de sustancias químicas. La cromatografía en capa fina (TLC) se utilizó para la estandarización del sistema de eluyentes. Las placas cromatográficas que se utilizaron fueron compradas en la empresa Analtech. Con un grosor de 0.01 mm. Los disolventes que se usaron fueron adquiridos en empresas proveedoras de la universidad. El sistema de eluyentes (previamente estandarizado) que se utilizó fue: Éter dietílico/acetonitrilo 111:1 El revelado de las placas fue con UV y visible, y de ser necesario con yodo.   3.5.SEPARACIÓN POR COLUMNA DE CROMATOGRAFIA Para la cromatografía en columna se utilizó una columna vertical de plástico con una fase estacionaria de gel de sílice y una fase móvil de éter/acetonitrilo, en porcentajes de 99.2% y 0.79% respectivamente. El volumen total que se utilizo fue de 200 ml. Esta fase móvil se usó para compactar la sílice y formar la fase estacionaria Se rotularon tubos en donde se recolectaron las diferentes fases El goteo durante la separación era pequeño y constante; el tiempo transcurrido entre el cambio de un tubo y otro fue de 16 min aproximadamente. En total se obtuvieron 9 tubos al término de la separación. De estas 9 muestras se realizó TLC con una fase móvil hexano/acetato en relación 50:50. Con base en el comportamiento revelado en la luz UV de los componentes que contenía cada muestra (1 a la 9), se optó por homogeneizar la 1,2 y 3; 4 y 5; 6, 7 y 8 para obtener al final solo tres fases como resultado de la cromatografía en columna que son A, B y C.     3.6.ENSAYO DEL RADICAL LIBRE CON DPPH Y DETERMINACIÓN DE LA IC50 DPPH es un radical libre estable que se utiliza en el ensayo de atrapadores de radicales libres; este ensayo sirve para la identificación y determinación de la capacidad antioxidante con base en la disminución de color medida a 515 nm. Para conocer el efecto antioxidante de cada fase (A, B y C) que estas tienen sobre el radical libre DPPH se analizaron agregando diferentes cantidades de muestra de 100 en 100 µL en 1 ml de solución de DPPH a una concentración de 30.86. Obteniendo un espectro diferente de cada una. 3.7.ESPECTRO DE RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR (RMN). Las fases A, B y C se pusieron a evaporar en la campana de extracción durante 4 días. Para poder leer las muestras en el espectrómetro de RMN se agregó a los viales que contenían cada una de las fases cloroformo deuterado, se agito y se pasó a los tubos para RMN que previamente fueron lavados. Ya en el espectro se analizaron las 3 fases en RMN de H1  y posteriormente de C13 .  La elección del disolvente se hace dependiendo de la disolución de la muestra, temperatura de los experimentos de RMN y mejor separación de las señales que son de interés. Se utilizó Tetrametilsilano (TMS) y la muestra alcanzo alrededor de 4 cm de altura en el interior del tubo de RMN.

CONCLUSIONES

En la estancia se aplicaron ténicas de separación y purificación de muestras y se elaboró un extracto de Ruta Graveolens con benceno que mediante estas técnicas como la cromatografía TLC y de columna fue posible aislar 3 fases (A. B y C); de estas se determino su capacidad antioxidante a traves del radical libre DPPH y posterioremente con Resonancia Magnetica Nuclear mediante los espectros obtenidos de cada una de proton y C13 se propusieron algunos grupos funcionales y se predijo a que compuesto perteneciente a la planta o extracto puede pertenecer. 

Asesor: Dr. Viviana Matilde Mesa Cornejo, Universidad de Guadalajara

RESPUESTA DE DROSOPHILA MELANOGASTER A SULINDACO

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RESPUESTA DE DROSOPHILA MELANOGASTER A SULINDACO

Belmonte Romo Aldo Emmanuel, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Viviana Matilde Mesa Cornejo, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El sulindaco es un antiinflamatorio no esteroideo que tiene propiedades analgésicas y antipiréticas. Se utiliza en el control del dolor y la inflamación asociados a ciertos tipos de artritis. Su función consiste en bloquear la biosíntesis de prostaglandinas inhibiendo la enzima ciclooxigenasa. Se conocen algunos efectos adversos como ulceras gástricas y en el peor de los casos falla renal. Debido a que la Drosophila melanogaster y los humanos comparten más del 60% de su información genética, el objetivo de este estudio es conocer si el sulindaco ocasiona alteraciones en el ciclo de vida y la decendencia en este organismo.

METODOLOGÍA

 Se prepararon 4 medios de cultivo enriquecidos con levadura, a 3 de ellos se les adicionó 66.66 mg del medicamento y el otro se mantuvo como control. En cada frasco de medio, se sembraron 5 hembras y 5 machos y se mantuvieron a 23 ° C. Se realizó monitoreo diario de temperatura y progreso del ciclo de vida, tomando en cuenta las fechas de aparición de huevos, larvas, pupas y adultos. Al ver las primeras pupas se debe realizar un conteo para tener un número aproximado de moscas nacidas. Al identificar el tercer estadío de pupa se extraen los progenitores para evitar endogamia Se realiza conteo de total de moscas F1 nacidas. Los primeros adultos o F1 se siembran en las mismas condiciones que los medios iniciales y se realizan los mismos monitoreos.

CONCLUSIONES

El ciclo de vida del primer cultivo fue más largo que lo esperado, con un promedio de 33 días. Los cultivos controles en F1 y F2 obtuvieron una mayor cantidad de descendientes contra la descendencia de los cultivos con medicamento. La relación entre machos y hembras en el primer cultivo fue casi de 1:1, tanto en los cultivos con medicamento como en el cultivo control, sin embargo, en los segundos cultivos no fue tan evidente. Como conclusión final, dada la naturaleza del experimento se necesita más tiempo y más generaciones para poder dar una conclusión certera sobre el medicamento ya que estos resultados pudieron variar por el tiempo, el manejo, la contaminación de los frascos, etc.

Asesor: Dr. Dulce Yaahid Flores Renteria, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

EFECTO DEL USO DE SUELO Y LA APLICACIÓN DE NANOPARTÍCULAS EN LA GERMINACIÓN DEL CILANTRO (CORIANDRUM SATIVUM).

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EFECTO DEL USO DE SUELO Y LA APLICACIÓN DE NANOPARTÍCULAS EN LA GERMINACIÓN DEL CILANTRO (CORIANDRUM SATIVUM).

Beltrán Alonso Ana Laura, Instituto Politécnico Nacional. Juarez Salado Jose Manuel, Universidad Autónoma de Guerrero. Santiago Gallegos Gabriela, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Dulce Yaahid Flores Renteria, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El 58% del territorio mexicano pertenece a zonas semiáridas, sin embargo, se encuentran pocos estudios para este tipo de suelo. El cambio de uso de suelo en las zonas áridas y semiáridas del país se ha ido incrementando en las últimas décadas, para cubrir las necesidades humanas, lo que provoca que los suelos pierdan su calidad. Actualmente ha surgido interés en el estudio de los efectos de las nanopartículas, debido a su ubicuidad. Las nanopartículas tienen una dimensión de 100 nm o menos, y un gran número de átomos, lo que permite una mayor superficie por peso y una fuerte adherencia con otras partículas. Existen nanopartículas que se producen naturalmente por cenizas volcánicas, pulverizaciones del océano y tormentas de polvo. Pero también existen nanopartículas producidas artificialmente a partir de metales como el cobre, oro, silicio y titanio, entre otros. Muchos de los procesos actuales presentan la formación secundaria de nanopartículas y sus efectos en el ambiente y en los cultivos, sigue siendo investigado. Existen pocos estudios del efecto del cambio de uso de suelo en interacción con las nanopartículas, por tal motivo surge el interés de indagar los efectos que pueden presentarse si existe algún efecto de diferentes usos de suelo, y la presencia de óxido de hierro en la germinación del cilantro (Coriandrum sativum), en este caso se estudiaron tres usos de suelo: conservado, huerto y parcela agrícola.

METODOLOGÍA

Para esta Investigación se utilizaron suelos de tres usos diferentes: conservados, huerto y agrícola, con tres sitios cada uno, recolectados en la localidad San Isidro de Gómez, General Cepeda, Coahuila. El suelo fue tamizado con una malla de 2 mm para retirar materia vegetal y rocas. Cada tipo de suelo se mezcló con perlita expandida 1:1 (v/v). Para la plantación de las semillas de cilantro se prepararon bolsas con capacidad de 500 g, a las cuales se le realizaron  4 perforaciones en el fondo, para facilitar el filtrado del agua. Posteriormente se agregaron 400 g de mezcla de suelo a cada bolsa, se regó el suelo a capacidad de campo y se dejó en reposo durante 72 horas. Utilizando un diseño factorial se obtuvieron 120 bolsas con sustrato, 40 para cada tipo de suelo, a la mitad de estas réplicas se les aplicaron nanopartículas. Para poder agregar las nanoparticulas a cada tipo de suelo (por cada 100 g de suelo se deben agregar 30 ml de nanoparticulas), se pesaron 120ml de nanoparticulas, haciendo un equivalente de 0.120 g de nanoporticulas de óxido de hierro (Fe2O3). Las nanoparticulas se activaron antes de agregarlas al sustrato, para esto se agregaron 10 ml de agua destilada en un tubo falcón, y posteriormente se colocaron en un baño de ultrasonido con agua desionizada por un periodo de 30 minutos, lo anterior para la expansión de las nanopartículas y con ello su activación. Durante la aplicación de las nanopartículas a los tratamientos correspondientes, la suspensión se debió mezclar cuidadosamente con el sustrato. Se etiquetaron las bolsas con su código correspondiente. Después de 24 h de la aplicación de las nanopartículas, se regaron todos los tratamientos. Se plantaron 10 semillas de cilantro en cada bolsa y se colocaron en una cámara de crecimiento. La cámara se programó a 16 horas luz a 25-28 °C, y 8 horas oscuridad a 20-25 °C, en ambos casos a una humedad relativa de 40-47%. Tomando en cuenta que las condiciones en las que el cilantro debe de germinar es que mantenga la humedad el suelo en la que fue plantada la semilla, para esto se estableció un periodo de riego de cada tres días. Pasados 10 días, se cuantificó la cantidad de semillas de cilantro germinadas y se calculó el porcentaje de germinación de cada tratamiento. Los tratamientos sin nanopartículas presentaron los porcentajes más altos con 25% en el caso de los suelos agrícolas y conservados cada uno, y 26.5% los suelos de huertos. Mientras que los tratamientos con nanopartículas presentaron disminución en estos porcentajes, presentando el suelo conservado 12%, el agrícola 8.5% y el huerto 4%. Adicionalmente a la cuantificación de germinación se caracterizó el suelo utilizado, determinando pH (suelo:agua, 1:2), obteniendo un promedio total en el suelo sin nanoparticulas de 7.98 ( suelo agrícola 8.12; suelo conservado 7.85, suelo de huerto 7.96); y para el suelo con nanoparticulas se obtuvo un promedio de 8.07 (suelo agrícola 8.09, suelo conservado 8.04 y suelo de huerto 8.08), el suelo agrícola presento los valores más básicos de pH tanto en el suelo sin nanoparticulas y con nanoparticulas. Así mismo se obtuvo la conductividad del suelo (suelo:agua, 1:2), obteniendo un promedio total en el suelo sin nanoparticulas de 1409.88 (suelo agrícola de 1276.66; suelo conservado de 1495.66 y el suelo de huerto de  1457.33); y para el suelo con nanoparticulas se obtuvo un promedio total de 1316.55 (suelo agrícola de 1287.33; suelo conservado 1351.66 y para el suelo de huerto 1310.66). Aun se espera conocer los resultados de materia orgánica y de densidad aparente.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró adquirir conocimientos teóricos y prácticos sobre la ecologia del suelo, caracterización del suelo, germinación de la semilla del cilantro, en tres usos de suelo (conservado, agrícola y huerto) tomando en cuenta el factor de nanopartículas y cómo influyen a la germinación del cilantro. Por otra parte, todos los tratamientos acondicionados con nanopartículas dieron resultados con un menor número de germinación, se considera que el factor de nanopartículas a la concentración de 30ml/100 g de suelo afecta al proceso de germinación, retrasando el tiempo de emergencia de las plántula de cilantro. Se observó que los suelos conservados presentaron una mayor germinación cuando se añaden las nanopartículas, en comparación de los suelos agrícolas y de huertos. Sin embargo, aún se podría explorar el efecto de las nanopartículas Fe2O3 a largo plazo en el crecimiento y desarrollo de las plantas de cilantro, utilizando técnicas microscópicas y moleculares, así como teniendo en cuenta el efecto tanto del tipo de suelo como de la aplicación de nanopartículas en la productividad total de las plantas de cilantro.

Asesor: Dr. Gustavo Adolfo Zelada Guillén, Universidad Nacional Autónoma de México

SíNTESIS DE NANOMATERIALES CONFORMADOS POR BASES DE SCHIFF

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SíNTESIS DE NANOMATERIALES CONFORMADOS POR BASES DE SCHIFF

Benhumea Zúñiga Igor Sebastián, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Ríos Arce Jesús Alejandro, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Gustavo Adolfo Zelada Guillén, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Es importante la búsqueda de nuevos materiales y métodos que nos brinden una mayor eficacia, sensibilidad y una menor cantidad de riesgos para la salud y el medio ambiente, debido a esto se han estudiado el posible uso de nanomateriales con el fin de determinar las propiedades que sean útiles. Por tanto, las moléculas que presentan las bases de Schiff, el cual es un grupo funcional también llamado imina o azometina y las cuales se forman cuando una amina primaria reacciona con un grupo aldehído o un grupo cetona en condiciones específicas, son de gran relevancia puesto que son compuestos orgánicos muy utilizados, se utilizan como pigmentos y colorantes, catalizadores, productos intermedios de síntesis inorgánica, y estabilizadores de polímeros; además, gracias a su grupo imina, presenta un gran número de actividades biológicas como son las antifúngica, antibacteriana, antipalúdicas, propiedades antiproliferativas, anti-inflamatorias, antivirales y antipiréticas. En este sentido la formación de nanomateriales que presentan bases de Schiff son una posible gran herramienta en múltiples aplicaciones biológicas, debido a su característica de formar sistemas supramoleculares de autoensamblaje con distintas formas que presentan propiedades y funciones en dependencia de los elementos y las pequeñas variantes en los compuestos que los conforman. Debido a esto la investigación de este tipo de moléculas es de gran relevancia

METODOLOGÍA

Se realizó la síntesis de cuatro productos moleculares de compuestos de bases de Schiff. A partir de los reactivos 3,5-dibromosalicilaldehído y 5-bromosalicilaldehído, en reacción con o-fenilendiamina y cetimina. Se realizaron los cálculos para cada una de las reacciones, de las cuales generar 200 mg del producto I se necesitaron 85.35 mg de 5-bromosalicilaldehído (PM= 201.1 g/mol) y 122.30 mg de cetimina (PM= 288 g/mol); para la misma cantidad del producto II se requirieron 101.81 mg de 3,5-dibromosalicilaldehído (PM= 279.91g/mol) y 104.72 mg de cetimina (PM= 288 g/mol); para la obtención de 200 mg del producto III se necesitaron 177.72 mg de 3,5-dibromosalicilaldehído (PM= 279.91 g/mol) y 34.17 mg de o-fenilendiamina (PM= 108.14 g/mol); para la obtención de 200 mg del producto IV se requirieron 169.62 mg de 5-bromosalicilaldehído (PM= 201.1 g/mol) y 45.57 mg de o-fenilendiamina (PM= 108.14 g/mol). Obtención de los productos I, II, III y IV. Utilizando una balanza analítica se pesaron 85.35 mg de 5-bromosalicilaldehído y 122.30 mg de cetimina, estos compuestos se depositaron en un matraz bola de 25 mL y se disolvieron en 7 mL de metanol, se agitó y se agregaron 3 mL más del mismo, dejándolo en un sonicador durante 10 minutos para obtener una mezcla más homogénea. La solución resultante se colocó en un sistema de reflujo dentro de una campana, el cual consistía en un baño de aceite en un recristalizador sobre una placa de calentamiento. Se colocó una sonda que mantuvo la temperatura a 65 °C, se agregó un agitador magnético en el matraz y un refrigerante conectado a una bomba que estaba dentro de una cubeta con agua y hielo, el cual mantuvo una baja temperatura. Se mantuvo el reflujo durante 24 horas hasta obtener un precipitado. Una vez terminado el reflujo, se armó un sistema de filtrado por vacío, el cual consistió de un matraz Kitasato de 100 mL y un embudo Büchner. El producto obtenido en reflujo se distribuyó en el embudo y se realizaron lavados con metanol, se dejó secar y se obtuvo un sólido sobre el papel filtro del embudo. Se pesó el sólido obtenido en una balanza analítica y se colocó en un vial de 5 mL. Para el resto se midieron 101.81 mg de 3,5-dibromosalicilaldehído y 104.72 mg de cetimina para la obtención del producto II; 177.21 mg 3,5-dibromosalicilaldehído y 34.18 mg o-fenilendiamina para la obtención del producto III; y 169.62 mg de 5-bromosalicilaldehído y 45.57 mg de o-fenilendiamina para el producto IV. El procedimiento para la obtención del producto I se repitió con cada uno de los productos y el sólido en forma de polvo de cada uno de ellos fue colectado y depositado en un vial de 5 mL respectivamente. Resonancia Magnética Nuclear (RMN). Se realizó Resonancia Magnética Nuclear a cada uno de los productos obtenidos (I, II, III y IV) y se observaron los espectros obtenidos.

CONCLUSIONES

En la estancia se lograron adquirir conocimientos teóricos sobre las propiedades, ordenamiento y función de nanomoleculas en sistemas supramoleculares para su aplicación tecnológica, así como técnicas experimentales para la síntesis de las muestras. Debido al corto tiempo del periodo de trabajo, se logró la síntesis de los compuestos en un sólido en forma de polvo y su caracterización por resonancia magnética nuclear donde se observó que se obtuvieron los productos esperados con una gran pureza. Aún falta analizar su autoensamblaje supramolecular, además de posibles aplicaciones utilizando distintos medios y solventes.

Asesor: Dr. Rafael Herrera Bucio, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

ESTUDIO COMPARATIVO MEDIANTE EL DOCKING DE DERIVADOS ALIFáTICOS DE MEDICARPINA CON LAS DIANAS DE S. AUREUS, T. VERSICOLOR Y CáNCER DE LEUCEMIA

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ESTUDIO COMPARATIVO MEDIANTE EL DOCKING DE DERIVADOS ALIFáTICOS DE MEDICARPINA CON LAS DIANAS DE S. AUREUS, T. VERSICOLOR Y CáNCER DE LEUCEMIA

Bermudez Saturnino Omar, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Rafael Herrera Bucio, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Es un salto cualitativo y cuantitativo de la medicina predictiva, ante  la aplicación integrada de las posibilidades técnicas aportadas por el conocimiento del genoma humano, la genómica, la transcriptómica, la proteómica y la metabólica, como herramientas para aplicar una medicina predictiva, tanto en el riesgo de padecer determinadas enfermedades como de la respuesta a fármacos, personalizada para cada paciente de acuerdo con sus genes. El diseño de fármacos asistido por computadora consiste en la aplicación de algún procedimiento realizado en ella, para relacionar la actividad de un compuesto con su estructura química. De esta manera, el uso de la computadora puede ayudar a descubrir y diseñar estructuras químicas que tengan las propiedades adecuadas para entrar en el proceso de desarrollo de un fármaco. Acoplamiento (docking) molecular, el objetivo es encontrar el modo de unión más favorecido de un ligando con el receptor. El acoplamiento molecular requiere de dos componentes que pueden ser caracterizados, en forma general, como la etapa de ‘‘búsqueda’’ y la etapa de ‘‘evaluación’. La búsqueda se refiere a la exploración del espacio configuraciones accesible para el ligando dentro del receptor. Otro objetivo es la exploración de encontrar la orientación y conformación del ligando que corresponda al mínimo global de la energía libre de unión. Por su parte, la etapa de evaluación se refiere a la asignación de un valor numérico a cada una de las configuraciones generadas durante la etapa de búsqueda. Esto permite establecer un orden entre las diferentes posiciones y configuraciones encontradas.

METODOLOGÍA

Se utilizó GaussView, es un software donde se puede importar o construir estructuras de los derivados de la medicarpina. Con este programa se construyeron cada uno de los ligando de medicarpina como son: acetilado de medicarpina, butirato de medicarpina, carbamato de medicarpina, dietilbutirato de medicarpina, etileter de medicarpina, isobutirato de medicarpina Y metileter de medicarpina. En la página de PROTEIN DATA BANK es una base de datos de la estructura tridimensional de las proteínas, se obtuvieron las dianas cáncer de leucemia (6HD4), T. versicolor (1GYC) Y S. aureus (2W9H) en formato PDB. Una vez que se tienen las estructuras en formato PDB, utilizamos el software UCSF CHIMERA para hacer el acoplamiento molecularr o DOCKING. Donde se obtuvieron todas las configuraciones posibles del sustrato en el área de búsqueda con su correspondiente energía de afinidad y van a estar ordenadas de menor a mayor energía. En el docking de las dianas de los citocromos (1R9O-CYP2C9, 2HI4-CYP1A2, 2V0M-CYP3A4, 3NXU-CYP3A4, 4GQS-CYP2C19, 4WNT-CYP2D6, 4WNV-CYP2D6 Y 5XXI-CYP2C9) con los derivados de medicarpina se siguieron los mismos pasos, las dianas de los citocromos se obtuvieron de la página PROTEIN DATA BANK. Se convirtieron los ligando a SMILES, para esto utilizamos open babel. Los códigos SMILES, se utilizaron para ver la semejanza que tienen a una droga, para esto se hizo la comparación de dos páginas que es la de Drug-Likeness y OSIRIS, se prosiguió a determinar ADME y ADMET, para eso se utilizó la siguiente página SwissADME y pkCSM. Se buscaron análogos de los ligando de los derivados de medicarpina que estos tuvieran una similaridad, se utilizó DrugBank y ChENMBL, estos tenían que tener un Drug-Likeness mayor a 1.0, igualmente se determinó el ADMET con pkCSM. Las enzimas del citocromo P450 (P450) son enzimas metabólicas que procesan la mayoría de los medicamentos de molécula pequeña aprobados por la FDA. Para determinar el metabolismo de los derivados de medicarpina se utilizó XenoSite Web y RS-Web.

CONCLUSIONES

Los derivados de medicarpina que tiene una mayor afinidad a las dianas de 6HDA fue Isobutirato de medicarpina debido a que tiene una energía de -9.3 Kcal/mol, 1GYC obteniendo una mayor afinidad con Isobutirato de medicarpina con una energía de -7.9 Kcal/mol Y 2W9H obtuvo una buena afinidad con todos los derivados de medicarpina, todos los derivados que tienen una mayor afinidad pueden utilizarse como fármacos. Los citocromos 1R9O-CYP2C9, 2V0M-CYP3A4, 3NXU-CYP3A4 y 4WNV-CYP2D6 son los que hubo una mayor afinidad con los derivados de medicarpina.

Asesor: Dr. Claudia Edith Millán Testa, Universidad Hipócrates

CARACTERIZACION QUIMICA Y FUNCIONALIDAD DE GALLETA ELABORADA A BASE DE NONI MEZCLADA CON ALIMENTOS NO CONVENCIONALES

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CARACTERIZACION QUIMICA Y FUNCIONALIDAD DE GALLETA ELABORADA A BASE DE NONI MEZCLADA CON ALIMENTOS NO CONVENCIONALES

Blanco Ramirez Lileny, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Asesor: Dr. Claudia Edith Millán Testa, Universidad Hipócrates

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La  sociedad de hoy en día  se ha olvidado de frutos con muchos beneficios para la salud tales como manifiesto a través de sus efectos antimicrobianos, anti cáncer, antioxidante, antiinflamatorio y en la actividad cardiovascular. (Wang et al., 2002; ChangBlanco et al., 2006).  Se estima que el efecto antimicrobiano puede ser debido a ciertos compuestos fenólicos como la acubina, alizarina, escopoletina y otras antraquinonas (Atkinson, 1956). Ayuda con enfermedades cardiovasculares, mejora el flujo sanguíneo, regula la presión  arterial llegando a relajar las células de los músculos. Con lleva así una mejor Protección del hígado, Artritis, Deterioro de la memoria, Diabetes, La cicatrización de heridas Un estudio evaluó las propiedades curativas del jugo de noni y ha revelado resultados positivos con respecto al aumento en el peso de los tejidos de granulación, el funcionamiento de colágeno, la hidroxiprolina y el contenido de proteína, proporciona alivio de los síntomas del dolor menstrual y la endometriosis en mujeres. El jugo de Noni ayuda a elevar el estado de ánimo, mediante la estimulación de la producción de serotonina y evita las condiciones de ansiedad y depresión.  

METODOLOGÍA

  Metodología Elaboración de  la galleta Se plantearon 6 recetas de galletas elaboradas a base de harina de noni a las cuales se les asignaron las siguientes claves que van de la G01 a la G06, las cuales presentan siguientes  ingredientes. Ingredientes de la galleta Harina de noni, Harina de plátano, Harina de avena, Harina de integral, Harina de trigo blanca, Miel, Azúcar, Otros ingredientes. Una vez realizada la masa de cada una de las recetas, que se dejó reposar todo un día en el refrigerador, después se pasó a elaborar  las galletas a base de harina de noni y otros ingredientes como ya se mencionaron antes para así obtener una cantidad alta de fibra y saber cuál de las fórmulas es la mejor opción. Ya obtenidas las muestras se le realizaron los análisis correspondientes para conocer su composición de humedad, cenizas, lípidos, carbohidratos, antocianinas y fibra, de acuerdo a las siguientes metodologías. Para composición: Humedad Cenizas Lípidos Carbohidratos Antocianinas Fibra      

CONCLUSIONES

Composición química Como podemos observar en la siguiente tabla de resultados la galleta de noni se comporta con un porcentaje de proteínas casi proporcionalmente, donde se determina que la fórmula de galleta G06 es la que se aprecia tiene un contenido proteico menor  y un alto nivel de carbohidratos en comparación de G02 O G03, ya que es la fórmula que contiene un  % en  harina de plátano verde  y como es de saber el plátano verde contiene un tipo de almidón resistente o de forma nativa el cual el sistema digestivo no lo puede degradar, esto por lo tanto es fibra así que la cantidad proteica puede reflejarse después de la digestión. Funcionalidad En el caso de los componentes funcionales que son la fibra y antocianinas, donde se pueden encontrar que el porcentaje de fibra que contiene la galleta  es alto en la mayoría de los casos, ejemplo: en el caso de de la formula con nombre G05 la cantidad de fibra es mayor en la G03, en la G06 el  valor de fibra podría incrementar si se incrementa el porcentaje de ya sea harina de noni o plátano en gramos para la galleta, ya que el plátano cuenta en su estructura almidón resisten que la fibra aportada puede cuantificarse hasta después de la digestión.  Pero la explicación con respecto a la G06 es debido a lo ya antes mencionado de los almidones que contiene el plátano verde, ya que en esta formulación se agregó más harina de plátano en un 60% y de harina de noni en un 20%. Cabe mencionar que existe más almidón resistente en la G06. En las antocianinas las cuales son uno de los compuestos bioactivos que se encuentran en los alimentos, en este caso contamos que las formulaciones de la galleta antes mencionada  contiene la más alta es la fórmula G04 con 9.45 miligramos en comparación de la G03 que su nivel de antocianinas en más bajo que en las demás, esto se debe a que en la formula G03 la cantidad de harina de noni en menor y no contiene avena y ni harina de plátano.

Asesor: Dr. Rosa del Carmen Rocha Gracia, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

ECOLOGíA MOLECULAR DE LA RESISTENCIA

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ECOLOGíA MOLECULAR DE LA RESISTENCIA

Bojorquez Perez Rocio, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Rosa del Carmen Rocha Gracia, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA La resistencia microbiana a los antibióticos constituye un serio problema de salud pública que ha sido reconocido como prioritario por las instancias internacionales de salud (OMS, CDC, FDA, COFEPRIS, EFSA). Miles de casos de infecciones causadas por microorganismos multidrogorresistentes se reportan con un aproximado de 600 000 muertes cada año en la práctica médica pública y privada a nivel internacional. Los determinantes de resistencia vienen frecuentemente conferidos en elementos genéticos como plásmidos, integrones y transposones los cuales por su alto índice de movilidad se constituyen como agentes importantes en la aparición de brotes epidémicos. Adicionalmente, se ha documentado la co-ocurrencia de determinantes de resistencia con factores de virulencia.

METODOLOGÍA

METODOLOGÍA El ADN genómico de cepas de Escherichia coli multidrogorresistentes aisladas de alimentos vegetales sin cocinar así como de Leclercia adecarboxylata aisladas de muestras clínicas fue obtenido mediante ebullición. Posteriormente el material genético fue cuantificado utilizando un espectrofotómetro (NanoDrop 2000 Thermo scientific®) y se ajustó a 100 ng/µL para utilizarlo como templado en reacciones de PCR. Se corrieron reacciones de PCR con oligonucleótidos específicos para la búsqueda de los genes qacEΔ1, sul1, blaCTX-M, región variable de integrones tipo 1, acc(6’)-Ib, intI1, ybbW, uidA, cnfI, afa/draBC, ibeA, iroN, operón afa, papGI, blaOXA, blaIMP, blaGIM, blaVIM, blaGES, blaNDM.

CONCLUSIONES

CONCLUSIONES En la búsqueda de integrones de tipo 1 provenientes de las 12 cepas de Escherichia coli aisladas de alimentos (vegetales crudos), se encontraron 3 cepas que contaban con la estructura clásica de integrones tipo 1 y a su vez, 4 cepas con estructura no clásica. Se concluye que estas podrían ser receptores que albergan genes casete que confieren resistencia. Con respecto de las cepas provenientes del brote hospitalario, se realizaron pruebas de determinantes de género y especie en donde se concluyó que las 30 cepas pertenecían a Leclercia adecarboxylata. En estas no se encontraron factores de virulencia asociados a E. coli. Por pruebas de Kirby-Bauer se determinó que las cepas eran multidrogorresistentes a carbapenemasas.

Asesor: Dr. Patricia Lozano Zarain, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

ESTUDIO DE LOS MECANISMOS MOLECULARES Y BIOQUíMICOS QUE CONDUCEN A LA ADQUISICIóN, GENERACIóN Y DISEMINACIóN DE RESISTENCIA MICROBIANA, MEDIANTE HERRAMIENTAS MOLECULARES Y GENóMICA COMPARATIVA EN BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES

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ESTUDIO DE LOS MECANISMOS MOLECULARES Y BIOQUíMICOS QUE CONDUCEN A LA ADQUISICIóN, GENERACIóN Y DISEMINACIóN DE RESISTENCIA MICROBIANA, MEDIANTE HERRAMIENTAS MOLECULARES Y GENóMICA COMPARATIVA EN BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES

Bojórquez Portillo Dannia Edith, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Patricia Lozano Zarain, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Pseudomonas aeruginosa es una bacteria Gram negativa considerado un microorganismo oportunista, se presenta en pacientes vulnerables como los que presentan fibrosis quística o que se encuentran hospitalizados. Se considerada que el mal uso de antibióticos ha llevado a que se presenten cepas resistentes para las cuales existen muy pocas opciones terapéuticas, asociándose a mayores tasas de mortalidad y está también genera un incremento en el coste de la atención hospitalaria. Uno de los mecanismos más estudiados para la resistencia hacía carbapenémicos es la pérdida de la proteína OprD, que se encuentra en la membrana de la bacteria y permite el paso de estos antibióticos hacia su interior para eliminarlos, la pérdida o modificación de esta proteína confiere la resistencia hacía estos.

METODOLOGÍA

  Se trabajo con cepas clínicas de la bacteria Pseudomonas aeruginosa para conocer algunos de sus mecanismos de resistencia de tal bacteria, por lo cual se llevó a cabo un corrimiento de PAGE-SDS. Para tal procedimiento se corrieron primeramente 2 PAGES-SDS uno para la transferencia a una membrana de nitrocelulosa y el otro será su espejo y se teñirá con azul de Coomassie.  Para el corrimiento primero se realizó la preparación de una solución concentradora y otra separadora teniendo en cuenta que no se deben de agregar el TEMED ni el APS hasta que se tenga preparado donde será colocado. Se puede colocar un límite hasta donde la solución concentradora será vertida, colocando una línea horizontal en el vidrio con un marcador. Una vez que sea añadida la solución catalizadora hasta el límite marcado en el cristal y posteriormente añadir una capa de agua y esperar la polimerización. Después de que este polimerizado se añaden los catalizadores APS y TEMED a la solución separadora y mezclar uniformemente, verterla y colocar el peine y esperar su polimerización. Una vez que este polimerizado se procede a armar la electroforesis colocando los geles en la cámara de electroforesis para poder cargar las muestras en los pocillos y correr la electroforesis a un voltaje de 80 V para concentrar la carga de proteínas y después se incrementará el voltaje a 120 V para la separación de éstas. Al terminar el corrimiento se llevo a cabo un Western Blot el cual cuanta con una serie de pasos: Se llevo a cabo la transferencia del gel PAGE-SDS a una membrana de nitrocelulosa por 40 minutos a 10-15 V, haciendo un sándwich con papel filtro. Al terminar verificamos que se halla transferido el marcador de peso a la membrana por completo, enseguida se colocó la membrana en un tupper con 40 mL de leche sin grasa (0%) al 5% de PBS (toda la noche). Al siguiente día lavamos con PBS-tween 0.5% 3 veces la membrana en agitación y sin calor, después se agregó 20 mL de anticuerpos de conejo 1:1000 (1er anticuerpo) y se dejo toda la noche. Al otro día se agito por 2 horas la membrana y se lavo después 3 veces con PBS-tween 0.5% en agitación. Se agrego el segundo anticuerpo anti-conejo y se agito por 1 hora. Se procedió a dar 3 lavados con PBS-tween 0.5% en agitación. Por último, se trasladó a otro tupper y se le agrego el sustrato NBT/BCIP con micropipeta hasta ver bandas, en especial la de los controles. Al final se dieron lavados con agua corriente y después con agua destilada 15 veces.

CONCLUSIONES

Con esta investigación se obtuvo información y se encontraron cepas que eran resistentes a carbapenémicos y no expresaban a la proteína OprD por lo que su resistencia se asocia a este mecanismo.

Asesor: Mtro. Paula Montserrat García Sánchez, Instituto Tecnológico de Estudios Superiores de Zamora

EXTRACCIÓN POR POLARIDAD DEL RESVERATROL A PARTIR DE LA SEMILLA Y EL HOLLEJO DE LA UVA (VITIS VINíFERA)

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EXTRACCIÓN POR POLARIDAD DEL RESVERATROL A PARTIR DE LA SEMILLA Y EL HOLLEJO DE LA UVA (VITIS VINíFERA)

Bolaños Parra Alejandra, Instituto Tecnológico de Estudios Superiores de Zamora. Gallegos Torres Cinthya Lorena, Instituto Tecnológico de Estudios Superiores de Zamora. Vega Alcalá Brenda Jazmín, Instituto Tecnológico de Estudios Superiores de Zamora. Asesor: Mtro. Paula Montserrat García Sánchez, Instituto Tecnológico de Estudios Superiores de Zamora

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En las últimas décadas se han realizado numerosos estudios epidemiológicos que relacionan la alimentación y la salud, así mismo se ha buscado la prevención de enfermedades cardiovasculares y cáncer gracias a constituyentes esenciales en los alimentos. 

METODOLOGÍA

Acondicionamiento de la materia prima.   La uva fue previamente lavada a chorro de agua para su posterior manipulación y pelado, una vez teniendo las cascaras de uva, posteriormente se extrajeron las semillas para empezar el acondicionamiento de nuestra materia prima.   Las muestras  del hollejo y la semilla se colocaron en papel filtro para llevarlas a la incubadora manteniendo la temperatura a 25 °C, donde se determinó su pérdida de agua por el método de peso constante bajo la NMX-F-083-1986, una vez que se tuvo la condición optima de acuerdo a la norma,  se molieron ambas partes de forma separada en un molino manual modelo victoria, al finalizar la molienda se tamizaron las muestras de hollejo y semillas pasándolas por un tamiz de abertura de malla de 16 y reteniéndola en una malla de 8, donde se almaceno en refrigeración 4°C para su posterior utilización.   Extracción por polaridad.   Las muestras acondicionadas se dejaron en extracción mediante disolventes por gradientes de polaridad (tabla 1), en una relación de 1:10 utilizando tolueno como indicador de baja polaridad, etanol como disolvente de mediana polaridad y el agua como disolventes de polaridad alta, las muestras se dejaron en un proceso de extracción por inmersión durante 24 horas a una temperatura ambiente 25°C aproximadamente con agitación lenta 80 RPM en los laboratorios de Biotecnología en el ITESZ. Una vez teniendo nuestro extractos se almacenaron a -20°C para su posterior análisis en el espectro DART+Ms en el laboratorio de LADIPA en la piedad Michoacán.

CONCLUSIONES

La uva puede presentar distintos cambios en la sobre expresión del Resveratrol, esto puede depender de los estadios fenológico en los cuales es cosechada la fruta, la variedad y los niveles de nitrógeno, fosforo y potasio (NPK) en la calidad de la tierra, es decir, los tipos de clima pueden afectar la intensidad de expresión del antioxidante de interés.   El modo de extracción puede desnaturalizar el antioxidante de interés mediante los cambios bruscos de temperatura, por lo cual es necesario tomar las medidas necesarias al momento de su extracción por maceración.   El método de conservación es otro factor que puede influenciar en la detección del Resveratrol ya que si no se mantiene en la temperatura optima, puede sufrir una oxidación mediante el intercambio de electrones en presencia del Oxígeno. Al momento de la identificación en el espectro DART-Ms modo positivo es necesario saber la biosíntesis del compuesto para saber las distintas formas de fragmentación que se puedan separar mediante la ionización al momento del análisis y las distintas rampas de temperaturas.   La identificación mediante el espectro DART-Ms modo positivo es un método rápido en la identificación del antioxidante, pero puede afectar el traslado al momento de ionizar a altas temperaturas o modificar su proceso de oxidación.

Asesor: Dr. Fausto Roberto Méndez de la Cruz, Universidad Nacional Autónoma de México

CAMBIO CLIMÁTICO Y SUS EFECTOS EN LOS ANFIBIOS Y REPTILES DE VARIAS MUNICIPIOS DEL ESTADO DE MÉXICO

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CAMBIO CLIMÁTICO Y SUS EFECTOS EN LOS ANFIBIOS Y REPTILES DE VARIAS MUNICIPIOS DEL ESTADO DE MÉXICO

Borelli Luna Arianna Yineth, Universidad de la Guajira (Colombia). Asesor: Dr. Fausto Roberto Méndez de la Cruz, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

  El cambio climático ocupa hoy uno de los primeros lugares entre los problemas que afectan a la humanidad, por sus efectos medioambientales y, sobre todo, porque su principal determinante es el incremento de los gases de efecto invernadero, resultantes de las actividades humanas. Afectando en sobremanera tanto a los causantes de todas las actividades como a la diversidad a nivel mundial; debemos tener en cuenta que el cambio climático y las especies exóticas invasoras son de las principales causas de cambio y pérdida de la biodiversidad .Teniendo en cuenta que la temperatura es uno de los factores abióticos más importantes que varía tanto temporal como espacialmente, afecta a muchos factores biológicos, procesa y restringe las distribuciones de especies (Angilletta, 2009). El incremento de la temperatura global ocasionada por el efecto invernadero es responsable del aumento del nivel del mar, de la disminución de las capas de nieve y hielo, así como del cambio de tendencia en las precipitaciones y todo ello afectará a los sistemas naturales vinculados al hielo, a los sistemas hidrológicos y a la calidad de las aguas, a los sistemas biológicos marinos y de agua dulce y a la productividad agrícola y forestal. El cambio climático asociado al calentamiento global se considera como la segunda causa de mayor impacto en ecosistemas terrestres, solamente sobrepasado por el cambio de uso de suelo. Mientras que, en ecosistemas acuáticos epicontinentales, las especies exóticas invasoras son la mayor causa de pérdida de biodiversidad (Sala et al., 2000). Teniendo en cuenta que la temperatura es uno de los factores abióticos más importantes que varía tanto temporal como espacialmente, afecta a muchos factores biológicos, procesa y restringe las distribuciones de especies (Angilletta, 2009). Los organismos ectotermos como las lagartijas son especialmente vulnerables a cambios en las temperaturas ambientales, como locales y tendencias de calentamiento en los últimos años, porque la temperatura ambiente influye directamente en su temperatura corporal (Sinervo et al., 2010). La temperatura del cuerpo, a su vez, influye en varios aspectos de su fisiología y comportamiento (Bennett, 1980; Huey y Berrigan,2001; Martin y Huey, 2008). Todo lo anteriormente mencionado acarrea muchas consecuencias por lo cual deben buscarse soluciones de inmediato y dichos trabajos aportaran a esas soluciones.

METODOLOGÍA

  Se realizaron trabajos de campo adelantados por los titulares de los proyectos: Efecto de distintas aclimataciones de temperatura en la población de Sceloporus aeneus del Volcán Coatzontle, San Miguel Ajusco - Rosa Isela Quintero Pérez Vulnerabilidad de Ambystoma granulosum en fase de neotenia y metamorfosis ante el calentamiento global y las especies exóticas invasoras - Aldo Eric Fuentes Barradas Los cuales trabajan en dicha línea de investigación Efectos del cambio climático en anfibios y reptiles. En el caso de los reptiles se trabajó con varios individuos de Sceloporus aeneus, que tenían un mes de aclimatación con temperaturas por arriba y debajo de las preferidas durante un mes.Fueron sometidos a pruebas de rendimiento locomotor con velocidades de carrera sobre distancias (Elphick y Shine, 2006) en un carril de 1.20 metros, donde al final del carril. Los organismos de cada tratamiento fueron grabados con una cámara Canon EOS Rebel T5 y cada uno de los individuos corrieron tres veces para poder obtener su velocidad (distancia / tiempo). En el caso de los anfibios cada cuerpo de agua se midió in situ el oxígeno disuelto, la temperatura, el pH, la conductividad y la salinidad. Para obtener las temperaturas seleccionadas por A. granulosum en fase de neotenia y metamorfosis se realizaron experimentos en un gradiente de temperaturas. Los gradientes constaron de un recipiente de metal galvanizado de 150 x 6 x 13 cm (largo por ancho por profundidad). El mantenimiento de las temperaturas en el gradiente se logró colocando el recipiente de metal dentro de una caja de madera dividida en tres secciones; la sección central contendrá arena como amortiguador de la temperatura, una sección de las orillas contendrá agua y un calentador para acuario (proporcionará el extremo caliente), la sección opuesta contendrá hielos para disminuir la temperatura (modificado de Heath, 1975). La temperatura máxima del gradiente será de 22 °C, la temperatura mínima del gradiente será de 9 °C. Las temperaturas seleccionadas por los individuos se registraron con un termómetro infrarrojo cada 10 minutos hora durante tres horas.  Posterior a los experimentos se liberaron los individuos en su sitio de colecta.  

CONCLUSIONES

  Se logro registrar en el caso de los Ambystomas se capturaron en gran mayoría en etapa juvenil, lo cual espera que alrededor de temperaturas de 20 °C optimizaran el crecimiento teniendo en cuenta los experimentos previos son temperaturas seleccionadas. Teniendo en cuenta loa anterior se puede inferir que en un fututo habar un crecimiento acelerado. Los machos seleccionan temperaturas de 19°C, seleccionan menores debido a que la espermatogénesis de da a temperaturas mas bajas si llega aumentar la temperatura podría detenerse dicho proceso lo cual afectaría directamente a la especie. Se puede inferir que el cambio climático en un futuro generara mayores temperaturas y menos precipitaciones provocando la desecación de los cuerpos de agua y aumentando la concentración de yodo que en la actualidad se desconocen las concentraciones de yodo en el momento de la metamorfosis. La temperatura también juega un papel importante en los reptiles por lo cual se tiene la hipotesís de que la temperatura repercute en varios aspectos fisiológicos del género Sceloporus; además que las aclimataciones en la especie Sceloporus aeneus a temperaturas elevadas se verá beneficiada en su desempeño en función de velocidad, pero la viabilidad espermática estará mermada. Por lo tanto, los individuos se encuentren aclimatados a temperaturas bajas su desempeño se verá afectado negativamente y la viabilidad espermática será mejor. Por último, podemos concluir que las investigaciones anteriormente mencionadas generar un gran aporte a la ciencia para poder buscar soluciones a los posibles daños en cada una de las especies.

Asesor: M.C. Yamel Guadalupe Rubio Rocha, Universidad Autónoma de Sinaloa

REGISTRO DE LAS PRESAS DE JAGUAR (PANTHERA ONCA) EN EL MUNICIPIO DE SAN IGNACIO, SINALOA

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REGISTRO DE LAS PRESAS DE JAGUAR (PANTHERA ONCA) EN EL MUNICIPIO DE SAN IGNACIO, SINALOA

Borja González Ana Carolina, Universidad de Guadalajara. Asesor: M.C. Yamel Guadalupe Rubio Rocha, Universidad Autónoma de Sinaloa

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las selvas secas en Sinaloa albergan una importante riqueza de especies vegetales y animales que por su belleza o rareza son motivo de admiración6; tal es el caso del jaguar. El jaguar es uno de los carnívoros terrestres más amenazados en México1, clasificado como especie en peligro de extinción en la NOM-059-SEMARNAT-2010. Como depredador tope, este felino es una especie clave en los ecosistemas que habita, regulando activamente las poblaciones de otras especies. Las presas más comunes del jaguar en México y Centroamérica son los venados, el pecarí, el coatí, el serete y el armadillo2, aunque puede llegar a consumir otros animales dependiendo de la abundancia que tengan, pues es considerado un cazador oportunista3. Cuando la selva es fragmentada para instalación de potreros, los jaguares se alimentan frecuentemente de vacas, cabras y borregos, dando pie a un conflicto con los ganaderos2 que muchas veces concluye en la caza furtiva de jaguares. Para evitar esta situación, es importante mantener disponibles las presas naturales del jaguar y realizar actividades de educación ambiental en las comunidades cercanas al área de distribución del jaguar.

METODOLOGÍA

Registro de la presencia de presas del jaguar mediante la técnica de colocación de estaciones de foto trampeo descrita por Chávez y colaboradores4. Se ubicaron 6 estaciones, de las cuales 3 fueron dobles. Las estaciones se colocaron en diversos sitios, entre ellos aguajes y senderos, alrededor de las comunidades El Carmen, Cabazán y El Cañón en el municipio de San Ignacio, Sinaloa. El tipo de vegetación del área de estudio es selva baja caducifolia e importantes fragmentos de selva baja subcaducifolia entre las cañadas5. Las cámaras se colocarón el día 30 de junio y se quitaron el 18 de julio. Considerando el número de estaciones, el esfuerzo de monitoreo fue de 120 días cámara/trampa. Posteriormente, con la información recopilada, se creó una base de datos estandarizada de los ejemplares captados. También se consideró la presencia de rastros como huellas, excretas, rascaderos y osamenta. Además, se realizaron actividades de educación ambiental en el Museo del Jaguar y la Estación biológica del Jaguar, contando con el apoyo de diversos artistas y creadores.

CONCLUSIONES

Se obtuvo evidencia de la presencia de venado cola blanca (Odocoileus virginianus), coatí (Nasua narica), tlacuache (Didelphys marsupialis), conejos (Sylvilagus spp.) y cuichis (Ortalis poliocephala) como posibles presas del jaguar (Panthera onca). El agua es un recurso importante para la fauna que se distribuye en las selvas bajas de San Ignacio. Es por eso que las cámaras colocadas en aguajes tienen mayor éxito en la captura de una gran variedad de fauna. La cultura es un elemento fundamental para la educación ambiental, potencializando la efectividad de la misma. Las labores de educación ambiental realizadas desde hace tiempo en las comunidades de El Carmen y Cabazán han influido de manera positiva en la percepción que se tiene de la fauna silvestre que habita en sus selvas bajas. LITERATURA CITADA Ceballos, G., C. Chávez, R. List y H. Zarza. 2007. Conservación y manejo del jaguar en México: estudios de caso y perspectivas. Conabio-Alianza WWF/Telcel-Universidad Nacional Autónoma de México, México. Ceballos, G., R. List, R. Medellín, C. Bonacic y J. Pacheco. Los felinos de América, cazadores sorprendentes. TELMEX. México, D.F. Ceballos, G. y O. Gisselle. 2005. Los mamíferos silvestres de México. Fondo de cultura económica, CONABIO. México, D.F. Chávez, C., A. de la Torre, H. Bárcenas, R. A. Medellín, H. Zarza y G. Ceballos. 2013. Manual de fototrampeo para estudio de fauna silvestre: El jaguar en México como estudio de caso. Alianza WWF-Telcel, Universidad Nacional Autónoma de México, México. Miranda, F. y E. Hernández-X. 1963. Los tipos de vegetación de México y su clasificación. Boletín de la Sociedad Botánica de México 28: 29-179. Rubio, Y., H. Bárcenas y A. Beltrán. 2010. Llanura costera del Pacífico-Pie de la sierra de Sinaloa. En: Ceballos, G., L. Martínez, A. García, E. Espinoza, J. Bezaury y R. Dirzo (eds.). 2010. Diversidad, amenazas y áreas prioritarias para la conservación de las Selvas Secas del Pacífico de México. Fondo de cultura económica. México.  

Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MOLECULARES POR RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR

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IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MOLECULARES POR RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR

Brambila Castañeda Diana Estefanía, Universidad Autónoma de Nayarit. Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El espectro de Resonancia Magnética Nuclear (RMN) sirve para identificar las sustancias presentes en una muestra, así como su proporción (con la integral). Según Juaristi [2010], incluso la integración del área de las señales separadas proporciona la relación entre los isómeros. También pueden llegar a identificarse contaminantes que pudieron no haberse eliminado debidamente antes de llevar a cabo la reacción (presentes en el material utilizado, por ejemplo). Así, la RMN funciona como guía para saber qué pasos seguir en caso de continuar con una reacción (de reducción, por ejemplo) en base a los productos identificados en el espectro, o bien, tener en claro qué condiciones modificar para que, si es necesaria la repetición de la reacción, ésta se ejecute de una forma más cuidadosa que la anterior. En esta investigación se busca caracterizar los productos obtenidos de una síntesis, así como calcular los rendimientos de cada reacción, para posteriormente, reducirlos y llevar a cabo la inclusión en la ciclodextrina. Cabe mencionar que se busca trabajar con química verde que, como lo menciona el sitio web ChemHat.org, consiste en diseñar productos y procesos químicos para reducir o eliminar el uso o la generación de sustancias peligrosas.  

METODOLOGÍA

Como primer intento de síntesis, en un vial adicionado con un agitador, se colocaron 10 mmol de Benzaldehído (1.19 mL), se añadieron 10 mmol de α-Metilbencilamina (1.29 mL), se colocó el vial sobre una parrilla de agitación y a temperatura ambiente se dejó en agitación vigorosa por un lapso de 18 horas aproximadamente. Pasado el tiempo de reacción se añadió 1 ml de CH2Cl2, se agitó un poco y la mezcla se extrajo con pipeta Pasteur y se hizo pasar por un mini embudo de cristal adicionado con una pequeña porción de algodón y NaSO4 anhidro para quitar el H2O subproducto de la reacción. Dicho proceso se realizó tres veces (3.1 mL aprox. de CH2Cl2) y la mezcla se pasó a otro vial previamente pesado (balanza analítica) y etiquetado, el CH2Cl2 fue evaporado con flujo de aire, y una vez seca la muestra se pesó nuevamente el vial (también en la balanza analítica), se calculó el rendimiento por diferencia de peso y finalmente se preparó una muestra para enviar a RMN de 1H y 13C en CDCl3 para su posterior análisis. Dado que el rendimiento por diferencia de peso resultó bajo (28.68%), se realizaron otras 4 repeticiones de la síntesis, modificando las cantidades o condiciones. En la primera repetición, se utilizó solo 1 mmol de cada reactivo, 100 mg de Na2SO4 anhidro y 100 mg de sílica gel como desecantes. Se aplicó mecanoquímica utilizando un mortero de ágata, y 5 mL de CH2Cl2 para posteriormente filtrar. El rendimiento estimado fue del 96.28%. Sin embargo, existe la posibilidad de que este valor sea demasiado inexacto, debido a que las mediciones fueron en la balanza granataria.  En el tercer intento, se midieron 100 microlitros de benzaldehído y 130 μL de α-Metilbencilamina, y esta vez utilizando 50 mg de Na2SO4 y 50 mg de sílica gel, de nuevo, utilizando el mortero de ágata. A partir de esta síntesis, las mediciones se hicieron con la balanza analítica. El rendimiento por diferencia de peso fue del 42.36% En el cuarto intento se quintuplicaron todas las cantidades medidas anteriormente, quedando como 5 mmol de cada reactivo, y 250 de cada desecante (silica y Na2SO4). Debido a las cantidades mencionadas, se utilizó un mortero de porcelana, por ser más grande. La metodología para filtrar se cambió, usando un embudo Buchner y una bomba de vacío. Se gastaron aproximadamente 30 mL de CH2Cl2. El rendimiento por diferencia de peso fue del 3.79%. En el quinto y último intento, se utilizaron 100 mg de cada uno de los 2 desecantes, y 1 mmol de cada reactivo, aplicando mecanoquímica de nuevo en el mortero de ágata y 5 mL de CH2Cl2 para la filtración. Después de analizar los espectros de RMN, se calculó un 99.1% de rendimiento de la reacción. Para la reducción de midieron 0.1124 g de NaBH4. Primeramente, se le agregaron 4 mL de MeOH a la imina reducida. Después, con el vial sobre un recipiente con hielo (este a su vez sobre la parrilla de agitación) y una bala de agitación, se le fue añadiendo poco a poco el NaBH4, el vial con la imina se dejó en reposo sobre el hielo durante 30 minutos. Después de ese tiempo se le retiró el hielo, y se puso en agitación toda la tarde y hasta la mañana siguiente. Posteriormente se le agregaron 2 mL de agua destilada, se realizó una extracción con un embudo de separación, lavándose 3 veces con 5 mL de agua cada una. Se le añadió Na2SO4 a la fracción orgánica y finalmente se hizo la evaporación para preparar el producto resultante con cloroformo deuterado y analizarlo por RMN.

CONCLUSIONES

Existe la presencia de dos isómeros (E y Z) en el producto de la síntesis. A pesar de que los números arrojados en los cálculos de rendimiento por diferencia de peso son bajos, el espectro de RMN permitió observar que siempre han estado alrededor del 70% y 90%. Sin embargo, cabe mencionar que los rendimientos por diferencia de peso en el primer y segundo intento de síntesis son más inexactos que los del resto debido a que las mediciones de la masa fueron en una balanza granataria. El cuarto método para la síntesis fue el más ineficiente.

Asesor: Dr. Elith Yazmin Valencia Villalvazo, Universidad de Guadalajara

CARACTERIZACIóN DE LOS CAMBIOS ADAPTATIVOS, FíSICOS, FISIOLóGICOS Y GENéTICOS COMO RESPUESTA AL EJERCICIO

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CARACTERIZACIóN DE LOS CAMBIOS ADAPTATIVOS, FíSICOS, FISIOLóGICOS Y GENéTICOS COMO RESPUESTA AL EJERCICIO

Bravo Patiño Sebastian Luis, Instituto Tecnológico de La Piedad. Carachure Muñoz Zayra Jocelyn, Universidad Autónoma de Guerrero. Espinoza Ramírez Jassel, Universidad de Guadalajara. Penagos Castellanos Nathan, Universidad Autónoma de Chiapas. Saldivar Castro Eduardo Raúl, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Elith Yazmin Valencia Villalvazo, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Introducción Las características físicas de un deportista son por lo general muy distintivas, además de reflejar un estado de salud óptimo. Desde que una persona comienza a realizar ejercicio de manera rutinaria o incursiona en la practica de un deporte en carácter formal, experimenta una serie de cambios no solo físicos, si no también fisiológicos o inclusive genéticos. El presente estudio pretende describir los rasgos característicos de cada cambio experimentado por un individuo en el proceso adaptativo al entrenamiento deportivo, que se espera sean diferentes cuando el deporte involucre la fuerza, la resistencia o la velocidad. Planteamiento del problema En las últimas dos décadas diversas investigaciones se han enfocado en dilucidar cuales son las características que debe presentar un deportista para considerarse como tal, es bien sabido que en el proceso formativo un atleta experimenta múltiples cambios que le ayudan a adaptarse a las cargas de entrenamiento demandadas por el deporte que practica, sin embargo, son pocos los reportes que existen respecto a los cambios en la expresión de los genes que se han visto asociados con las adaptaciones físicas o fisiológicas en respuesta al ejercicio. La principal pregunta que esta investigación pretende contestar es si ¿las variaciones en el genoma que se han visto asociadas a fenotipos de un mejor rendimiento físico se expresan diferente en las etapas de formación de un atleta o según el deporte que se practica? Objetivos Establecer si la expresión de genes candidatos del desarrollo de fenotipos deportivos es diferente cuando el individuo inicia en un programa de entrenamiento en comparación a cuando se consolida como un atleta de élite. Definir como es la expresión de genes en diferentes deportes, según las características fenotípicas que deba tener el atleta de la disciplina particular. Objetivos particulares Enunciar las características físicas y fisiológicas que tienen particularidad en atletas de diferentes deportes.  Distinguir las variantes en los genes que se asocian a rasgos de un mejor desempeño en el deporte. Estimar como es la expresión de genes candidatos del rendimiento atlético y fitnes. Justificación La estructura genética define las particularidades de cada individuo, sin embargo muchas veces aunque en el genoma no haya diferencias significativas la expresión de los genes puede influenciar al desarrollo de características singulares, en los deportes puede ser de especial interés conocer los mecanismos que llevan a que un gen se exprese de terminada manera pues dicho conocimiento puede mejorar los métodos de entrenamiento o incluso posibilitar un diagnostico del ejercicio mas adecuado.

METODOLOGÍA

Para realizar el proyecto Caracterización de los cambios adaptativos, físicos, fisiológicos y genéticos, como respuesta al ejercicio, se cuenta con dos tipos de poblaciones: Población testigo (población en general) y Población estudio (personas que practican natación, halterofilia, lucha y atletismo) Como desarrollo del proyecto se realiza lo siguiente: Cuestionario: nos permite conocer la clínica y los antecedentes familiares de cada participante del proyecto. Antropometría: se realiza una serie de mediciones corporales (talla, peso, diámetros corporales, perímetros y pliegues cutáneos) para saber la composición corporal y los cambios que se puedan producir en la población en estudio durante el desarrollo del proyecto. Posterior a esto, se realiza una toma de muestra sanguínea, de la cual se analiza: Fisiología, a través de la cuantificación de las pruebas bioquímicas, tales como Glucosa, Creatinina, Urea y Proteínas totales Estudio molecular: como parte de la variación genética se extrae ADN y como parte de la expresión genética se extrae ARN Obtenidos los resultados de todas las pruebas y cuestionarios realizados se lleva a cabo el Análisis Estadístico.

CONCLUSIONES

Proyecto sin concluir, en proceso... Se espera obtener variación genética entre las dos poblaciones (población testigo y población estudio), especificamente en el gen PPAR. a través de los diferentes análisis realizados. Tras la exposición a diferentes periodos de ejercicio, también se esperan observar cambios significativos manifestándose tanto en el metabolismo como en la expresión de genes de la población en estudio.

Asesor: Dr. José Antonio Cruz Barraza, Universidad Nacional Autónoma de México

MARCADORES MOLECULARES PARA LA IDENTIFICACIóN DE ESPONJAS MARINAS DEL GéNERO APLYSINA (DEMOSPONGIAE: VERONGIDA) DEL CARIBE MEXICANO

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MARCADORES MOLECULARES PARA LA IDENTIFICACIóN DE ESPONJAS MARINAS DEL GéNERO APLYSINA (DEMOSPONGIAE: VERONGIDA) DEL CARIBE MEXICANO

Bringas Ramirez Gloria Estefani, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. José Antonio Cruz Barraza, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Aplysina, es un género de esponjas marinas perteneciente a la familia Aplysinidae, una de las más grandes del orden Verongida. Su distribución abarca áreas tropicales y subtropicales, en el golfo de México y mar Caribe, el Pacifico oriental y el Mediterraneo. Una de las principales características que presentan las especies de este género cuenta con un esqueleto de colágeno orgánico (espongina), siendo reconocida como una esponja cornea. . Dicha estructura le ha conferido gran interés en distintas líneas de investigación, por ejemplo, en biomedicina y bioingeniera, específicamente en regeneración de tejidos. También son altamente reconocidas por la producción de metabolitos, en farmacología.  Pese a su importancia, su estudio taxonómico y ecológico se vuelve un reto, debido a la dificultad que representa la interpretación de sus características morfológicas, pues su esqueleto presenta gran sensibilidad a los factores ambientales y no posee suficientes características diagnosticas. Por lo tanto, una sistemática tradicional a partir de solo análisis morfológicos es poco factible, ya que suele reflejar una identificación errónea o relaciones filogenéticas inciertas. Actualmente se ha implementado el uso de marcadores moleculares en la taxonomía de las esponjas, mismos que han facilitado la identificación de las especies y sus relaciones filogenéticas.  Por lo tanto, durante el verano de investigación se intenta identificar a distintos individuos del género Aplysina presentes en el golfo de México y Caribe Mexicanos a partir del uso de marcadores moleculares y al mismo tiempo revisar antecedentes morfológicos para verificar si la especie identificada coincide con las características ya descritas.

METODOLOGÍA

Se extrajo ADN de 10 ejemplares del género Aplysina presentes en la colección de esponjas marinas del Laboratorio de Sistemática y Ecología Molecular del Instituto de Ciencias del Mar y Limnología. Para la extracción de ADN, a cada ejemplar se le fue removido una pequeña cantidad de tejido (≈ 100 mg), el cual se macero lo más finamente posible. Luego en un tubo eppendorf de 1.5 ml, se adiciono el tejido y 300 μl de buffer de extracción (100 mM de NaCl, 50 mM Tris-HCL, SDS al 1%, 50 mM EDTA pH 8.0), más 3 μl de proteinasa K (20 mg/ml) y colocados a 55° C toda la noche. Se adiciono 600 μl de cloroformo: alcohol isoamílico (24:1). Se precipito el ADN a -20° C por una hora con 1000 μl de estanol absoluto frío. Se decanto el etanol y se dejaron secar por toda la noche. Se resuspendio el pellet, en cantidades variadas según la muestra en TE 1x. Finalmente, la calidad y cantidad de ADN fueron evaluadas por electroforesis en gel agarosa al 1.5% teñido con bromuro de etidio. Se amplificó el gen que codifica la región ITS; utilizando los cebadores RA2 (5´-GTCCCTGCCCTTTGTACACA-3´) e ITS_2.2 (5´- CCTGGTTAGTTTCTTTTCCTCCGC-3´). Las amplificaciones fueron realizadas con mezclas de 11.5 μl de reacción que contenía: 1 μl de ADN de cada uno de los individuos, 74 μl dH2O (HPLC or sterile MilliQ), 25 μl de 10x PCR buffer (20 mM MgCl2), 5 μl R-primer, 5 μl de F-primer, 5 μl de BSA y 1μl taq DNA pol (5u/ μl). El protocolo del termociclador consistió en una desnaturalización inicial a 94° C por 5 min y 35 ciclos de 94° C por 45 segundos, seguida de un alineamiento de 56° C por 1 min, una extensión a 72° C por 1 min y una extensión final de 72° C por 5 min. Finalmente, se corrió un gel de verificación. Se llevo a cabo el proceso de edición de secuencias donde se verificó la calidad y se corrigieron posibles errores de lectura o fallas creadas durante la secuenciación. Para la edición se utilizó el programa Codon Code aligner 10.5.8. El proceso consistió en corregir las inconsistencias entre las dos hebras de ADN de un mismo organismo. Para corroborar la confiabilidad de las secuencias, se sometieron a una comparación a la herramienta BLAST en Genbank, con la que se compararon las secuencias obtenidas con las disponibles en la base de datos de nucleótidos. Una vez confirmado el origen de las secuencias, se procedió a realizar los análisis moleculares. Las secuencias fueron alineadas en el Programa Mega 5.1. utilizando los parámetros iniciales del programa. Dada la naturaleza de este estudio, los análisis de taxonomía molecular se realizaron en este mismo programa mediante la reconstrucción de un árbol taxonómico por el método del vecino más cercano o Neighbor-Joining (NJ). Los valores bootstrap no paramétrico, que son un indicativo de la robustez de las ramas, se calcularon con 10,000 pseudoréplicas.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró adquirir el conocimiento fundamental de como identificar a una especie y las dificultades que trae consigo. El hecho de trabajar con un grupo que posee poca información diagnostica y que sea tan complicado como el género Aplysina por su morfología dan mayor relevancia al aprendizaje logrado. Para este estudio no fue posible obtener la secuencia de todos los ejemplares, ya que para algunos fue difícil obtener el ADN o amplificar los fragmentos. Sin embargo, se logró obtener y amplificar la secuencia del ejemplar 3004 con éxito, siendo la secuencia fue evaluada por medio de la herramienta Blast de GenBank, y fue posible atribuirla a la especie Aplysina fistularis (con un 99.64% de identidad). Además, fue posible determinar que la región ITS´s y los juegos de cebadores 18s y 28s, ITS2.2 y RA2 son los más eficientes para el género. De esta manera se pretende continuar identificando a las especies que se quedaron en pasos intermedios.     

Asesor: Dr. Carlos Alberto Gómez Aldapa, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo

MICROENCAPSULACIóN DE LACTOBACILLUS PENTOSUS POR EL MéTODO DE GELIFICACIóN IóNICA Y SU EVALUACIóN IN VITRO

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MICROENCAPSULACIóN DE LACTOBACILLUS PENTOSUS POR EL MéTODO DE GELIFICACIóN IóNICA Y SU EVALUACIóN IN VITRO

Bustamante Tello Abraham Ricardo, Instituto Tecnológico de Tepic. Cervantes Ceceña Gabriela, Instituto Tecnológico de Tepic. Asesor: Dr. Carlos Alberto Gómez Aldapa, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

 Los consumidores buscan alimentos que aporten un beneficio a su salud con alimentos enriquesidos con probióticos. Los alimentos con estos microorganismos presentan diversos problemas debido a las diferentes condiciones adversas, por lo que no alcanzan la concentración benefica (1X107 UFC/mL), por lo que el problema es la falta de una proteccion al microorganismo durante su almacenamiento que le permita mantener la concentracion benefica.

METODOLOGÍA

  Activación y paquete celular. Para la obtención del paquete celular se activó la bacteria L.Pentosus para ello se agregó 200 µm de la bacteria en 40 ml de caldo RMS y se incubo a 37°C por 24 h, posteriormente se centrifugo a 3500 rpm durante 20 minutos, se decantó y se le agrego 40 ml de NaCl al 0.85%, se homogeneizo en un vortex y se centrifugo a 3500 rpm por 20 minutos, se decantó y se agregó 10 ml de agua estéril y se homogeneizo. Gelificación iónica. Se ajustó 1 L de agua des ionizada a pH 4 con HCl 0.1 N. Posteriormente se usó dicha agua para preparar las siguientes soluciones: 4 g de Cl2Ca en 200 ml de agua 3 g de Alginato en 90 ml de agua Después de su preparación cada solución fue ajustada a un pH de 4 con HCl 0.1N. Enseguida a la solución de alginato se le agregó 1.65 g de aceite comestible y se homogeneizo a 14,000 rpm durante 3 minutos y se agregó el paquete celular, homogeneizo a 3000 rpm durante 5 segundos. Enseguida la solución de alginato con el paquete celular ya homogeneizado se calentó hasta llegar a 50°C y se tomó 1 ml y se agregó a un tubo de ensayo con 9 ml de peptona estéril y se etiqueto como: A.GI, -1. La muestra con Cl2Ca se colocó en un recipiente que estuviera en constante agitación y la del alginato se hizo pasar por un equipo de gelificación iónica por extrucción, al terminar el proceso se dejó la muestra en agitación por 30 minutos. Luego de terminar el periodo de tiempo se quitaron residuos y se pasó por un tamiz del #270 y se enjuago con agua a pH 4. Finalmente se pesó una caja Petri vacía, para posteriormente pasar las capsulas obtenidas a la caja Petri previamente pesada y se volvió a pesar ya con el producto, y así se obtuvo una cierta cantidad   de micro cápsulas. Se tomó 1 g de microcápsulas obtenidas y se agregaron a un tubo de ensayo con 9 ml de citrato estéril y se etiqueto como: D.GI, -1 A sí mismo en un tubo de ensayo pequeño se agregó a la mitad agua des ionizada a pH 4 y se colocó un poco de las microcápsulas quedantes en el tamiz. Y se observaron en el microscopio óptico. Con los tubos A.GI y D.GI se hicieron diluciones utilizando 9 ml de peptona estéril, quedando: A.GI (-1), -2…..-7 D.GI (-1), -2…..-7 Y posteriormente de las diluciones de -5, -6, -7 de ambas series se tomaron 100 µm y se colocaron en cajas Petri estériles por triplicado y se les coloco agar bacteriológico el cual consistía en una mezcla de 20 g de caldo MRS y 8 g de agar bacteriológico en 400 ml de agua adicionado con 4 ml de un antibiótico llamado rifampicina, se homogeneizo y se dejó solidificar y se incubaron a 37°Cpor 48 hrs. Finalmente, del tiempo transcurrido se hizo el conteo de las cajas y obtener las UFC/ ml. Incorporación de las microcápsulas a un alimento. Se colocó 30 ml de la solución ya preparada para las paletas con 4 gr de las microcápsulas, se elaboraron 4 paletas, dos de ellas después de su congelación se deshicieron en baño maría y se hicieron diluciones hasta -6 y se sembraron con el mismo agar MRS y se incubaron por 48 h. Medición del potencial z. La medición del potencial z de la microcápsula se llevó a cabo colocando una pequeña muestra de microcápsulas en agua ,se colocó una pequeña parte en la celda de cuarzo del equipo Zetasizer, una vez la celda estuvo colocada en su sitio se cerró y se procedió al comienzo de la medición. Medición del tamaño de partícula. Se colocaron  250ml de agua  para después vaciar y rellenar para  colocar la muestra de gota en gota hasta obtener un 8% de concentración  y proceder a la medición del tamaño de la partícula. Evaluación de sobrevivencia en pH y sales biliares. Se colocó 1g de microcápsulas por tubo, en 2 con  9ml de sales biliares,2 con 9ml de   caldo MRS,2 con 9ml de caldo a un pH de 2y 2 con 9ml de caldo a un pH de  6.5 para incubarlos durante 3 horas para pH y 24 horas para sales igual para su control. Se realizaron diluciones después de romper la microcápsula y se colocaron 100 microlitros de cada dilución (-5,-6 y -7) por separado en una caja petri, se realizó por triplicado para después agregar el agar e incubar durante 48 horas para después realizar el conteo de colonias. Se repitió el mismo procedimiento, pero ahora mezclando 4 g de alginato con 90 ml de agua desionizada a pH 4 estéril.

CONCLUSIONES

Durante la estadía de verano se logró adquirir los conocimientos para la elaboración de microcápsulas que contuvieran la bacteria L. Pentosus con la finalidad que esta microcápsula protegiera a la bacteria de diferentes factores que puedieran afectarla negativamente, así como también el manejo de diferentes equipos como el LS I3 320 Laser Diffraction Size Analyzer y ZETA SIZER. Se espera que la microencapsulación utilizando diferentes porcentajes de alginato y añadiéndolas a una paleta de hielo pueda permitir que la bacteria pueda llegar al tracto digestivo en concentraciones óptimas para que esta funcione de manera positiva a la salud de las personas que las consuman, convirtiéndose en una alternativa para el desarrollo de nuevos productos funcionales y en otros ámbitos de la industria.  

Asesor: Dr. Alba Adriana Vallejo Cardona, Centro de Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco, A.C. (CONACYT)

FORMACIóN Y EVALUACIóN DE LA ESTABILIDAD DE LIPOSOMAS, ERITROSOMAS Y NANOERITROSOMAS CON MAGNETITA Y TEMOZOLOMIDA

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FORMACIóN Y EVALUACIóN DE LA ESTABILIDAD DE LIPOSOMAS, ERITROSOMAS Y NANOERITROSOMAS CON MAGNETITA Y TEMOZOLOMIDA

Caballero Díaz Esthela Jordana, Centro Universitario UTEG. Asesor: Dr. Alba Adriana Vallejo Cardona, Centro de Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco, A.C. (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los tumores del sistema nervioso central (SNC) se distinguen de las neoplasias del resto del cuerpo debido a que pueden ser un reto tanto diagnóstico como terapéutico por la difícil diferenciación entre tumores, así como la intervención terapéutica.   El glioblastoma o glioblastoma multiforme (WHO IV) se considera el grado más alto de tumor del tipo glioma (grado IV), por la presencia de necrosis y el aumento de vasos sanguíneos alrededor del tumor además son de crecimiento rápido y con un alto nivel de malignidad. Los gliomas corresponden al 24% de los tumores cerebrales en adultos de los cuales el 50% de incidencia corresponde a los glioblastomas. La presidencia del WHO IV es más común en adultos de entre 45 y 65 años de edad con una sobrevida del 5% a 10 años. El tratamiento estándar de los pacientes con WHO IV consiste en una cirugía citorreductora o biopsia, seguida de Radiación y la administración de Temozolomida (TMZ) concomitante.  Sin embargo, la extirpación completa no es posible debido a que el tumor se infiltra a través de los tractos de la sustancia blanca. Así mismo, la TMZ, un agente triazeno activo capaz de traspasar la barrera hematoencefálica, que, a pesar de administrarse por vía oral conlleva efectos adversos, tales como trastornos gastrointestinales, náuseas, entre otros. Debido a la alta incidencia, se ha vuelto de vital importancia la búsqueda de nuevas alternativas terapéuticas en el tratamiento del glioblastoma multiforme por lo que se propone el uso de vesículas de Eritrosomas, Nanoeritrsomas y Liposomas rellenas de nanopartículas de magnetita, TMZ y Calcenina como marcador para evaluar la estabilidad de las vesículas.  

METODOLOGÍA

Formación de Liposomas Se preparó una solución 10mM de Lecitina de Soya en Cloroformo/Metanol 9:1 del cual se tomó una alícuota de 100ul en un tubo Falcon y evaporó los solventes formando un Pelet. Al terminar de evaporar se agregaron las nanopartículas (Magnetita Fe3O4 con forma cúbica) suspendidas en Ciclohexano a una concentración de 0.25mg/ml y evaporó con corriente de Nitrógeno. Para arrastrar cualquier residuo de solventes que hayan quedado en el medio se añadió 1ml de Ciclohexano y evaporó. Como indicador se utilizó la Calceina a 20mM en PBS (Buffer Fosfato Salino con un pH: 7.4), colocándolo en el fondo del tubo Falcon y se completó el volumen a 10 ml con PBS para someter a Ultrasonicacion a 47.5 W durante 1 hora, dentro de un baño de hielo (pulsos 10s y 5s). Finalmente se colocó la muestra en agitación durante una hora para sellar los poros de las vesículas. Formación de Eritrosomas y Nanoeritrosomas Se tomó una muestra sanguínea (grupo A+) en un tubo Vacutainer con EDTA, el cual se centrifugó a 3000 rpm por diez minutos para separar los eritrocitos del plasma. Los glóbulos rojos obtenidos se lavaron y suspendieron en solución PBS pH:7.4. Los 3 lavados siguientes se centrifugaron a 2000 rpm durante 10 minutos con solución hipotónica (PBS, 0,14 M NaCl, 10 mM fosfato de Na, y KCl 3 mM) para poder retirar la hemoglobina que contiene los eritrocitos. Se colocó una alícuota de 50μl/ml de concentración con PBS hipotónico en tubos Eppendorf y se homogenizó diez segundos en Vortex para poder incubar a 4°C durante 30 minutos. Después del tiempo de incubación, se colocaron los tubos Eppendorf en una ultracentrífuga durante 30 minutos a 18000rpm con una temperatura de 0°C (formación del Pelet). Se recupero el Pelet para continuar con tres lavados en solución hipotónica, así como centrifugar a 18000 rpm durante 15 minutos a 0°C. Al obtener los Eritrosomas (MER) se concentraron en cinco tubos ajustando el hematocrito al 10% con PBS isotónico (pH: 7.4). Estos MER se someten a ultrasonido donde se utiliza el ultrasonicador a 47.5 W durante 15min obteniendo Nanoeritrosomas. Para sellar la membrana se colocó en un cuarto frio con agitación magnética durante 12hrs. Evaluación de la Estabilidad Se tomaron alícuotas de 500ul de cada uno de las muestras y se añadió 0.2ul de Tritón con el fin de provocar la liberación de la Calceina, Magnetita y TMZ, además se tomaron alícuotas de 200ul de las vesículas rellenas y como blanco se utilizó 200ul de vesículas vacías. Las alícuotas fueron observadas en el Microscopio Electrónico de Fluorescencia y analizadas durante siete días cada 24hrs en el equipo Cytation™ 3 a una energía de emisión (485 nm) y excitación (525 nm), a temperatura de 25°C.

CONCLUSIONES

Los protocolos para la elaboración de Naoeritrosomas, Esritrosomas y Liposomas rellenos de magnetita cubica, TMZ y Calceina se lograron adaptar a las condiciones requeridas para poder evaluar la estabilidad, obteniendo que el sistema Nanoeritrosomas rellenos tiene mayor estabilidad, sin embargo, los Liposomas rellenos presentaron más inestabilidad que los Eritrosinas rellenos según las gráficas de Excitación y Emisión obtenidas con los resultados que el equipo Cytation™ 3 mostró. Los Sistemas con Tritón X-100 ostentaron mayor liberación de Calceina ya que este detergente es surfactante, es decir, actúa sobre la superficie de las membradas.  AL observar las muestras al Microscopio Electrónico de Fluorescencia se encontraron vesículas con más de una nanopartícula de magnética demostrando que la encapsulación de nanopartículas no es homogénea, además se pudo observar la Calceina encapsulada en las vesículas para las muestras que no contiene Tritón X-100, y algunas vesículas degradadas liberando la Calceina en muestras que se les añadió Tritón X-100, demostrando los cambios morfológicos que los sistemas tienen al tener un medio estabilidad durante una semana. Durante el periódico de la estancia de investigación reforcé mis habilidades de liderazgo y resolución de problemas por medio del trabajo en equipo; dirigiendo a un grupo de estudiantes para poder cumplir con los objetivos. Se espera evaluar la estabilidad de estos sistemas durante un mes para determinar el tiempo de liberación de la TMZ, las condiciones que provocan una liberación controlada y la eficiencia de los métodos utilizados.

Asesor: Dr. Lidia Beiza Granados, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

ANÁLISIS QUÍMICO PRELIMINAR DEL EXTRACTO CLOROFÓRMICO DE LAS HOJAS DE CEANOTHUS CAERULEUS.

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ANÁLISIS QUÍMICO PRELIMINAR DEL EXTRACTO CLOROFÓRMICO DE LAS HOJAS DE CEANOTHUS CAERULEUS.

Calderón Cabrera Yareli Kizlev, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Lidia Beiza Granados, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La familia Rhamnaceae comprende 44 géneros y alrededor de 850 especies, presentándose en regiones templadas y tropicales. Algunas especies de esta familia son árboles o arbustos, a veces plantas herbáceas o trepadoras con hojas simples, flores pequeñas y agrupadas en inflorescencias cimosas o umbeladas, tetrámeras o pentámeras y rara vez sextámeras. Los frutos son comestibles, aunque también los hay venenosos. Cabe mencionar que un número importante de especies de esta familia se comercializan de forma ornamental de ahí su valor económico. El género Ceanothus está agrupado en alrededor de 55 especies y conformado por arbustos o raramente árboles pequeños, que presentan ramas espinosas, hojas simples o alternadas, flores pequeñas que pueden ser de color azul, violeta o blancas, dispuestas a manera de racimos o umbelas terminales encontrándose en  Estados Unidos, Canadá y México. Ceanothus caeruleus crece en el estado de Michoacán en donde se conoce como flor de chaquira, vara cueruda, palo colorado y cuaicuastle, se ha colectado también de Sinaloa y Coahuila a Veracruz y Guatemala. Debido a la variedad de estructuras químicas sobretodo triterpénicas encontradas en ella se han utilizado como anti-tumorales, anti-inflamatorios, anti-VIH, anti-microbianos, así como hepato y cardioprotectores, entre otros. Dentro de este grupo de productos naturales se encuentra el ácido ceanótico, un nor-triterpeno pentacíclico del tipo lupano el cual se ha aislado de Ceanothus velutinus y Ceanothus caeruleus. En la medicina tradicional la corteza se emplea como febrífujo; las hojas se usan para infecciones de la garganta y la raíz se utiliza para el tratamiento de algunas enfermedades de tipo venéreo. Aunque se han atribuido diferentes propiedades terapéuticas a la especie, no existe evidencia científica que las respalde, de ahí la importancia de llevar a cabo estudios fitoquímicos que coadyuven a su conocimiento y al desarrollo de su potencial farmacológico.

METODOLOGÍA

La planta de Ceanothus caeruleus se colectó a la orilla de la carretera Pátzcuaro-Apatzingán en el km 29 en el estado de Michoacán. Fue separada en sus diferentes partes: raíz, tallo, hojas y flores, las cuales se dejaron secar a la sombra. Posteriormente, se obtuvieron los extractos de hexano y cloroformo de las hojas, las cuales se sometieron a tres maceraciones de una semana cada una con hexano y tres maceraciones de 15 días cada una con cloroformo. Las maceraciones con acetato de etilo y metanol quedan pendientes. Del extracto de cloroformo 4 g del mismo se purificaron mediante cromatografía en columna utilizando mezclas de disolvente hexano-acetato de etilo en polaridad ascendente y gel de sílice 70-230 mallas.

CONCLUSIONES

En la polaridad 8:2 hexano:acetato de etilo se obtuvo el ácido betulínico el cual fue identificado mediante cromatografía en capa fina y resonancia magnética. Los datos espectroscópicos fueron corroborados con la literatura.

Asesor: Dr. Angela Molina Gómez, Universidad de Murcia (España)

ESTUDIO VOLTAMPEROMéTRICO DE LA ACTIVIDAD ELECTROCATALíTICA DEL 2,2,6,6-TETRAMETIL-1-PIPERINIDILOXILO (TEMPO) EN LA OXIDACIóN DE ALCOHOL BENCíLICO.

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ESTUDIO VOLTAMPEROMéTRICO DE LA ACTIVIDAD ELECTROCATALíTICA DEL 2,2,6,6-TETRAMETIL-1-PIPERINIDILOXILO (TEMPO) EN LA OXIDACIóN DE ALCOHOL BENCíLICO.

Calvillo Solís Jonathan Josué, Universidad Autónoma de Ciudad Juárez. Asesor: Dr. Angela Molina Gómez, Universidad de Murcia (España)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La oxidación de alcoholes a compuestos carbonílicos es una de las reacciones más importantes y útiles en síntesis orgánica. Entre los agentes oxidantes comúnmenteempleados se encuentran el K2Cr2O7, KMnO4, SeO2, entre otros; sin embargo, estos reactivos son altamente contaminantes y peligrosos para la salud. Una alternativa más conveniente es la oxidación vía electroquímica empleando un catalizador molecular como el 2,2,6,6-tetrametil-1-piperinidiloxilo (TEMPO), un radical libre muy estable tanto en medio acuoso como en medio no acuoso que muestra actividad electrocatalítica para la obtención de aldehídos y cetonas a partir de alcoholes. La voltamperometría cíclica (CV) y voltamperometría de onda cuadrada (SWV) son técnicas electroquímicas muy efectivas para el estudio cinético y mecanístico de procesos redox. Es por esto que en este trabajo se han empleado en combinación con micro y macroelectrodos para evaluar la actividad electrocatalítica del TEMPO hacia la oxidación de alcohol bencílico, tanto en modo homogéneo (TEMPO disuelto) como heterogéneo (TEMPO inmovilizado sobre electrodo), estudiando la ruta de reacción así como la influencia del medio (acuoso vs orgánico).

METODOLOGÍA

Todos los experimentos se llevaron a cabo en una celda electroquímica con montaje de tres electrodos. Como electrodo de referencia se utilizó un electrodo de calomel saturado (ECS), un electrodo de alambre de platino como electrodo auxiliar, y como electrodo de trabajo se utilizó un electrodo de carbón vítreo (3 mm de diámetro) o un microelectrodo de fibra de carbono (33 μm de diámetro). Las mediciones de voltamperometría cíclica (CV) y voltamperometría de onda cuadrada (SWV), se realizaron en un potenciostato SP-200 (Bio-Logic Science Instruments) con el software EC-Lab® V.11.21. El estudio de la actividad catalítica se realizó con 2,2,6,6-tetrametil-1-piperinidiloxilo (TEMPO) (98%) de Sigma Aldrich. En medio acuoso se utilizó una disolución amortiguadora de carbonatos 0.1 M a pH 9.6, preparada con NaHCO3 (99.7%) y Na2CO3 (99%) en agua Milli-Q. En medio orgánico se empleó como disolvente acetonitrilo (99.8%), perclorato de tetrabutilamonio (99%) 0.1 M como electrolito soporte, y N-metilimizadol (99%) como base. En ambos medios se estudió la reacción catalítica con alcohol bencílico (99%).

CONCLUSIONES

Electrocatálisis homogénea Los resultados obtenidos en disoluciones de TEMPO con un macroelectrodo de carbon vítreo mostraron que la electro-oxidación de TEMPO es un proceso electroquímicamente reversible (CV: Epa-Epc = 61.2 mV; SWV: W1/2 = 92.1 mV para ESW = 5 mV) y, por tanto, adecuado para ser empleado en Electrocatálisis molecular en medio acuoso, resultados similares se obtuvieron en medio no acuoso (CV: Epa-Epc = 60.7 mV; SWV: W1/2 = 93.4 mV para ESW = 5 mV. Al realizar adiciones de alcohol bencílico se observó el aumento progresivo de la corriente de oxidación de TEMPO con la concentración de alcohol y la desaparición de la correspondiente al proceso de reducción, indicando la existencia de un mecanismo tipo catalítico (EC` en el caso màs simple) en el que el TEMPO es regenerado a través de la reducción de su forma oxidada por el alcohol. Los resultados obtenidos muestran una actividad catalítica notable del TEMPO en ambos medios, siendo superior en medio no acuoso. Un análisis más detallado de la respuesta CV reveló que la cinética catalítica no es de un pseudo-primer orden, como se había asumido en la literatura, siendo necesario considerar un mecanismo catalítico más complicado para explicar los resultados y para determinar la constante catalítica (kcat) de forma precisa. Esto último se lleva a cabo en la actualidad mediante el análisis de los voltagramas experimentales con simulaciones numéricas que permiten considerar rutas catalíticas complejas con cinéticas de segundo orden, incluyendo el proceso de comproporción propuesto en la bibliografía. Los resultados preliminares obtenidos indican que, bajos las condiciones experimentales de nuestro estudio, la incidencia de dicho proceso no es significativa y que el esquema de reacción sería tipo ECE’ donde la etapa C es de segundo orden y da lugar a una especie que es electro-oxidada a TEMPO en la segunda etapa electródica (E’). Electrocatálisis heterogénea La actividad electrocatalítica también se estudió con el TEMPO anclado al electrodo mediante reducción de la sal de diazonio derivada de amino-TEMPO. La respuesta CV mostró que la estabilidad de la capa de TEMPO tanto en medio acuoso como orgánico se ve comprometida en el proceso de electro-oxidación del TEMPO, probablemente debido a repulsiones electrostáticas entre las formas oxidadas que conducen a la desorción del catalizador. Estos resultados ponen de manifiesto que para el uso de TEMPO como electrocatalizador inmovilizado es necesario diseñar entornos de inmovilización más favorables.  

Asesor: Dr. Perla Fabiola Méndez Herrera, Universidad Autónoma de Sinaloa

OBTENCIóN DE EXTRACTOS DE PLANTAS Y SEMILLAS Y SU APLICACIóN EN LA ELABORACIóN DE BIOPESTICIDAS Y/O PRODUCTOS DE USO VETERINARIO

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OBTENCIóN DE EXTRACTOS DE PLANTAS Y SEMILLAS Y SU APLICACIóN EN LA ELABORACIóN DE BIOPESTICIDAS Y/O PRODUCTOS DE USO VETERINARIO

Camacho Muñoz Olivia, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Perla Fabiola Méndez Herrera, Universidad Autónoma de Sinaloa

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

México es rico en tierra, contando con 198 millones de hectáreas de las cuales 145 millones se dedican a la actividad agropecuaria. A partir de esa actividad grandes zonas de nuestro país se consumen grandes cantidades de plaguícidas, herbicidas e insecticidas para producir granos, hortalizas, etc. En este sentido, es importante que se desarrollen nuevos productos con base en componentes naturales que sean efectivos para el control de plagas y a su vez sean amigables con el ambiente y de fácil degradación para evitar afectar al personal encargado de aplicarlo y también a los consumidores finales puesto que algunos pesticidas sintéticos quedan remanentes en frutas y/o verduras.  En este verano de investigación se iniciaron trabajos para obtener los extractos necesarios para  elaborar el biopesticida, por cuestiones de tiempo y puesto que no se alcanzará a formular el biopesticida (aquel a partir de sustancias naturales) pues es necesario caracterizar los extractos químicamente, solo se utilizarán algunos para elaborar un producto final de uso veterinario, específicamente se elaborará un champú y repelente contra pulgas y garrapatas. En esta investigación se utilizaran distintas metodologías  para obtener extractos como: extracción por solvente, arrastre de vapor y maceración.

METODOLOGÍA

Maceración Extracto de ajo. Para obtener el extracto de ajo se utilizaron 50 g de bulbos de ajo pelados y  50 mL de solución salina 0.9%,  los cuales se molieron  a alta velocidad durante 5 minutos, posteriormente se filtran y se dejan en refrigeración. Por otra parte se preparó otro macerado con las mismas condiciones pero el filtrado se realizó a los cinco días de dejar el ajo en contacto con el solvente. Se repitió el método pero con 100mL de solución salina. Transcurridos los 5 días se analizaron en el UV-Vis para evaluar cada solución con un pico de 250 nm el cual es caracteristico de la alicina, es un compuesto muy importante en la defensa de la planta contra insectos, hongos y bacterias. Preparación de oleatos. La preparación de un oleato se efectuó con 50 mL de solvente (aceite de soja) y 5 g de muestra molida o triturada (romero, eucalipto, menta y cola de caballo) durante 2 min a alta velocidad. Posteriormente se dejó reposar cada frasco en la oscuridad por 28 días y agitándose manualmente cada tercer día. Al transcurrir los 28 días, cada oleato se filtró para obtener el extracto. Extracción con solvente     Extracción de aceites esenciales utilizando solvente  método Soxhlet. Para la obtención de extractos cerosos por el método soxhlet  se utilizaron  15 g de muestra (menta, canela, neem y ruda) previamente molidos durante 2 minutos a alta velocidad;  se colocaron respectivamente en un saco de papel filtro en la cámara principal del extractor soxhlet. Posteriormente se midieron 200 mL de solvente (etanol)  en el matraz bola y se dejó correr el proceso por 5 y 10 ciclos respectivamente con cada hierba.  Dado por terminado el proceso de extracción por solvente se procedió a iniciar la destilación simple. Una vez obtenido el extracto con el solvente  se colocó en un matraz Erlenmeyer y comenzó el proceso estándar de destilación simple procurando destilar la mayor cantidad de solvente posible para obtener como resultado la mezcla de pigmento, ceras y aceite esencial separado del solvente utilizado (etanol).  Extracción con arrastre de vapor Para llevar a cabo este método se pesaron 80 g de eucalipto los cuales se colocan en un embudo de decantación con 900 mL de agua desionizada y se dejó correr el proceso. Posteriormente para efectuar la separación, se preparó una solución saturada con 100 mL de agua más 35g de NaCl la cual se añadió al extracto y se dejó reposar durante 24 horas. Al paso del tiempo determinado, se observó una película de aceite en la parte superior. A partir de los extracos obtenidos se preparó un champú y repelente. Preparación del champú Para comenzar la preparación se esterilizaron todos los frascos de vidrio para hacer las formulaciones y envasado. Una vez contando con el instrumental esterilizado se procedió a pesar 100 g de champú  base. Después se añadieron 0.2 g de extracto de ajo y se agitó cuidadosamente. En seguida se añadieron 0.2 g de oleatos y aceites esenciales de eucalipto, menta, Jojoba, Neem, lavanda, cedro y árbol del té, inmediatamente se agitó cuidadosamente la solución. Después se agregaron 0.2 g de vitamina E, nuevamente de agitó cuidadosamente y  se midió el pH a 7. Por último se envasó el champú. Preparación del repelente Al igual que el champú.Una vez contando con el instrumental esterilizado se procedió a añadir en un recipiente de cristal 10 gotas de aceite esencial de romero, cedro, neem y lavanda, 10  gotas de extracto de ajo y 0.1 g de vitamina E. Ya que el recipiente de cristal haya contenido todos los aceites, se agregaron 19 g de alcohol 96°, ya que éste ayuda a que se los aceites se mezclen e integren mejor. Posteriormente se agregaron 30 g de agua desmineralizada y por último se envasó en una botella pet transparente de 100 ml con atomizador.    

CONCLUSIONES

En base al analisis en UV-Vis de los macerados de ajo; se llegó a la conclusión que a menor cantidad de solvente o a mayor tiempo de contacto del ajo-solvente incrementa el pico de absorción y por lo tanto la concentración de alicina. Continuando con la metodología, la extracción con solvente; en base al registro de pesos y rendimiento se puede deducir que entre más ciclos este en contacto la planta o semilla con el solvente, se obtendrá mayor cantidad de extracto y por consiguiente rendimiento. A su vez, cada planta por su naturaleza tiene diferente cantidad de extracto y/o aceites esenciales, por lo tanto, varía la cantidad obtenida en cada planta.  En seguida la extracción por arrastre de vapor. En base a estas cifras bajas se concluyó que es un proceso el cual se necesita realizar modificaciones en el sistema para mejorar su rendimiento ya que se obtiene muy poca cantidad. A partir de los extractos obtenidos, se formuló un champú y repelente antimicrobicidas para uso veterinario, los cuales contienen propiedades que los protege contra pulgas y garrapatas y a la vez cuida el pelaje de los cachorros dejándolo sedoso, sano, limpio y con olor agradable.

Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

FAUNA INTERSTICIAL DEL CENOTE LOS TRES POTRILLOS, COZUMEL, QUINTANA ROO

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FAUNA INTERSTICIAL DEL CENOTE LOS TRES POTRILLOS, COZUMEL, QUINTANA ROO

Camalich Arvayo Karina, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Durante siglos, los cenotes han formado parte de la cultura mexicana de diversas maneras, lo cual ha fomentado su estudio. Para el año 1981, ya se habían descubierto 1024 cuevas en todo México, especialmente en la península de Yucatán. La isla de Cozumel está formada por roca cárstica, lo cual fomenta la formación de cuerpos de agua subterráneos tales como los cenotes o sistemas anquihalinos, logrando llegar a un total de 18 cenotes en su superficie, varios de los cuales son explotados como fuentes de agua dulce o con fines turísticos. Las características fisicoquímicas de los cenotes los hacen lugares únicos para el desarrollo de fauna especializada. El grupo faunístico que ha sido más estudiado en las cuevas es el de los crustáceos, sin embargo, también pueden encontrarse otros phyla de organismos, como lo son las esponjas, los gasterópodos, los poliquetos, los pogonóforos, los oligoquetos, las salamandras y varios peces pequeños. En el ambiente intersticial, pueden encontrarse pequeños artrópodos como copépodos, anfípodos e isópodos, nemátodos y ostrácodos, sin embargo, este ambiente no ha sido tan estudiado como otros. El objetivo de este estudio es determinar la fauna intersticial que se encuentra en el cenote Los Tres Potrillos en Cozumel, Quintana Roo.

METODOLOGÍA

Área de Estudio La isla de Cozumel se encuentra en el Caribe mexicano y está formada por roca caliza, lo cual permite la filtración de agua y la formación de acuíferos y cenotes. La entrada al cenote Rancho Los Tres Potrillos se localiza a 20°27’05N, 86°59’15O (Figura 1); está rodeada de selva y hojarasca, desechos de los cuales caen en el cenote, formando una pila de débris. El agua presenta una coloración café debido a los taninos provenientes de la vegetación circundante. Procedimiento Se tomaron 3 muestras de sedimento utilizando 3 tubos de PVC de 50 cm de largo y 2 ½  pulgadas de diámetro. Éstos fueron bajados a 40 metros en el cenote con ayuda de dos buzos. Los tubos fueron incrustados en la pila de débris y tapados para después ser transportados a la superficie. La muestra se transportó al laboratorio, donde inmediatamente fue fijada con alcohol al 99% y almacenada. El análisis de la muestra se realizó primero a ojo desnudo y posteriormente, bajo el microscopio estereoscópico para identificar los organismos hasta el menor taxón posible con ayuda de la bibliografía.

CONCLUSIONES

Se encontraron cuatro especies distintas en la muestra del sedimento, entre las cuales el 50% eran hormigas y el 50% eran conchas de caracoles. La primera hormiga fue identificada como Acromyrmex octospinosus. Presenta una coloración café rojiza y su cabeza mide 2 mm Tiene una mandíbula que le sirve para cortar hojas y se caracteriza por sus espinas de punta plana o redondeada y escasa pubescencia en las esquinas posteriores de su cabeza. Es nativa de México, Sudamérica y el Caribe.             La segunda hormiga identificada se trataba de Dorymyrmex sp. Es encontrada en las regiones biogeográficas neártica y neotropical. Presenta una coloración café y ojos grandes. La forma de la cabeza es ovalada y tiene marcados lóbulos frontales. Presenta poca pubescencia principalmente en el área anterior de la cabeza y cerca de los lóbulos frontales. No se preservaron las mandíbulas de esta especie en la muestra. Posteriormente, se identificaron dos especímenes de caracol. El primero se trata de Calliostoma adelae, un molusco marino con gran número de estrías espirales granuladas. La apertura es cuadrangular y la forma de la concha es triangular. Presenta una coloración blanca con manchas color arena. Se trata de una especie comúnmente encontrada en el Golfo de México, no obstante, su distribución puede alcanzar el Caribe. Finalmente, se encontró un caracol perteneciente a la familia Pomatiidae identificado como Pomatias elegans. Su concha presenta una forma cónica ancha con espirales bien determinadas. Presenta una coloración café clara con la zona media de un color más oscuro. Cuenta con un gran número de estrías longitudinales y espirales y  una apertura circular. Ambas conchas fueron encontradas sin ningún tipo de tejido blando dentro de ellas. Adicionalmente, se encontraron varios fragmentos de artrópodos imposibles de identificar que no se muestran en el reporte. El descubrimiento de nuevas conchas de caracol puede significar la colonización de más especies marinas al ambiente anquihalino, sin embargo, la escasez de ejemplares sugiere la caída accidental de un organismo en movimiento, como un cangrejo ermitaño. No se descarta la posibilidad de nuevos registros de estos caracoles en los cenotes, sin embargo, se requieren estudios posteriores que comprueben dicha hipótesis.

Asesor: Dr. Jose Antonio Santos Moreno, Centro Interdisciplinario de Investigacion para el Desarrollo Integral Regional (IPN)

RIQUEZA Y ABUNDANCIA RELATIVA DE MAMíFEROS DE TALLA MEDIANA Y GRANDE PRESENTES EN EL PARQUE NACIONAL HUATULCO, SANTA MARIA HUATULCO - OAXACA.

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RIQUEZA Y ABUNDANCIA RELATIVA DE MAMíFEROS DE TALLA MEDIANA Y GRANDE PRESENTES EN EL PARQUE NACIONAL HUATULCO, SANTA MARIA HUATULCO - OAXACA.

Camargo Gonzales Laidis Tatiana, Universidad de la Guajira (Colombia). Velazquez Aviña Daniela Guadalupe, Universidad de Guadalajara. Villa Duarte Lydia María, Instituto Tecnológico de Los Mochis. Asesor: Dr. Jose Antonio Santos Moreno, Centro Interdisciplinario de Investigacion para el Desarrollo Integral Regional (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

México es el cuarto país magadiverso después de Brasil, Colombia e Indonesia albergando entre el 10% y el 12 % de todas las especies del planeta, México presenta un total de 535 especies de mamíferos  (Sierra et al 2014). Oaxaca ocupa el segundo lugar en riqueza de mamíferos en México con un total de 222 especies registradas (Santos-Moreno 2014) además es uno de los estados con mayor diversidad biológica en México, esto debido a las características biogeográficas de su ubicación ya que se encuentra en una zona de transición entre la Neártica y la Neotropical (Cruz-Jácome et al 2015). Las poblaciones de muchas especies de mamíferos silvestres se ven amenazadas por la presión antropogénica, generando cambios en la estructura de las poblaciones dentro de los ecosistemas. Los estudios y la obtención de registros acerca de su abundancia y riqueza son importantes para la conservación de los mamíferos, sin embargo esta información es escasa debido a problemas metodológicos para realizar un muestreo efectivo de las poblaciones. Los vacíos de información biológica aumentan el desconocimiento de los organismos presentes en los sistemas y por lo cual retrasa adelantos de proyectos de conservación y conocimiento de aspectos ecológicos de las especies, por esta razón es importante realizar estudios dirigidos al conocimiento del estado de las poblaciones naturales.

METODOLOGÍA

Área de estudio: El Parque Nacional Huatulco fue establecido en el año 1998 como una reserva ocupando una superficie de 11. 890 ha, de las cuales 6. 374 ha son terrestres y 5. 516 ha es zona marina. Huatulco presenta un clima cálido subhúmedo con un porcentaje de lluvias en verano mayor al 90% y con una temperatura media anual de 28 °C, se sitúa entre las coordenadas geográficas 15°39'12'' - 15°47'10'' de latitud Norte y 96°06'30'' - 96°15'00'' de longitud Oeste, ocupando el plano costero, las estribaciones de la Sierra Madre del Sur y la plataforma continental correspondiente (Lira y Ceballos 2010). Muestreo en campo: Se realizó una salida de campo del 20 al 26 de junio del 2019 al Parque Nacional Huatulco donde se realizó el monitoreo de cámaras trampas modelo Bushnell Trophy CamTM con sensor infrarrojo pasivo las cuales fueron colocadas con un mes de anterioridad, el total de cámaras monitoreadas fueron 53 ubicadas en cuadrantes y separadas a 500 metros una de otra, a las cámaras se les cambió baterías y memorias SD, las segundas fueron etiquetadas con número de cámara y fecha de retiro de la tarjeta SD para la posterior revisión y depuración de registros fotográficos. Análisis de datos: la obtencipon de los datos fue por método de Foto-Trampeo a los cuales se les determinó abundancia relativa y riqueza a cada una de las especies registradas. Abundancia relativa: Las estimaciones de abundancia por especie se obtuvieron como resultado del conteo de los individuos capturados por la unidad de esfuerzo, el método utilizado fue el de registro independiente, esto se entiende como las fotografías consecutivas de individuos de diferentes especies, fotografías consecutivas de individuos de la misma especie y las fotografías no consecutivas de individuos de la misma especie diferenciados por ciclos de 24 horas, en caso de registros fotográficos que capture dos individuos de la misma especie el registro absoluto será considerar a los dos individuos capturados.​ Riqueza: La riqueza se calculó como el registro neto de las especies encontradas en los registros fotográficos, es decir se entiende por riqueza como la composición de especies que presenta un área.

CONCLUSIONES

Se obtuvieron 156 registros independientes de 13 especies de mamíferos de talla mediana a grande. De las especies encontradas, las más abundantes fueron Sylvilagus cunicularius con un promedio de 59.3 registros independientes de fototrampeo; Leopardus pardalis  con un promedio de 27 registros independientes de fototrampeo; y Dasypus novemcinctus con un promedio 1.75 registros independientes de fototrampeo.  El conejo mexicano (S. cunicularius) habita en una gran diversidad de ambientes, principalmente en bosque tropical caducifolio, bosque de encinos, pastizal, entre otros, desde el nivel del mar hasta alrededor de los 4200 m de altitud. La relevancia ecológica de estos animales se basa en sus hábitos alimenticios que incluyen la ingesta de vegetales exclusivamente, por lo que mantienen el equilibrio en los ecosistemas al eliminar o controlar las malezas e incluso al dispersar semillas (Fernández, et al., 2015). También, al cavar madrigueras para refugio y reproducción, airean y reciclan los suelos. El ocelote (Leopardus pardalis) se distribuye en México por la península de Yucatán y el istmo de Tehuantepec. Ya en Oaxaca su distribución se bifurca a lo largo de ambos planos costeros por el Golfo de México hasta Tamaulipas y por el Pacífico hasta Sonora y Chihuahua. Es un animal terrestre pero también es arborícola. El armadillo (Dasypus novemcinctus) se distribuye en la península de Yucatán y el sur del país, ascendiendo hacia el centro hasta la altura del Estado de México, donde se bifurca. El armadillo presenta una tasa metabólica baja y una alta conductividad térmica, en parte debido a la ausencia de un pelaje denso. Esta característica posiblemente le confiere poca resistencia al frío y climas templados. Es necesario seguir realizando muestreos para que los datos obtenidos sean representativos aumentando las referencias dentro de una base de datos. Conocer la riqueza que presentan las áreas conservadas permite llevar un monitoreo de la variación de la densidad estructural a través del tiempo, de esta manera realizar acciones que aseguren la presencia de las poblaciones. 

Asesor: Dr. Roberto Alejandro Arreguin Espinosa de los Monteros, Universidad Nacional Autónoma de México

PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE TOXINAS CON ACTIVIDAD DE FOSFOLIPASA (PLA2) EN CONUS XIMENES Y CONUS PERPLEXUS

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PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE TOXINAS CON ACTIVIDAD DE FOSFOLIPASA (PLA2) EN CONUS XIMENES Y CONUS PERPLEXUS

Álvarez Rosales Paulette Carolina, Universidad de Sonora. Campillo Badilla Dalila, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Roberto Alejandro Arreguin Espinosa de los Monteros, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los caracoles del género Conus son moluscos marinos depredadores que comprenden alrededor de ~750 especies y son caracterizados por capturar a sus presas utilizando una glándula venenosa que produce un veneno paralizante (conotoxina) de acción rápida inyectado a través de una rádula dentada hipodérmica.  Las conotoxinas producidas por el género Conus, son péptidos pequeños (10 a 40 residuos y 2 a 4 puentes disulfuro). Los mecanismos de acción de las toxinas incluyen acciones sobre diversos órganos y sistemas, por ejemplo, el sistema nervioso, canales iónicos, operando como agonistas o antagonistas de receptores de neurotransmisores e inhibiendo los transportadores de los mismos, entre otras acciones. La gran diversidad que ofrecen las conotoxinas del veneno de los caracoles marinos (~100-400 toxinas venenosas distintas), hace de estos organismos una excelente fuente de moléculas con potencial farmacoterapéutico debido a su actividad biológica altamente específica y selectiva.  A pesar de la tremenda diversidad y potencial de descubrimiento de fármacos de los venenos de Conus, solo alrededor del 0,2% de la biblioteca de péptidos de conotoxinas se ha catalogado.  El trabajo enfocado durante la estancia de investigación fue sobre la actividad fosfolipasa de las toxinas, esto es debido a que los productos de hidrólisis de la reacción de estos en ácidos grasos pueden ser importantes como depósitos de energía, como segundos mensajeros, precursores de eicosanoides, importantes en la señalización celular, la remodelación de fosfolípidos y la perturbación de la membrana. Con base a lo anterior, se trabajó con las conotoxinas dentro del aparato venenoso de dos caracoles del género Conus: C. ximenes y C. perplexus mediante la separación del mismo en sus tres partes principales: bulbo, conducto y rádula, para su posterior caracterización y la determinación de actividad de fosfolipasa (PLA2).

METODOLOGÍA

A varios caracoles marinos, Conus perplexus y C. ximenes, se les extrajo el aparato venenoso, utilizando un estuche de disección. Posteriormente este se dividió en bulbo, conducto y rádula. La disección se llevó a cabo utilizando especialmente agujas de tipo entomológicas, pinzas y bisturí, y apoyándose también de un estereoscopio. Las estructuras disectadas fueron congeladas.  Después, cada muestra se homogenizó con nitrógeno líquido y luego se suspendió en agua Milli-Q. Luego, todas las muestras resuspendidas se centrifugaron a 14,000 rpm durante 10 minutos a 4°C con el fin de descartar todo lo que no fuera veneno, por lo que solo se recogió el sobrenadante. Posteriormente, las diferentes muestras decantadas se sometieron a un proceso de secado a través de la utilización del Speed Vac.   Después, las muestras fueron diluidas en 1000 μl de agua Milli-Q para realizar la cuantificación de proteínas por Nanodrop. Cada uno de los diferentes tipos de muestras que se introdujeron al HPLC, se estandarizaron a una misma concentración (1500 μg/ml). Además, los parámetros que se siguieron fueron los siguientes: el tipo de columna que se empleó correspondió a una de tipo C18 de silica, el volumen de inyección fue de 130 μl, el flujo al cual se sometió la muestra fue de 0.700 ml/min, las longitudes de onda que se determinó que revelara el detector fueron las de 220 y 280, los solventes que se utilizaron para la fase móvil fueron agua Milli-Q más 0.1% de TFA y acetonitrilo más 0.1% de TFA. Luego se realizaron pruebas por triplicado en una microplaca para determinar actividad fosfolipasa, en donde cada pozo contenía 50 μl de un solo tipo de muestra, 25 μl de mezcla de liposomas y 25 μl de buffer reacción. Los blancos y controles también se hicieron por triplicado, en donde los primeros estaban conformados por 50 μl tanto de buffer reacción como de substrato, y los segundos estaban compuestos por 25 μl de buffer reacción, 25 μl de la fosfolipasa PLA2 y 50 μl de substrato. Una vez agregadas todas las sustancias a la microplaca, esta se cubrió con aluminio y se dejó incubando durante 10 minutos, para después ser analizada a través de un lector de microplacas.      Las pruebas de espectrometría de masas fueron realizadas con un total de 1 μg por cada una de las tres estructuras aisladas del aparato venenoso, y llevadas a cabo por el Laboratorio de Cromatografía perteneciente al Instituto de Química.

CONCLUSIONES

De acuerdo con los materiales y métodos descritos, se puede concluir que se logró aislar el veneno de cada una de las partes del aparato venenoso (bulbo, conducto y rádula) y obtener su purificación mediante la polaridad de cada una de las partes por medio de HPLC en fase reversa. Adicionalmente, es preciso señalar que de las pruebas realizadas para la actividad de fosfolipasa, solamente la estructura radular obtuvo un resultado positivo. No obstante, debido la complejidad de las conotoxinas y al largo proceso que se tiene que llevar a cabo para la purificación de estas, no fue posible obtener todos los resultados propuestos, como fue el caso de la determinación de masas moleculares mediante la espectrometría de masas (MALDI-TOF).

Asesor: Dr. María de Lourdes Ruiz Gómez, Universidad Autónoma del Estado de México

EXPLORACIóN E INTREPIDEZ EN HEMBRAS DE ASPIDOSCELIS COSTATUS COSTATUS ANTES Y DESPUéS DE LA OVIPOSICIóN.

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EXPLORACIóN E INTREPIDEZ EN HEMBRAS DE ASPIDOSCELIS COSTATUS COSTATUS ANTES Y DESPUéS DE LA OVIPOSICIóN.

Campos Fernández Jesús Fernando, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. María de Lourdes Ruiz Gómez, Universidad Autónoma del Estado de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Objetivo general Evaluar aspectos de la variación individual en la conducta de hembras de Aspidoscelis costatus costatus antes y después de la oviposición. Objetivos específicos Evaluar el nivel de intrepidez de hembras grávidas de Aspidoscelis costatus costatus al exponerse a un ambiente novedoso. Evaluar el nivel de exploración de hembras grávidas de Aspidoscelis costatus costatus al exponerse a un ambiente novedoso. Evaluar el nivel de intrepidez de hembras recién ovipositadas de Aspidoscelis costatus costatus al exponerse a un ambiente novedoso. Evaluar el nivel de exploración de hembras recién ovipositadas de Aspidoscelis costatus costatus al exponerse a un ambiente novedoso. Determinar las diferencias en los niveles de intrepidez y exploración en hembras de Aspidoscelis costatus costatus antes y después de la oviposición. Justificación A pesar de que esta especie se considera endémica de la República Mexicana, hay escasos estudios referentes a la personalidad y perfil conductual a cambios ambientales de A. costatus costatus. Por este motivo, es de suma importancia la evaluación de la exploración e intrepidez en hembras de Aspidoscelis costatus costatus antes y después de la oviposición, ya que esto aportará información significativa y una mejor comprensión de la ecología de esta especie. Hipótesis La intrepidez y exploración serán diferentes entre hembras de Aspidoscelis costatus costatus antes y después de la oviposición. De esta manera, se espera observar que las hembras una vez que hayan ovipositado, serán más intrépidas y tendrán una mayor capacidad de exploración que en su etapa de gravidez ya que una hembra grávida puede ser más vulnerable en un ambiente novedoso.

METODOLOGÍA

Área de Estudio El municipio de Tonatico se localiza la parte sur del Estado de México entre los paralelos 99º 40’ longitud oeste, y 18º 48’ de latitud norte. La mayoría del territorio se ubica a los 1,650 metros sobre el nivel del mar. Se realizaron dos muestreos en esta zona los días 19 de Junio y 4 de Julio de 2019, en los cuales se obtuvieron 10 hembras grávidas de Aspidoscelis costatus costatus. La presencia de ondulaciones en el área interaxilar de la hembra y la palpación de los huevos internos denota claramente el estado de gravidez de la misma. Las hembras fueron trasladas en sacos de tela al Laboratorio de Ecología y Conducta de la Universidad Autónoma del Estado de México, y una vez medidas y pesadas fueron colocadas individualmente en terrarios armados con contenedores de plástico de 34cm de alto y 50cm de largo por 33cm de ancho. Se realizó un corte en la tapa del contenedor y se colocó una malla de metal, la cual funciona como respirador y para una fácil recepción del calor. Previamente se vertió peat moss en los terrarios como sustrato y se humedeció para que las situaciones fueran óptimas para la preservación del ejemplar. Los terrarios se mantuvieron en un estante bajo la luz de dos focos, uno de 100 watts especial para suministrar calor alrededor de 30°C y el otro consistió en una lampara VitaLite de 17W la cual proveé de rayos UV necesarios para la lagartija. Diariamente se humedeció el terrario y se alimentó las lagartijas con grillos suplementados con calcio y minerales para reptiles. Dentro del terrario se colocó un medio tubo de PVC de 9.7 x 9.7cm el cual sirvió de refugio para la lagartija. Experimentos En los experimentos se evaluaron las lagartijas grávidas que se colectaron (antes de la oviposición) y las mismas lagartijas se volvieron a evaluar una vez que ovipositaron (después de la oviposición). Para la realización de los experimentos se utilizó una maqueta de forma circular con un perímetro de 116.8cm, un diámetro de 37.7cm y un alto de 30.5 cm, en el cual se hizo una división de 12.6cm para el área denominada como sitio seguro. Se hizo una compuerta removible para que el individuo a evaluar pudiera acceder a ambas divisiones de la maqueta. Las paredes del área novedosa, o sitio de exploración, estaban estampadas con imágenes de plantas acuáticas y se colocaron objetos ajenos (animales de plástico) al ambiente natural de la lagartija. La evaluación de la lagartija se realizó con ayuda de una cámara de video colocada en un tripie y se dividió en dos fases. En la primera, se colocó a la hembra en la parte denominada como sitio seguro durante 10min dejándola sola y sin ruido, proporcionándole luz directa de un foco de 100 watts que le proveía el calor para aclimatarse al sitio. Para la segunda fase terminado los 10min de reposo, se tapó esa zona y el foco se cambió de posición hacia el área de exploración, se abrió la compuerta y se dejó 15 min a la hembra para que pudiera salir y explorar. Los 15min de exploración se grabaron con la cámara de video para su posterior análisis. Obtención de datos y análisis Los videos recopilados fueron revisados para obtener el tiempo en que la lagartija estuvo en las dos áreas de la maqueta (sitio seguro y área de exploración), tomando en cuenta el tiempo en refugio y una vez que la lagartija salió (intrepidez), el tiempo de exploración y el tiempo inmóvil. De la misma manera, con ayuda de una hoja de acetato colocada sobre la pantalla al analizar el video, se dividió el área de exploración en 3 zonas y se contabilizó el número de veces que la lagartija se trasladaba por cada una. Estos datos se analizarán estadísticamente con pruebas paramétricas y no paramétricas adecuadas con la finalidad de poner a prueba la hipótesis establecida.

CONCLUSIONES

En cuanto a los resultados se espera lo siguiente: Que las hembras de Aspidoscelis costatus costatus varíen en la intrepidez-exploración antes y después de la oviposición. Que exista una relación entre la intrepidez y la exploración antes y después de la oviposición, donde posiblemente las hembras después de la oviposición sean más intrépidas y exploren más un ambiente novedoso.

Asesor: Dr. Fausto Roberto Méndez de la Cruz, Universidad Nacional Autónoma de México

CAMBIO CLIMáTICO Y SU EFECTO EN REPTILES Y ANFIBIOS

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CAMBIO CLIMáTICO Y SU EFECTO EN REPTILES Y ANFIBIOS

Canizales Juarez Lourdes Gabriela, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Fausto Roberto Méndez de la Cruz, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El proyecto de Cambio climático y sus efectos en reptiles y anfibios tiene como objetivo determinar la vulnerabilidad de los reptiles y anfibios ante el cambio climático, para esto es necesario obtener los datos de ecología térmica de los organismos en campo y en condiciones de laboratorio. La finalidad del estudio de estos datos de temperaturas es obtenerlas horas de restricción y determinar el riesgo de extinción de algunas especies de lagartijas. El cambio climático es uno de los problemas ambientales más grandes que está sufriendo el planeta, afectando a miles de especies. Muchos organismos no han logrado adaptarse a los cambios de temperatura o logrado migrar a otros sitios, llevándolos a la extinción, situación que está ocurriendo con miles de especies actualmente, entre ellos, los reptiles y anfibios, los cuales, en el pasado no eran considerados victimas del calentamiento global ya que, estos animales pueden alcanzar temperaturas corporales altas, soportar la deshidratación y evadir el estrés térmico mediante el comportamiento. Sin embargo, actualmente existen estudios que afirman lo contrario, los reptiles y anfibios son afectados de igual o peorforma, que otros animales, ya que al ser ectotermos dependen de cierta manera de las temperaturas que ofrece el ambiente.

METODOLOGÍA

Toma de temperatura corporal en campo: Durante las salidas de campo, se colectaron lagartijas del género Aspidoscelis y Sceloporus y salamandras del género Ambystoma. Al momento de capturar a los animales fue necesario tomarle la temperatura corporal lo más pronto posible, para evitar que el animal ganara o perdiera calor. De igual forma se tomaron la temperatura del sustrato donde fue encontrado y la temperatura del aire (5cm arriba del sustrato). Gradientes de temperatura: Esto consiste en varios carriles largos, donde se le ofrecen al animal ciertas temperaturas. Uno de los extremos del carril tenia temperaturas cálidas (entre 40 y 50°) que se conseguían poniendo focos o calentadores y el otro extremo contaba con temperaturas más frías (entre 16y 20°), esta podía ser obtenida con hielos para enfriar el agua en el caso de las salamandras. Se marcaron los animales y se colocaron uno o dos por carril y se dejaron aclimatar por dos horas. Pasando las dos horas se tomó la temperatura seleccionada de cada animal y se registró. La toma de las temperaturas seleccionadas se realizó cada hora durante 6 horas en el caso de las lagartijas, y para las salamandras el tiempo de aclimatación fue de media hora y la toma de temperatura corporal se realizó cada 10 minutos por 1 hora y media. El objetivo de esto es dejar al animal que se desplace por los carriles y encuentre una temperatura ideal para él, de esta forma se puede comparar la temperatura seleccionada con la de campo.  Temperaturas críticas: Las temperaturas críticas son la temperatura máxima y mínima que un animal puede soportar, antes de entrar en estrés térmico. Para determinar las temperaturas críticas de las lagartijas estudiadas fue necesario someterlas a bajas y altas temperaturas. En el caso de la crítica mínima, se lleva al animal a un lugar frio, puede ser un recipiente cerrado con hielos o un congelador, para saber cuál es su temperatura mínima se dejó al animal dentro por varios minutos, se sacó y colocó con el vientre hacía arriba, si el animal se volteaba era necesario meterlo por más tiempo. Se tomó la temperatura corporal cuando al momento de voltear al animal este no podía incorporase. Para la temperatura critica máxima, se utilizó una metodología similar, pero el animal fue sometido a altas temperaturas con ayuda de focos incandescentes. Las temperaturas criticas pueden ayudar a determinar los límites térmicos a de los organismos y estimar algún posible riesgo ante el cambio climático, si es el caso en que las temperaturas ambientales u operativas  superan estos límites durante un tiempo prolongado. . Calibración de modelos para temperaturas operativas: La temperatura operativa (Te) es la temperatura que tendría el animal en campo y sin poder termoregular. Estas temperaturas son de suma importancia para conocer las horas de restricción del animal y así calcular su riesgo de extinción, ya que si las Te exceden en durante una hora las Tsel se puede decir que existe una hora de restricción en la que el animal no puede realizar sus actividades. Para esto es necesario hacer modelos que se colocan en el microhábitat  de los organismos de estudio. Estos modelos pueden ser de PVC cobre o agar para el caso de anfibios. Posteriormente, se utilizan registradores de datos para tomar las temperaturas cada 10 minutos durante los meses en que los organismos se encuentran más activos (varía dependiendo de la especie).Para la calibración del modelo, se toma un ejemplar típico de la especie y se inmoviliza, para evitar la termorregulación,  y  se colocan el organismo y el modelo en un recipiente donde se pueda dar episodios de sol y sombra, y se toma la temperatura de ambos cada 3 minutos por 3 horas aproximadamente. Después se realiza una correlación lineal para obtener el valor de r2, . Si el valor de r2 es mayor a 0.7, se considera que el modelo es adecuado.

CONCLUSIONES

Gracias a la toma de datos en campo, el trabajo en laboratorio con los experimentos y base de datos fue posible conocer sobre la ecología térmica de varias especies de lagartijas y de una salamandra. Pudimos conocer las temperaturas seleccionadas de los bichos, su rango de temperaturas críticas, conocer si eran termorreguladores activos o termoconformistas, si eran precisos o tenían buen grado de termorregulación, si la calidad térmica del hábitat donde estaban era buena, entre varias cosas. Datos que en un futuro ayudaran a determinar la vulnerabilidad de estas especies ante el cambio climático y conocer el riesgo extinción que tienen. 

Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

REACCIóN DE CONDENSACIóN ENTRE ACETONA Y (R,S)-α-METILBENCILAMINA PARA LA FORMACIóN DE N-(1-FENILETIL) PROPAN-2-IMINA

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REACCIóN DE CONDENSACIóN ENTRE ACETONA Y (R,S)-α-METILBENCILAMINA PARA LA FORMACIóN DE N-(1-FENILETIL) PROPAN-2-IMINA

Cano Pérez Arely Fayde, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Introducción: Las aminas primarias quirales juegan un papel esencial en la preparación de productos naturales, ingredientes farmacéuticos activos y otros derivados importantes.[1]. Las iminas conocidas como azometinas o bases de Schiff de formula general  R3R2C=N-R1 son preparadas por la reacción de un aldehído o cetona con una amina primaria eliminando una molécula de agua, esta se puede acelerar por catálisis acida y generalmente se lleva a cabo a reflujo de una mezcla de un compuesto carbonilo y una amina, en un aparato Dean Stark para eliminar el agua, es importante su separación debido a que la conversión del intermediario carbinolamina en la imina es reversible. Varios agentes deshidratantes se han utilizado con éxito incluido el sulfato de sodio y tamices moleculares. En lo referente al uso del catalizador ácido se ha reportado el uso de ácidos minerales, como H2SO4 o HCl, ácidos orgánicos como ácidos p-toluenosulfónicos o piridinio p-toluenosulfonato, incluso ácidos de Lewis tales como ZnCl2, TiCl4, SnCl4, BF3Et2O, MgSO4, Mg(ClO4)2.[2] La reacción de formación de enlaces C-N es una de las transformaciones más importantes en la química sintética moderna y desempeña un papel vital en los sistemas biológicos y químicos. En particular debido a su reactividad diversa, las iminas y sus derivados se han convertido en intermediarios cruciales en la síntesis de compuestos nitrogenados biológicamente activos y se han utilizado ampliamente en la preparación de productos farmacéuticos, colorantes, fragancias, fungicidas y productos químicos agrícolas.[3].

METODOLOGÍA

Metodología: La primer reacción se realizó en un vial limpio con un agitador magnético, se colocó 1.0072 mmol de la mezcla racemica de α-metilbencilamina (0.1297 ml), y acetona (0.0074 ml), se agitó vigorosamente durante 45 min a temperatura ambiente. Pasado el tiempo se extrajo el crudo de reacción que es un líquido amarillo claro, se filtró sobre sulfato de sodio y fue analizado por RMN, usando como disolvente CDCl3. Observando las señales características de acetona y α-metilbencilamina con un rendimiento de la imina de 38%. Posteriormente se realizó una segunda reacción utilizando 5 mmol de α-metilbencilamina y acetona, y se agregó 50 mg de Na2SO4, se colocó el vial sobre la parrilla de agitación durante 23 h manteniendo la misma temperatura. El análisis de los espectros de RMN mostraron señal de materia prima con un rendimiento de imina de 25.31%. El crudo de reacción que al principio fue líquido y en color amarillo comenzó a solidificar por lo que se dejó evaporar la acetona durante 1 fin de semana y al final con flujo de aire obteniendo un polvo blanco. El cual fue analizado por RMN, encontrando solo señal de amina por lo que se concluyó que el producto de reacción es volátil. Para mejorar el rendimiento del producto se realizó una tercera reacción adicionando 6 mmol de α-metilbencilamina y 12 mmol de acetona y se agitó durante 23 h con 40 min. El crudo de reacción se obtuvo como un líquido amarillo claro y se determinó la muestra por RMN, observándose señales de materia prima y el rendimiento del 50%. Debido a que el rendimiento no fue óptimo para pasar a la reducción se procedió a realizar una cuarta reacción con la misma cantidad de mmol y condiciones de la reacción anterior cambiando únicamente el tiempo de reacción a 72 h con 40 min. Sin embargo en esta reacción el rendimiento fue de 15%. Se realizó una quinta reacción utilizando 8.25 mmol de α-metilbencilamina y 335.74 mmol de acetona y se agregó 100 mg de Na2SO4,. La reacción se llevó a cabo en reflujo durante 3 h y posteriormente se realizó destilación fraccionada. El crudo de reacción se filtró obteniendo un líquido amarillo claro, el cual se analizó por RMN, determinando subproductos que no se observaban anteriormente y un rendimiento del 75%.

CONCLUSIONES

Conclusión Se llevará a cabo otra reacción con la misma metodología que la quinta reacción ya que es de la que se reporta mayor rendimiento, se mejorará el monitoreo en los tiempos y temperatura para evitar en lo posible la formación de subproductos y favorecer la producción de la imina. Es de gran interés realizar la reducción de la imina para llegar a la obtención de la amina secundaria que podrá incluirse en β-ciclodextrina. Durante la estancia de verano se han adquirido conocimiento sobre Resonancia Magnética Nuclear que nos han permitido ampliar el panorama de conocimientos teóricos para aplicarlos en los resultados obtenidos en la parte experimental. Bibliografía [1]. Biondi., W. Q. (08 de Octubre de 2013). Schiff Bases: A Short Survey on an Evergreen Chemistry Tool. [2]. Sheng Guo, J. C. (2018). A Practical Electrophilic Nitrogen Source for the Synthesis of Chiral Primary amines by Copper-Catalyzed Hydroamination. Massachusetts, United States. [3]. Nama, V. A. (2017 de Octubre de 03). Hβ Catalyzed Condensation Reaction Between Aromatic Ketones and Anilines: To Access Ketimines (Imines).  

Asesor: Dr. Omar Chassin Noria, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

ANáLISIS DE ASIMETRíA FLUCTUANTE Y COMPARACIóN DE TéCNICAS MOLECULARES EN LA FAMILIA POMACENTRIDAE

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ANáLISIS DE ASIMETRíA FLUCTUANTE Y COMPARACIóN DE TéCNICAS MOLECULARES EN LA FAMILIA POMACENTRIDAE

Canul Palma Ivan, Consejo Quintanarroense de Ciencia y Tecnología. García Palacios Jessica Alejandra, Consejo Quintanarroense de Ciencia y Tecnología. Martínez Farías José Mauro, Consejo Quintanarroense de Ciencia y Tecnología. Pérez Suaste Lilia Margarita, Consejo Quintanarroense de Ciencia y Tecnología. Asesor: Dr. Omar Chassin Noria, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

COMPARACION DE PROTOCOLOS DE EXTRACCIÓN DE ADN Existen diversas técnicas moleculares para el estudio de peces, como la extracción de ADN, factores influyentes en esta técnica es el tipo de tejido a utilizar y el protocolo empleado. Hay varios protocolos de extracción, sin embargo, es importante estandarizar uno y mostrar la eficacia en su amplificación por PCR, la cual es el objetivo final. Compararemos dos protocolos de extracción de ADN utilizando tejidos de músculo de pez, larva y aleta, para así cuantificar el ADN extraído y ver su eficacia en la amplificación por PCR. ASIMETRIA FLUCTUANTE Un fenotipo ideal juega un rol importante en la naturaleza, por ejemplo, en el caso de las simetrías y asimetrías, se ha comprobado que los organismos simétricos tienen un mayor éxito reproductivo ya que provee ventajas sobre los organismos asimétricos, por ello, se estimarán la asimetría fluctuante entre dos especies Stegastes acapulcoensis y Stegastes  flavilatus, con la finalidad de saber si alguno de estos presenta una simetría ideal que lo vuelve más capaz de reproducirse y por tanto que se encuentre con mayor abundancia.

METODOLOGÍA

los dos protocolos que se compararon fueron los de: Aljanabi y Martínez (1997) y FitzSimmons et al. (1997) ; con los dos protocolos se realizaron extracción de ADN en aleta de peces ,larva y músculo, para saber si la extracción se efectuó correctamente cada muestra se corrió en geles de agarosa, una vez que se verifico el éxito de la extracción se realizaron mediciones en el espectrofotómetro para saber cuánto ADN había en cada muestra de los diferentes protocolos y se realizó una PCR para medir la asimetría fluctuante se contó los radios de cada una de las aletas pectorales (Izquierda y derecha) y se midió el largo total de los peces con el software imagej , la especies analizadas fueron Stegastes acapulcoensis y Stegates flavilatus.

CONCLUSIONES

La comparación de protocolos nos ayuda a elegir el mejor método para realizar la extracción de ADN y una buena extracción es fundamental cuando se quieren realizar estudios moleculares La evaluación de la asimetría nos ayuda a saber si es un factor que determine la abundancia en las especies, ya que mientras más simétrico mayor éxito reproductivo.

Asesor: Dr. Ma. Nieves Trujillo Tapia, Universidad del Mar

EVALUACIóN DE LAS MICROALGAS: SPIRULINA SP. Y CHLORELLA SP. COMO ENMIENDA DEL SUELO.

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EVALUACIóN DE LAS MICROALGAS: SPIRULINA SP. Y CHLORELLA SP. COMO ENMIENDA DEL SUELO.

Capistrán Pintor Crisol Alejandra, Instituto Tecnológico de Colima. Morales Morales Isidro, Instituto Tecnológico Superior de Los Reyes. Asesor: Dr. Ma. Nieves Trujillo Tapia, Universidad del Mar

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La contaminación del suelo ha ido aumentando por el uso excesivo de los agroquímicos, afecta la actividad de los microorganismos, modificando los procesos biológicos para mantener la fertilidad y la productividad de los cultivos. El uso de agroquímicos provoca la disminución significativa de microorganismos y baja actividad microbiana. Debido a este problema se tiene la necesidad de buscar alternativas sostenibles y ecológicas para la recuperación del suelo contaminado. Las enmiendas de suelo son materiales de diferente naturaleza y entre sus principales beneficios se encuentra el mejorar las características físicas, químicas y biológicas del suelo en donde se aplica la enmienda. Algunas de las posibles enmiendas son las microalgas , ya que estas contribuyen a la fertilidad del suelo por su producción de carbono y la fijación el nitrógeno atmosférico (en algunas especies). Por lo anterior, el objetivo del proyecto es evaluar el efecto de las microalgas Spirulina sp. y Chlorella sp. como enmienda del suelo, monitoreando la actividad microbiana y la concentración de C y N de la biomasa microbiana. Aplicar dos tipos de microalgas, Spirulina sp. y Chlorella sp., como enmienda en diferentes de suelos, nos da la oportunidad de conocer el comportamiento de ambos tipos de microalgas en suelos con diferentes características y evaluar el efecto que tiene cada una de estas al pasar el tiempo, incrementando sus niveles de carbono y nitrógeno para obtener como beneficio el incremento de nutrientes y por ende detoxificar los suelos recolectados.

METODOLOGÍA

El desarrollo del experimento se realizó en el laboratorio de investigación de la Universidad del Mar (Campus Puerto Ángel, Oaxaca), trabajando con dos tipos de cianobacterias, Spirulina sp. y Chlorella sp., y dos tipos de suelo. Uno de ellos fue recolectado en La Herradura, donde presenta un tipo de suelo arcilloso y el otro en Puerto Ángel, con una textura de suelo arenoso, ambos dentro del estado de Oaxaca. Los parámetros medidos durante la evaluación de las cianobacterias en los dos tipos de suelo son: cuantificación de CO2, Carbono de la biomasa microbiana (CBM) y Nitrógeno de la biomasa microbiana (NBM) mediante el método de fumigación-extracción (Vance, et al. 1987). Para cada muestra se pesaron 30 g de suelo, aplicando una concentración de 36 Mgha-1 de cada una de las cianobacterias (Chlorella sp. y Spirulina sp.). Cada frasco se introdujo en una jarra con una capacidad de dos litros, junto a un vial con NaOH al 1M.   Se realizó un monitoreo de 35 días en donde se evaluó el efecto como enmienda de las cianobacterias. Cada una de las muestras se dividieron en dos partes, una de estas se llevó a un tratamiento sin fumigación y la segunda parte se sometió un tratamiento de fumigación con cloroformo durante 24 horas. Se agregaron 60 ml de K2SO4 al 0.5 M en las muestras fumigadas y no fumigadas y se llevaron agitación durante 30 minutos. Posteriormente, se filtraron y se obtuvieron los extractos. Extracción y cuantificación del Carbono de biomasa microbiana (CBM) y Nitrógeno de la biomasa microbiana (NBM). La extracción y cuantificación de CBM y NBM es la metodología propuesta por Vance, et. al 1987. En la extracción de CBM, se tomaron 20 ml del extracto de cada una de las muestras (fumigadas y no fumigadas) y se agregan 5 ml de K2CrO7 al 0.4 N, 10 ml de una mezcla de ácidos 2:1 de H2SO4 y H3PO4, para después someter las muestras a reflujo durante 45 minutos. La cuantificación se determina mediante una titulación con sulfato ferroso amoniacal al 40 Mm usando fenantrolina como indicador. Para la extracción de NBM, se tomaron 0.6 ml de extracto y se le adicionó 1.4 ml de búfer de ácido cítrico, 1 ml de reactivo de ninhidrina y se agitó. Posteriormente las muestras se llevaron a baño maría durante 25 minutos, se dejaron enfriar a temperatura ambiente, se agregaron 4 ml de una mezcla 1:1 de etanol - agua y se agitaron nuevamente. La cuantificación se determina mediante una lectura en el espectrofotómetro a una longitud de onda de 570 nm. Cuantificación de CO2 Para cuantificar la cantidad producida de CO2, se utiliza la metodología propuesta por Anderson, 1982. Se tomaron 5 ml de cada una de los viales de NaOH, adicionando 50 ml de agua destilada y posteriormente realizando una titulación con HCl al 2N y HCl al 0.1 N, usando como indicador la fenolftaleína hasta obtener una coloración incolora. La cuantificación se realiza titulando nuevamente con HCl al 0.1 N y usando como indicador naranja de metilo hasta obtener una coloración canela.

CONCLUSIONES

La metodología utilizada nos ayuda a cuantificar los niveles de BMC, BMN y CO2 presentes en cada una de las muestras de suelo y así observar la evolución que tiene cada uno de ellos. En los resultados obtenidos, durante los 35 días de incubación, son significativas las diferencias en cada uno de los suelos (arcilloso y arenoso) con la presencia de las microalgas (Spirulina sp. Y Chlorella sp.) en el contenido de CBM y NBM; se encuentra con mayor eficiencia como enmendador de suelo la Spirulina sp. en el suelo de la Herradura del estado de Oaxaca; ya que probablemente al ser un tipo de suelo más arcilloso y con mayor capacidad de retención de agua, tenga un mayor efecto sobre el suelo contaminado al tener mejores condiciones para poder desarrollar las cianobacterias presentes. Esto nos abre camino a continuar con las investigaciones sobre este tipo de microalga y poder aplicarlo como biorremediador en posteriores investigaciones hasta lograr un suelo totalmente fértil. BIBLIOGRAFÍA Anderson, J., P. (1982). Soil respiration. In: Page AL, Miller, R. H, Keeney, D. R, (eds) Methods of soil analysis, part 2, 2nd edn. Agronomy monograph no. 9. American Society of Agronomy, Soil Science Society of America, Madison, Wis, pp 837-871. Vance, E., Brookes, P., & Jenkinson, D. (1987). An extraction method for measuring soil microbial biomass C. Soil Biology and Biochemistry, 19, 703-707

Asesor: Dr. Santiago Chacón Zapata, Instituto de Ecología (CONACYT)

BIODIVERSIDAD DE LOS HONGOS (ASCOMICETOS) DEL PARQUE LOS TECAJETES DE XALAPA, VERACRUZ.

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BIODIVERSIDAD DE LOS HONGOS (ASCOMICETOS) DEL PARQUE LOS TECAJETES DE XALAPA, VERACRUZ.

Capistrano Vázquez Yoloxochitl, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Santiago Chacón Zapata, Instituto de Ecología (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Existen a nivel mundial alrededor de 1.5 millones de especies de hongos, de las cuales solo se conoce el 5%. Estimaciones de micólogos mexicanos consideran que en México crecen aproximadamente 200 000 especies de hongos, y de ellas apenas se tiene catalogado el 3.2 %, siendo Veracruz, uno de los estados mejor representados con alrededor de 1500 especies (Chacón y Utrera, 2019). Los ascomicetos conforman el grupo de hongos más grande, diverso y ecológicamente importante; representan 60% de las especies y 72% de los géneros descritos (Ávalos et al., 2018). En México, de acuerdo con Aguirre et al. (2014) se conocen  646 especies de Ascomicetos repartidos en 275 géneros y 86 familias, incluyendo líquenes. Medel (2007), estima que se conocen para el país 686 especies de ascomicetes principalmente macroscópicos. Esta cifra representa apenas el 2.1% de lo que potencialmente se considera pudiera existir en el país, dicha cifra incluye especies macro y microscópicas, estas últimas son aún más abundantes y muy poco conocidas. De acuerdo con observaciones de Chacón y Utrera (2019) se han recolectado alrededor de 1600 ejemplares de ascomicetos en áreas verdes urbanas y periurbanas de Xalapa, que incluyen al Santuario del bosque de Niebla, Parque Natura, Cerro de Macuiltépec ,Molinos de San Roque, Los Tecajetes y Los Berros, Sin embargo,  hasta ahora no se cuenta con un estudio formal sobre estos hongos en ninguna de las áreas citadas, es por eso que con el presente trabajo, se pretende dar a conocer la diversidad de los ascomicetos presentes en una de estas áreas como es el parque urbano Los Tecajetes.

METODOLOGÍA

Se realizaron dos salidas de campo al área de estudio Parque Recreativo Los Tecajetes, con el propósito de recolectar el mayor número posible de hongos ascomicetos Los ejemplares fueron llevados al laboratorio para realizar la identificación microscópica de cada uno de ellos. Para identificarlos se realizaron cortes de los ascomas y se hicieron preparaciones para su observación en el microscopio de luz, donde se tomaron medidas de ascas, ascosporas y paráfisis que resultan útiles para la determinación. Para determinar e identificar los hongos ascomicetos se utilizaron claves dicotómicas publicadas en libros generales sobre ascomicetos y/o artículos de investigación específicos a cada especie. Por último, se realizaron esquemas y toma de fotografías de estructuras macro y microscópicas que resultaron útiles en las determinaciones.

CONCLUSIONES

A pesar de que la temporada en que se realizaron las recolectas de ascomicetos no fue óptima, se  lograron obtener 24 ejemplares. Llama la atención de que a pesar de  que el parque recreativo de Los Tecajetes se encuentra en pleno centro de la ciudad de Xalapa, en dos visitas al sitio, y a partir de los 24 ejemplares previamente colectados, se lograron determinar 16 especies, y solo unos pocos fueron desechadas debido a la carencia de estructuras fértiles, situación que limitó su determinación. Con los resultados logrados queda la impresión de que el potencial sobre la riqueza biológica de los hongos ascomicetos en el parque de Los Tecajetes es prometedora y significativa, de ahí que si se pretende alcanzar un mejor conocimiento sobre la diversidad biológica de estos organismos en dicho sitio, se requiere incrementar las exploraciones y estudio de este importante grupo de hongos. Por otro lado, durante el verano de investigación nos dimos cuenta que hacen falta micólogos que realicen este tipo de investigaciones.

Asesor: Dr. Ma. Dolores González Hernández, Instituto de Ecología (CONACYT)

IDENTIFICACIóN DE HONGOS DE HOJARASCA DE SUELO RECOLECTADAS EN LA ZONA ARQUEOLóGICA “LA VENTA” CON MéTODOS MOLECULARES Y SU POTENCIAL PARA EL BIOCONTROL DE PLAGAS.

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IDENTIFICACIóN DE HONGOS DE HOJARASCA DE SUELO RECOLECTADAS EN LA ZONA ARQUEOLóGICA “LA VENTA” CON MéTODOS MOLECULARES Y SU POTENCIAL PARA EL BIOCONTROL DE PLAGAS.

Capuchina Gonzalez Saida Marisol, Universidad Autónoma de Tamaulipas. Asesor: Dr. Ma. Dolores González Hernández, Instituto de Ecología (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La Venta es una zona arqueológica que se ubica en el centro de la ciudad de Villahermosa. El tipo de vegetación que predomina en el área es selva alta perennifolia. El clima es cálido húmedo con lluvias en verano, con un promedio de precipitación anual entre los 1,600 y 2,000 mm. La Venta constituye un área natural protegida y es considera una de las primeras ciudades del antiguo México, la región fue habitada desde al menos 5,000 a. C., cuando se cultivaba maíz y yuca domesticados. Está rodeada por una extensa red de cuerpos de agua dulce y salada, con abundante flora y fauna comestibles, al igual ricos suelos aluviales para la agricultura. En esta región de la costa del Golfo de México, no se encuentran yacimientos de piedra. Por ello, la arquitectura es de tierra. La Venta presenta el primer trazo planificado de una ciudad prehispánica. Debido a que es una zona protegida, existen pocos trabajos sobre las especies de microorganismos (bacterias y hongos) presentes en el área. Además, se desconoce si algunos de estos microorganismos, en especial los hongos del suelo, pudieran tener alguna aplicación biotecnológica. Por ello, el objetivo de este trabajo fue aislar, identificar y probar la actividad como biocontroladores de plagas de algunos de estos hongos.

METODOLOGÍA

1. Se activaron los hongos presentes en muestras de hojarasca de la zona arqueológica de La Venta. Para ello, se utilizando cámaras húmedas realizadas con frascos de vidrio estériles colocando dentro de este un papel filtro con un poco de agua estéril y pequeños trozos de muestra. 2. Se prepararon medios de cultivo sólido (agar-papa dextrosa) con estreptomicina la se utilizó para inhibir el crecimiento de las bacterias que se pudieran encontrar y así los hongos filamentosos de las muestras de hojas crecieran en buenas condiciones. 3. Se transfirieron repetidas veces los hongos que iban creciendo hasta obtener cultivos puros, caracterizándolos macro y microscópicamente en caso de ser posible. 4. Se pusieron en contacto los hongos que se obtuvieron en cultivos puros con un hongo fitopatógeno (Rhizoctonia solani) para determinar el efecto que pueden tener contra este. 5. Se extrajo ADN de los hongos que tuvieron algún efecto inhibidor en el fitopatógeno o con alguna característica especial; se prepararon geles de agarosa y se hicieron electroforesis horizontal para observar la calidad y cantidad del ADN obtenida de las extracciones. 6. Se amplificó el gen ITS del ADN ribosomal nuclear de los hongos y se purificaron los productos de PCR con columnas de sílice. 7. Se secuenció el gen ITS del ADN ribosomal nuclear de los hongos que causaron algún efecto inhibidor en el fitopatógeno o tuvieran alguna característica especial. Se purificaron los productos de secuenciación y se procesaron en secuenciador automatizado del Instituto para la electroforesis. 8. Se editaron las secuencias generadas con el programa BioEdit y ya con las secuencias generadas y editadas se hizo un BLAST en GenBanK del National Center for Biotechnology Information para identificar, de ser posible, el(los) hongo(s) que se obtuvieron en cultivo puro. 9. Se dejaron los cultivos puros en cajas de petri selladas e identificadas para su posterior utilización.

CONCLUSIONES

Con base en las secuencias de los hongos obtenidos se pudo identificar, hasta ahora, a la especie Rhizopus oryzae como un hongo con efecto inhibidor sobre el fitopatógeno. Como conclusión tenemos que es posible que éste, y alguno de los otros hongos aislados puedan servir como bioconrol para Rhizoctonia solani. Sin embargo, se necesita continuar con esta investigación para tener un resultado más confiable y poder proponerlos como posibles biocontroladores de plagas.

Asesor: Dr. Elith Yazmin Valencia Villalvazo, Universidad de Guadalajara

CARACTERIZACIóN DE LOS CAMBIOS ADAPTATIVOS, FíSICOS, FISIOLóGICOS Y GENéTICOS COMO RESPUESTA AL EJERCICIO

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CARACTERIZACIóN DE LOS CAMBIOS ADAPTATIVOS, FíSICOS, FISIOLóGICOS Y GENéTICOS COMO RESPUESTA AL EJERCICIO

Bravo Patiño Sebastian Luis, Instituto Tecnológico de La Piedad. Carachure Muñoz Zayra Jocelyn, Universidad Autónoma de Guerrero. Espinoza Ramírez Jassel, Universidad de Guadalajara. Penagos Castellanos Nathan, Universidad Autónoma de Chiapas. Saldivar Castro Eduardo Raúl, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Elith Yazmin Valencia Villalvazo, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Introducción Las características físicas de un deportista son por lo general muy distintivas, además de reflejar un estado de salud óptimo. Desde que una persona comienza a realizar ejercicio de manera rutinaria o incursiona en la practica de un deporte en carácter formal, experimenta una serie de cambios no solo físicos, si no también fisiológicos o inclusive genéticos. El presente estudio pretende describir los rasgos característicos de cada cambio experimentado por un individuo en el proceso adaptativo al entrenamiento deportivo, que se espera sean diferentes cuando el deporte involucre la fuerza, la resistencia o la velocidad. Planteamiento del problema En las últimas dos décadas diversas investigaciones se han enfocado en dilucidar cuales son las características que debe presentar un deportista para considerarse como tal, es bien sabido que en el proceso formativo un atleta experimenta múltiples cambios que le ayudan a adaptarse a las cargas de entrenamiento demandadas por el deporte que practica, sin embargo, son pocos los reportes que existen respecto a los cambios en la expresión de los genes que se han visto asociados con las adaptaciones físicas o fisiológicas en respuesta al ejercicio. La principal pregunta que esta investigación pretende contestar es si ¿las variaciones en el genoma que se han visto asociadas a fenotipos de un mejor rendimiento físico se expresan diferente en las etapas de formación de un atleta o según el deporte que se practica? Objetivos Establecer si la expresión de genes candidatos del desarrollo de fenotipos deportivos es diferente cuando el individuo inicia en un programa de entrenamiento en comparación a cuando se consolida como un atleta de élite. Definir como es la expresión de genes en diferentes deportes, según las características fenotípicas que deba tener el atleta de la disciplina particular. Objetivos particulares Enunciar las características físicas y fisiológicas que tienen particularidad en atletas de diferentes deportes.  Distinguir las variantes en los genes que se asocian a rasgos de un mejor desempeño en el deporte. Estimar como es la expresión de genes candidatos del rendimiento atlético y fitnes. Justificación La estructura genética define las particularidades de cada individuo, sin embargo muchas veces aunque en el genoma no haya diferencias significativas la expresión de los genes puede influenciar al desarrollo de características singulares, en los deportes puede ser de especial interés conocer los mecanismos que llevan a que un gen se exprese de terminada manera pues dicho conocimiento puede mejorar los métodos de entrenamiento o incluso posibilitar un diagnostico del ejercicio mas adecuado.

METODOLOGÍA

Para realizar el proyecto Caracterización de los cambios adaptativos, físicos, fisiológicos y genéticos, como respuesta al ejercicio, se cuenta con dos tipos de poblaciones: Población testigo (población en general) y Población estudio (personas que practican natación, halterofilia, lucha y atletismo) Como desarrollo del proyecto se realiza lo siguiente: Cuestionario: nos permite conocer la clínica y los antecedentes familiares de cada participante del proyecto. Antropometría: se realiza una serie de mediciones corporales (talla, peso, diámetros corporales, perímetros y pliegues cutáneos) para saber la composición corporal y los cambios que se puedan producir en la población en estudio durante el desarrollo del proyecto. Posterior a esto, se realiza una toma de muestra sanguínea, de la cual se analiza: Fisiología, a través de la cuantificación de las pruebas bioquímicas, tales como Glucosa, Creatinina, Urea y Proteínas totales Estudio molecular: como parte de la variación genética se extrae ADN y como parte de la expresión genética se extrae ARN Obtenidos los resultados de todas las pruebas y cuestionarios realizados se lleva a cabo el Análisis Estadístico.

CONCLUSIONES

Proyecto sin concluir, en proceso... Se espera obtener variación genética entre las dos poblaciones (población testigo y población estudio), especificamente en el gen PPAR. a través de los diferentes análisis realizados. Tras la exposición a diferentes periodos de ejercicio, también se esperan observar cambios significativos manifestándose tanto en el metabolismo como en la expresión de genes de la población en estudio.

Asesor: Dr. Ana Maria Mesa Vanegas, Universidad de Antioquia (Colombia)

POTENCIAL ANTIMICROBIANO DE EXTRACTOS DE PIPER SP. CONTRA ENTEROBACTERIAS DE INTERéS CLíNICO Y HONGOS FITOPATóGENOS

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POTENCIAL ANTIMICROBIANO DE EXTRACTOS DE PIPER SP. CONTRA ENTEROBACTERIAS DE INTERéS CLíNICO Y HONGOS FITOPATóGENOS

Carbajal Dominguez José de Jesús, Universidad de Guadalajara. Martínez Santos María Guadalupe, Universidad Veracruzana. Asesor: Dr. Ana Maria Mesa Vanegas, Universidad de Antioquia (Colombia)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Debido a la resistencia microbiana que se ha incrementado en los últimos años, lo cual denota un reto actual y aun mayor en el futuro, muchos investigadores se han dado a la tarea de observar y analizar los datos del incremento de la resistencia microbiana, y debido a su repercusión han optado por buscar otras alternativas para el control microbiano mediante el uso de nuevos productos farmacéuticos y naturales para hacerles frente. Por otra parte, a nivel mundial los hongos fitopatogenos constituyen el grupo más importante desde el punto de vista económico en cuanto a su frecuencia de aparición y daño que pueden causar. El daño que ocasionan no solo se refiere a las pérdidas de producción económica, sino también a las perdidas en la producción biológica. Por ello, en esta investigación se pretende evaluar el potencial de extractos de Piper (como alternativa natural) sobre enterobacterias de interés clínico y hongos fitopatógenos. 

METODOLOGÍA

Obtención de Extractos Vegetales El material vegetal seco se triturará hasta obtener un tamaño de partícula de aproximadamente 5 mm de diámetro. 500 g del material vegetal triturado se llevará a un proceso de percolación-extracción hasta agotamiento (5 días/3 veces), utilizando etanol (E) como disolvente. El material percolado se filtrará y el extracto se concentrará en un rotavaporador para obtener el extracto etanólico codificado como (ExtE). El solvente recuperado en el rotavaporador se agregará nuevamente al material vegetal y el proceso de percolación y extracción se repetirá cinco veces. Selección de enterobacteria y de hongos fitopatógenos. Se utilizarán los hongos fitopatógenos aislados de cultivos de plantas ornamentales Fusarium sp., Botrytis sp., Phytium sp., Cylindrocarpon sp y  Cladosporium sp.,. y las enterobacterias E. coli, etc. provenientes de la colección de cultivos microbianos del Grupo de Agrobiotecnología.   Caracterización química de los extractos vegetales por cromatografía de capa delgada (CCD). Los extractos crudos y fracciones se caracterizarán por CCD. 5 µL de los extractos de Piper sp. se servirán en placas de sílica gel de poro fino con indicador de fluorescencia en base de aluminio (Alugram® Nano-Sil G/UV254 - Macherey-Nagel). Como fase móvil se utilizarán diferentes solventes como Hexano:Diclorometano(1:1), Hexano:Acetato de etilo(7:3), Diclorometano:Metanol(95:5), Diclorometano:Metanol(8:2) y Acetato de etilo. Los reveladores utilizados serán revelador universal con Vainillina (H2SO4) (alcoholes, esteroides, fenoles y aceites esenciales), Dragendorff (alcaloides) y Difenil picril hidrazil (antioxidantes).   Prueba de inhibición del crecimiento micelial por el método de difusión por discos. En este procedimiento las placas de Agar papa Dextrosa  se inocularán con un inóculo estandarizado del microorganismo de ensayo (un disco, de la zona de crecimiento, de un cultivo de hongo de 10 días se colocará en el centro de la caja de Petri de 9 cm de diámetro). Entonces, discos de papel filtro (de aproximadamente 6 mm de diámetro), que contienen el compuesto de ensayo a una concentración deseada, se colocarán sobre la superficie del agar a 2.6 cm del disco del hongo (el número de discos de extractos no será mayor a 6), se usarán como control negativo discos con DMSO y como control positivo discos con el fungicida usado regularmente para el control de cada microorganismo. Las placas de Petri se incuban a 25°C, y se harán evaluaciones a los 3, 5, 7 y 11 días del experimento.  En general, los agentes antimicrobianos se difunden en el agar y pueden inhibir la germinación y el crecimiento del microorganismo.   Prueba de actividad antibacteriana por el método de difusión por discos en agar. Preparación del inoculo. El ensayo de actividad antibacteriana contra E. coli, salmonella, shigella, serratia, citrobacter, klebsiella, enterobacter, proteus, B. cereus, B. subtillis, S. aureus,  se realizará por el método de difusión en agar usando discos de papel de filtro (Valgas et al., 2007). . Los extractos secos se disolvierán con dimetilsulfóxido (DMSO) a 100 ppm. Pruebas de actividad antibacteriana Con el objetivo de determinar la actividad antimicrobiana de los extractos crudos obtenidos a partir de los de etanol se aplicaron 10 µL de la concentración 100ppm en discos de papel de filtro estériles de 0,7 cm de diámetro. Los discos con los extractos se secarán y colocarán a una distancia entre ellos de 1.5-2,0 cm en las placas, previamente inoculadas con la bacteria. Los discos de gentamicina se usará como un control positivo en el ensayo in vitro, al ser la bacteria susceptible a este antibiótico. Se utilizará el dimetilsulfóxido como control negativo o control de solvente (10 µL) para todos los casos, ya que este será el solvente utilizado para disolver los extractos secos. Las placas se incubaron por 24 h a 37°C y se midió el diámetro del halo de inhibición incluyendo el diámetro del disco. Cada tratamiento se hizo por triplicado y el experimento por duplicado. 

CONCLUSIONES

Los extractos de Piper 03, 07 y 08  de hoja presentaron buena actividad sobre los hongos fitopatógenos Phytium y Cladosporium, mientras que en las bacterias el extracto de Piper 07 tanto tallo como hoja presentaron mayor potencial sobre Shigella y B. cereus, Piper 03 de tallo y hoja sobre Shigella, B. subtilis, B. cereus, S. aureus y Enterobacter. En cuanto a la caracterización química de los extractos se presentaron metabolitos secundarios como terpenos, alcaloides, flavonoides, antraquinonas, cumarinas, y la pueba de DPPH demostró potencial antioxidante. Estos resultados abren un mayor interés para continuar con la investigación sobre el potencial antimicrobiano y antifungico de estos extractos. 

Asesor: Dr. Gustavo Rangel Porras, Universidad de Guanajuato

ELABORACIóN DE CATALIZADORES HETEROGéNEOS A BASE DE COBRE PARA LA SíNTESIS DE MOLéCULAS ORGáNICAS

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ELABORACIóN DE CATALIZADORES HETEROGéNEOS A BASE DE COBRE PARA LA SíNTESIS DE MOLéCULAS ORGáNICAS

Carpio Martinez Grecia Jocelyne, Instituto Tecnológico de Matamoros. Asesor: Dr. Gustavo Rangel Porras, Universidad de Guanajuato

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Actualmente, el uso de catalizadores ha tomado gran importancia en la industria. Un gran número de procesos Industriales utilizan catalizadores para llevar a cabo procesos en una escala rentable. Sin embargo, los catalizadores más utilizados presentan una gran desventaja, los catalizadores se encuentran en la misma fase que productos y reactivos, y consecuentemente, aumenta la dificultad para llevar a cabo una separación adecuada del catalizador en los productos, modificando costos y generando mayor cantidad impurezas. Una de las propuestas que se sugieren para reducir la presencia del catalizador, es el uso de catalizadores heterogéneos. Este tipo de catalizadores, los reactivos y el catalizador se encuentran en diferentes fases. Y mediante procesos sustentables, se puede llevar a cabo la separación del catalizador en los productos de valor agregado. Uno de los inconvenientes en la síntesis de moléculas orgánicas, radica en el uso de metales nobles, aumentando el costo de producción.   Por este motivo, los catalizadores obtenidos a partir de óxidos metálicos pueden ser una gran opción en los procesos. El TiO2 es un material de fácil obtención y modificación, puede ser utilizado como soporte de catalizador, presentando la capacidad para soportar metales que presentan propiedades catalíticas oxido-reductoras. Adicionalmente, una de las grandes problemáticas actuales relacionadas con la síntesis de compuestos orgánicos, está asociada con la selectividad, como en la esterificación de alcoholes secundarios y la dificultad para realizar reducciones sobre algunos grupos orgánicos, como el grupo nitro de los nitrocompuestos, por lo que durante el verano de investigación se estudian las propiedades catalíticas del TiO2 en la síntesis de aril compuestos, utilizando la reacción de 4-nitrofenol como reacción modelo. Así como, su aplicación en la obtención de esteres en la reacción entre alcoholes y ácido acético.

METODOLOGÍA

Se sintetizaron óxidos de titanio mediante el proceso sol-gel, utilizando alcóxidos metálicos como precursores. El óxido de titanio se obtuvo mediante el secado del gel durante 24 horas y un tratamiento térmico a 600 ºC.   Después de la obtención del TiO2, se realizó una impregnación de cobre sobre el TiO2, mediante la suspensión del óxido en usa solución de cobre al 1%. Posteriormente se dejó secar toda la noche y se trató térmicamente a 350 ºC.   El catalizador obtenido fue caracterizado mediante diversas técnicas, como; Difracción de Rayos-X, Espectroscopia FT-IR y Fisisorción de N2. Así como su aplicación en la reducción de 4-nitrofenol para la obtención de 4-aminofenol. Adicionalmente, con el material obtenido, se llevaron a cabo pruebas de esterificación entre etanol y ácido acético.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró adquirir conocimientos teóricos y prácticos sobre la síntesis de materiales mediante el proceso sol-gel, así como la interpretación de las caracterizaciones para materiales inorgánicos. Sin embargo, al ser un trabajo extenso, aun son necesarias algunas pruebas catalíticas y de caracterización. Por lo tanto, poder describir los cambios generados por el cobre y la influencia del soporte TiO2 en la selectividad de la esterificación y la participación en la reducción de nitrocompuestos. Se espera que las modificaciones llevadas a cabo sobre el TiO2 puedan tener mayor rendimiento en las esterificaciones y una disminución en los tiempos de reducción de 4-nitrofenol.

Asesor: Dr. Josué Elías Juárez Onofre, Universidad de Sonora

EFECTO DEL EXTRACTO DE CHAYA EN LA CINETICA DE AGREGACIÓN FIBRILAR DE LISOZIMA

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EFECTO DEL EXTRACTO DE CHAYA EN LA CINETICA DE AGREGACIÓN FIBRILAR DE LISOZIMA

Carpio Moreno Norma Alicia, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Josué Elías Juárez Onofre, Universidad de Sonora

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La lisozima es una enzima bacteriolítica ampliamente distribuida en fluidos corporales y tejidos, desempeñando funciones biológicas como actividad antibacteriana, antiviral, antinflamatoria, analgésica, antitumoral y antioxidante. La lisozima en condiciones fisiológicas es estable y no forma fibras. Sin embargo, diversos factores físicos, químicos y biológicos dan lugar a la formación de fibras amiloides, provocando una enfermedad conocida como amiloidosis sistémica no neuropática. Por otra parte, las plantas medicinales son un recurso valioso para complementar los tratamientos alopáticos y mejorar la calidad de vida, siendo la principal fuente de obtención de compuestos bioactivos. La Chaya (Cnidoscolus chayamansa) es empleada en el sureste de México por su alto valor nutricional y como especie medicinal para tratar padecimientos como diabetes, reumatismo, trastornos gastrointestinales, así como diurético y antihipertensivo. En este trabajo se estudió la cinética de fibrilación de la lisozima de clara de huevo y posteriormente se evaluó el efecto del extracto etanólico de la chaya en la agregación de la proteína utilizando diversas técnicas analíticas.

METODOLOGÍA

Para determinar el tamaño de los agregados se utilizó la técnica DLS (dispersión dinámica de luz). Se observó la formación de agregados proteicos conforme transcurre el tiempo de incubación. Al inicio la intensidad de la luz dispersada fue prácticamente nula indicando que el tamaño de dichos agregados es muy pequeño, pero después de un tiempo, alrededor de 120 minutos, comenzaron se observó un incremento en la intensidad de luz dispersada. Al transcurrir 2640 minutos se observó que la gráfica comenzó a decrecer, sugiriendo que el tamaño de los agregados es tan grande que sedimentan. Para conocer la forma de dichos agregados y determinar si se formaron fibras amiloides se utilizó la técnica AFM (microscopía de fuerza atómica). A tiempo 0 de incubación se observan agregados pequeños y al transcurrir el tiempo los agregados comienzan a aumentar de tamaño, a los 2640 minutos se observó la formación de fibras proteicas, pero para afirmar que las fibras que se observan son fibras amiloides se utilizó la técnica FTIR con ATR, en donde el incremento en la composición de la estructura secundaria de hojas-β antiparalelas respecto a la estructura nativa nos indica la presencia de fibras amiloides. Al finalizar las 72 horas de incubación se observa que la composición de la estructura secundaria de Lisozima sin extracto de chaya tiene un gran porcentaje de hojas-β antiparalelas en Lisozima, mientras que el porcentaje de la estructura secundaria en hojas-β antiparalelas la Lisozima con extracto de Chaya es despreciable.

CONCLUSIONES

La extracción de los componentes bioactivos de la chaya utilizando etanol es un proceso fácil y eficiente de realizar, con un rendimiento de 15 mg/ml. El análisis de la cinética de agregación de la lisozima con y sin extractos de chaya (DLS y AFM) sugiere que los componentes de la chaya no afectan la formación de fibras amiloides de la lisozima.  Los resultados de FTIR-ATR sugieren que el extracto etanólico de la chaya inhibe la formación de fibras amiloides de la lisozima. Esto se concluye a con base en la disminución del contenido de la estructura secundaria hoja-β-cruzada

Asesor: Dr. Victor Hugo Cruz Escalona, Instituto Politécnico Nacional

COMUNIDAD FAUNISTICA ASOCIADA AL HACHA (ATRINA MAURA, ATRINA TUBERCULOSA Y PINNA RUGOSA) EN LA LAGUNA DE LA PAZ, BAJA CALIFORNIA SUR, MEXICO.

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COMUNIDAD FAUNISTICA ASOCIADA AL HACHA (ATRINA MAURA, ATRINA TUBERCULOSA Y PINNA RUGOSA) EN LA LAGUNA DE LA PAZ, BAJA CALIFORNIA SUR, MEXICO.

Carranza Hernández Karla, Universidad Autónoma de Guerrero. Nava Refugio Arlene, Universidad Autónoma de Guerrero. Rodriguez Betancourt Vicente Osmel, Universidad Autónoma de Guerrero. Varona Cantor Christian Gabriela, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Victor Hugo Cruz Escalona, Instituto Politécnico Nacional

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En los ecosistemas marinos, es bien conocido que algunas especies de animales juegan un papel ecológico importante contribuyendo a la complejidad de las comunidades bentónicas. Dentro de este contexto, algunas especies bentónicas sésiles son muy importantes ya que ellas interactúan con muchas otras especies asociadas. Algunos trabajos anteriores han demostrado que la diversidad y la estructura de la macrofauna en los hábitats de sedimentos blandos se ven afectadas por la presencia de especies de hachas, en particular Atrina spp. y Pinna spp. (Cummings et al., 1998, Hewitt et al., 2002, Munguia, 2004, Warwick et al., 1997). Debido a sus beneficios en el ecosistema, las hachas se consideran, así como otros organismos bentónicos, como ingenieros del ecosistema (Jones et al., 1994, Passarelli et al., 2014). De hecho, la presencia de estas especies clave bentónicas puede modificar las propiedades fisicoquímicas y biológicas del medio ambiente local (Braeckman et al., 2010) y también proporcionar, a través de su presencia física, un sustrato para varios epibiontes. En la Laguna de La Paz, BCS, las hachas representan un recurso natural de importancia pesquera y comercial relativamente alta, su valor puede alcanzar los ochocientos pesos por kilogramo en el mercado nacional. A pesar de su reconocida importancia ecológica y económica, pocos esfuerzos han examinado aspectos de su biología, potencial de ingeniería de ecosistemas y patrones de distribución espacial y temporal; información de línea de base que debe ser considerada en la formulación de planes de manejo de cualquier recurso natural. Por lo tanto, nuestra participación durante el Programa de Verano de Investigación Delfín fue apoyar en diferentes actividades relacionadas con los siguientes objetivos de investigación: a) Caracterizar las comunidades de macrofauna asociados a las hachas (Atrina maura, Atrina tuberculosa y Pinna rugosa) presentes en la laguna de la Paz B.C.S , b) Entrenamiento en tècnicas de muestreos ecològicos.  

METODOLOGÍA

a) Caracterizar las comunidades de macrofauna asociadas a las hachas presentes en la laguna de la Paz B.C.S. Se realizó un muestreo por cada uno de los 4 bancos de callo de hacha en La Laguna de La Paz, Baja California Sur, México durante el mes de junio. En el cual se recolectaron 30 organismos por estación a una profundidad de 1.5 m a 2 m, con el equipo básico de buceo libre. Se extrajeron de su hábitat para posteriormente ser embolsados y etiquetados. Los organismos se refrigeraron para mantener su conservación, después se llevaron al laboratorio para realizar lo siguiente: Se fotografiaron con macrofauna, tunicado y la etiqueta, se sacó su peso total, se extrajo la macro fauna y el tunicado, se pesaban ambos y se tomaba una muestra del tunicado, la macrofauna se ponía en un frasco con formol al 10 %, se pesaba el hacha sin macrofauna, se evisceraba, se separaba las vísceras y el callo, se lavaba el callo y se pesaba, se observó si la gónada estaba madura o inmadura, se limpiaba el hacha, se pesaba,  se midió la longitud total (LT en mm),  el ancho total (AT en mm), el alto (A en mm), las medidas las registramos con un vernier manual y se fotografiaban las hachas limpias con su etiqueta. B) Entrenamientos en tècnicas de muestreos ecològicos Trabajamos con la diversidad de organismos distribuidos en diferentes sistemas ecológicos tales como el rocoso, arenoso y mangle, trabajando diferentes técnicas de muestreo utilizando núcleos, transectos y cuadrantes para posteriormente llevar los organismos recolectados al laboratorio e identificarlos. Trabajamos en el Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas (CICIMAR) con un Sistema de arrastres por diferencia de densidades, el cual estaba constituido de cuatro cubetas, mangueras, una bomba de poder, un colador con malla y un cono metalico. Este Sistema se utilizó con el fin de extraer los organismos de las muestras que se extrajeron mediante núcleos en el sistema arenoso y así se dejó la arena limpia.

CONCLUSIONES

De acuerdo a las actividades realizadas, podemos determinar que de las tres especies de callo de hacha la más abundante fue Atrina maura y la menos abundante fue Pinna rugosa. Los epibiontes con mayor presencia en las hachas fueron; moluscos, poliquetos y equinodermos. Se puede apreciar en general una zonificación de los invertebrados en función de dos cosas: la profundidad y el tipo de sustrato. Por otro lado, lo que nos permitió ver los cuadrantes de 5 x 5 fue que la variación de los invertebrados estaba en función en parte de la profundidad y también en parte de la cercanía de algún manglar o no. La diversidad cambiaba por la afluencia de la materia orgánica que desprenden los manglares directamente comparándolo entre los que hicimos en el manglar con los de la playa Pichilingue. Los núcleos nos permiten ver las diferentes riquezas de infauna, esta varía en función del tamaño de grano y la profundidad en que se tomó la muestra, en lugares más cercanos a zonas intermareales las muestras van a tener menor cantidad de organismos que en las zonas submareales. Los núcleos nos permiten ver que la riqueza es baja pero la abundancia es alta debido a que solamente los organismos pueden vivir en esas condiciones, pero los pocos que viven son muy abundantes. El tipo de muestreo va a depender del objetivo que se quiere alcanzar: Si queremos ver riqueza en zonas rocosas es más fácil hacer un transecto. En zonas arenosas, donde no hay ningún tipo de organismo a la vista es mejor hacer directamente núcleos en lugar de cuadrantes.

Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

DIVERSIDAD MORFOLóGICA DE CRUSTáCEOS DECáPODOS EN ARROYOS Y CUEVAS DE BELICE

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DIVERSIDAD MORFOLóGICA DE CRUSTáCEOS DECáPODOS EN ARROYOS Y CUEVAS DE BELICE

Carreon Moreno Maria Fernanda, Instituto Tecnológico de Colima. Estrada Peña Luz Cristina, Instituto Tecnológico de Colima. Puente Castellanos Luz Beatriz, Instituto Tecnológico de Colima. Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los crustáceos son organismos que constituyen uno de los principales grupos zoológicos de mayor éxito del mar tanto por las especies vivientes registradas tanto como por la diversidad de hábitat que colonizan. Existe una gran variedad de estos organismos tanto en ambientes costeros, como en cuevas, cenotes, ríos y algunos arroyos presentando alguna serie de adaptaciones durante su desarrollo y modificaciones en su metabolismo, desarrollo, morfología taxonómica y pigmentación. El objetivo del presente trabajo es analizar la diversidad morfológica de los crustáceos decápodos recolectados en arroyos y cuevas de Belice de las distintas zonas estudiadas. Hay pocas especies registradas en Belice de decápodos de agua dulce, las principales especies son del género Macrobrachium encontradas en algunas cuevas. De los sitios muestreados se encontraron cinco poblaciones de camarones de agua dulce de este género con desarrollo larvario.  Los datos fueron obtenidos de cuevas y arroyos de Belice un pequeño país situado en América Central, con costas en el Mar Caribe.  Los sitios de las poblaciones recolectadas fueron: ·         AGUADA CREEK: Arroyo, población exterior sin adaptaciones.  ·         ST. HERMANN: Cueva, población sin adaptaciones. ·         ACTUN CHAPAT: Población ya descrita, especie Macrobrachium catonium con adaptaciones. ·         CAMPUS, UB: Arroyo Central Farm, población sin adaptaciones. ·         STATION LAS CUEVAS: Cueva, población con adaptaciones.

METODOLOGÍA

De acuerdo a los datos, se realizaron una serie de cálculos en el Software Microsoft Excel para obtener las proporciones de cada población. Posteriormente se analizaron dichas proporciones con un análisis de varianza (ANOVA) del primer y segundo pereiópodos mediante el Software Statgraphics, en donde se obtuvieron como resultado un gráfico, una tabla, así como una medida de confianza de Fischer LSD, en donde se muestran las diferencias significativas entre las poblaciones. Además de obtener una tabla de homogeneización entre los cinco grupos, un gráfico de cajas y bigotes, estas indican mediante cuartiles valores mínimos y máximos de los datos así como la variabilidad fuera de los cuartiles superior e inferior. Dentro de este Software se generaron métodos jerárgicos de análisis de Cluster que tiene como objetivo agrupar Clusters para formar un nuevo o bien separar alguno ya existente  para dar origen a otros dos, de tal forma que, sucesivamente se va efectuando este proceso de aglomeración o división, se minimice alguna distancia o bien se maximice alguna medida de similitud.

CONCLUSIONES

Dentro de los resultados se obtuvo que la población recolectada de la cueva Actun Chapat es la población que muestra mayor diferencia significativa en relación con las otras especies estudiadas. Esta población se encuentra actualmente ya descrita, recibiendo el nombre de Macrobachium catonium, la cueva se encuentra en el extremo norte de la meseta de vaca y aunque no ha sido completamente explorada, se estima que tiene unos 2 km de longitud. Esta especie se destaca por presentar adaptaciones, una de sus características morfológicas es su falta de pigmento, excepto la mancha ocular que puede ser de color púrpura a negro.   La población del arroyo Aguada Creek muestra una similitud en sus proporciones morfológicas con la población encontrada en la cueva Station Las Cuevas. La población recolectada del arroyo Aguada Creek, es una población que no muestra adaptaciones en sus características morfológicas, de lo contrario, la población encontrada en Las Cuevas, son camarones que si presentan dichas adaptaciones. En similitud, estas poblaciones viven con una diferencia de temperatura de 0.2°C entre ellas. En ubicación, estas dos poblaciones se encuentran relativamente cerca una con la otra, por lo que se podría explicar que debido a los cambios esporádicos que ha sufrido Belice por medio de las precipitaciones y el tipo de suelo kárstico estas poblaciones en algún tiempo estuvieron juntas y debido a su separación geológica una parte tendió a adaptarse para poder vivir en el nuevo lugar situado.    Otra relación que se encuentra debido a las características de proporciones morfológicas es entre la población de la cueva St. Hermann y la población del arroyo Campus UB. Una característica entre ellas es que poseen una semejanza en su pigmentación y tamaño. Además, la distancia entre una y otra población es relativamente cerca, por lo que de igual manera que la relación Aguada Creek-Las Cuevas, se presenta la hipótesis de que estas poblaciones fueron separadas por cambios geológicos esporádicos en el suelo, por medio de cuencas que al fraccionarse en micro cuencas se realizó una distribución de poblaciones.   Como muestra el dendograma del segundo pereiópodo, existe una aglomeración entre las relaciones Aguada Creek-Las Cuevas y St. Hermann-Campus UB, por lo que se explica que estas cuatro poblaciones muestran similitudes entre sí, sin embargo, la población de Station Las Cuevas, muestra mayor diferencia morfológica entre el resto de esta aglomeración, pero no lo suficiente como para no formar parte de esta, a pesar de que es la única que presenta adaptaciones morfológicas.    En general, la población Macrobachium catonium es la que presenta mayor diferencia significativa al resto de las poblaciones, por lo que la relación entre las demás puede ser debida a la ubicación en la que se encuentran.    

Asesor: Dr. Maria del Rocio Gamez Montaño, Universidad de Guanajuato

SÍNTESIS VERDE Y/O SUSTENTABLE BASADA EN REACCIONES DE MULTICOMPONENTES DE MOLÉCULAS DE INTERÉS EN QUÍMICA MEDICINAL

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SÍNTESIS VERDE Y/O SUSTENTABLE BASADA EN REACCIONES DE MULTICOMPONENTES DE MOLÉCULAS DE INTERÉS EN QUÍMICA MEDICINAL

Castañeda Mayorga Silvia Rebeca, Instituto Politécnico Nacional. Marin Cabrera Sabrina, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Asesor: Dr. Maria del Rocio Gamez Montaño, Universidad de Guanajuato

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La síntesis en química orgánica convencional incluye varias etapas de reacción. En la actualidad el diseño de estrategias que permitan acceder a las moléculas de interés en una o pocas etapas de reacción es un área de investigación en constante crecimiento debido a las múltiples ventajas con respecto a los métodos multipasos. Las desventajas de estas son el uso excesivo de disolventes y reactivos, implica rutas sintéticas largas que tienen una implicación directa en el tiempo de trabajo en el laboratorio, el uso de gran cantidad de reactivos y el daño al medio ambiente es mucho mayor. El diseño de nuevas estrategias basadas en reacciones de multicomponentes constituye la principal línea de investigación en el laboratorio de síntesis orgánica de la Dra. Rocío Gámez en la Universidad de Guanajuato, nuevas estrategias de síntesis donde se vean mejorados los tiempos de reacción, convergencia, una o dos etapas de reacción y costos, rendimientos globales buenos a excelente, simplicidad operacional,  que sean seguras y  en condiciones amigables con el medio ambiente. De ahí nacen las reacciones de multicomponentes (RMC), las cuales cumplen con las características anteriores; éstas consisten en procesos convergentes en las que tres o más reactivos reaccionan secuencialmente, y en un solo paso es posible obtener el producto deseado el cual incorpora todos o la mayoría de los átomos de los materiales de partida. Unas de las más importantes RMC son aquellas que involucran el uso de isonitrilos (RMC-I), como es la reacción de cuatro componentes de Ugi (U-4CR) y sus variantes. Un ejemplo de las reacciones de Ugi es la Ugi-azida, la cual involucra un aldehído, un isonitrilo, un grupo azida y una amina, dando como productos generalmente compuestos con anillos tetrazólicos 1,5-disustituidos.

METODOLOGÍA

SÍNTESIS DE ALDEHÍDOS ALFA BETA INSATURADOS Para la síntesis de los aldehídos αβ-insaturados se siguió la metodología que se describe a continuación utilizando la reacción de Vilsmeier-Haak de cetonas cíclicas. En un matraz bola seco con una barra de agitación magnética se añadió DMF (2.0 equiv.) y se enfrió a 0°C en un baño de hielo. Se añadió gota a gota el POCl3 (1.6 equiv.) bajo agitación constante. Posteriormente la mezcla se llevó a temperatura ambiente y se mantuvo 15 min en agitación. Posteriormente se colocó la mezcla a 0°C antes de añadir la cetona cíclica correspondiente (ciclopentanona o ciclohexanona). La mezcla de reacción se dejó a temperatura ambiente y se agitó durante una hora. El curso de la reacción se monitoreo por c.c.f. en la cual se observó el consumo de la materia prima, posteriormente se vertió el contenido del matraz sobre hielo y posteriormente se realizaron 3 extracciones con diclorometano. Por último, a la fase orgánica se le hizo un lavado con NaHCO3 acuoso. Se colectó la fase orgánica y secó con Na2SO4, se filtró y se concentró bajo presión reducida para obtener producto analíticamente puro. El producto se guardó a -10 ºC bajo atmósfera de nitrógeno para evitar su descomposición. Se obtuvieron el 2-clorociclopent-1-ene-1-carbaldehído y 2-clorociclohex-1-ene-1-carbaldehido los cuales se caracterizaron por RMN 1H. Estos fueron usados posteriormente en la reacción Ugi-azida para la obtener tetrazoles 1,5-disustituidos siguiendo metodología que la que se describe a continuación. SÍNTESIS DE TETRAZOLES 1,5-DISUSTITUIDOS VÍA UNA REACCIÓN DE UGI-AZIDA En un vial de 10 mL provisto con agitador magnético se disolvió el aldehído correspondiente (1.0 equiv.) en una mezcla de MeOH/H2O (1:1) 1.0 M al cual se adiciono la amina (1.0 equiv) y se dejó 10 min en agitación posteriormente, al mismo vial se adiciono la TMSN3 (1.2. equiv.), y el isonitrilo correspondiente (1.2 equiv.) y se dejó en agitación a temperatura ambiente. La reacción se monitoreo por c.c.f., utilizando como referencia el aldehído correspondiente, utilizando como sistema de elución mezclas Hex/AcOEt. Una vez terminada la reacción el producto se purificó mediante cromatografía en columna, utilizando SiO como fase estacionaria y mezclas Hexano/AcOEt como eluyente. Los productos obtenidos se caracterizaron mediante RMN de 1H y se analizaron utilizando el programa MestrecNova. En total se sintetizaron 8 productos en rendimientos buenos entre 60 y 80 %.

CONCLUSIONES

La estrategia de síntesis one pot utilizando aldehídos αβ -insaturados vía la reacción de multicomponentes (RMCs) de Ugi-azida permitió acceder de manera eficiente a los tetrazoles 1,5-disustituidos en una etapa de reacción, en condiciones verdes y/o amigables con el medio ambiente. Los compuestos sintetizados se caracterizaron mediante la técnica de RMN de 1H.  

Asesor: M.C. Aideé Montiel Martínez, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

LOCALIZACIóN DE DISTINTOS PROBLEMAS AMBIENTALES EN PUEBLA

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LOCALIZACIóN DE DISTINTOS PROBLEMAS AMBIENTALES EN PUEBLA

Castañeda Pimentel Elvia Angélica, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Juárez Contreras Aylin Alejandra, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Asesor: M.C. Aideé Montiel Martínez, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los mayores problemas ambientales generalmente son consecuencia de actividades antropogénicas. Éstas producen grandes cantidades de sustancias, componentes y residuos que modifican la composición natural de una zona. La localización de los diferentes problemas ambientales permite identificar áreas de riesgo y prioritarias. El objetivo de este trabajo fue realizar un mapa con la ubicación de distintos problemas ambientales que han estado presentes en el Estado de Puebla a partir de 2010 en al menos una ocasión.

METODOLOGÍA

Las problemáticas registradas fueron: degradación forestal por incendios, degradación atmosférica, contaminación de agua y tratamiento de residuos sólidos urbanos. Los datos fueron obtenidos de organizaciones gubernamentales, tesis, tesinas y artículos científicos. La información fue organizada identificando los siguientes datos: tipo de problema ambiental, municipio o localidad, nombre del lugar o estación de monitoreo, parámetro medido, normas violadas, valor límite de la norma para el parámetro, valor medido del parámetro y coordenadas geográficas. Los sitios fueron ubicados geográficamente con la aplicación de la herramienta Mapa Digital del INEGI y poder localizar las regiones más afectadas de la entidad.

CONCLUSIONES

Se encontraron 455 incendios forestales registrados en el año 2016 ubicados en la región de Angelópolis y la región Nororiental. Con respecto a la contaminación atmosférica, existen sólo cuatro estaciones de monitoreo del aire en el Estado, situados en el municipio de Puebla en las cuales las concentraciones de PM10 y PM2.5 han rebasado los límites de 40 ug/m3 y 12 ug/m3 la mayor parte del tiempo que ha durado el monitoreo. Por otro lado, datos de monitoreo de cuerpos de agua realizados en 2016, muestran que hay 26 municipios en la entidad que presentan sitios contaminados, dentro de los cuales se encuentran el Río Nexapa y el Río Atoyac. Asimismo, se revisó un estudio acerca de los rellenos sanitarios de Puebla, Atlixco y San Pedro Cholula en el año 2017, que evalúa aspectos regulados por las normas mexicanas como son: el espacio del relleno y la separación de residuos, dichos rellenos no tienen estos requerimientos, incumpliendo así con la normativa. La información revisada muestra que la zona donde se concentra la mayor cantidad de alteraciones ambientales es en la región de Angelópolis lo que expone los graves problemas ambientales que enfrenta nuestra urbe y enfatiza lo urgente de la implementación de programas que disminuyan o controlen el impacto ambiental.

Asesor: Dr. Gilber Vela Gutierrez, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas

EMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA DE PAPAYA MARADOL Y CHILE

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EMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA DE PAPAYA MARADOL Y CHILE

Castellanos Montesinos Paola Lizethe, Instituto Tecnológico de Tuxtla Gutiérrez. Corona Rodríguez Aliric Guadalupe, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Gilber Vela Gutierrez, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La propagación de plantas, a través de la embriogénesis somática, representa el método más eficiente de multiplicación clonal de plantas que se ha desarrollado hasta la fecha, ha sido empleada como herramienta para la conservación y el mejoramiento genético de germoplasmas,  además, estos métodos son empleados para la conservación de plantas en peligro de extinción. Una de las características sobresalientes de los embriones somáticos es que surgen de células somáticas y por lo tanto presentan la potencialidad de producir duplicados de un genotipo específico.  Esta característica permite la propagación clonal, tanto en especies propagadas vegetativamente como semillas. Los individuos genéticamente modificados pueden ser multiplicados en forma segura y eficiente, evitando los riesgos de la incorporación de genes extraños meioticamente inestables en el resto del germoplasma. La mayor problemática que se presenta en este tipo de cultivos in vitro es la susceptibilidad a la contaminación de las muestras, además de que se requiere un largo periodo de tiempo para su desarrollo; se seleccionaron como materia de estudio los frutos de papaya maradol y chile, debido a que generalmente presentan déficit nutricional en campo y por ello infección vírica o fúngica. Durante el verano de investigación se estudia la serie de eventos que ocurren durante el proceso de embriogénesis somática y cómo solucionar las problemáticas antes mencionadas.

METODOLOGÍA

Se utilizaron frutos inmaduros de papaya Maradol y de chile. Los frutos se lavaron con agua y jabón, y se desinfectaron con una solución al 20% de cloro comercial, posteriormente se limpiaron con etanol al 96%. Las semillas de los frutos se extrajeron y seleccionaron, en condiciones de esterilidad, fueron colocadas en cajas petri estériles para su conservación. Previo a la inoculación, las semillas se desinfectaron con etanol al 96% durante 5 minutos, y con una solución de cloro comercial al 20% durante 20 minutos; posteriormente se realizaron varios lavados con agua destilada estéril. En condiciones de esterilidad se diseccionaron las semillas para obtener embriones; esto se efectuó con la ayuda de un microscopio estereoscópico. Los embriones se cultivaron en placas que contenían medio para inducción de embriogénesis (MEmb: medio fuerte en macro y micronutrientes, hierro, mio-inositol y vitaminas de Murashige y Skoog MS), suplementado con 0.4 g/L de glutamina, 1 mg/L de 2,4-D (2,4- ácido diclorofenoxiacético) 6% de sacarosa. Ajustado a un valor de pH de 5.8; finalmente se adicionaron 8g/L de agar-agar, se mantuvieron en la oscuridad a 26°C alrededor de 2 semanas. El callo embriogénico se forma a partir de los meristemos apicales y radiculares del embrión. Se observó la formación de los callos embriogénicos que portaban color amarillo, consistencia frágil y exudación de líquido claro y denso. Finalmente después de 3 semanas, se realizó la cuantificación de desarrollo de callo y crecimiento adecuado de los embriones de papaya maradol y semillas de chile, obteniendo los porcentajes correspondientes.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano científico se logró adquirir conocimientos teóricos de la embriogénesis somática y ponerlos en práctica con las técnicas de inoculación y cuantificación de crecimiento de embriones y semillas, sin embargo, al ser un extenso trabajo, aún se encuentra en la fase de desarrollo y no se pueden mostrar todos los datos y resultados finales. Hasta el momento se logró obtener los siguientes porcentajes de desarrollo de callos y crecimiento adecuado que fueron desarrollando los embriones de papaya, los cuales fueron 16% y 30% respectivamente; y por el lado de las semillas se notó un crecimiento del 40%.

Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

VARIABILIDAD DE LOS GONóPODOS DEL GéNERO MACROBRACHIUM SP. UBICADOS EN LA LOCALIDAD DE NUEVA ESPERANZA, CHIAPAS, MéXICO.

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VARIABILIDAD DE LOS GONóPODOS DEL GéNERO MACROBRACHIUM SP. UBICADOS EN LA LOCALIDAD DE NUEVA ESPERANZA, CHIAPAS, MéXICO.

Castillo Garcia Monserrat, Universidad de Guadalajara. Garcia Tejeda Olga Alejandra, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

 Los langostinos del género Macrobrachium sp. Pertenecen a la familia Palaemonidae y se encuentran representados por veintiséis especies que habitan en aguas dulces y salobres de América. La reproducción de los crustáceos ha sido estudiada con el fin de la explotación comercial para crear una derrama económica con la venta de los mismos y el género Macrobrachium sp. es uno de los más explotados por lo que su conservacion esta en riesgo.  La mayor problematica que se presenta en este tipo de crustaceo es que no se sabe mucho sobre la biología en cuanto a morfología para poder clasificar de manera correcta a estos ejemplares y tampoco se tiene el suficiente conocimiento sobre la variabilidad de el gonópodo, aunque para el comercio esto es algo sin importancia para los investigadores es fundamental.  Por lo que durante el verano de investigación se estudiaron estas características para saber qué tan viable es poder basarse en estos aspectos a manera de clasificación taxonómica para facilitar su reconocimiento, intentado obtener la variabilidad del gonópodo de Macrobrachium sp.

METODOLOGÍA

Se obtuvieron 15 muestras de gonópodos del género Macrobrachium sp. De la localidad Nueva esperanza, Chiapas, México, de las cuales se tomaron fotografías en un microscopio electrónico de barrido del laboratorio de biodiversidad del instituto de biologia de la Universidad Nacional Autónoma de México gracias a la maestra Berenit Mendoza, específicamente del apéndice masculino y apéndice interno en donde se seleccionó una imagen general, una del apéndice masculino agrandado en donde se pudiera apreciar el número de espinas presentes, una del apéndice interno con vista lateral y otra con mayor aumento, de vista frontal, enfocándose en la punta de este, donde se visibilizaban los cincinulis. En total se obtuvieron de 3 a 4 fotografías por cada ejemplar, una vez teniendo las fotografías acomodadas con cada espécimen se tenía el objetivo de poder contabilizar el número de espinas del apéndice masculino, así como la longitud de este, y el número de cincinulis presentes en el apéndice interno y la longitud del mismo. Al tener los datos se acomodaron en una tabla donde se proseguiría a intentar conseguir gráficos significativos de la muestra tales como grafico de caja y bigotes, grafico de dispersión, histograma y grafico de densidad suavizada utilizando el programa statgraphics para lograr obtener una interpretación de los mismos.

CONCLUSIONES

Proponemos que los resultados indican que  dentro de la muestra recolectada se obtuvieron tanto individuos juveniles como adultos en donde estos últimos pueden ser representados por los apéndices masculinos más grandes, y teniendo esto en cuenta podemos suponer que la mayoría de los individuos son adultos.  En cuanto al número de espinas presentes en el apéndice masculino, se encontró que no hay una relación entre la cantidad de espinas respecto a la longitud del apéndice masculino, sin embargo, si se ve presente una relación entre el apéndice masculino con el apéndice interno ya que mientras la longitud del apéndice masculino sea mayor pasará lo mismo con la longitud del apéndice interno. Se encontró también una relación negativa, respecto al número de cincinulis presentes en el apéndice interno por lo que mientras mayor sea el tamaño del apéndice interno menor será el número de cincinulis.  Esto posiblemente tenga que ver con su funcionalidad debido a esto se deduce que cuando el apéndice interno crece la funcionalidad de los cincinulis  va perdiéndose y comienza a disminuir el número de los mismos. En tanto a taxonomía no es viable tomar en cuenta el número de espinas ya que no depende de la longitud del apéndice masculino ni de la edad del camarón, por otra parte podría considerarse dos aspectos: la relación del apéndice masculino con la del apéndice interno y la relación de los cincinulis con el apéndice interno Como complemento para la clasificación taxonómica, más no como un aspecto base de la identificación, dado que la variabilidad es amplia.  

Asesor: Dr. Eduardo Morteo Ortiz, Universidad Veracruzana

OCURRENCIA DE AVISTAMIENTOS, PATRONES DE COMPORTAMIENTO Y ACTIVIDADES DIARIAS DE TURSIONES (TURSIOPS TRUNCATUS; MONTAGÜ, 1821), EN LAS AGUAS COSTERAS DE ALVARADO, VERACRUZ, DURANTE LOS AñOS 2006-2010 Y 2016-2019.

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OCURRENCIA DE AVISTAMIENTOS, PATRONES DE COMPORTAMIENTO Y ACTIVIDADES DIARIAS DE TURSIONES (TURSIOPS TRUNCATUS; MONTAGÜ, 1821), EN LAS AGUAS COSTERAS DE ALVARADO, VERACRUZ, DURANTE LOS AñOS 2006-2010 Y 2016-2019.

Castillo López Olivera Montserrat, Universidad Autónoma de Baja California Sur. Asesor: Dr. Eduardo Morteo Ortiz, Universidad Veracruzana

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Se le conoce como hábitat al espacio que reúne las características y condiciones bióticas y abióticas, para la supervivencia y reproducción de una especie; la selección de dicho hábitat está basada en elecciones de recursos, de acuerdo a las necesidades del animal. A la manera en la que el animal aprovecha cada uno de los recursos que le otorga el hábitat, se le conoce como uso de hábitat, el cual, influye directamente en la distribución y abundancia de las especies, por lo que existen zonas de alimentación, reproducción, crianza, refugio, entre otras. Los delfines nariz de botella (Tursiops truncatus), también llamados tursiones o toninas, son probablemente los cetáceos más conocidos y estudiados, gracias a su distribución cosmopolita. Presentan dos ecotipos (oceánico y costero), diferenciados en su dieta, morfometría, conducta y genética. Gracias a la existencia del ecotipo costero, se han logrado estudiar patrones de actividad y uso de hábitat de poblaciones residentes para conocer la manera en la que los organismos distribuyen su tiempo para la realización de actividades, a lo largo del año. En 2016, se realizó el etograma para interacciones con pesca en Alvarado, Veracruz; determinando y describiendo las posibles conductas que se observan durante las navegaciones, sin embargo, no se saben los patrones de comportamiento ni la ocurrencia de avistamientos en esa zona, lo que sería de gran utilidad para lograr navegaciones más productivas en cuanto a avistamiento de tursiones, ya que son consideradas una especie importante, debido a su posición en la cadena trófica, pues al ser depredadores tope representan la salud y productividad de niveles tróficos inferiores.

METODOLOGÍA

Se utilizó la metodología descrita en Escobar, 2019; para el registro de datos. Se realizaron salidas a campo mensuales durante los años 2006-2010 y 2016-2019. Las navegaciones se llevaron a cabo en una embarcación menor con motor fuera de borda a una velocidad promedio de 12 km/h, se navegó en transectos sistemáticos diseñados previamente. Una vez localizado un grupo de toninas, se suspendió la búsqueda y se inició el avistamiento siguiendo al grupo de toninas y se registraron los datos: fecha, hora de inicio, posición geográfica (mediante el GPS) inicial y final, rumbo, estado del mar en escala Beaufort, visibilidad, tamaño y composición del grupo, y conducta observada. El avistamiento finalizó cuando el grupo se perdió de vista o salió del área de muestreo, al término de los avistamientos se continuó la navegación en los transectos en búsqueda de más grupos. Durante los años establecidos, se obtuvieron 350 datos de avistamientos, los cuales se estructuraron en una base de datos con la que se trabajó para analizar y generar los resultados mediante gráficas en el programa Excel, 2013; de la Paquetería de Microsoft Office.

CONCLUSIONES

Se encontraron patrones para alimentación y viaje, siendo inversamente proporcionales; el comportamiento social se mantiene relativamente constante con mayor presencia de 10 a 12 del día; la evasión es más probable que se presente cuando los organismos no se están alimentando. Así mismo se encontró que los avistamientos realizados en las primeras y últimas horas de navegación, son poco representativos.

Asesor: Dr. Jesus Gabriel Rangel Peraza, Instituto Tecnológico de Culiacán

ELABORACIóN DE UN BIOFILTRO CON PLáSTICO Y MICROORGANISMOS INMOVILIZADOS PARA LA REMOCIóN DE MALATIóN

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ELABORACIóN DE UN BIOFILTRO CON PLáSTICO Y MICROORGANISMOS INMOVILIZADOS PARA LA REMOCIóN DE MALATIóN

Castillo Meza Sergio, Instituto Tecnológico de Culiacán. Sainz Zatarain Mario Humberto, Instituto Tecnológico de Culiacán. Asesor: Dr. Jesus Gabriel Rangel Peraza, Instituto Tecnológico de Culiacán

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La agricultura es una actividad de vital importancia a nivel mundial pues constituye una importante fuente de ingresos para varios países, entre ellos México. Es por esto que se busca que los cultivos se encuentren en las mejores condiciones posibles para su distribución, procesamiento y consumo. Con el fin de mantener los rendimientos de los cultivos, se opta por el uso de plaguicidas para evitar que insectos u otra clase de organismos estén presente en éstos. Uno de los más utilizados es el malatión, el cual puede llegar a los ecosistemas acuáticos y terrestres y puede significar un gran riesgo para el hombre. Es por esto que se diseñó un filtro biofísico usando plásticos y microorganismos inmovilizados para realizar una remoción eficiente y segura del malatión de forma que el filtro sea de uso seguro y no represente algún riesgo químico o de diferente índole que pueda contaminar más el agua, además de poder reemplazarse fácilmente y de forma segura.

METODOLOGÍA

Primero se preparó una solución de malatión, y se le agregó un plástico y se puso en agitación en un reactor por lote a una temperatura de 40°C usando una plancha de calentamiento. Todo esto dentro de una campana de extracción y usando bata, guantes y máscara de gas en un área aislada. En el sistema por lote, se fueron midiendo la absorbancia a los 5, 10, 15, 20, 30, 40 y 50 min en un espectrofotómetro con el fin de observar la adsorción del malatión con respecto al tiempo Una vez realizadas estas pruebas el siguiente paso fue realizar el mismo procedimiento, esta vez en un reactor continuo. En dicho reactor se empaquetaron los materiales adsorbentes a utilizarse para diferentes pruebas: material plástico y esferas de encapsulamiento con y sin microorganismos. Para la preparación de las esferas de encapsulamiento se usaron dos soluciones, una con agua destilada y alginato de sodio y otra con agua destilada y cloruro de calcio. La primera solución se mantuvo en agitación con una mosca y se le agregó el alginato de sodio hasta que este se disolvió por completo, entonces la solución adquirió la consistencia de un gel, es entonces que se detuvo la agitación. Después se preparó la solución de cloruro de calcio de la misma forma y se puso en agitación, mientras la misma se agitaba usando jeringas y dejando caer gota por gota para que se formaran las esferas. Se realizaron pruebas de adsorción en un reactor en continuo usando diferentes combinaciones: solo plástico, solo esferas sin microorganismos, plástico con esferas sin microorganismos y plástico con esferas con microorganismos y llenando un ancho de 5 cm de empaque dentro del reactor. El filtro se situó casi a la mitad del reactor. La solución madre se calentó hasta los 40°C y seguidamente se puso a bombear con una bomba peristáltica hacia dentro del reactor, donde se estableció un tiempo de retención de 45 min y se tomaban lecturas de absorbancia cada 10 min de goteo en la salida. A diferencia del reactor por lote, en el reactor en continuo la absorbancia no debe observar una variación con respecto al tiempo.

CONCLUSIONES

Durante la estancia en el verano se adquirieron conocimientos teóricos y prácticos sobre el malatión y el manejo que se le debe dar al mismo. Las pruebas de adsorción realizadas en el reactor por lote arrojaron una disminución de la absorbancia en la solución de 1.738 al tiempo 0 hasta 0,213 al pasar los 50 minutos. De momento se pudo realizar una prueba en el reactor continuo usando el plástico, al tiempo 0 la lectura de absorbancia fue de 1.695, la cual después de un tiempo de retención de 45 minutos dentro del reactor pasando por el foamboard y de 20 minutos de goteo se presentó una lectura de 0.622. Se espera obtener mejores resultados en las siguientes pruebas con esferas de encapsulamiento con microorganismos ya que este proceso sería un efecto sinérgico entre un proceso biológico y físico

Asesor: Dr. Daniel Arrieta Baez, Instituto Politécnico Nacional

EXTRACCIóN DE METABOLITOS TIPO FLAVONAS DE LA ESPECIE VEGETAL TRIXIS ANGUSTIFOLIA PARA EL USO EN LA ELABORACIóN DE NANOMATERIALES

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EXTRACCIóN DE METABOLITOS TIPO FLAVONAS DE LA ESPECIE VEGETAL TRIXIS ANGUSTIFOLIA PARA EL USO EN LA ELABORACIóN DE NANOMATERIALES

Castillo Nuño Josué Alejandro, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Daniel Arrieta Baez, Instituto Politécnico Nacional

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Diversas especies vegetales tienen la capacidad de sintetizar compuestos de interés medicinal, específicamente, los llamados metabolitos secundarios, que cumplen una función, entre otras, de defensa frente a patógenos. De entre los metabolitos secundarios se encuentran los flavonoides, que pertenecen al grupo de los compuestos fenólicos, estos compuestos son bastante relevantes hoy en día, no solo por sus propiedades organolépticas, sino también por sus potenciales efectos beneficiosos sobre la salud. Trixis angustifolia es una especia vegetal que se usa para disminuir la fiebre y el reumatismo. Se ha reportado que produce las flavonas slavigenina, pebrelina, xantomicrol, 3-demetoxisudachitin y cirsimaritina y además se ha demostrado mediante ensayos fluorimétricos en placa Alamar Azul que los extractos hexánico, clorofórmico, metanólico y de acetato de etilo muestran actividad antimicrobiana de interés. Con el desarrollo de la nanotecnología, los nanomateriales aplicados a la medicina y a la liberación controlada de fármacos han sido ampliamente estudiados, esto gracias a que combinados con principios activos tales como las flavonas, se potencia su actividad contra, por ejemplo, Mycobacterium tuberculosis.    Una de las problemáticas que presenta la aplicación de estos principios activos es que en el transcurso hacia la región de interés gran cantidad de estos son degradados, desperdiciados o mal administrados, lo cual puede llevar consigo efectos secundarios no previstos.

METODOLOGÍA

Los extractos de la especie seca se obtuvieron por maceración con metanol, para esto se dejó 5 días y al final el extracto se concentró usando un rota-vapor. Este proceso se repitió 3 veces. Una vez concentrado el extracto se realizó una separación selectiva con disolventes de diferente polaridad iniciando con cloruro de metileno previamente se suspende el extracto en agua. Las disoluciones conforme a su densidad se separan y concentran a presión reducida. Se repite el mismo proceso, pero esta vez colocando acetato de etilo. Al final se obtienen 3 mezclas del extracto original, separadas usando cloruro de metileno, acetato de etilo y agua.   Separación Cromatográfica y Caracterización Espectroscópica   De las mezclas de cloruro de metileno y de acetato de etilo se le sacaron placas cromatográficas utilizando como fases móviles  8MeOH:2AcOEt y 5CH2CL2:1C6H14:1AcOEt, respectivamente. Esta técnica conocida como cromatografía en capa fina utiliza una placa cromatográfica de sílice llamada la fase estacionaria, que se coloca de manera vertical en una fase móvil, esta última se elige dependiendo el sistema que se desea estudiar, subirá por la fase estacionaria por capilaridad y permitirá separar los componentes de la mezcla que se coloquen de acuerdo a su polaridad.     Estas dos mezclas se prepararon para obtener su espectro RMN de protón, por lo que fueron disueltas en cloroformo y metanol deuterado. Esta técnica espectroscópica depende de la absorción de energía cuando el núcleo de un átomo es excitado de su estado de espín de menor energía al siguiente de mayor energía. Los elementos más comunes en las moléculas orgánicas son el carbono y el hidrogeno, sus isotopos 1H y 13C son capaces de dar espectros RMN y brindan información estructural.  Los espectros RMN de protón de las dos mezclas mencionadas permitieron determinar que en la mezcla de acetato de etilo se encuentran distribuidas la mayoría de los flavonoides, mientras que en la mezcla de cloruro de metileno se observa una gran cantidad de grasas. Con esta información se procede a separar los componentes de la mezcla de acetato de etilo en una columna cromatografía. Para esto se monta una columna con sílica flash en cloruro de metileno. La mezcla se coloca gota a gota con cuidado de no deformar la sílica. La columna se corrió utilizando la misma fase (5CH2CL2:1C6H14:1AcOEt) y se recolectó en tubos de ensayo obteniendo así 80 fracciones de la mezcla. El monitoreo se realizó por medio de placas cromatográficas utilizando como referencia la mezcla original, de esta manera se determina el grado de separación de los compuestos de la mezcla. Las placas que resultan idénticas se juntan y se realizan nuevamente una columna cromatográfica hasta obtener las flavonas purificadas, que son caracterizadas con RMN de protón.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano fue posible adquirir los conocimientos teóricos básicos de la espectroscopia RMN de 1H y 13C, los cuales fueron utilizaron para el análisis de moléculas orgánicas. Mediante técnicas cromatográficas fue posible aislar la flavona prebelina a partir de la especie vegetal Trixis angustifolia, que es rica en este  tipo de metabolitos y con actividad biológica importante y que no cuenta con reportes químicos. Al ser un trabajo extenso aún se encuentra en la fase de enlazar covalentemente las flavonas a nanomateriales y no se podrán mostrar los datos obtenidos. Se espera que las flavonas puedan ser liberadas de manera controlada bajo estímulos específicos sin que pierdan su actividad biológica.           

Asesor: Dr. María de Lourdes Ruiz Gómez, Universidad Autónoma del Estado de México

EVALUACIóN DE LA AGRESIVIDAD EN HEMBRAS GRáVIDAS Y NO GRáVIDAS DE LA LAGARTIJA ASPIDOSCELIS COSTATUS COSTATUS

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EVALUACIóN DE LA AGRESIVIDAD EN HEMBRAS GRáVIDAS Y NO GRáVIDAS DE LA LAGARTIJA ASPIDOSCELIS COSTATUS COSTATUS

Castro Flores Cinthia, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. María de Lourdes Ruiz Gómez, Universidad Autónoma del Estado de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La ecología de la conducta es una disciplina que intenta explicar la conducta de los animales en función del medio ambiente en el que viven y está enmarcada en la teoría darwinista de la evolución. Actualmente, se sabe que la variación individual de la conducta afecta diferentes características de historia de vida y entre los parámetros conductuales más estudiados se encuentran la agresividad, la dominancia, la sociabilidad, la intrepidez. Se ha observado que la actividad, la agresividad y la intrepidez están relacionadas con las tasas de crecimiento y fecundidad. Lo anterior denota que dependiendo del tipo de personalidad, los individuos tendrán características morfológicas, fisiológicas, energéticas y de desempeño específicas, con la finalidad de responder de manera particular a las demandas ambientales. Es importante recalcar que algunas conductas han evolucionado hasta tal punto que, aunque en su origen servían a la función de alimentarse o de conservar el calor corporal, la selección natural ha determinado que se utilicen como señales comunicativas entre miembros de la misma especie: ejemplos de esto son las conductas de cortejo o de amenaza. En este sentido, la correlación entre la fase del ciclo reproductor y el nivel de agresividad fue expuesta para el pez Aequidens latifrons, en el que la hembra es más agresiva hacia los machos fuera de la época de puestas que cuando esta grávida Por su parte para la hembra de Cavia porcellus y la zarigüeya se observó que eran más sumisas que el macho cuando el desarrollo folicular era máximo y resistían sus avances o incluso reaccionaban agresivamente hacia el macho en otras ocasiones Debido a que los estudios reportados no son concluyentes, en el presente trabajo se compara la agresividad de hembras grávidas y no grávidas de la lagartija Aspidoscelis costatus costatus, lo cual ayudará a sentar bases en áreas de estudio poco exploradas, tales como la agresividad en lacertilios. En general, pocos trabajos se han enfocado en el estudio de la agresividad en hembras grávidas por lo cual este estudio ayudará a entender en papel de la agresividad dentro de las estructuras sociales y se integrará al conocimiento biológico actual de la especie.

METODOLOGÍA

  El área de estudio está localizada en el  municipio de Tonatico, Estado de México. Con las coordenadas 99° 37’ de longitud oeste y 18° 45’de latitud norte El clima predominante del área es semicálido subhúmedo. Colecta de individuos: Se capturaron 10 hembras grávidas y 10 no grávidas durante la temporada de reproducción específicamente en los meses de junio y julio del 2019 con un atrampa de desvío. Cada hembra capturada fue colocada en un saco de tela y transportada al Laboratorio de Ecología y Conducta de la UAEMéx. A su llegada para cada individuo se tomó la longitud desde la punta del hocico hasta la raya de la cola(cloaca), Punta del hocicó a la raya de la cola(LHC), Largo de la cola(LC), Ancho de la cabeza(AnCa), Largo de la cabeza(LaCa), Altura de la cabeza(AlCa), Distancia intaraxilar(DIA), Longitud del fémur(LF) con ayuda de un vernier digital(0.01mm) y el peso con una balanza digital(0,1 g). Las lagartijas se mantuvieron individualmente en terrarios de plástico con las siguientes medidas 50 cm largo por 34 cm alto por 33 cm ancho. Cada terrario contenía Peat moss como sustrato, el cual fue humedecido con agua y se colocó un pequeño refugio. Se proporcionó luz natural mediante el uso de lámparas de 17 watts a una altura de 35 cm y como fuente de calor se utilizaron focos incandescentes de 100 watts a 32 cm de altura. Ambas fuentes se programaron para estar encendidas durante un periodo de 7 horas que es un aproximado al periodo de actividad de la especie en su sitio de captura. Los individuos fueron alimentados una vez al día con 15 a 20 grillos los cuales fueron espolvoreados con suplemento de calcio especializado para reptiles y se le suministraba agua por medio de rocío del sustrato en un horario de 10:00 a 12:00 h, se revisaba su estado de salud diariamente. Cada individuo se mantuvo bajo estas condiciones por lo menos tres días antes de comenzar la evaluación de conducta, con la finalidad que se aclimatara al cautiverio y se encontraran en óptimas condiciones al momento de ser utilizados en los experimentos. Una vez terminados los experimentos los individuos fueron marcados por ectomización de falanges para posteriormente ser liberados en su sitio de captura.. Los experimentos se realizaron en el horario de 10:00 a 14:00 horas. Las interacciones de la lagartija se evaluaron en un terrario de 60 cm de largo, cuyas paredes estaban construidas de plástico opalino por un lado y una pared de acrílico transparente por el otro que permitía la visualización de las interacciones. Los primeros 20 cm de cada lado funcionan como refugio donde se colocó la lagartija por 10 minutos antes de iniciar los experimentos. El terrario tenía lámparas incandescentes para que los individuos mantuvieran su temperatura óptima. Esta zona estaba dividida por una pared deslizable de 42 cm de alto por 30 cm de largo. Por su parte el área de interacción tenía una medida de 30 cm largo por 30 cm de ancho y frente a esta área se colocó un espejo de las mismas dimensiones. A cada lagartija se le permitió interactuar con su reflejo por un periodo de 10 minutos y su conducta se gravó con una cámara de alta definición. Una vez terminados los experimentos, los videos se analizaron para obtener el número de interacciones agonistas para cada individuo.

CONCLUSIONES

Una vez analizados los datos, se espera que las hembras de Aspidoscelis costatus costatus presenten niveles de agresividad variables entre una y otra. En el caso de las hembras grávidas, presentarán una conducta más agresiva en comparación con las hembras no grávidas.Es posible que las diferencias en la agresividad estén ligadas a las distintas presiones, tanto ecológicas como biológicas, a las que están expuestas las hembras durante la temporada de reproducción.

Asesor: Dr. Yvonne Herrerias Diego, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

ESTRUCTURA, COMPOSICIÓN Y DIVERSIDAD DE LA VEGETACIÓN EN TRES AREAS VERDES DE MORELIA, MICHOACÁN.

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ESTRUCTURA, COMPOSICIÓN Y DIVERSIDAD DE LA VEGETACIÓN EN TRES AREAS VERDES DE MORELIA, MICHOACÁN.

Castro Grande Citlali, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Yvonne Herrerias Diego, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

  La importancia de conocer los recursos naturales biológicos recae en que son la base para el desarrollo de las sociedades humanas, puesto que dependemos directamente de ellos para sobrevivir y es fundamental para implementar estrategias que nos permitan aprovecharlos de forma adecuada. Por el contrario, la falta de conocimiento de toda esta diversidad biológica y en consecuencia de su manejo, provoca que tengamos serios problemas ambientales. Morelia es una ciudad que cuenta con importantes áreas verdes entre ellos se encuentra el Boulevard García de León, Bosque Cuauhtémoc y  Bosque Lázaro Cárdenas estos sitios juegan un papel importante tanto económico, social y ecológico ya que son centros recreativos que albergan gran cantidad de especies, sin embargo, existe muy poca información sobre la vegetación que mantienen y de las especies presentes. Por ende se pretende caracterizar la diversidad, composición y estructura de la vegetación para los tres sitios y compararlos entre si, para que de esta manera se pueda brindar información básica sobre la vegetación arbórea presente de estos sitios  y así evaluar su importancia y el papel ecológico que estos juegan.  

METODOLOGÍA

  El Bosque Cuauhtémoc es un área verde recreativa pero muy importante ya que en ella albergan diferentes especies de plantas, aves, insectos, etc.; además cuenta con una vegetación densa que presta las condiciones aptas para llevar a cabo el muestreo; el bosque Lázaro Cárdenas es un bosque abierto con abundantes especies y el boulevard García de León es un pasaje arbolado que  a lo largo de camellón alberga importantes especies. Registro de datos. Se realizaron recorridos en las tres zonas de estudio  para seleccionar los sitios a muestrear. Una vez seleccionados se estableció la unidad de medida por líneas de  Gentry (1995); la cual se hace con la finalidad de que las muestras sean representativas, establece la realización de 10 parcelas de 2x50 m para cubrir 0,1 ha de superficie, al objeto de proporcionar una comparación entre formaciones diferentes. Este método considera todos los individuos de especies cuyo DAP es superior a 2,5 cm, localizadas dentro del perímetro definido por 1 m a cada lado de una línea de 50 m. El análisis de los datos permite estudiar la diversidad de una formación vegetal tomando como referencia las especies de tipo biológico arbóreo, así como su estructura vertical.  Para cada uno de nuestros sitios de  se hicieron 10 transectos de 2x50 m en total se muestrearon 30 transectos estas se trazaron con la ayuda de un flexómetro, posteriormente se  tomaron medidas morfométricas a los especímenes (diámetro, altura, diámetro de la copa). Esto se realizó del 01-12 de julio de 2019. Trabajo de gabinete. La identificación de los individuos medidos, se realizó con ayuda de  algunas guías de identificación; además de apoyarnos con imágenes de internet. Se lograron identificar a nivel de  género, y a nivel de especie todos los individuos registrados. Análisis de datos. Los índices de diversidad se calcularon con el programa estadístico PAST (versión 3.25) para determinar diversidad α, se calculó el Índice de diversidad basado en la dominancia de Simpson (D), que manifiesta la probabilidad de que dos individuos tomados al azar de una muestra sean de la misma especie D=.£i=1 ni (ni-1)/ N(N-1) Donde N es el número total de individuos, ni es el número de individuos de una especie i y S es el número de especies. El índice de Shannon-Wiener (H´) expresa la uniformidad de los valores de importancia a través de todas las especies de la muestra, asumiendo que los individuos son seleccionados al azar y que todas las especies están representadas en la muestra; indica que tan homogéneamente se encuentran representadas las especies y su abundancia. El índice adquiere valores entre cero, cuando hay una sola especie y el logaritmo de S, cuando todas las especies están representadas en el mismo número de individuos.      

CONCLUSIONES

  Podemos concluir que de un total de trece especies, el sitio Lázaro Cárdenas fue el que mayor número presentó ya que cuenta con ocho de las especies presentes; seguido del bosque Cuauhtémoc y el Boulevard García de León ambos con cinco especies respectivamente. En la curva de rarefacción  el sitio Lázaro Cárdenas presento mayor riqueza con mínimo esfuerzo de muestra. En la Diversidad alfa (α) con el índice de dominancia Simpson, el sitio con mayor dominancia es el Cuauhtémoc (D=0.64), y en la prueba de t modificada por Hutchenson no se encontraron valores significativos para los sitios. Con el índice Shannon-Wiener el sitio más diverso  fue el Cuauhtémoc (H´= 1.28); en la prueba t, existen diferencias significativas entre Boulevard García de León y  Cuauhtémoc con un valor de (p<0.01). En los índices de similitud  Jaccard, el sitio que mayor similitud presentó es el Boulevard García de León y el Bosque Cuauhtémoc compartiendo un (22%) de las especies; para Bray-Curtis los más similares son el Bosque Lázaro Cárdenas y el Bosque Cuauhtémoc con (60%) de similitud.  

Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

SíNTESIS DE IMINAS

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SíNTESIS DE IMINAS

Castro López Hugo César, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las iminas son compuestos que poseen un enlace doble carbono-nitrógeno (C=N) las cuales se pueden obtener mediante distintos métodos empleando reactivos diferentes. El método de síntesis más común conocido y el más reportado es mediante la reacción entre un aldehído o cetona y una amina primaria mediante reacciones de condensación. Estos compuestos, al igual que los alquenos, pueden presentar isomería Z/E, además de tener propiedades estereoquímicas si este presenta al menos un centro estereogénico. Las iminas se pueden emplear como reactante para una gran gama de reacciones, destacando entre ellas su reducción para obtener aminas, la hidrólisis para obtener el respectivo compuesto carbonílico y la amina, la síntesis de Strecker para obtener aminoácidos y síntesis de otros compuestos tales como pirroles, indoles, piridinas y quinolinas. En el presente proyecto de investigación se trató la síntesis de la N,N’-bis(1-feniletilidien)-1,2-propanodiamina mediante la reacción química entre la acetofenona y el 1,2-diaminopropano como reactivos.

METODOLOGÍA

Se utilizaron la acetofenona y el 1,2-diaminopropano en proporciones estequiométricas en ocho corridas de reacción empleando mecanoquímica, disminuyendo el uso de disolventes cuando pudo ser posible y empleando disolventes que sean amigables con el medio ambiente en los casos en los que fue inevitable su uso, todo de acuerdo con los principios de la química verde. Los reactivos fueron medidos empleando diferentes materiales de medición, entre ellos pipetas graduadas, pipetas volumétricas y micropipetas y fueron colocados en recipientes en cuales se pudiese llevar a cabo la reacción química, los cuales fueron viales de vidrio y matraces Erlenmeyer previamente rotulados y pesados en una balanza analítica con una barra de agitación en su interior para fomentar la interacción entre las moléculas y así garantizar la formación de la molécula de interés mediante la agitación de esta al ser colocada sobre un agitador magnético durante un periodo promedio de 24 horas. La reacción entre ambos compuestos empleados como reactantes produce por cada doble enlace C=N formado una molécula de agua, la cual puede hidrolizar el producto y regresarlo a la materia prima, por lo cual se procedió a realizar filtraciones después de terminar el tiempo de agitación. Las filtraciones se realizaron empleando un agente que fuese capaz de atrapar el agua formada, el cual fue sulfato de sodio anhidro (Na2SO4) mediante distintos métodos en las corridas de reacción efectuadas: empleando una filtración sobre sulfato de sodio; filtración en vacío con un matraz kitasato, un embudo Büchner y una bomba de vacío; y por último, filtración por bombeo de pistón y papeles filtro. En las corridas en donde se hicieron filtraciones típicas y filtraciones al vacío se usó cloruro de metileno (CH2Cl2) como disolvente para asegurar que no hubiese ninguna pérdida de producto. Los filtrados en estos casos fueron recolectados en otros viales distintos a los usados en la reacción química y se evaporó el disolvente en una campana de extracción. Una vez que se tuvo la certeza de que todo el disolvente fuese evaporado, se procedió a registrar el peso del recipiente con el producto para poder realizar cálculos de rendimiento de la reacción química y se tomó una pequeña en cada corrida con una pipeta Pasteur y se colocó dentro de un tubo de resonancia para preparar una muestra para analizar su contenido mediante Resonancia Magnética Nuclear (RMN) de 400 y 500 MHz con la obtención de espectros de hidrógeno (1H) y de carbono (13C) usando cloroformo deuterado (CDCl3) como disolvente en tubos de 5 mm de diámetro externo. Una vez obtenidos los espectros se realizó el análisis de los mismos, ubicando las señales características de los reactivos, de los productos de reacción obtenidos y de cualquier otra especie que haya estado presente en el crudo de reacción, además, para corroborar los cálculos de rendimiento que se efectuaron por diferencias de masas mediante la utilización de programas que permiten el procesamiento de espectros, tales como SpinWorks, MestReNova y Delta.

CONCLUSIONES

Durante la toda la estancia de verano se pudo adquirir más conocimientos referentes a la Resonancia Magnética Nuclear como técnica para la identificación de compuestos químicos, así como la obtención de experiencia de trabajo en laboratorio en la síntesis de iminas; en todas los experimentos efectuados para conseguir dicho compuesto no se pudo tener una reacción química completa, además en todos ellos se obtuvo una mezcla de productos debido a que también se observaron los compuestos intermediarios que se forman para poder conseguir el compuesto de interés, lo cual indica que la metodología empleada no es la más adecuada para la formación de la diimina. Como propuesta futura se tiene llevar a cabo la reacción mediante reflujo usando un agente azeotrópico que sea capaz de arrastrar el agua formada en la reacción para así evitar la hidrólisis y facilitar su separación. 

Asesor: Dr. Patricia Lozano Zarain, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

EXTRACCIóN PLASMíDICA PARA LA IDENTIFIACIóN DE GENES DE RESISTENCIA EN ACINETOBACTER BAUMANNII

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EXTRACCIóN PLASMíDICA PARA LA IDENTIFIACIóN DE GENES DE RESISTENCIA EN ACINETOBACTER BAUMANNII

Castro López Kevin Alan, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Patricia Lozano Zarain, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Acinetobacter baumannii es una bacteria Gram negativa considerado un microorganismo oportunista, se presenta en pacientes vulnerables como los que se encuentran hospitalizados. Se considerada que el mal uso de antibióticos ha llevado a que se presenten cepas resistentes para las cuales existen muy pocas opciones terapéuticas, asociándose a mayores tasas de mortalidad y está también genera un incremento en el coste de la atención hospitalaria. Uno de los mecanismos más estudiados para la resistencia hacía carbapenémicos son un grupo de enzimas llamados betalactamasas de espectro extendido (BLEE), que se encuentra de diferentes formas, un ejemplo son las secuencias de inserción y permite un cambio en la secuencia de su genoma o en algunas ocasiones, plásmidos, lo que confiere la resistencia hacía estos Acinetobacter baumannii es una bacteria Gram negativa considerado un microorganismo oportunista, se presenta en pacientes vulnerables como los que se encuentran hospitalizados. Se considerada que el mal uso de antibióticos ha llevado a que se presenten cepas resistentes para las cuales existen muy pocas opciones terapéuticas, asociándose a mayores tasas de mortalidad y está también genera un incremento en el coste de la atención hospitalaria. Uno de los mecanismos más estudiados para la resistencia hacía carbapenémicos son un grupo de enzimas llamados betalactamasas de espectro extendido (BLEE), que se encuentra de diferentes formas, un ejemplo son las secuencias de inserción y permite un cambio en la secuencia de su genoma o en algunas ocasiones, plásmidos, lo que confiere la resistencia hacía estos

METODOLOGÍA

Se trabajó con cepas clínicas de la bacteria Acinetobacter baumannii para conocer algunos de sus mecanismos de resistencia de tal bacteria, por lo cual se llevó a cabo un corrimiento de electroforesis en gel de campos pulsados Para tal procedimiento primeramente se prepararon los insertos que contiene el ADN de las cepas de Acinetobacter. Para el corrimiento primero se realizó el gel de agarosa al 2% con TBE 0.5X y la cámara electroforética se enciende una hora previamente con tae a 4˚c para limpiar sus sensores. En cada pocillo se agregó ½ de inserto después de la digestión enzimática con la enzima s1 y su solución de paro y se sellaron con la misma agarosa. Electroforesis se realizó en CHEF-DR ll con 2.8 Litros de TBE 0.5X tiourea 75 µM. Las condiciones fueron 6v/cm, 22 horas de tiempo de corrimiento, 14˚c, pulso inicial 1 segundo y pulso final de 30 segundos.

CONCLUSIONES

Con esta investigación se obtuvo información y se encontraron cepas que eran resistentes a carbapenémicos y expresaban a la enzima BLEE por lo que su resistencia se asocia a este mecanismo.

Asesor: Dr. María Luisa Ramos Ibarra, Universidad de Guadalajara

ESPECIES DE LA SUBFAMILIA CAPRINAE (CABRAS Y BORREGOS) COMO POTENCIALES BIOINDICADORES DE GENOTOXICIDAD EMPLEANDO PRUEBA DE MICRONúCLEOS

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ESPECIES DE LA SUBFAMILIA CAPRINAE (CABRAS Y BORREGOS) COMO POTENCIALES BIOINDICADORES DE GENOTOXICIDAD EMPLEANDO PRUEBA DE MICRONúCLEOS

Castro Montaño Iraís Araceli, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. María Luisa Ramos Ibarra, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

A través del tiempo el hombre ha descubierto que por diversas actividades que realiza e incluso por varios eventos naturales que provocan la contaminación del medio ambiente, se han estado liberando agentes altamente dañinos para los organismos. Tales agentes tienen un gran potencial tóxico y genotóxico que afectan desde el ADN de las células hasta los tejidos, lo que podría desencadenar enfermedades que llegarían a provocar la muerte (Díaz, A. C., et al., 2012).             Los compuestos genotóxicos son aquellos que dañan el material genético de las células que tienen alta proliferación, como el tejido epitelial, médula ósea,  gametos, entre otros; por lo tanto, dichas células tienen una mayor exposición a efectos que las dañen. Los efectos que se presentan pueden ser teratogénicos, mutagénicos y carcinogénicos. Los compuestos genotóxicos son capaces de provocar lesiones tanto directa como indirectamente en el ADN, causando mutación o interferencias en procesos indispensables para la  producción de proteínas que se encargan de la correcta función de cada célula (Zúñiga‐González, G., et al., 2003).             Debido a la constante exposición que han tenido los organismos de todo el planeta a los agentes dañinos provocados por fenómenos naturales y por las actividades antropogénicas que mayormente han sido la causa de que se generen cada vez más sustancias peligrosas al medio ambiente; esto ha provocado que se implementen diferentes pruebas para saber el grado de toxicidad que tienen esos agentes químicos, físicos y biológicos. Una de ellas es la prueba de micronúcleos que detecta el daño genotóxico en etapas tempranas y de una manera rápida y económica, por lo que resulta ser una prueba altamente eficiente para lo cual se utilizan bioindicadores que permiten determinar y evaluar el índice de contaminación del ambiente en el que se encuentran. El objetivo del presente proyecto fue evaluar a especies de la subfamilia Caprinae (cabras y borregos) como posibles bioindicadores de genotoxicidad  (Zúñiga‐González, G., et al., 2003; Torres-Bugarín, O., & Ramos-Ibarra, M. L., 2013).

METODOLOGÍA

Se utilizaron 19 muestras de frotis de sangre de cabra y borrego, estos fueron teñidos con naranja de acridina  y se analizaron sus células con un microscopio de fluorescencia marca Zeiss con el objetivo 100X (Zúñiga‐González, G., et al., 2003; Torres-Bugarín, O., & Ramos-Ibarra, M. L., 2013). Se contaron eritrocitos micronucleados (EMN)/10,000 eritrocitos totales (ET); eritrocitos policromáticos micronucleados (EPCMN)/1,000 eritrocitos policromáticos  (EPC) y la proporción de EPC/10,000 ET. Los resultados fueron registrados en una base de datos en Excel y se calcularon los valores promedio ± desviación estándar de cada uno de ellos (Díaz, A. C., et al., 2011; Šutiaková, I., Kovalkovičová, N., Šutiak, V., & Váczi, P., 2008).

CONCLUSIONES

El resultado del conteo de las células mostró niveles elevados de EMN comparado con algunos resultados en cabras que obtuvo Zuñiga G. y cols en 1996, donde los niveles de EMN fueron muy inferiores. Esta observación puede deberse a varios efectos; uno de ellos es la edad o la exposición a un ambiente que se encontraba altamente contaminado por genotóxicos. Durante el análisis de las muestras también se observó que los organismos no presentaban EPC, lo que comprueba la afirmación de Zuñiga G. y cols en el 2000, que menciona que algunos mamíferos sanos no los presentan en su sangre periférica, puesto que tienen una rápida maduración, o el animal padece cierta enfermedad que afecta a la producción de dichas células.

Asesor: Dr. Luis Eduardo Segura García, Universidad de Guadalajara

INTERACCIóN ESCHERICHIA COLI - CEPA CP3 CON MUCíLAGO EN Té VERDE VS. PILONCILLO A 30°C

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INTERACCIóN ESCHERICHIA COLI - CEPA CP3 CON MUCíLAGO EN Té VERDE VS. PILONCILLO A 30°C

Castro Quintero Dania Guadalupe, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Luis Eduardo Segura García, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Escherichia coli es una de las bacterias más conocidas y estudiadas a nivel mundial ya que esta coloniza de forma normal el intestino del hombre horas después del nacimiento, siendo así parte de la flora normal. Además, es una de las principales causas de infecciones como diarrea debido principalmente a la ingesta de alimentos contaminados. Es sabido que las fermentaciones producen metabolitos que reducen o inhiben el crecimiento de patógenos, sin embargo ha habido casos de ciertas fermentaciones en las que sigue el crecimiento de estos, por lo que la finalidad de este estudio es evaluar la interacción de esta bacteria tan importante en la salud pública como lo es Escherichia coli con una cepa  proveniente de alimentos, en este caso CP3, para así poder asegurar que haya una inhibición de la colonización de patógenos  y que nos provee una inocuidad en la bebida fermentada.

METODOLOGÍA

Se utilizó principalmente una cepa de bacteria ácido acética CP3 de la cual generaba mucílago y Escherichia coli ATCC 25922. La cepa CP3 se extrajo a partir de una purificación de té verde fermentado y para su posterior análisis morfológico se llevó a cabo un frotis en fresco. Se prepararon medios de cultivo de caldo YPD de 100mL en matraces de 250mL donde se inoculó la cepa CP3 y que esta pudiera adaptarse sometiéndola a incubación a 30°C en estático por 24 horas. Una vez obtenido su crecimiento, se inoculó la cepa CP3 en medio de cultivo de piloncillo y té verde, el cual fue preparado en matraz de 250 mL con 100 mL de medio cada uno respectivamente. Posteriormente, en el matraz con medio a base de piloncillo y en el de té verde se inoculó bacteria, es decir,  Escherichia coli ATCC 25922 junto con la cepa CP3, para después ser llevados a incubación a 30°C por 48 horas. Se realizaron diluciones decimales en microtubos con 900 uL de diluyente de peptona, los cuales al primer tubo se le inoculó 100 µL tomados a partir de los matraces que fueron inoculados con la bacteria y la cepa CP3. Seguido de esto, las últimas tres diluciones (de los tubos eppendorf 4, 5 y 6) se tomaron 100 µL respectivamente y se pasaron a un medio de agar WL en caja Petri que fue preparado y esterilizado en el mismo laboratorio, realizando una extensión en placa con varilla de vidrio previamente esterilizada en alcohol al 100%. Una vez realizada la extensión en placa, se incubaron a 30°C por 24 horas. Transcurrido este tiempo, se llevó a cabo el conteo en caja, registrarlo y realizar los cálculos necesarios. A los matraces inoculados con la cepa CP3 y Escherichia coli ATCC 25922, se le realizó una titulacion al final de la fermentación para poder determinar la producción de ácido de la bacteria. Se hicieron los cálculos necesarios al final y se interpretaron los resultados con el apoyo del profesor. El procedimiento se llevó a cabo dos veces para así tener una réplica con la finalidad de comparar y verificar los resultados.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano científico en el Centro Universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias de la Universidad de Guadalajara, se realizó este experimento donde pudimos evaluar dicha interacción mencionada anteriormente en la cual se observó que tanto la cepa CP3 y Escherichia coli siendo inoculadas por separado en medio a base de piloncillo y en té verde  tienen un buen crecimiento, y al inocularse ambas en un matraz de medio de piloncillo así como en té verde, tanto la cepa CP3 como E. coli tuvieron el mismo crecimiento, esto quiere decir que no presentó inhibición de ninguno de los dos microorganismos. Lo cual representa un riesgo sanitario al consumir bebidas fermentadas con una mala manipulación durante su producción debido a que E. coli no es inhibida.

Asesor: Dr. Omar Hernando Avila Poveda, Universidad Autónoma de Sinaloa

PROCESO DE DISECCIóN DEL CHITON ARTICULATUS (MOLLUSCA, POLYPLACOPHORA) DEL INTERMAREAL ROCOSO DEL PACIFICO TROPICAL MEXICANO.

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PROCESO DE DISECCIóN DEL CHITON ARTICULATUS (MOLLUSCA, POLYPLACOPHORA) DEL INTERMAREAL ROCOSO DEL PACIFICO TROPICAL MEXICANO.

Catalan Cardenas Rebeca, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Omar Hernando Avila Poveda, Universidad Autónoma de Sinaloa

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El chiton articulatus es un molusco poliplacoforo que habita en las costas rocosas del pacifico tropical mexicano, este organismo es  utilizado como recurso pesquero. A demás este organismo es recolectado y ofrecido en algunos restaurantes como platillo gourmet, lo cual ha llevado a ser explotado y poniendo en peligro su especie; ya que no cuenta con una regulación  pesquera. Los estudios realizados para conocer más sobre la especie como son estudios de alimentación, reproducción, crecimiento etc. Los cuales se logran utilizando métodos de separación de órganos (disección).

METODOLOGÍA

Este proceso se realiza con los organismos fijados y en conservación con alcohol del 96%, se realiza la separación y extracción de órganos, los cuales se pesan para después ser conservados; la rádula y gónada en alcohol del 60%, vísceras y pie en alcohol del 96% y las placas se enumeran.  Para así ser guardadas con su correspondiente marca, localidad, mes y año. A cada organismo completo, se le desprendió el cinturón del manto con ayuda de unas pinzas, después por medio de la inserción de una cuchilla fina, las placas fueron separadas de la musculatura, empezando por la placa anterior hasta la posterior y cuidando que esté totalmente desprendida del músculo dorsal. Una vez que el quitón quedó descubierto sin placas, se hicieron cortes paralelos a la longitud del quitón a ambos lados del surco de inserción de los órganos digestivos, para remover la zona muscular empezando de la parte posterior hacia la anterior y cuidando que la gónada se desprendiera de la aorta dorsal. Siguiendo el protocolo de Abadia-Chanona QY (2015). La disección de estos organismos es importante para obtener los datos biométricos de los órganos, los cuales pueden utilizarse para desarrollar  índices,  y algunos procesos histológicos. Con los datos obtenidos se pueden realizar diversos análisis para distintos temas derivados del proyecto en el que se trabajo.

CONCLUSIONES

Durante la estancia del verano se logro adquirir experiencia y conocimiento del organismo, como también me sirvió para desenvolverme en desarrollar el trabajo en equipo y obtener la práctica de la disección de los órganos y la conservación. Los resultados de los datos obtenidos están en proceso ya que es una extensa investigación.

Asesor: M.C. Lucero Montserrat Cuautle García, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

ANáLISIS DE LOS PARáMETROS DE LA MICROCUENCA HIDROGRáFICA DE LA COMUNIDAD DE SAN FRANCISCO HUILANGO, TOCHIMILCO, PUEBLA A TRAVéS DEL USO DE LOS SISTEMAS DE INFORMACIóN GEOGRáFICA

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ANáLISIS DE LOS PARáMETROS DE LA MICROCUENCA HIDROGRáFICA DE LA COMUNIDAD DE SAN FRANCISCO HUILANGO, TOCHIMILCO, PUEBLA A TRAVéS DEL USO DE LOS SISTEMAS DE INFORMACIóN GEOGRáFICA

Cazares Carpacio Ignacio, Universidad de Guadalajara. Asesor: M.C. Lucero Montserrat Cuautle García, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El volcán Popocatépetl ofrece servicios ambientales tales como el abastecimiento de agua dulce, mantiene un régimen de caudales necesarios para mantenimiento de los ecosistemas, recarga los acuíferos, permite la infiltración del agua al suelo y su flujo hacia los cuerpos de agua superficiales, los cuales cuenca abajo la población aprovecha para realizar sus actividades socioeconómicas, por ello es importante evaluar los recursos hídricos en una cuenca, comenzando con la delimitación y evaluación de los parámetros de la misma. Los sistemas de información geográfica (SIG) permiten manejar información para facilitar el análisis de varias dimensiones en un mismo problema. Con el manejo de los SIG´s se pueden hacer determinaciones del cambio de uso de suelo, balances hidrológicos, planeación y gestión hidráulica, transporte de sedimentos y contaminantes, modelación hidráulica para la determinación de áreas de inundación, sequías, cambio climático, fronteras agrícolas, deforestación etc. (INEGI, 2014) Por lo tanto, la presente investigación tiene como objetivo determinar la microcuenca de la comunidad de San Francisco Huilango, Tochimilco, Puebla, así mismo definir los parámetros fisiográficos a través de un módulo hidrogeomático, el cual nos brinda una visión más amplia para su posterior gestión integral de los recursos bióticos y abióticos. El volcán Popocatépetl ofrece servicios ambientales tales como el abastecimiento de agua dulce, mantiene un régimen de caudales necesarios para mantenimiento de los ecosistemas, recarga los acuíferos, permite la infiltración del agua al suelo y su flujo hacia los cuerpos de agua superficiales, los cuales cuenca abajo la población aprovecha para realizar sus actividades socioeconómicas, por ello es importante evaluar los recursos hídricos en una cuenca, comenzando con la delimitación y evaluación de los parámetros de la misma. Los sistemas de información geográfica (SIG) permiten manejar información para facilitar el análisis de varias dimensiones en un mismo problema. Con el manejo de los SIG´s se pueden hacer determinaciones del cambio de uso de suelo, balances hidrológicos, planeación y gestión hidráulica, transporte de sedimentos y contaminantes, modelación hidráulica para la determinación de áreas de inundación, sequías, cambio climático, fronteras agrícolas, deforestación etc. (INEGI, 2014) Por lo tanto, la presente investigación tiene como objetivo determinar la microcuenca de la comunidad de San Francisco Huilango, Tochimilco, Puebla, así mismo definir los parámetros fisiográficos a través de un módulo hidrogeomático, el cual nos brinda una visión más amplia para su posterior gestión integral de los recursos bióticos y abióticos.

METODOLOGÍA

En la primera fase se realizó la consulta de los datos geográficos (carta topográfica) a través del uso de la plataforma Mapa digital de México del Instituto Nacional de Estadística y Geografía (INEGI, 2019), después se obtuvieron las imágenes de la agencia Alaska Satellite Facility del radar global ALOS PALSAR® (modelo digital de elevación), las cuales se utilizaron para definir el modelo digital de elevación de la localidad. Para la segunda fase se utilizaron las aplicaciones de Qgis y ArcMaps ® para el manejo de datos vectoriales, y el uso de SELVA® para la implementación del modelo geomático, el cual nos permitió realizar el análisis, procesamiento e interpretación de las imágenes ráster. Posteriormente se realizó una visita de campo (levantamiento) para verificar las características de la microcuenca.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró adquirir conocimientos teóricos de los principales sistemas de información geográfica, el manejo de los programas que nos permiten manejar recursos de manera teórica a través de modelos geomáticos (SELVA®, ArcGIS®, PCI Geomatics®) y el uso de plataformas gubernamentales abiertas al público en general como Mapa Digital de México INEGI, las cuales a través de su uso me permitió  hacer una propuesta para generar un mapa integral de la comunidad. Este trabajo representa el inicio de proyectos posteriores sobre el manejo de recursos de la comunidad, el cual es una herramienta que será utilizada en la práctica de actividades relacionadas al manejo de la vida silvestre, en el conocimiento del uso del suelo, en la distribución y caracterización fisionómica de la vegetación y en el manejo integral del agua. Sin embargo, al ser un trabajo extenso se necesitan de otros estudios para complementar la información del área de estudio, tales como ecológicos, edafológicos, microbiológicos, climatológicos, entre otros.

Asesor: Dr. Felipe Amezcua Martinez, Universidad Nacional Autónoma de México

MéTODOS PARA EL ESTUDIO DE EDAD Y CRECIMIENTO DE ELASMOBRANQUIOS

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MéTODOS PARA EL ESTUDIO DE EDAD Y CRECIMIENTO DE ELASMOBRANQUIOS

Ceballos Luna Valeria, Universidad Veracruzana. Asesor: Dr. Felipe Amezcua Martinez, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Actualmente la pesca se considera un recurso muy valioso ya que representa una fuente importante de alimento y empleo (Castillo et al., 1998), sin embargo, es un recurso agotable por lo que se deben crear estrategias para su conservación. Los elasmobranquios (tiburones y rayas), son especies de importancia comercial, que presentan una baja fecundidad, lento crecimiento, una madurez sexual tardía y una larga vida (tipo de estrategia K) siendo particularmente vulnerables a la sobreexplotación ejercida por las pesquerías, tanto industriales, como artesanales y recreativas (Walker, 1998), que operan para obtener productos como aletas, carne, cartílago, piel, aceite, dientes y mandíbulas (Musick, 2004). Por tales motivos es importante conocer el crecimiento, maduración y longevidad de las especies mediante las estimaciones de edad, con el fin de evaluar el estatus de las poblaciones y sus cambios a través del tiempo, principalmente en especies sujetas a explotación (Ricker, 1975; Cortés, 1997). La mayoría de los estudios sobre edad y crecimiento en elasmobranquios se basan en la descripción de las marcas de crecimiento en estructuras duras (Cailliet & Goldman, 2004) debido a que su incremento es un proceso continuo de la deposición de calcio y no existe evidencia de reabsorción o modificación interna (Simkiss, 1974; Clement, 1992; Officer et al., 1997). En México, los estudios de edad y crecimiento de este grupo son escasos  (Downton, 2001; Sánchez-De Ita, 2004), por lo que se considera importante detallar un método para tiburones y rayas.

METODOLOGÍA

Área de estudio Los ejemplares se recolectaron en dos zonas, en el sistema estuarino de Santa María la Reforma, ubicada en la placa continental del centro del Pacífico Mexicano y en Playa Norte ubicado en Mazatlán, Sinaloa. Trabajo de campo Los organismos se obtuvieron a través de la pesca incidental del camarón utilizando como arte de pesca las redes de arrastre con una abertura de malla de 2.75 pulgadas. Las muestras se mantuvieron congeladas hasta su traslado al laboratorio de pesquerías del ICMYL en Mazatlán, Sinaloa. La pesca se realizó de Abril a Junio de 2019. Trabajo de laboratorio La identificación de los elasmobranquios se llevó a cabo por medio del diagnostico de características externas utilizando las claves de la FAO (1995). Posteriormente se identificó el sexo por medio de características sexuales externas como la presencia de clasper en los machos y la ausencia de ellos en las hembras. Se registró su longitud (cm) así como el peso total de los organismos (Pt; g), peso vesicular (Pevsc; g), peso estomacal (Pest; g), peso del hígado (Phig; g) y peso gonadal (Pgon; g). Para los machos se tomó el peso de testículo derecho e izquierdo por separado, por último el estado gonadal. Específicamente para el caso de las rayas (batoideos) se registró la Longitud total (Lt; cm): distancia desde la punta del rostro hasta el final de la aleta caudal y ancho del disco (AD; cm): distancia transversal de extremo a extremo de las aletas pectorales. En el caso de los tiburones (Selacimorfos) se tomaron las siguientes medidas: longitud total (Lt; cm): desde la punta del rostro hasta el final de la punta de la aleta caudal. Longitud furcal (LF; cm): distancia de la punta del rostro a la horquilla (punto de unión del lóbulo superior e inferior de la aleta caudal). Longitud precaudal (LPC): distancia de la punta del rostro a la zona precaudal. Inicialmente se tomaron de 4 a 6 vertebras de cada organismo, que para estandarizar se extrajeron después del condocraneo; con ayuda de un bisturí se realizaron cortes transversales para separar las vertebras, remover el exceso de tejido conectivo, arco hemal y neural de cada una. Se colocaron en peróxido de hidrógeno al 3% durante dos minutos aproximadamente con el fin de remover todo tejido adherido, se transfirieron a otro recipiente con agua destilada y por último se dejaron secar durante 24 horas a temperatura ambiente. Para facilitar el corte de las vertebras, se fijaron con resina CYTOSEALTM 60 sobre una pieza de madera (2cm x 5 cm). De cada una se cortó una sección longitudinal de .5 y 1 mm de grosor aproximadamente utilizando una cortadora IsoMetTMBuehlerde baja velocidad con navajas con punta de diamante. El resultado de esto fue una pequeñasección de la vertebra en forma de moño o de reloj de arena las cuales se montarán en portaobjetos y se visualizarán en un esteromicrosópio óptico ZeissStemi 508. Para la determinación y conteo de la bandas de crecimiento se contarán cada una de ellas observadas en la región del región del corpus calcareum (una banda opaca seguida de una hialina). La marca de nacimiento será identificada como la primerabanda delgada hialina y a partir de esa se realizará el conteo del resto de las bandas. En la imagen digitalizada se medirá el radio total (RV) del foco al borde dela vertebra, el ancho de margen (AM) distancia de la última marca al borde de la vertebra y por último el ancho de la última banda totalmente depositada (ABP) con el fin de estimar la periodicidad de las bandas de crecimiento. (Méndez, 2008) A partir de los datos obtenidos se procederá al análisis de la relación peso-longitud, la determinación de edades, la estimación de la periodicidad de los anillos de crecimiento y la descripción del crecimiento a través de modelos, los cuales en este estudio no se detallarán.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró adquirir conocimientos teórico-prácticos acerca de la metodología de estudios de edad y crecimiento en elasmobranquios, sin embargo, al ser un extenso trabajo y estar complementándolo con otro tipo de trabajos,  aún se encuentra en la fase de lectura de vertebras y no se pueden presentar los resultados obtenidos. Se espera una buena visualización clara de bandas de crecimiento en las vertebras.

Asesor: Mtro. Eduardo Juventino Ramirez Chavez, Universidad del Mar

ÁREAS NATURALES PROTEGIDAS

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ÁREAS NATURALES PROTEGIDAS

Cebrero Manzano Luis Manuel, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Mtro. Eduardo Juventino Ramirez Chavez, Universidad del Mar

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las áreas naturales protegidas son porciones terrestres o acuáticas del territorio nacional representativas de los diversos ecosistemas, donde el ambiente original no ha sido alterado significativamente y cuya función es la conservación y protección de los recursos naturales y la biodiversidad. Pueden ser federales, decretadas por el gobierno central, y estatales, donde el gobierno estatal es el principal autor del decreto. En Oaxaca han sido decretadas por el gobierno federal seis áreas que son administradas por la Comisión Nacional de Áreas Naturales Protegidas, la primera de las cuales, el Parque Nacional Benito Juárez, fue decretada en 1937 y se localiza al norte de la capital del estado. Por su parte, el gobierno estatal ha emitido decretos de protección para tres áreas más. Sin embargo, la función que deberían realizar estas áreas no siempre se cumple, debido principalmente a la mala delimitación que ocasiona discusiones e incluso enfrentamientos entre comunidades o municipios por el control del territorio que reclaman como suyo. En otros casos, las áreas se delimitaron sin consultar a las comunidades por lo que éstas no las reconocen como tal o están en desacuerdo con el manejo de las mismas, lo cual nos lleva a otro problema: la inexistencia en la mayoría de los casos de planes de manejo adecuados. En el caso de existir dichos planes, el problema es que ocurren violaciones a los mismos, como lo muestra lo que sucede en el Parque Nacional Bahías de Huatulco, donde aun cuando el reglamento señala que no es permitido el turismo en gran escala al interior del parque, las compañías hoteleras y turísticas han establecido instalaciones dentro de los lí­mites del área protegida. Aunado a este tipo de problemas, en la mayoría de los parques hay actividades clandestinas como la caza de especies enlistadas dentro de la nom-059-ecol-2001 y la extracción de flora nativa.

METODOLOGÍA

Primero se utilizó un dron llamado Mavic Pro para hacer un plan de vuelo mediante una aplicación móvil el cual uno determina el perímetro para obtener las imagenes sobre el lugar de estudio para obtener más información sobre el área que se está trabajando y tener una mejor obtención de datos. Posteriormente de que se tomaron las fotos del plan de vuelo, se llevan al laboratorio de SIG para procesar las fotos y hacer un mapa Ortomosaico (3D) en el programa llamado Agisoft, ya cuando están terminados los mapas estos se observan y se analizan para ver que parte de las áreas naturales protegidas están siendo modificadas o ver de dónde está surgiendo el problema (si es que tiene problema de contaminación). Metiéndose más al fondo con la problemática con la primera problemática del Parque Nacional Huatulco, menciona que no puede tener un cierto rango de turismo excesivo en el parque, esto se puede saber con exactitud usando el mismo proceso de plan de vuelo, ya obtenida las fotos se procesan en un programa el cual cuenta el número de organismos que se observan en las imágenes tomadas y asi ya obtenido el número de personas en total podemos saber si el área sobre pasa los límites de rango establecido en dicho parque. Pasando a la problemática de las Áreas Naturales Protegidas sobre la caza de especies que no están permitidas por la nom-059-ecol-2001, ya sea por endemismo o esté en peligro de extinción, para resolverlo hay de dos maneras, la primera es dar recorridos de las personas que protegen esa área y tener un control de las especies observadas durante ese recorrido para saber en qué parte del área se encuentran; la segunda es dar recorridos con un dron en la zona en el cual se toman fotos posteriormente de tomarlas se analizan y se ponen los punto en una mapa hecho en ArcGis (creador de mapas) de donde se encuentran dichas especies, ya que las imágenes del dron están georreferenciadas y pueden ser proyectadas en el programa.

CONCLUSIONES

Durante este verano se logró adquirir conocimientos de las Áreas Naturales Protegidas ya que estas son muy importantes en el ámbito ecológico ya que nos ayuda a preservar especies que son endémicas o que están en peligro de extinción y pueden ser protegidas y cuidadas para su preservación, ya que por la culpa del hombre por obtener fácilmente fuente de recursos no cuidan las áreas naturales y las destruyen de poco a poco terminando así con la extinción de especies tanto especies animales como plantas o árboles. Otros conocimientos obtenidos es que la tecnología apoya en el ámbito científico, como lo observé en estas problemáticas de las Área Naturales Protegidas, ya que ayudan a facilitar algunos procesos que se pueden hacer con más tiempo y esfuerzo, además de no tener un margen de error tan grande y obtener los resultados casi exactos.

Asesor: Dr. Eden Oceguera Contreras, Universidad de Guadalajara

OPTIMIZACIóN DE LA PRODUCCIóN DE HIDRóGENO POR MICROORGANISMOS ASOCIADOS A VERMIHUMUS UTILIZANDO MELAZA COMO SUSTRATO

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OPTIMIZACIóN DE LA PRODUCCIóN DE HIDRóGENO POR MICROORGANISMOS ASOCIADOS A VERMIHUMUS UTILIZANDO MELAZA COMO SUSTRATO

Cedeño Ferrer Francisco Javier, Instituto Tecnológico de Colima. Asesor: Dr. Eden Oceguera Contreras, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La utilización de hidrocarburos como principal fuente de energía nos ha traído cambios climáticos muy drásticos, por este motivo, existe un esfuerzo mundial para reducir la emisión de gases de efecto invernadero. Sin embargo, hasta que comencemos a utilizar energías amigables con el medio ambiente, continuaremos coexistiendo con el problema ambiental. Hoy en día, una alta producción y acumulación de desechos orgánicos ha superado la capacidad inherente de la naturaleza de degradar estos compuestos donde no hay suficientes vertederos para depositar estos desechos. Aquí, el vermicompostaje se ha convertido en una excelente herramienta para degradar y eliminar los residuos agroindustriales. Una de las estrategias para producir energía de manera sustentable es utilizar Hidrógeno, el cual se puede obtener por medios biológicos. Las condiciones de operación para la producción de hidrógeno con microorganismos oscilan desde los 4 hasta los 75 °C, es necesario producir la mayor cantidad de hidrógeno en temperaturas mesofilicas, esto para utilizar la menor cantidad de energía para producir energía y el ciclo de vida del proceso sea de una manera sustentable. El vermihumus es un fertilizante orgánico enriquecido que contiene moléculas cruciales para ayudar al crecimiento y mantenimiento de microorganismos. Recientemente, Oceguera-Contreras et al., (2019), utilizaron microorganismos asociados con vermihumus en los que las cantidades se ajustaron entre otros estudios de producción de hidrógeno a condiciones mesofílicas. Además, la mayor producción de hidrógeno fue con melaza como sustrato (hasta 1500 ml L-1).  El objetivo de esta investigación fue el de optimizar las condiciones de operación (pH, sustrato, temperatura) con melaza como sustrato.

METODOLOGÍA

Se utilizó lixiviado de lombriz que fue donado por la empresa Biogarma S.C. de C.V. de R.L., ubicado en Tamazula de Gordiano, Jalisco, México; dicho producto fue mezclado en una proporción de 20% (w/v) con vermihumus sólido para generar un producto enriquecido. La melaza fue proporcionada por la industria azucarera San Miguel ubicada en Ameca, Jalisco, México. Para analizar la producción de hidrógeno, se elaboró un diseño de superficies de respuesta Box-Behnken, donde se consideraron 3 variables (pH, temperatura, concentración de sustrato). Para las condiciones de pH, fueron valores de 4.6 (-1) para le valor más bajo y 8.6 (+1) para el valor más alto, con puntos centrales en 6.6. Las condiciones de temperatura se encontraban en valores de 25°C (-1) y 45°C (+1), con puntos centrales en 35°C. Los valores para la última variable fueron establecidos en 10%(v/v) (-1) y 30%(v/v) (+1), con valores centrales en 20%(v/v). Todos los experimentos se llevaron a cabo en botellas serológicas de 120 mL; en condiciones anaeróbicas, con un volumen de trabajo de 100 mL, utilizando melaza como sustrato y lixiviado de lombriz enriquecido como inóculo. Antes de comenzar las fermentaciones, todos los experimentos fueron pre tratados con calor a 90 °C por 24 horas, para eliminar los microrganismos consumidores de hidrógeno. Para cuantificar la producción de hidrógeno, se realizó por desplazamiento volumétrico, en una bureta invertida con hidróxido de sodio 1M. Dentro de la columna, se hallaba una manguera para suero, que en el otro extremo contaba con una jeringa, la cual, se insertaba en los tapones de las botellas serológicas para dejar salir los gases producto de la fermentación (hidrógeno y dióxido de carbono). El método DuBois nos sirvió para conocer  el contenido de azucares totales a través de la fermentación. Para llevar a cabo este método previamente se construyeron curvas estándar de calibración de sacarosa de 40 a 200 mg/L. El azúcar presente en los estándares y la muestra se hicieron reaccionar con fenol y ácido sulfúrico concentrado. Después de un tiempo de repososo (15 minutos) en agua fría, se leyeron en un espectrofotómetro (UV/Vis) y se determinaron  las absorbancias a una longitud de onda de 490 nm. Las muestras se diluyeron hasta 1:2500, dependiendo la muestra. Los datos obtenidos fueron registrados en el software desing expert, donde se observó el mejor modelo, de acuerdo a las gráficas de superficie de respuesta, para conocer las mejores condiciones de operación.

CONCLUSIONES

En este estudio se produjo hidrógeno en todas las temperaturas, concentraciones de sustrato y pH, lo que habla de la gran versatilidad del consorcio. Sin embargo, fue un hallazgo muy prometedor la producción de hidrógeno a 25 °C, donde se alcanzó hasta 2000 mL L-1 de hidrógeno, por lo que el modelo sugiere 25 °C, 10 % (v/v) de melaza y un pH de 6.5, como las condiciones óptimas de operación. Con estos datos obtenidos, el siguiente punto es la validación del modelo, para corroborar los datos y posteriormente escalarlo a biorreactor de 3 y 5 Litros.

Asesor: Dr. Mario Pedraza Reyes, Universidad de Guanajuato

PAPEL DE LA OXIDO-REDUCTASA YHDA EN PROTEGER A BACILLUS SUBTILIS DE LOS EFECTOS CITOTóXICOS Y GENOTóXICOS DEL ESTRéS OXIDATIVO

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PAPEL DE LA OXIDO-REDUCTASA YHDA EN PROTEGER A BACILLUS SUBTILIS DE LOS EFECTOS CITOTóXICOS Y GENOTóXICOS DEL ESTRéS OXIDATIVO

Cedillo de León Melissa, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Mario Pedraza Reyes, Universidad de Guanajuato

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La toxicidad del Cr (VI) que contamina al medio ambiente es de gran preocupación por sus efectos mutagénicos y teratogénicos. El Cr(VI) es considerado altamente tóxico para todas las formas de vida ya que es altamente móvil y soluble en agua, lo que le permite atravesar con facilidad las membranas biológicas y puede ser transportado activamente al interior de las células. En contraste el Cr(III) es considerado menos tóxico que el Cr(VI) debido a su tendencia de formar complejos insolubles en agua. Se ha propuesto que los efectos tóxicos del Cr(VI) son una consecuencia de la formación de especies intermedias reducidas, incluyendo Cr(V) y Cr(IV), las cuáles incrementan la formación de especies reactivas de oxígeno (ERO), incluyendo al ion superóxido (O2-), peróxido de hidrógeno (H2O2) y radical hidróxilo (OH∙). Distintas Bacterias Gram negativas y Gram positivas como Escherichia coli y Pseudomonas putida producen de Oxidoreductasas dependientes de los cofactores Flavin Mononucleótido (FMN) y Difosfo-Nucleótido de Nicotinamida y Adenina (NADPH) con capacidad de reducir el Cr(VI) a Cr(III) sin generar especies intermedias reducidas. Estudios recientes de nuestro laboratorio demostraron que la bacteria del suelo, Gram positiva Bacillus subtilis presentó una respuesta adaptativa al tratamiento con el ion cromato. Se demostró que utiliza diversas enzimas para prevenir los efectos oxidantes indirectos del ion cromato, incluyendo las catalasas KatA y KatB. Además, se demostró que B. subtilis posee la capacidad de reducir Cr(VI) a Cr(III). Un análisis in silico mostró que en el genoma de B. subtilis existe el gen yhdA, que codifica para una proteína que posee homología con Flavin Mononucleótido Oxido Reductasas dependientes de NADPH (FMN:NADPH) como las descrita en E. coli y P. putida. En consideración a estos antecedentes, en el presente trabajo se pretende investigar si la sobreexpresión del gen yhdA confiere protección a B. subtilis de los efectos nocivos del peróxido de hidrógeno. Para abordar este aspecto se utilizarán enfoques genéticos, moleculares y fisiológicos mediante la obtención de una cepa transformante con genotipo katA/katB portando una construcción extracromosomal para sobreexpresar el gen yhdA desde un promotor inducible. Además, se obtendrá una cepa control en el mimo fondo genético que porte el vector de expresión sin el gen de interés.

METODOLOGÍA

En este estudio se utilizaron las cepas Bacillus subtilis 168, trpC2 (PERM451), Bacillus subtilis ΔkatA/katB (PERM1596; KanR EriR) y E. coli conteniendo el plásmido de expresión pDG148-yhdA (PERM1558; AmpR KanR) obtenidos del cepario del laboratorio del Dr. Mario Pedraza Reyes. Se prepararon células competentes de la cepa B. subtilis PERM1596 y se transformaron con el plásmido de expresión pDG148-yhdA aislado por lisis alcalina de la cepa E. coli PERM1558 para generar la cepa B. subtilis PERM1742. Asimismo, se prepararon dos cepas control, 1) la cepa transformante B. subtilis PERM1596 conteniendo el plásmido pDG148 vacío, y, 2) la cepa transformante B. subtilis PERM451 conteniendo el plásmido pDG148 vacío. La introducción y replicación de los plásmidos indicados se verificó mediante selección de colonias sembradas en medio sólido Luria-Bertani (LB) suplementado con los antibióticos apropiados. Así, en el caso de las cepas B. subtilis PERM1742 Y PERM1596 los antibióticos de selección usados fueron Kanamicina (Kan) 1 μg/mL, Cloranfenicol (Cm) 5 μg/mL y Eritromicina (Eri) 1μg/mL; para la cepa B. subtilis PERM451, Kanamicina (Kn) 1 μg/mL. Para caracterizar las cepas transformantes, se prepararon cultivos de colonias aisladas, se purificaron los plásmidos mediante lisis alcalina y estos se sujetaron a un análisis de restricción de minipreparaciones de ADN plasmídico utilizando las enzimas BglII y EcoRV para la cepa que porta el plásmido que sobreexpresa a yhdA, y la enzima EcoRI para las cepas control arriba referidas. Los productos de restricción se separaron en geles de agarosa al 1% teñidos con bromuro de etidio; el patrón de bandas obtenido se comparó con el mapa de restricción esperado para cada construcción. Adicionalmente se investiga la capacidad de la cepa B. subtilis PERM1742 de incrementar la síntesis del producto del gen yhdA, mediante electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones desnaturalizantes (SDS-PAGE). Para analizar la susceptibilidad a peróxido de hidrógeno se realizarán ensayos de susceptibilidad a H2O2 in situ en placas de LB agar conteniendo un disco de papel Whatman No. 1 (diámetro de 7 mm) estéril al cuál se le adicionarán 10 mL de una solución de H2O2 1 M. Las frecuencias de mutación de resistencia a rifampicina RifR se realizarán en condiciones de inducción del yhdA y en presencia y ausencia de IPG determinando la producción de colonias resistentes a Rif en referencia a numero de unidades formadoras de colonias de cada cultivo.

CONCLUSIONES

Se obtuvieron dos cepas transformantes de B. subtilis con genotipo katA/katB, una que porta la construcción pDG148-yhdA y la segunda conteniendo el vector de expresión pdG148. Ambas cepas fueron caracterizadas molecularmente mediante análisis de restricción de mini preparaciones de ADN plasmídico. Actualmente, se verifica mediante SDS-PAGE que la adición de IPTG si induce la expresión y producción de la enzima YhdA en la cepa B. subtilis PERM1742, pero no en la cepa PERM1596 del mismo microrganismo. En experimentos futuros se investigará si la sobreexpresión del gen yhdA protege a la doble mutante KatA/katB de los efectos citotóxicos y genotóxicos de H2O2. Así mismo, se determinará si la expresión exacerbada de YhdA es capaz de contrarrestar la mutagénesis espontanea e inducida por el H2O2 en esta cepa mutante. Los resultados de este estudio nos permitirán entender el papel que juega la oxidoreductasa YhdA en proteger a B. subtilis de los efectos nocivos de factores espontáneos y extracelulares que impactan el material genético de este microorganismo mediante la producción de ERO.

Asesor: Dr. Karina Verdel Aranda, Colegio de Postgraduados

IDENTIFICACIÓN DE POSIBLES ACTINOBACTERIAS AISLADAS DE LAS AGUADAS DE LA RESERVA DE LA BIOSFERA DE CALAKMUL

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IDENTIFICACIÓN DE POSIBLES ACTINOBACTERIAS AISLADAS DE LAS AGUADAS DE LA RESERVA DE LA BIOSFERA DE CALAKMUL

Ceja López Jaime Abelardo, Universidad Tecnológica de la Costa. Asesor: Dr. Karina Verdel Aranda, Colegio de Postgraduados

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La Reserva de la Biósfera de Calakmul es una zona con suelos calcáreos y una de las selvas tropicales conservadas más extensas a nivel mundial, donde a la fecha no se han reportado estudios sobre la microbiota. Las aguadas son acumulaciones de agua de la Reserva que pueden ser temporales o permanentes, que se presentan como un espacio para el estudio de los microorganismos ideal ya que se pueden comparar poblaciones microbianas en situaciones distintas, por ejemplo aquellas que han permanecido inundadas por mucho tiempo o aquellas que se comportan de manera cíclica, siendo incluso una oportunidad para el estudio del impacto en poblaciones microbianas del cambio climático.

METODOLOGÍA

Aislamientos de actinobacterias El aislamiento de actinobacterias de muestras de las aguadas de la Reserva de la Biosfera de Calakmul fue por estriado simple tomando las colonias que presentaban la morfología características de las actinobacterias, tales como esporulación, color de la colonias y olor, hipotetizando que las colonias potencialmente serán del grupo de las actinobacterias. Las placas fueron incubadas a 23 grados Celsius durante cuatro días. Los medios utilizados para el aislamiento fueron medios sólidos tal es el caso del medio SFM. Este medio contribuye a la esporulación de las actinobacterias. El medio es una mezcla de diferentes ingredientes (harina de soya, manitol y agar) que enriquece el medio donde se desarrollarán las posibles actinobacterias. Conservación de esporas   Para la conservación de esporas de las actinobacterias se empleó una técnica utilizando una jeringa de 25 mililitros con un pequeño filtro de algodón en el fondo para obtener pellets concentrados y puros. Las placas que anteriormente se sembraron con las diferentes cepas se rasparon con un aza añadiendo con una pipeta 10µl de agua estéril directamente a la caja facilitando el arrastre de esporas. El líquido que se obtuvo a partir del raspado se extrajo utilizando una micro pipeta pasándolo al filtro que se elaboró con el cuerpo de la jeringa y el algodón embocado a un tubo tuvo cónico de 1.5 mililitros donde el filtrado reposaría para su posterior tratamiento. Una vez que se obtuvo el líquido del raspado de las cajas en los tubos cónicos de 1.5 mililitros se centrifugo a 13,000rpm donde con la fuerza centrífuga se separó el líquido, posteriormente se decantó y se dejó el precipitado lo más seco posible.       Los pellets resultantes después de la centrifugación y la decantación se resuspendieron en 500µl de glicerol 50% debido a que esta sustancia es crioprotectante lo cual asegurara la permanecía de las esporas durante cierto tiempo con alta viabilidad para reactivarlas almacenándolas a -20 grados Celsius. Extracción de DNA genómico  Para la extracción de DNA se colocaron en tubos falcón con tres mililitros de medio líquido R2YE colocando las cepas con puntas estériles en contacto con el medio donde se dejaron en agitación durante dos días para obtención de biomasa. Las pastillas se obtuvieron mediante centrifugación 80,000 rpm durante cinco minutos decantando el líquido y volviendo a llenar hasta terminar con el medio de los tubos falcón de cada cepa. se siguio el protocolo de el kit de extracción utilizando las diferentes sales y solventes organicos. PCR del gen rRNA 16S Para el análisis de las diferentes cepas de estudio se empleó la técnica de PCR (polymerase chain reaction). Esta técnica ha revolucionado la investigación y diagnóstico basado en la Biología Molecular.  . El volumen total de las reacciones fueron 20µl con las siguientes cantidades; oligonucleótido FW 1µl (5´-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3´), oligonucleótido RV 1µl     (5´-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3´) cada uno a una concentración de 20 picomolas/µl, DMS0 0.6µl, agua ultra pura 6.4µl, phusion HSII mix 10µl y DNA templado 1µl dando así el volumen total de 20µl por reacción. El protocolo del tiempo de las reacciones se estableció a las siguientes temperaturas: Fase de precalentamiento: en esta fase se empleó una temperatura de 98 grados durante 1 minuto para homogenizar las temperaturas de todos los reactivos de la reacción y poder asegurar la desnaturalización de la molécula de DNA. Fase de desnaturalización: la temperatura que se utilizó para para facilitar el rompimiento de los puentes de hidrogeno que mantienen unidos a las dos hebras de DNA fue de 98 grados 1 minuto. Fase de annealing: la temperatura utilizada fue de 63 grados durante 1 minuto tomando en cuenta la secuencia de los oligonucleótidos FW Y RV dándoles las condiciones que requieren para que encuentren sus secuencias complementarias localizada en alguna zona del DNA. Fase de extensión: temperatura de 72 grados durante 1 minuto donde las reacciones aseguran la síntesis de las cadenas de DNA que fueron señaladas dentro de la reacción por los oligonucleótidos. Fase de conservación: la fase de conservación se mantiene a 4 grados siempre, en caso de que se requiera hasta por un lapso de 12 horas evitando la degradación de la reacción. Purificación de reacciones de PCR´S La purificación de las reacciones es de PCR´S se llevó a cabo con QIAquick® 96 PCR Purification Kit, mediante la utilización de diferentes buffer. Este kit, garantiza la limpieza de hasta el 98% a partir de hasta 10µg de producto de PCR (100pb a 10kb).

CONCLUSIONES

Durante el periodo de estancia que se realizó en el Colegio de Postgraduados campus Campeche, se logró adquirir conocimientos y técnicas de biología molecular para la identificación de posibles actinobacterias de los densos ecosistemas de la reserva de la biosfera de Calakmul, sin embargo, es importante mencionar que debido al extenso trabajo de este estudio aún resta el mandar a secuenciar los productos de PCR para poder obtener de manera segura género y especie, y determinar si estos microorganismos son del grupo de las actinobacterias utilizando el gen rRNA16S, y estudiando las posibles aplicaciones de estos.

Asesor: Dr. Pindaro Diaz Jaimes, Instituto de Ciencias del Mar y Limnología (UNAM)

SISTEMATICA MOLECULAR DE LAS RAYAS DEL GENERO RHINOPTERA (ELASMOBRANCHII, MYLIOBATIFORMES) DISTRIBUIDAS EN AMERICA

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SISTEMATICA MOLECULAR DE LAS RAYAS DEL GENERO RHINOPTERA (ELASMOBRANCHII, MYLIOBATIFORMES) DISTRIBUIDAS EN AMERICA

Cera Pinto Laura Yiseth, Universidad de la Guajira (Colombia). Asesor: Dr. Pindaro Diaz Jaimes, Instituto de Ciencias del Mar y Limnología (UNAM)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El género Rhinoptera se compone de ocho especies distribuidas en todos los mares tropicales, subtropicales y templados, excepto alrededor de las islas del Pacifico Oriental; habitan bahías, estuarios y desembocadura de ríos. De estas ocho especies, solo Rhinoptera bonasus y RhInoptera brsilensis se distribuyen en el Atlántico Occidental, siendo estas morfológicamente muy similares, en cambio R. sterindachneri en el Pacifico Oriental Tropical. La mayor parte de los caracteres diagnósticos para la clasificación  del genero Rhinoptera se basan en los números de series o filas de las dentales, debido a su gran similitud morfológica la taxonomía de este género se encuentra en duda y ha sido poco estudiada , por lo que una revisión de las relaciones filogenéticas de este género es de gran utilidad para definir el número y la distribución de las especies que lo componen.

METODOLOGÍA

Se realizó extracción de ADN de las muestras de las rayas del género Rhinoptera proveniente de Estados Unidos  mediante el protocolo de Fenol: Cloroformo: alcohol Isoamilico, este protocolo permite la purificación de ADN mediante la adición de fenol y cloroformo lo que da lugar a la aparición de 2 fases: una fase acuosa superior que contiene los ácidos nucleicos y una fase orgánica que contiene las proteínas disueltas en el fenol y los lípidos disueltos en el cloroformo. Para la purificación de ADN el fenol debe tener un pH≈7-8. Posteriormente se precipita el ADN de la fase acuosa con  etanol absoluto y se lava con etanol al 70% para eliminar sales y pequeñas moléculas orgánicas que podrían aún estar presentes en la muestra. Para la Extracción de ADN ambiental de las muestras de agua se utilizo el kit comercial DNAeasy blood and tissue kit® de QIAGEN.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se ha  podido realizar  extracción de ADN de las muestras de las rayas del género Rhinoptera con el protocolo de Fenol: Cloroformo: alcohol Isoamilico; Extracción de ADN ambiental de las muestras de agua con el kit DNAeasy blood and tissue kit® de QIAGEN; Elaboración de la PCR con genes mitocondriales; Cuantificación de los productos de extracción mediante un Espectrofometro NanoDrop™ 2000 Thermo Scientific y preparaciones de soluciones. Las muestras extraídas se mandaron a secuenciar por el método de Sanger posterior a esto se realizara alineamiento de secuencias  mediante el programa Bioedit y ultimo un análisis de datos los cuales se analizara la divergencia genética entre localidades, métodos filogenéticos para la reconstrucción de la historia evolutiva del género en estudio: máxima verosimilitud (MV) e inferencia bayesiana (IB).  

Asesor: Dr. Gabriela María Ávila Villarreal, Universidad Autónoma de Nayarit

BúSQUEDA DE COMPUESTOS DE SERJANIA TRIQUETRA A PARTIR DE CROMATOGRAFíA EN COLUMNA ABIERTA

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BúSQUEDA DE COMPUESTOS DE SERJANIA TRIQUETRA A PARTIR DE CROMATOGRAFíA EN COLUMNA ABIERTA

Cerezo Limón Francisco Javier Benjamín, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Gabriela María Ávila Villarreal, Universidad Autónoma de Nayarit

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La Organización Mundial de la Salud, define la medicina tradicional (MT) como el conjunto de conocimientos, aptitudes y prácticas basados en teorías, creencias, y experiencias indígenas de las diferentes culturas, sean explicables o no, usados para el mantenimiento de la salud. De acuerdo con estadísticas de la OMS, el 80% de la población de los países en desarrollo, recurre a las plantas, para satisfacer o complementar sus necesidades básicas de salud. Aún cuando la MT se ha empleado como importante estrategia para la antención de las necesidades de salud de diversas culturas, el conocimiento científico que avale las atribuciones medicinales de estas aún es limitado. A pesar de que se ha demostrado que las plantas presentan una gran diversidad de metabolitos secundarios y estos a su vez presentan potenciales efectos farmacológicos, es importante establecer estrategias que nos permitán estandarizar químicamente llos productos herbarios utilizados por la población, dada la complejidad del metabolismo de las plantas, es común que se encuentren variaciones químicas entre la misma especie colectada en diferentes regiones o en diferentes épocas del año, incluso una especie que sea colectada en la misma época en años diferentes puede tener una varición metabólica debido a los cambios climáticos del entorno. Por lo anterior contar con información fitoquímica de su contenido metabólico es fundamental para poder continuar con el desarrollo de estrategias para su estandarización y su asequibilidad a la población. Serjania triquetra es un bejuco anual originario de México, esta especie se emplea popularmente con el fin de tratar diversas afecciones tales como dolores estomacales, golpes, hemorragias uterinas, ictericia infecciosa, problemas asociados con los riñones, por mencionar algunas. A pesar de su amplio uso y de las propiedades que se le atribuyen a esta planta, no existen estudios científicos exhaustivos que reporten su contenido químico metabolico y que avalen estas propiedades farmacológicas reportadas.

METODOLOGÍA

Para la separación de compuestos, se realizó una cromatografía en columna abierta (CCA), utilizando como muestra la reunión número 18 de un fraccionamiento previo del extracto hidroalcohólico de Serjania triquetra, en la cual se usó como fase estacionaria gel de sílice 60 (0,040-0,063 mm) de la marca Merck® y como fase móvil un gradiente de polaridad de n-hexano, diclorometano, acetato de etilo y metanol, en diferentes proporciones, finalizando con un lavado de acetona. Se realizó el seguimiento cromatográfico de las fracciones obtenidad por cromatografía en capa fina (CCF), estas se observaron en una lámpara de luz UV (λ 254 nm y 365 nm), y se revelaron mediante oxidación con ácido sulfúrico al 10%, a 100 °C. Con base a la similitud cromatográfica que presentaron las fracciones mediante CCF, se realizaron reuniones de estas las cuales igualmente se observaron en CCF.

CONCLUSIONES

En la presente investigación, se realizó con el fraccionamiento por CCA, colectando 51 fracciones. A través del seguimiento cromatográfico, se obtuvo un total de 14 reuniones las cuales presentaron coloraciones entre moradas y guindas que, de acuerdo con la revisión bibliográfica se pudieran deber a la posible presencia de compuestos tipo terpeno que han sido anteriormente descritos en esta planta. La identificación de los compuestos aisaldos se realizará por técnicas espectroscópicas y espectrométricas.

Asesor: Dr. Esperanza Milagros Garcia Oropesa, Universidad Autónoma de Tamaulipas

ESTANDARIZACIóN DE UNA TéCNICA DE EXTRACCIóN DE ARN MICOBACTERIANO A PARTIR DE MUESTRAS CLíNICAS DE PACIENTES CON TUBERCULOSIS PULMONAR ACTIVA.

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ESTANDARIZACIóN DE UNA TéCNICA DE EXTRACCIóN DE ARN MICOBACTERIANO A PARTIR DE MUESTRAS CLíNICAS DE PACIENTES CON TUBERCULOSIS PULMONAR ACTIVA.

Cerna Mansilla Eduardo Azahel, Universidad Autónoma de Tamaulipas. Asesor: Dr. Esperanza Milagros Garcia Oropesa, Universidad Autónoma de Tamaulipas

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En la actualidad la TB es una de las 10 principales causas de mortalidad en el mundo por enfermedades infecciosas, actualmente se busca comprender a la bacteria causante de la TB debido a su alta virulencia para tratar de controlar esta enfermedad, gracias a diversos tipos de estudios que tienen la finalidad de comprender los diferentes tipos de mecanismos de transmisión de la micobacteria es como se busca tratar de parar la enfermedad de la tuberculosis. Los factores sigma juegan un rol importante en la virulencia del organismo y esto aunado a la transmisión de cepas resistentes a los medicamentos, en este estudio se realizo la extracción de ácidos nucleicos de la micobacteria con el fin de  llevar a cabo su análisis y comprender los mecanismos de transcripción de Mycobacterium tuberculosis. Para lo anterior es necesario optimizar la técnica de extraccion de Trizol de Chomczynski y Sacchi realizándole modificaciones para la obtención de esta biomolecula (ARN) en muestras cinicas de pacientes con tuberculosis pulmonar (esputo) para lograr el análisis de la expresión de genes de Mycobacterium Tuberculosis.

METODOLOGÍA

Se realizo la extracción de ARN mediante 2 técnicas a muestras clínicas de pacientes con tuberculosis pulmonar activa, QIAamp Viral RNA Mini Kit y Chomczynski, se comprobó la calidad y concentración del ARN mediante el Nanodrop 2000 midiendo su absorbancia a una longitud de onda de 260/280 nanómetros, se selecciono la técnica de Chomczynski debido a sus resultados y se le realizaron diversas modificaciones, se compararon los resultados obtenidos de las 3 diferentes técnicas empleadas para la realización de la extracción de ARN.

CONCLUSIONES

Resultados: Se encontraron diferencias estadísticamente significativas en las concentraciones obtenidas de ARN entre la técnica de Trizol de Chomczynski y Sacchi y las diferentes modificaciones realizadas. Mediante la tecnica de Chomczynski se encontro una media en la concentración de 75.9 ng/μl y una media de la calidad de 1.36, en la tecnica descrita por el kit QIAamp Viral RNA mini kit se encontro una media en la concentración de 87.6 ng/μl y una media de la calidad de 1.83 y en la tecnica de Chomczynski realizandole diversas modificaciones se enocntro una media en la concentración de 929.1 ng/μl y una media de la calidad de 1.94 mostrando una concentración y una calidad superior en comparacion a las tecnicas antes mencionadas. Conclusión: Gracias a los resultados obtenidos, se puede concluir que la técnica de extracción técnica de Trizol de Chomczynski y Sacchi, con algunas modificaciones, como el tiempo y temperatura de incubación, así como la incorporación de ADNasas permite una mejor obtención de ARN a partir de muestras clínicas de pacientes con tuberculosis pulmonar activa.

Asesor: Dr. Gloria Gutierrez Venegas, Universidad Nacional Autónoma de México

ESTUDIOS IN VITRO DE LUTEOLINA EN LA LíNEA CELULAR PROVENIENTE DEL CARCINOMA HIPOFARíNGEO (FADU).

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ESTUDIOS IN VITRO DE LUTEOLINA EN LA LíNEA CELULAR PROVENIENTE DEL CARCINOMA HIPOFARíNGEO (FADU).

Cervantes Barreto Andrea Monserratt, Universidad de Colima. Asesor: Dr. Gloria Gutierrez Venegas, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El cáncer de cabeza y cuello en su mayoría tiene su inicio en las membranas mucosas húmedas-en la epidermis [1]- que recubren el interior de la boca, la nariz y la garganta. Dichas membranas están formadas por células escamosas, así que al cáncer desarrollado en estas células se le conoce como carcinoma de células escamosas [2]. Es el segundo cáncer de piel más común. Se presenta en áreas mayormente expuestas al sol, como el borde de la oreja, cara y cuello [1]. El cáncer hipofaríngeo se presenta en el tejido denominado con el mismo nombre, que puede generarse principalmente por el consumo de tabaco y alcohol, cuyos síntomas incluyen dolor de garganta y oído, dificultad para tragar y un cambio en la voz, entre otros. Respecto a este tipo de cáncer, en 2018 se reportaron 80, 608 casos en ambos sexos, mientras que fallecieron 34,984 personas [3], cuya posición es vigésima quinta tanto en incidencia como en mortalidad a nivel mundial en ambos sexos y todas las edades [3]. Latinoamérica y el Caribe representan el cuarto lugar respecto a incidencia y mortalidad por región en el mundo, con un 3.4% en ambos eventos [3]. México en la escala ASR por cada 100,000 habitantes se encuentra en 0.23-0.44 respecto a los hombres, mientras que, en mujeres es de 0.04-0.10 [3]. Se ha observado que en los hombres es aún mayor la incidencia de esta enfermedad, incluso más que el doble en las mujeres [4] y aún más en personas mayores a 50 años. En México, el cáncer hipofaríngeo ocupa el trigésimo tercero lugar respecto a la incidencia, mientras que, de mortalidad, la posición trigésimo-segunda [5]. La línea celular FaDu (ATCC® HTB-43) es proveniente del tejido de la faringe con morfología epitelial con propiedades adherentes de un hombre caucásico de 56 años, con la enfermedad de carcinoma de células escamosas [6]. La luteolina es una flavona que se encuentra tanto en plantas medicinales como verduras y especias, tales como tomillo, perejil, salvia, zanahorias silvestres, alcachofas, cáscara de cacahuate, apio, espinaca, algunas variedades de pimientos y lechuga, principalmente [7]. Ha sido reportado que la luteolina inhibe la fosforilación y actividad de AKT, así como la inhibición de la unión del ADN y su transcripción al unirse al NFκB [7]. La inflamación está implicada en todas las fases del cáncer, desde el inicio hasta la progresión del deterioro. La mayoría de los estudios han reportado que la luteolina tiene efectos inhibitorios en varios tipos de cáncer [8, 9, 10, 11, 12]. En este estudio se busca evaluar el efecto que tiene la luteolina sobre la línea celular FaDu de forma in vitro.

METODOLOGÍA

Cultivo celular. Las células FaDu se mantienen en el medio líquido Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) y suplementado con 10 % de suero bovino fetal en un ambiente con 5 % de CO2 incubadas a 37°C. Se cambia el medio cada tercer día hasta que las células crecen a una densidad apropiada para cada ensayo. Para el ensayo de Western Blot se cultivaron en cajas de 6 pozos. Western Blot. Células FaDu son cultivadas en una caja con 6 pozos hasta obtener un cultivo confluente. Se realizó el tratamiento con luteolina 50 µM con el ensayo curso temporal por 2 horas. Después las células son raspadas y lisadas en 30 µL de buffer de lisis. Luego 30 µg de proteína es separada usando electroforesis de geles de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE). Las proteínas se transfieren a una membrana de difluoruro de polivinildieno (PVDF) usando el sistema de Bio-Rad. Las membranas son bloqueadas con una solución de leche (0.05 g/ ml) por 1 hora. Luego son expuestas a diferentes anticuerpos primarios correspondientes a la proteína a analizar por 24 horas. Las membranas son incubadas con anticuerpos secundarios unidos a la peroxidasa de rábano, por 2 horas. Las bandas reactivas son detectadas usando un sistema de quimioluminiscencia y placas fotográficas. Resultados semicuantitativos son obtenidos a partir de la densidad de las bandas.

CONCLUSIONES

La luteolina en un ensayo curso-temporal generó un efecto modulador en algunas cinasas como AKT y PKC. Ya que se observó en el ensayo de Western Blot que la luteolina es capaz de disminuir la fosforilación de las enzimas, cuyas vías están implicadas en el metabolismo, proliferación, crecimiento y angiogénesis celular al responder a señales extracelulares. AKT es una cinasa con específica de treonina/serina que al ser activada fosforila otras proteínas con distintas funciones como crecimiento, adhesión y muerte celular. En la vía PI3K/AKT, el grupo fosfato de 3 posiciones de PIP3 puede unirse tanto a la proteína PDK1 como a la proteína AKT y reclutar a ésta en la membrana plasmática, permitiendo que PDK1 acceda y fosforile a T308 en el "bucle de activación", lo que conduce a PKB/Akt una activación parcial. Cuando se bloquean estas vías, al colocarle el anticuerpo p-AKT T308, la proteína no está siendo fosforilada en ese residuo de aminoácido, lo que conduce que distintas proteínas no se fosforilen ni se transloquen al DNA, como CREB, de esta forma, el ciclo normal de la célula se ve afectado y puede conducir a la apoptosis. Se trató con otro anticuerpo primario, el cual fue p-PKC; se puede observar la disminución de los tiempos 60, 90 y 120, lo cual corresponde a que sí se disminuye la expresión de la proteína PKC; así que, puede disminuir la formación de células cancerígenas y promover la apoptosis. Se observó que en un ensayo de curso-temporal conforme aumenta el tiempo de exposición a la luteolina 50 µM disminuye la fosforilación de las proteínas AKT y PKC respecto al basal. Conclusiones. Se logró realizar un cultivo de células FaDu, así como su tratamiento con el flavonoide luteolina. Además, se logró determinar que la luteolina 50 µM puede modular la fosforilación de la cinasa AKT involucrada en la vía PI3K/AKT, así como la enzima PKC en la línea celular FaDu de forma in vitro a través del ensayo de Western Blot por triplicado. Impidiendo así, que la vía progrese normalmente, ya que disminuye las formas fosforiladas de esta proteína. De esta manera, se ven alteradas la proliferación de las células FaDu.

Asesor: Dr. Carlos Alberto Gómez Aldapa, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo

MICROENCAPSULACIóN DE LACTOBACILLUS PENTOSUS POR EL MéTODO DE GELIFICACIóN IóNICA Y SU EVALUACIóN IN VITRO

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MICROENCAPSULACIóN DE LACTOBACILLUS PENTOSUS POR EL MéTODO DE GELIFICACIóN IóNICA Y SU EVALUACIóN IN VITRO

Bustamante Tello Abraham Ricardo, Instituto Tecnológico de Tepic. Cervantes Ceceña Gabriela, Instituto Tecnológico de Tepic. Asesor: Dr. Carlos Alberto Gómez Aldapa, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

 Los consumidores buscan alimentos que aporten un beneficio a su salud con alimentos enriquesidos con probióticos. Los alimentos con estos microorganismos presentan diversos problemas debido a las diferentes condiciones adversas, por lo que no alcanzan la concentración benefica (1X107 UFC/mL), por lo que el problema es la falta de una proteccion al microorganismo durante su almacenamiento que le permita mantener la concentracion benefica.

METODOLOGÍA

  Activación y paquete celular. Para la obtención del paquete celular se activó la bacteria L.Pentosus para ello se agregó 200 µm de la bacteria en 40 ml de caldo RMS y se incubo a 37°C por 24 h, posteriormente se centrifugo a 3500 rpm durante 20 minutos, se decantó y se le agrego 40 ml de NaCl al 0.85%, se homogeneizo en un vortex y se centrifugo a 3500 rpm por 20 minutos, se decantó y se agregó 10 ml de agua estéril y se homogeneizo. Gelificación iónica. Se ajustó 1 L de agua des ionizada a pH 4 con HCl 0.1 N. Posteriormente se usó dicha agua para preparar las siguientes soluciones: 4 g de Cl2Ca en 200 ml de agua 3 g de Alginato en 90 ml de agua Después de su preparación cada solución fue ajustada a un pH de 4 con HCl 0.1N. Enseguida a la solución de alginato se le agregó 1.65 g de aceite comestible y se homogeneizo a 14,000 rpm durante 3 minutos y se agregó el paquete celular, homogeneizo a 3000 rpm durante 5 segundos. Enseguida la solución de alginato con el paquete celular ya homogeneizado se calentó hasta llegar a 50°C y se tomó 1 ml y se agregó a un tubo de ensayo con 9 ml de peptona estéril y se etiqueto como: A.GI, -1. La muestra con Cl2Ca se colocó en un recipiente que estuviera en constante agitación y la del alginato se hizo pasar por un equipo de gelificación iónica por extrucción, al terminar el proceso se dejó la muestra en agitación por 30 minutos. Luego de terminar el periodo de tiempo se quitaron residuos y se pasó por un tamiz del #270 y se enjuago con agua a pH 4. Finalmente se pesó una caja Petri vacía, para posteriormente pasar las capsulas obtenidas a la caja Petri previamente pesada y se volvió a pesar ya con el producto, y así se obtuvo una cierta cantidad   de micro cápsulas. Se tomó 1 g de microcápsulas obtenidas y se agregaron a un tubo de ensayo con 9 ml de citrato estéril y se etiqueto como: D.GI, -1 A sí mismo en un tubo de ensayo pequeño se agregó a la mitad agua des ionizada a pH 4 y se colocó un poco de las microcápsulas quedantes en el tamiz. Y se observaron en el microscopio óptico. Con los tubos A.GI y D.GI se hicieron diluciones utilizando 9 ml de peptona estéril, quedando: A.GI (-1), -2…..-7 D.GI (-1), -2…..-7 Y posteriormente de las diluciones de -5, -6, -7 de ambas series se tomaron 100 µm y se colocaron en cajas Petri estériles por triplicado y se les coloco agar bacteriológico el cual consistía en una mezcla de 20 g de caldo MRS y 8 g de agar bacteriológico en 400 ml de agua adicionado con 4 ml de un antibiótico llamado rifampicina, se homogeneizo y se dejó solidificar y se incubaron a 37°Cpor 48 hrs. Finalmente, del tiempo transcurrido se hizo el conteo de las cajas y obtener las UFC/ ml. Incorporación de las microcápsulas a un alimento. Se colocó 30 ml de la solución ya preparada para las paletas con 4 gr de las microcápsulas, se elaboraron 4 paletas, dos de ellas después de su congelación se deshicieron en baño maría y se hicieron diluciones hasta -6 y se sembraron con el mismo agar MRS y se incubaron por 48 h. Medición del potencial z. La medición del potencial z de la microcápsula se llevó a cabo colocando una pequeña muestra de microcápsulas en agua ,se colocó una pequeña parte en la celda de cuarzo del equipo Zetasizer, una vez la celda estuvo colocada en su sitio se cerró y se procedió al comienzo de la medición. Medición del tamaño de partícula. Se colocaron  250ml de agua  para después vaciar y rellenar para  colocar la muestra de gota en gota hasta obtener un 8% de concentración  y proceder a la medición del tamaño de la partícula. Evaluación de sobrevivencia en pH y sales biliares. Se colocó 1g de microcápsulas por tubo, en 2 con  9ml de sales biliares,2 con 9ml de   caldo MRS,2 con 9ml de caldo a un pH de 2y 2 con 9ml de caldo a un pH de  6.5 para incubarlos durante 3 horas para pH y 24 horas para sales igual para su control. Se realizaron diluciones después de romper la microcápsula y se colocaron 100 microlitros de cada dilución (-5,-6 y -7) por separado en una caja petri, se realizó por triplicado para después agregar el agar e incubar durante 48 horas para después realizar el conteo de colonias. Se repitió el mismo procedimiento, pero ahora mezclando 4 g de alginato con 90 ml de agua desionizada a pH 4 estéril.

CONCLUSIONES

Durante la estadía de verano se logró adquirir los conocimientos para la elaboración de microcápsulas que contuvieran la bacteria L. Pentosus con la finalidad que esta microcápsula protegiera a la bacteria de diferentes factores que puedieran afectarla negativamente, así como también el manejo de diferentes equipos como el LS I3 320 Laser Diffraction Size Analyzer y ZETA SIZER. Se espera que la microencapsulación utilizando diferentes porcentajes de alginato y añadiéndolas a una paleta de hielo pueda permitir que la bacteria pueda llegar al tracto digestivo en concentraciones óptimas para que esta funcione de manera positiva a la salud de las personas que las consuman, convirtiéndose en una alternativa para el desarrollo de nuevos productos funcionales y en otros ámbitos de la industria.  

Asesor: Dr. María Luisa Ramos Ibarra, Universidad de Guadalajara

CERDO PELóN MEXICANO COMO MODELO BIOINDICADOR DE GENOTóXICOS

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CERDO PELóN MEXICANO COMO MODELO BIOINDICADOR DE GENOTóXICOS

Cervantes Govea Dhamara, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. María Luisa Ramos Ibarra, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

 Debido al aumento de la población, la industria y la urbanización que ocurre actualmente también se h vitsto un aumento en el efecto toxicológico ambiental. Dentro de los múltiples daños de los contaminantes se encuentra el efecto genotóxico, expresado en sus diversas formas; como por ejemplo: teratogénesis, mutagénesis y por supuesto la cancerogénesis. Existen varias pruebas para identificar los agentes genotóxicos y la prueba de micronúcleos es la más sencilla y económica. Los micronúcleos son fragmentos de cromosomas o cromosomas completos, que espontáneamente o por causa de agentes genotóxicos, quedan fuera del núcleo durante la división celular. La prueba de micronúcleos (MN) detecta el efecto de agentes mutagénicos sobre los cromosomas mediante la identificación de fragmentos acéntricos y/o cromosomas rezagados que al quedar fuera del núcleo forman tales estructuras. La técnica permite detectar tanto agentes clastogénicos (que rompen cromosomas) como aneuploidogénicos (que afectan el huso mitótico) (Schmid, 1975). Según un estudio de Yamamoto y Kikuchi, 1980; Zúñiga y Col.,1996., el cerdo comun así como la raza de cerdo vietnamita contienen una gran cantidad de eritrocitos micronucleados (EMN) en sangre periférica, siendo esto una característica ideal para los bioindicadores de  sustancias genotóxicas micronucleogénicas. 

METODOLOGÍA

Se analizaron mediante microscopia de fluorescencia (100x), las muestras de sangre periférica de cerdo pelón mexicano que fueron previamente fijadas en alcohol al 90% y teñidas en naranja de acridina. Se realizó el conteo de eritrocitos micronucleados (EMN) en 10,000 eritrocitos; los eritrocitos policromáticos (EPC) en 1,000 eritrocitos y los eritrocitos policromáticos micronucleados (EPCMN) en 1,000 eritrocitos.

CONCLUSIONES

Los resultados obtenidos en la presente investigación nos indican que esta especie tiene el potencial de ser un bioindicador de genotoxicidad mediante la prueba de micronúcleos. 

Asesor: Dr. David Alejandro López de la Mora, Universidad Lamar

SíNTESIS Y EVALUACIóN DE LA EFECTIVIDAD DE NANOPARTíCULAS DE PLATA COMO AGENTE DESINFECTANTE DE FRUTAS Y VERDURAS SIN MODIFICAR SUS PROPIEDADES ORGANOLéPTICAS.

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SíNTESIS Y EVALUACIóN DE LA EFECTIVIDAD DE NANOPARTíCULAS DE PLATA COMO AGENTE DESINFECTANTE DE FRUTAS Y VERDURAS SIN MODIFICAR SUS PROPIEDADES ORGANOLéPTICAS.

Chable Guerrero Sarahi Guadalupe, Universidad Autónoma de Nayarit. Guzman Aceves Ramiro, Universidad de Guadalajara. Lugo Apodaca Sandra Guadalupe, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. David Alejandro López de la Mora, Universidad Lamar

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En la actualidad el uso de productos desinfectantes basados principalmente en plata ionizada para el lavado de frutas y verduras, es cada vez más frecuente, esto debido a la propiedad antimicrobiana que posee la plata ionizada.  Sin embargo, hasta el día de hoy, no hay estudios que comprueben la efectividad de dichos productos, de igual manera, si la forma de uso establecida del producto es la adecuada para llevar a cabo su función desinfectante. Además, no se tiene información de lo dañino que este producto pudiese llegar a ser como consecuencia de la formación de agregados de plata en el tejido vegetal, lo cual puede llegar a ser nocivo para el consumidor. Se plantea a las nanopartículas de plata diluidas en solución como una alternativa de los desinfectantes comerciales basados en plata ionizada, evitando modificar las propiedades organolépticas de las frutas y verduras y la acumulación de los iones de plata en el tejido vegetal.

METODOLOGÍA

Se realizó la síntesis de nanoparticulas de plata por el método de turkevish modificado y un microondas para controlar los ciclos de radiación y descanso. Asimismo, fueron caracterizadas para determinar su forma y tamaño hasta el momento, mediante técnicas de espectroscopia ultavioleta visible y dispersión dinámica de la luz.  Se puso a prueba su eficacia contra bacterias comúnmente encontradas en frutas y verduras  a través de antibiogramas realizados mediante la difusión de la solución depositada en pocillos aforados a 100 µL en placas de agar Mueller Hinton (BD Bioxon) y se compararon los halos de inhibición  obtenidos con respecto a los obtenidos con el producto comercial a base de plata ionizada y los antibióticos estándar. Por último, se utilizó la solución de nanopartículas de plata en el lavado de frutas y verduras para la desinfección de las mismas. Posteriormente dichas frutas y verduras fueron sometidas a pruebas bromatológicas  para determinar modificaciones en las propiedades organolépticas; y pruebas para la identificación de plata en el tejido vegetal mediante la reacción producida con cromato de potasio.

CONCLUSIONES

Se logró sintetizar nanopartículas de plata que al ser caracterizadas fueron utilizadas como solución desinfectante de frutas y verduras sin alterar las propiedades organolépticas de las mismas. Al caracterizar las partículas sintetizadas se determinó que eran nanopartículas de plata, presuntamente esféricas y de un tamaño aproximado de 15-30 nm. Se comprobó el efecto bactericida de las nanopartículas contra bacterias obtenidas de muestras clínicas: P. aeroginosa, E.coli, S. aureus. En los antibiogramas realizados, se obtuvieron halos de inhibición de 1.6 cm, 1.4 cm y 1.1 cm de diámetro para cada bacteria respectivamente, en diluciones 1:2 comparables con los halos obtenidos de ciertos antibióticos estándar, siendo la dilución 1:8 la concentración mínima inhibitoria. El producto comercial a base de plata ionizada no resultó efectivo en el 40% de las pruebas antimicrobianas realizadas.  Las propiedades organolépticas y pH de las frutas y las verduras tratadas con  solución de nanopartículas de plata no sufrieron ninguna modificación; con las pruebas sensoriales se comprobó que el olor, color, textura y sabor se conservaron. Por su parte, el producto comercial a base de plata ionizada conservó la mayoría de las propiedades organolépticas así como el pH de las frutas y verduras tratadas, sin embargo, el sabor fue modificado, aún después de ser enjuagadas. Se espera comprobar la ausencia o presencia insignificante de remanentes de plata en el tejido vegetal una vez enjuagadas las muestras tratadas

Asesor: Dr. David Alejandro López de la Mora, Universidad Lamar

TOXICIDAD DE NANOPARTíCULAS DE PLATA GENERADA POR ADMINISTRACIóN ORAL EN CONCENTRACIONES INHIBITORIAS DE MICROORGANISMOS EN UN MODELO EXPERIMENTAL MURINO

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TOXICIDAD DE NANOPARTíCULAS DE PLATA GENERADA POR ADMINISTRACIóN ORAL EN CONCENTRACIONES INHIBITORIAS DE MICROORGANISMOS EN UN MODELO EXPERIMENTAL MURINO

Chaides Cervantes Laisa Paola, Universidad Autónoma de Sinaloa. Chávez Duarte Helena Areli, Universidad Estatal de Sonora. Asesor: Dr. David Alejandro López de la Mora, Universidad Lamar

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Durante las últimas décadas, la investigación en nanotecnología se ha centrado en la fabricación de estructuras atómicas que van desde 1 nm a 100, a las cuales se les nombra nanomateriales. Se estima que de todos los nanomateriales utilizados en productos para el consumo, las nanopartículas de plata (AgNP’s) son las que tienen un mayor grado de comercialización, siendo utilizadas en electrónica, ropa, pinturas, cosméticos, bactericidas, biofungicidas, aplicaciones biomédicas, en la industria farmaceútica y alimentaria. Las AgNP’s son pequeñas partículas de las que puede variar forma y tamaño, que liberan continuamente iones de plata. Estas pueden comportarse de manera diferente a las partículas más grandes de la misma materia debido a su relación de área superficial/volumen. Distintos estudios han demostrado que la toxicidad de las AgNPs depende del tamaño e influye en la distribución y penetración tisular, dermal e intestinal así como en la captación celular, donde  mayores efectos tóxicos han sido observados con las AgNPs más pequeñas (10 nm) y de forma de triángulo truncado. Sin embargo, su principal propiedad antimicrobiana las hace muy interesantes para eliminar microorganismos patogenos resistentes a antibióticos, debido a la baja probabilidad del desarrollo de resistencia por parte de éstos hacia las nanopartículas de Plata. Por lo que el objetivo es encontrar una concentración que sea efectiva inhibiendo patógenos pero a su vez sea lo menos posible tóxica para el ser humano, para ello se emplearán nanopartículas buscando la mínima polidsipersión con tamaños mayoritarios de entre 20-30 nm y de forma circular por ser consideradas las menos tóxicas.  

METODOLOGÍA

Se sintetizarán AgNPs por medio del método Turkevish modificado, con radiación del microondas, citrato de sodio, nitrato de plata y etanol, una vez obtenidas las AgNP’s se realizará la caracterización de su tamaño, forma y solubilidad a partir de las técnicas analíticas de microscopía electrónica de barrido (SEM), luz ultravioleta visible (Uv vis) y tecnica de Dispersión de Luz Dinámica (DLS). Posteriormente se sembrarán bacterias de muestras clínicas en diferentes placas por estria masiva esta cada placa se harán pocillos y se colocarán 100 microlitros (μL) de AgNPs con diferentes concentraciones, 1:2, 1:4,  y 1:6, así como solución matriz y solución salina como blanco y se realizará un antibiograma con diferentes antibióticos para las mismas bacterias, después de un día se compararán los halos de inhibición entre las placas con AgNP’s y las placas con antibióticos. De acuerdo a los resultados obtenidos se seleccionarán dosis efectivas inhibitorias de AgNP’s a concentraciones media y alta, estas serán administradas diariamente con una cánula a ratones clasificados en diferentes grupos de acuerdo a la dosis de nanopartículas de plata: media (Grupo M) y alta (Grupo A), utilizando también un control (Grupo C) al que se le suministrará agua en lugar de las nanopartículas. La especie a utilizar será BALB/C white type, de los cuales, durante la primer semana se sacrificarán 5 ratones de el grupo M y A; y en la segunda semana los 5 restantes de todos los grupos, con la finalidad de evaluar la acumulación de nanopartículas en hígado, riñón, cerebro, bazo. Cada órgano será segmentado en 2 porciones. El primer segmento se colocará en formol y será  evaluado por el patólogo, en la segunda parte se realizará un análisis elemental para observar la posible presencia de plata con una tinción empleando cromato de potasio. A los ratones que serán sacrificados al llegar al periodo de una semana se les estimará el tercer y el séptimo día si existe la presencia de micronúcleos en sus eritrocitos tomando una muestra de sangre  y tiñéndola con naranja de acridina, al igual que a los ratones que serán sacrificados en el periodo de 2 semanas se les harán frotis al tercer,séptimo, décimo y catorceavo día con el mismo fin. También se recolectarán muestras de heces individuales, el primer día antes de la administración (muestra nasal) , y al séptimo día y catorceavo día con la ingesta de AgNP’s en curso, esto para poder analizar que tanto se altera la microbiota con las AgNP’s por medio de una secuenciación masiva.  

CONCLUSIONES

Los resultados nos indicarán en qué órganos hay acumulación de AgNP’s, si hay un daño en los órganos por esta acumulación, si su ingesta afecta de forma considerable la microbiota intestinal, si su consumo puede generar un efecto genotóxico en los eritrocitos y si se puede tener una dosis con buena actividad antimicrobiana pero con una concentración que no sea tan tóxica para el organismo.  

Asesor: Dr. Moises Méndez Toribio, Instituto de Ecología (CONACYT)

IMPACTO DE INCENDIOS FORESTALES EN EL BOSQUE DE PINO-ENCINO DEL PARQUE NACIONAL BARRANCA DEL CUPATITZIO, EN URUAPAN MICHOACáN, MéXICO.

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IMPACTO DE INCENDIOS FORESTALES EN EL BOSQUE DE PINO-ENCINO DEL PARQUE NACIONAL BARRANCA DEL CUPATITZIO, EN URUAPAN MICHOACáN, MéXICO.

Chavarría Valverde María Yarenis, Universidad Estatal a Distancia (Costa Rica). Asesor: Dr. Moises Méndez Toribio, Instituto de Ecología (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Desde el punto de vista del manejo forestal, se conoce como incendio forestal a la propagación libre y no programada del fuego sobre la vegetación silvestre; mientras que, en ecología, los incendios son un disturbio; es decir, una pérdida de individuos o biomasa, que se produce de forma repentina y eventual. Los incendios forestales pueden ocurrir de forma natural, accidental o intencional; no obstante, la ocurrencia de incendios de origen humano supera a los naturales Los incendios forestales, forman parte de la dinámica de los ecosistemas y como herramienta ecológica de manejo. Suelen ser originados por causas naturales o antropogénicas y son considerados como uno de los factores de perturbación ecológica y de transformación del paisaje de los ecosistemas terrestres tanto de México, como del mundo. Estos agentes de disturbio influyen en la composición, estructura, diversidad, funcionamiento y dinámica de los ecosistemas forestales en donde constituyen un cambio temporal, o recambio de especies provocado por el fuego. Los efectos de los incendios son muy variados debido a múltiples factores: biomasa disponible, intensidad (temperaturas alcanzadas y duración), área quemada, tiempo desde el último incendio, tipo de suelo, humedad, pendiente y tipo de vegetación. Así, en cada ecosistema se conforma un régimen de incendio concreto. Sin embargo, en una misma comunidad vegetal e incluso en un mismo incendio, la severidad y los efectos del fuego son diferentes y resultan en un mosaico de manchas de vegetación y suelo, que se recuperará con o sin rehabilitación y restauración posterior. El grado de impacto del fuego sobre la vegetación y los suelos es esencial ya que influye directamente sobre la evolución de todo el ecosistema. A escala regional el efecto de los incendios es heterogéneo. Dentro de una misma zona, los efectos serán variados y contrastados según las condiciones bióticas, abióticas, y el tipo de uso del suelo. Por eso es necesario conocer la severidad, la cual mide el grado de afectación de la perturbación en los organismos o en las propiedades del sistema, por ejemplo, el porcentaje de árboles muertos por el fuego. La importancia de conocer la severidad de un incendio forestal en un área determinada sirve para definir las tareas de restauración futura. En efecto, la regeneración natural después de ocurrido el fuego a menudo está relacionado con la severidad del incendio (Corporación Nacional Forestal (CONAF), 2017). En el caso de los bosques de pino-encino, la severidad de las perturbaciones afectan el nivel de resiliencia de estos bosques, mermando la capacidad del ecosistema de retomar su condición inicial (Mora y Alanís, 2016). Sin embargo, los bosques de pino-encino resultan ser unidades de vegetación eficientes y capaces de regenerar ante diferentes perturbaciones antropogénicas o naturales, caracterizándose por tener un alto grado de rebrote de las especies del género Quercus y de la resistencia de Pinus después de un incendio forestal (Alanís, Jiménez, Valdecantos, González, Aguirre, Treviño, 2012). Durante el verano de investigación se evaluó el impacto del incendio forestal sobre la cobertura de copa, la diversidad, su estructura y la composición florística. El estudio es una comparación de los atributos de la vegetación antes y después de un incendio forestal provocado en el Parque Nacional Barranca del Cupatitzio.

METODOLOGÍA

Durante el verano y otoño del 2018 se etiquetaron, registraron e identificaron todos los individuos leñosos que presentaban un Diámetro de Altura al Pecho (DAP, altura de 1,3 m) ≥2,5 cm. Con el propósito de conocer la severidad que tuvo el incendio forestal en el parque, en el 2019 y en el presente trabajo se tomaron dichas parcelas quemadas e individuos etiquetados. A cada uno de los individuos previamente registrados al interior de las parcelas se les midió la altura de fuego en los troncos y tallos con cinta diamétrica o con un Telémetro láser Forestry Pro 550, la cobertura de copa viva (diámetro mayor y diámetro mayor transversal). Además, se registró si presentaban rebrotes o no (si se encuentran vivos-con rebrotes, o muertos-sin rebrotes). Se colectaron muestras (tallos, hojas, bellotas) de especímenes que faltaban por identificar, los cuales se llevaron a prensar en paquetes de papel periódico y cartón. Las muestras fueron secadas a 60°C en una secadora convencional de resistencias, para posteriormente ser identificadas y/o comparadas con especímenes depositados en el Herbario del Centro Regional del Bajío del Instituto de Ecología, A.C.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró determinar el promedio de altura del fuego (m) y la cobertura viva de las copas (m2) de los individuos en dos tiempos distintos. Los individuos muestran una altura promedio del fuego de 2,77m (± 0,81). La altura del fuego varió entre los 1,79 m hasta 3,85 m en un rango de 2,06 m. Los árboles y arbustos presentaron una pérdida de cobertura notable. El cambio en porcentaje de la cobertura promedio es 96,48 (±1,01). La cobertura viva post-fuego de los individuos registrados en las parcelas esta entre un promedio de 0,81m2 y 4,25m2 mientras que la cobertura viva en el 2018 fue de entre 20,14 m2 y 42,90 m2. Por lo que se concluye que en general, las parcelas tuvieron una severidad alta. Sin embargo, también se notó que muchas especies leñosas, entre estas los Pinus y Encinos mostraban rebrotes, por lo que se podría deducir que el fuego puede ser un estimulante para el rebrote de la parte vegetativa de los árboles, permitiendo la regeneración del bosque, ya que no presentarían tanta competencia por recursos al tener un ecosistema más abierto. No obstante, se espera analizar datos de diversidad de especies y composición florística (recambio de especies). 

Asesor: Dr. Juan Manuel Germán Acacio, Universidad Nacional Autónoma de México

ANáLISIS DEL TIEMPO DE DISOLUCIóN DE UN CO-CRISTAL FáRMACO- FáRMACO PARA EL TRATAMIENTO DE SINDROME METABOLICO Y DIABETES TIPO II

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ANáLISIS DEL TIEMPO DE DISOLUCIóN DE UN CO-CRISTAL FáRMACO- FáRMACO PARA EL TRATAMIENTO DE SINDROME METABOLICO Y DIABETES TIPO II

Chávez Barajas Areli, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Juan Manuel Germán Acacio, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Uno de los problemas persistentes que se han observado en pacientes diabéticos y con síndrome metabólico tratados farmacológicamente de forma monoterapéutica, es que presentan grandes probabilidades de desarrollar fármaco-resistencia y aparición de otros factores de riesgo asociados. En este sentido, la administración simultánea de dos o más ingredientes farmacéuticos activos (IFA) parece ser una estrategia adecuada para su tratamiento. Las compañías farmacéuticas buscan ofrecer medicamentos eficaces ante dicha problemática a los pacientes en regímenes de dosificación razonables. De acuerdo con Shuai Qian (2015). El concepto de un sistema  co-amorfo binario combinando dos fármacos ha demostrado una significativa mejora en la solubilidad, tasa de disolución y estabilidad física en comparación con las formas puras amorfas( Cristal Growth & Design p.2921). Trabajos previos del grupo de laboratorio han diseñado fases sólidas fármaco-fármaco para el tratamiento de síndrome metabólico, diabetes tipo II, sus factores de riesgo y su potencial aplicación terapéutica por lo que durante el verano de investigación se evaluará  el tiempo de disolución de los fármacos que conforman estas fases sólidas para determinar su administración posterior.

METODOLOGÍA

Estandarizar separación por fase reversa en HPLC: Los parámetros para leer las muestras de un fármaco antihiperglucémico y un antihiperlipidemico en estado puro y de ambos formando un coamorfo por HPLC fueron de 65% de acidonitrilo y 35% de acetato de amonio a una presión 75 -77 bar. Generación de las curvas de calibración para cada fármaco en estado puro: Se pesó 10.4mg  de antihiperglucémico  y antihiperlipidemico los cuales por separado se aforaron con medio ácido (acidificado con HCl a un pH de 2.5) para hacer una solución de 10 mL, posteriormente de la primera solución se tomó 1mL para realizar la segunda disolución la cual se aforo a 10 mL, de la segunda disolución se realizó el mismo procedimiento para realizar una tercera disolución aforada a 5mL. Aparte se prepararon 8 viales para cada fármaco con 600mL de medio ácido, al vial 1 se le adicionó 1 mL de la tercera dilución ,se mezcló y del mismo se tomó 1 mL para adicionar al 2 vial, se repitió el mismo procedimiento hasta el 8vo vial, posteriormente se filtraron y se leyeron en HPLC. Se reportaron las áreas obtenidas de cada fármaco en Excel 2018 y se obtuvo la curva de calibración para cada uno. Realizar perfil de disolución para el co-cristal fármaco-fármaco de acuerdo a la FEUM: Se realizó por triplicado (A, B y C), pesando 11.5 mg de la fase sólida colocándolos en 100 mL de medio ácido, comenzando una reacción cinética en la que los primeros 5 minutos se tomó muestra cada minuto, de los 5 a 30 minutos cada 5 minutos, de 30 a 60 minutos cada 10 minutos, a partir de 60 minutos (1h), cada 20 minutos se tomó muestra hasta 120 minutos (2h), a partir de aquí cada media hora hasta 240 minutos (4h). Posteriormente se leyeron por HPLC para obtener las áreas de cada muestra, se registraron en Excel 2018 y se graficaron los resultados. Análisis de resultados Se analizó cuanto fármaco se disolvió por tiempo del coamorfo de acuerdo a las curvas de calibración anteriormente realizadas.

CONCLUSIONES

Debido al corto tiempo realizando el proyecto aún no se determina si los fármacos que conforman el coamorfo con el que se trabajó pueden proporcionar un efecto sinérgico, hasta ahora el antihiperglucémico que conforma la fase sólida no ha demostrado una significativa mejora en la solubilidad del antihiperlipidemico. Sin embargo cabe destacar que se continuará trabajando con el estos sistemas para comprobar su tasa de disolución. En el periodo de la estancia se aprendió a trabajar el HPLC, realizar perfiles de disolución de acuerdo a la FEUM y analizarlos por HPLC. REFERENCIAS Shuai,Qian.,Weili,Heng., Yuanfeng,Wei., Jianjun,Zhang., y Yuan,Gao. (2015).Coamorphous Lurasidone Hydrochloride-Saccharin with Charge-Assisted Hydrogen Bonding Interaction Shows Improved Physical Stability and Enhanced Dissolution with pH-Independent Solubility Behavior.Cristal Growth & Design, 15(6) 2920-2928.

Asesor: Dr. David Alejandro López de la Mora, Universidad Lamar

TOXICIDAD DE NANOPARTíCULAS DE PLATA GENERADA POR ADMINISTRACIóN ORAL EN CONCENTRACIONES INHIBITORIAS DE MICROORGANISMOS EN UN MODELO EXPERIMENTAL MURINO

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TOXICIDAD DE NANOPARTíCULAS DE PLATA GENERADA POR ADMINISTRACIóN ORAL EN CONCENTRACIONES INHIBITORIAS DE MICROORGANISMOS EN UN MODELO EXPERIMENTAL MURINO

Chaides Cervantes Laisa Paola, Universidad Autónoma de Sinaloa. Chávez Duarte Helena Areli, Universidad Estatal de Sonora. Asesor: Dr. David Alejandro López de la Mora, Universidad Lamar

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Durante las últimas décadas, la investigación en nanotecnología se ha centrado en la fabricación de estructuras atómicas que van desde 1 nm a 100, a las cuales se les nombra nanomateriales. Se estima que de todos los nanomateriales utilizados en productos para el consumo, las nanopartículas de plata (AgNP’s) son las que tienen un mayor grado de comercialización, siendo utilizadas en electrónica, ropa, pinturas, cosméticos, bactericidas, biofungicidas, aplicaciones biomédicas, en la industria farmaceútica y alimentaria. Las AgNP’s son pequeñas partículas de las que puede variar forma y tamaño, que liberan continuamente iones de plata. Estas pueden comportarse de manera diferente a las partículas más grandes de la misma materia debido a su relación de área superficial/volumen. Distintos estudios han demostrado que la toxicidad de las AgNPs depende del tamaño e influye en la distribución y penetración tisular, dermal e intestinal así como en la captación celular, donde  mayores efectos tóxicos han sido observados con las AgNPs más pequeñas (10 nm) y de forma de triángulo truncado. Sin embargo, su principal propiedad antimicrobiana las hace muy interesantes para eliminar microorganismos patogenos resistentes a antibióticos, debido a la baja probabilidad del desarrollo de resistencia por parte de éstos hacia las nanopartículas de Plata. Por lo que el objetivo es encontrar una concentración que sea efectiva inhibiendo patógenos pero a su vez sea lo menos posible tóxica para el ser humano, para ello se emplearán nanopartículas buscando la mínima polidsipersión con tamaños mayoritarios de entre 20-30 nm y de forma circular por ser consideradas las menos tóxicas.  

METODOLOGÍA

Se sintetizarán AgNPs por medio del método Turkevish modificado, con radiación del microondas, citrato de sodio, nitrato de plata y etanol, una vez obtenidas las AgNP’s se realizará la caracterización de su tamaño, forma y solubilidad a partir de las técnicas analíticas de microscopía electrónica de barrido (SEM), luz ultravioleta visible (Uv vis) y tecnica de Dispersión de Luz Dinámica (DLS). Posteriormente se sembrarán bacterias de muestras clínicas en diferentes placas por estria masiva esta cada placa se harán pocillos y se colocarán 100 microlitros (μL) de AgNPs con diferentes concentraciones, 1:2, 1:4,  y 1:6, así como solución matriz y solución salina como blanco y se realizará un antibiograma con diferentes antibióticos para las mismas bacterias, después de un día se compararán los halos de inhibición entre las placas con AgNP’s y las placas con antibióticos. De acuerdo a los resultados obtenidos se seleccionarán dosis efectivas inhibitorias de AgNP’s a concentraciones media y alta, estas serán administradas diariamente con una cánula a ratones clasificados en diferentes grupos de acuerdo a la dosis de nanopartículas de plata: media (Grupo M) y alta (Grupo A), utilizando también un control (Grupo C) al que se le suministrará agua en lugar de las nanopartículas. La especie a utilizar será BALB/C white type, de los cuales, durante la primer semana se sacrificarán 5 ratones de el grupo M y A; y en la segunda semana los 5 restantes de todos los grupos, con la finalidad de evaluar la acumulación de nanopartículas en hígado, riñón, cerebro, bazo. Cada órgano será segmentado en 2 porciones. El primer segmento se colocará en formol y será  evaluado por el patólogo, en la segunda parte se realizará un análisis elemental para observar la posible presencia de plata con una tinción empleando cromato de potasio. A los ratones que serán sacrificados al llegar al periodo de una semana se les estimará el tercer y el séptimo día si existe la presencia de micronúcleos en sus eritrocitos tomando una muestra de sangre  y tiñéndola con naranja de acridina, al igual que a los ratones que serán sacrificados en el periodo de 2 semanas se les harán frotis al tercer,séptimo, décimo y catorceavo día con el mismo fin. También se recolectarán muestras de heces individuales, el primer día antes de la administración (muestra nasal) , y al séptimo día y catorceavo día con la ingesta de AgNP’s en curso, esto para poder analizar que tanto se altera la microbiota con las AgNP’s por medio de una secuenciación masiva.  

CONCLUSIONES

Los resultados nos indicarán en qué órganos hay acumulación de AgNP’s, si hay un daño en los órganos por esta acumulación, si su ingesta afecta de forma considerable la microbiota intestinal, si su consumo puede generar un efecto genotóxico en los eritrocitos y si se puede tener una dosis con buena actividad antimicrobiana pero con una concentración que no sea tan tóxica para el organismo.  

Asesor: Dr. Rodrigo Erick Escartín Pérez, Universidad Nacional Autónoma de México

EVALUACIóN DE LOS EFECTOS DEL BLOQUEO DE LOS RECEPTORES D4 DOPAMINéRGICOS EN EL NúCLEO PARAVENTRICULAR DEL HIPOTáLAMO SOBRE LA SECUENCIA DE SACIEDAD CONDUCTUAL Y LA MICROESTRUCTURA DE LA CONDUCTA ALIMENTARIA EN RATAS

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EVALUACIóN DE LOS EFECTOS DEL BLOQUEO DE LOS RECEPTORES D4 DOPAMINéRGICOS EN EL NúCLEO PARAVENTRICULAR DEL HIPOTáLAMO SOBRE LA SECUENCIA DE SACIEDAD CONDUCTUAL Y LA MICROESTRUCTURA DE LA CONDUCTA ALIMENTARIA EN RATAS

Chishna Hernandez Geovani, Universidad Autónoma de Chiapas. Asesor: Dr. Rodrigo Erick Escartín Pérez, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En las últimas décadas, se ha descrito que la obesidad está relacionada con la ocurrencia de enfermedades como la diabetes tipo 2, enfermedades cardiovasculares y algunos tipos de cáncer (entre otras), mismas que ponen en serio riesgo la vida de las personas. Se sabe que estos problemas de salud se presentan tanto en países industrializados como en los que están en vías de desarrollo. México ocupa el segundo lugar en obesidad en adultos y el primer lugar en obesidad infantil. A pesar de que la obesidad, el sobrepeso y la diabetes tienen etiología multifactorial (factores sociales, genéticos y ambientales, así como el estilo de vida), una de las explicaciones más plausibles de la aparición de estas enfermedades se asocia a un desequilibrio homeostático entre la cantidad de alimento ingerido y la cantidad de energía utilizada.   Dado lo anterior, para la prevención y tratamiento individual y colectivo de la obesidad, el sobrepeso y la diabetes es preciso entender y actualizar los conocimientos sobre los mecanismos fisiológicos y sistemas neuronales que controlan el apetito y el peso corporal. Entre los sistemas de neurotransmisión necesarios para la regulación del consumo de alimento se encuentra el dopaminérgico, que a través de sus receptores expresados en regiones de regulación homeostática y del circuito de la recompensa, puede estimular (receptores D4) o inhibir (receptores D2 y D3) el consumo de alimento. En consistencia con lo anterior, en el presente estudio se propone la siguiente regunta de investigación: ¿cuáles son los efectos del bloqueo de los receptores a D4 dopaminérgicos en el núcleo paraventricular del hipotálamo (NPH) sobre la secuencia de saciedad conductual y la microestructura de la conducta alimentaria en ratas?

METODOLOGÍA

Sujetos. Ratas macho de la cepa Wistar pesando entre 220 y 240 g al inicio de las sesiones  de habituación. Las ratas fueron mantenidas en cajas habitación individuales con el ciclo de luz/oscuridad de 12 x 12 horas invertido (las luces se apagaban a las 14:00 h) y a una temperatura de 21 ± 2ºC. Los procedimientos empleados en el presente estudio son acordes con las Especificaciones Técnicas para la Producción, Cuidado y uso de los Animales de Laboratorio establecidos en la norma oficial mexicana NOM-062-ZOO-1999.   Dieta y programa de alimentación. Las ratas tuvieron acceso ad libitum al agua y a la dieta sólida (alimento estándar)  mismo que fue diseñado con el objetivo de mantener un nivel basal de ingesta alto sin que se presentara pérdida de peso corporal de las ratas.   Cirugía estereotáxica. Se realizó cuando las ratas alcanzaron peso de 304-329 g y bajo los efectos del anestésico (pentobarbital sódico 25 mg/kg). Los sujetos fueron colocados en el aparato estereotáxico y se les implantó una cánula guía en el área suprayacente al NPH. Las coordenadas estereotáxicas (con relación a bregma) empleadas fueron:   -1.3 antero-posterior; -0.25 mm latero-medial y -6.7 mm dorso-ventral   Fármacos e inyecciones. El fármaco empleado en el presente estudio fue el antagonista de los receptores a dopamina D4, L-745,870 (0,1 ug). La administración del fármaco (o vehículo) se realizó antes del inicio de la fase oscura del ciclo luz/oscuridad a una velocidad de 0.1 μl por minuto y en volumen de 0.5 μl en el núcleo paraventricular hipotalámico.   Registros conductuales. Posterior a las inyecciones intrahipotalámicas, se realizó un registro de duración de 60 minutos con acceso al alimento estándar  ad libitum (inicio de la fase oscura del ciclo de luz/oscuridad). La grabación de los registros se llevó a cabo mediante una cámara de video, la grabación se realizó en un cuarto oscuro adecuado para tal efecto. La videograbación será analizada posterior al análisis histológico, siendo las ratas correctamente canuladas e inyectadas las utilizadas para la determinación de las categorías conductuales de la secuencia de saciedad conductual. Durante el periodo de registro se determinará la ingesta de alimento estándar (gramos). Las ratas tendrán acceso al agua todo el tiempo. El presente proyecto se encuentra actualmente en la fase de análisis conductual de los registros conductuales.   Histología. Posterior a los registros conductuales, las ratas serán sacrificadas por una sobredosis de pentobarbital sódico e inmediatamente decapitadas para extraer el cerebro, mismo que será colocado en una solución de formaldehído al 10% para fijar el tejido. Una vez fijado el tejido (24 horas después) se realizarán cortes coronales de 300 μm para verificar el sitio de inyección del fármaco.

CONCLUSIONES

  Una vez concluido el análisis de los registros conductuales, se espera que el bloqueo de los RD4 en el núcleo paraventricular del hipotálamo producirá un efecto hipofágico, favoreciendo la progresión de la secuencia de saciedad conductual y produciendo cambios en la microestructura alimentaria (disminuyendo el tiempo total de ingesta de alimento).

Asesor: Dr. Jorge Gaona Bernal, Universidad de Guadalajara

TéCNICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGíA

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TéCNICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGíA

Cibrián Tovar Daniela, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Pérez Zavala Eric Eduardo, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Jorge Gaona Bernal, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Conocer las tecnicas básicas de investigacion en microbiología

METODOLOGÍA

Se realizó una extracción de ADN y su posterior purificación. La muestra fue a partir de heces fecales, por lo cual el ADN extraído fue de bacterias de la microbiota intestinal. La técnica se basa en propiedades físico-químicas. Este consistió en pasos sencillos los cuales fueron homogenizar la muestra, después se llevó a cabo una lisis celular, se removieron los componentes de la células (lípidos, proteínas, etc.), y el RNA y así de obtuvo el DNA. Utilizamos diferentes buffer, soluciones de lavado y filtros los cuales se desconoce debido a la patente del fabricante.  Con este DNA obtenido, se llevó a cabo una PCR, en la cual consistió en un tubo de microcentrífuga añadimos dNTP, ADN, Mg, buffer y primer para 3´y 5, y por último la polimerasa. Este se dejó incubando. También se llevó a cabo una ELISA, de tipo indirecto, el cual consiste en pegar un anticuerpo secundario a la proteína de interés. En la cual lo único que se hizo fue en una placa de 96 posos, se añadieron 2 blancos, y en los posteriores suero e IgG. A los cuales se incubó 1h a 37°C y se le realizaron diversos lavados. Se llevó a cabo una extracción de PMBC. Lisamos macrófagos, con el fin de obtener sus proteínas y así realizar un SDS-Page el cual se basa en el peso molecular de las proteínas para así poder purificarlas. Este en un gel de poliacrilamida, se desnaturaliza las proteínas con temperatura y se rompen sus enlaces disulfuro entre aminoácidos con mercaptoetanol. También observamos como Entamoeba histolytica se comía los eritrocitos de la sangre, el cual es de sus mecanismos de patogenicidad. De igual forma se realizó una tinción histológica con hematoxilina y eosina.   Hicimos una inmunohistoquímica, esta es una técnica que permite localizar moléculas en los tejdos mediante el empleo de anticuerpos, debido a la especificidad y afinidad de los anticuerpos, permite detectar cantidades ínfimas de moléculas. Para la técnica, se obtuvieron rebajes de 5um de espesor de los bloques de parafina que contengan tejido tumoral viable correspondiente. Se procedió a desparafinar mediante calor cada uno de los rebajes, para posteriormente incluirlos en xilol y concentraciones decrecientes de alcohol para su hidratación. Se sometieron a desenmascaramiento antigénico mediante su inclusión en olla de presión en tampón citrato (0.01 M, pH 6.0) y EDTA (0.001M, pH 8). El bloqueo de la actividad endógena de peroxidasa se realizará mediante incubación en solución de peróxido de hidrógeno 3% en metanol por 15 minutos. Se procedió al bloqueo de sitios de unión inespecíficos mediante incubación de los cortes en solución de albúmina bovina sérica 10 % en PBS 0.1M por 30 minutos. Tras el bloqueo, se incubó en el anticuerpo primario anti-Erp57 humano monoclonal hecho en ratón (Abcam 13506) a una concentración de 1:100 en PBST, durante 18 horas a temperatura ambiente (TA) en cámara húmeda. Inmediatamente serán incubados protegidos de la luz durante una hora a TA en un complejo de estreptavidina-biotina-peroxidasa. La reacción de peroxidasa será visualizada con una solución de tetrahidrocloro-diaminobenzidina (DAB). La reacción se detendrá con agua bidestilada cuando se presente una coloración café. Se utilizará como control positivo un bloque celular con células He-La, y como control negativo la misma reacción en ausencia del anticuerpo primario. También observamos las características y funciones de Caenorhabditis elegans el cual se utiliza como modelo para diversos estudios genéticos, muy especialmente en genética del desarrollo. Esto se debe a que presenta condiciones especialmente favorables tales como: 1) es transparente a lo largo de toda su vida, lo que facilita la observación de su desarrollo temprano bajo el microscopio; 2) es hermafrodita, lo que favorece la obtención y mantenimiento de individuos con mutaciones recesivas; 3) es uno de los organismos animales más simples que cuentan con sistema nervioso y digestivo bien definidos, por ejemplo en cuanto a número celular, posee 959 células, lo que ha permitido caracterizar cómo se genera cada linaje celular a lo largo del desarrollo; 4) es de muy fácil mantenimiento en el laboratorio, fácil de alimentar y manejar; 5) su corta vida de 2-3 semanas lo convierte en un modelo de alto rendimiento con resultados en corto plazo de tiempo; y 6) Es relativamente sencillo interrumpir la función de genes específicos mediante interferencia por ARN interferente (RNAi), lo que permite silenciar la función de un gen para inferir su efecto. Realizamos SDS PAGE, es un método de electroforesis en el cual se separan proteínas en base a su masa, en un medio o matriz el cual es un gel discontinuo a base de poliacrilamida, para el cual primero preparamos el gel separador, y posteriormente el gel concentrador el cual concentra las proteínas antes de su separación, después lo colocamos en la cubeta de electroforesis, en el cual se añade el buffer hasta cubrir completamente, y finalmente se cargaron nuestras muestras, para terminar se les hace pasar una corriente eléctrica para que se separen las proteínas. Para finalizar, realizamos un pase de células en el cual primero observamos si las células estaban cerca de la confluencia, una vez confirmado esto, se retiró el medio de la botella de cultivo celular y se hicieron distintos lavados con PBS, y posterior mente se agregó tripsina y se incuba a 37° durante 30 min para despegar las células, se inactiva la tripsina con medio de mantenimiento y se resuspendieron las células.

CONCLUSIONES

La importancia de las tecnicas readica en los usos de estas, ya sea obtener y multiplicar canenas de DNA para su posterior estudio, tecnicas de aislamiento de proteinas e identificarlas en base a su peso molecular, así como saber si un grupo de celulas tiene cierta proteina o una infección por unión de anticuerpos. De igual forma las tinciones histológicas nos ayudan desde simplemente diferenciar tejido, hasta haciendo inmunohistoquimica para buscar moleculas, que nos den idea del proceso que ha ocurrido en ese tejido.

Asesor: Dr. Gustavo Javier Acevedo Hernández, Universidad de Guadalajara

EXPRESIóN HETERóLOGA DE UNA TERPENO SINTASA DE ORéGANO MEXICANO (LIPPIA GRAVEOLENS) EN ESCHERICHIA COLI

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EXPRESIóN HETERóLOGA DE UNA TERPENO SINTASA DE ORéGANO MEXICANO (LIPPIA GRAVEOLENS) EN ESCHERICHIA COLI

Cisneros Macías Karina, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Gustavo Javier Acevedo Hernández, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Actualmente, el estudio de la planta de orégano está centrado en los aceites esenciales producto de su metabolismo secundario, pues estos, contienen una alta cantidad de terpenos que, según estudios previos, poseen propiedades antimicrobianas, antiinflamatorias, antioxidantes, entre otras. No obstante, los estudios han sido realizados en su mayoría en plantas de origen europeo como: Origanum vulgare, por ello se pretende el estudio de una terpeno sintasa proveniente de la especie de orégano mexicano Lippia graveolens, cuyo gen, será ligado al vector pET28a (+) para su sobre expresión en la bacteria Escherichia coli y posteriormente ser purificada. 

METODOLOGÍA

Se extrajo DNA plasmídico de una cepa de la clona C7 de Escherichia coli que contenía inserto en el vector pGEM-T el gen de la terpeno sintasa (TPS), el cual se amplificó por medio de la técnica de Reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Posteriormente, el producto obtenido de la PCR fue digerido con las enzimas de restricción NcoI y XhoI, cuyos sitios de reconocimiento se añadieron en el diseño de los iniciadores de la PCR. Así mismo, de otra cepa de Escherichia coli se extrajo el plásmido de expresión pET28a(+) al digerir el vector con las mismas enzimas de restricción con las que se digirió el producto de PCR de la clona del gen de la TPS, una vez digeridos, se realizó la ligación entre él gen y el vector pET28a (+). Posteriormente, se realizó la transformación de células competentes de Escherichia coli, con la ligación del gen y el vector, por medio de la técnica de electroporación,  Una vez transformadas, fueron incubadas a 37ºC con caldo Luria-Bertani (LB), y pasadas 3 horas fueron sembradas por superficie en agar LB adicionado con kanamicina e incubadas a 37ºc/24h. Pasado el tiempo, se realizó una PCR en colonia y con los productos de esta, una electroforesis para verificar la efectividad de la transformación.

CONCLUSIONES

Al realizar la electroforesis con las muestras producto de PCR en colonia con la transformación, se pudo observar, que la ligación no fue del todo efectiva, puesto que no se encontraba presente el gen de interés, ya que, al analizar la electroforesis, comparando las bandas obtenidas con el control positivo de la clona C7, las bandas no coincidían, por lo que se infiere que la ligación no resultó. A pesar de la realización de varios intentos de ligación del gen de la terpeno sintasa con el vector de expresión pET28a(+) esta no fue lograda, lo cual puede deberse, entre otras razones, a la ligasa y las enzimas de restricción empleadas.  Por lo que el proyecto no culminó en su totalidad, pero, durante este, se adquirieron conocimientos que reforzaron conceptos y técnicas importantes dentro del área de la biología molecular y genética.

Asesor: Dr. Nancy Claudia Saavedra Sotelo, Universidad Autónoma de Sinaloa

IDENTIFICACIóN DE ESPECIES DE RAYAS DEL GéNERO GYMNURA UTILIZANDO PCR MúLTIPLEX

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IDENTIFICACIóN DE ESPECIES DE RAYAS DEL GéNERO GYMNURA UTILIZANDO PCR MúLTIPLEX

Colula Ocampo Jareli Itzel, Universidad Veracruzana. Asesor: Dr. Nancy Claudia Saavedra Sotelo, Universidad Autónoma de Sinaloa

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El género Gymnura representa un grupo de batoideos de importancia comercial en la pesca artesanal del Pacífico mexicano incluido el Golfo de California. En esta región persiste la confusión de dos especies morfológicamente similares (Gymnura marmorata y G. crebripunctata), por lo que, los registros de pesca pueden agrupar a ambas especies en una sola. A pesar de que existe un trabajo que proporciona un método de discriminación entre las dos especies por medio de análisis de variables morfométricas, las cuales fueron confirmadas con análisis moleculares, se carece de certeza en la delimitación de especies en campo. Debido a esto, es probable que los registros de pesca para este grupo no reflejen la composición correcta de las capturas. El ADN mitocondrial (ADNm) es una de las moléculas ampliamente utilizadas en análisis filogenéticos, esto debido a que permiten reconstruir relaciones genealógicas dentro y entre especies. En años anteriores, se logró separar a estas especies utilizando la región del Citocromo B (CtB) del ADNm, los resultados indican que cada especie pertenece un grupo monofilético diferente. Es por ello que el ADNm es una molécula útil para diseñar una técnica precisa, rápida y de bajo costo para delimitar aquellos especímenes difícil de identificar en campo. En el caso específico del género Gymnura, la validez de las especies ha sido cuestionada ya que la alta variación en la morfología de la familia y la existencia de fenotipos intermedios complica la identificación concisa, limita los avances en la investigación, y el desarrollo de planes de manejo y conservación de los recursos pesqueros. Por lo tanto, el objetivo de este proyecto fue diseñar y optimizar una técnica de PCR cuádruplex (2 cebadores universales del CtB y 2 cebadores internos específicos para cada una de las especies) como método rápido de identificación mediante el diseño de cebadores específicos, los cuales pueden discernir entre el ADN de G. marmorata y G. crebripunctata de manera simultánea.

METODOLOGÍA

Se utilizaron 29 muestras de tejido de rayas del género Gymnura colectadas en las costas de Baja California Sur y Sinaloa, las cuales fueron identificadas como Gymnura marmorata y G. Crebripunctata de acuerdo a su morfología. Se realizó extracción de ADN mediante un protocolo de Proteinasa K y precipitación con LiCl. Con la finalidad de diseñar un protocolo de PCR múltiplex para una rápida identificación entre ambas especies, se utilizo la región del CtB del ADNm para diseñar cebadores específicos que permitieran discernir entre ambas especies. Tanto los cebadores universales del CtB como los internos para cada especie fueron sometidos a un proceso de estandarización de PCR para determinar la especificidad y sensibilidad de los mismos, así como identificar la temperatura optima de hibridación del conjunto de cebadores (59ºC). El diseño de los primers permitieron generar 3 bandas de amplificación de diferentes tamaños: 900 pb del gen CtB, 400 pb solo para ADN de G. marmorata y 600 pb para ADN de G. crebripunctata. Para la obtención de los productos de PCR se utilizó el siguiente protocolo: 0.2 mM de dNTP´s, 1x PCR buffer, 0.4 mM de cada primer (2 universales y 2 internos), 2.5 mM de MgCl2, 0.5 unidades de taq DNA polimerasa y 20 ng de ADN molde en un volumen final de 10 μl. El perfil de termociclado consistió en: desnaturalización inicial a 95ºC durante 5 min, seguido de 30 ciclos a 95ºC por 1 min, 59ºC por 1 min y 72ºC por 1 min, con una extensión final a 72ºC por 6 min. Todos los productos de PCR se separaron por electroforesis en geles de agarosa al 1.5% en solución tampón TBE 0.5X (pH 8.5). Los fragmentos de ADN se dejaron migrar entre 45 y 50 minutos a 95 V. Posteriormente, los geles se colocaron en un trans-iluminador (Gel-Doc de BIO-RAD) y se fotografiaron con ayuda del programa Imagen Lab para comprobar la amplificación. Para corroborar que la técnica de PCR cuádruplex fuera exitosa, se amplifico de manera individual el CtB para cada muestra y se envió a un laboratorio externo para ser secuenciadas. Las secuencias obtenidas se editaron con el programa Codon Code Aligner v7.0.1 y se alienaron con el programa MEGA v5.05. Finalmente se realizo un árbol filogenético mediante el método de distancias Neighbor-Joining con el programa MEGA para corroborar el origen filético de cada muestra.

CONCLUSIONES

A lo largo de la estancia de investigación se obtuvieron conocimientos tanto prácticos como teóricos acerca del uso de las herramientas moleculares para la identificación de especies. Particularmente, en el grupo de elasmobranquios la delimitación de especies es relevante ya que son organismos de importancia ecológica, comercial y biológica en el mundo. Los resultados de la técnica del PCR múltiplex no fueron concluyentes debido a un posible fallo en alguno de los parámetros químicos y de temperatura, así como errores en el diseño de los cebadores internos. Es necesario mencionar que una reacción de PCR múltiple eficiente requiere de estrategias de planificación y múltiples intentos, así como de la optimización de un protocolo para la amplificación de productos específicos. Una vez estandarizado el protocolo, la prueba será eficiente, rápida y de bajo costo para delimitar muestras que puedan estar en duda debido a la plasticidad fenotípica que presenta este grupo de rayas.

Asesor: Dr. Luis Víctor Rodríguez Durán, Universidad Autónoma de Tamaulipas

OPTIMIZACIóN DE LA EXTRACCIóN DE LOS PIGMENTOS NATURALES DE LA FLOR DE BOUGAINVILLEA GLABRA, ASISTIDA POR ULTRASONIDO.

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OPTIMIZACIóN DE LA EXTRACCIóN DE LOS PIGMENTOS NATURALES DE LA FLOR DE BOUGAINVILLEA GLABRA, ASISTIDA POR ULTRASONIDO.

Compean Vargas Bertha Cecilia, Universidad Autónoma de Tamaulipas. Asesor: Dr. Luis Víctor Rodríguez Durán, Universidad Autónoma de Tamaulipas

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En la actualidad la industria alimentaria, farmacéutica y cosmética está tomando en cuenta las demandas del consumidor, las cuales exigen el uso de ingredientes naturales brindando productos de alta calidad. Por ello se buscan fuentes alternativas para la obtención de colorantes naturales, existen registros que muestran la extracción de  colorantes a partir de plantas o frutos como lo son: la Jamaica, el achiote, los granos de café, la semilla de aguacate, el betabel y la bougainvillea. La bougainvillea glabra es originaria de Brasil, es de color magenta, rojo, rosa, amarillo, blanco y naranja, una característica de sus pigmentos es que actúan como buenos colorantes. Se ha .realizado la técnica de extracción asistida por ultrasonido (EAU) para recuperar pigmentos. Hoy en día la técnica de EAU se ha reconocido como un método alternativo sobre el método de extracción tradicional debido a sus propiedades beneficiosas tales como acortar el tiempo de extracción, disminuir el uso de solvente, Mejora el rendimiento de extracción y la calidad de los extractos.   El objetivo de este estudio es optimizar la extracción de los pigmentos naturales de la Bougainvillea glabra utilizando la extracción asistida por ultrasonido para lograr una mayor concentración para su uso posterior  como colorante en alimentos.

METODOLOGÍA

Materiales y métodos. Materiales El material vegetal se obtuvo de un arbol ubicado en ciudad mante tamaulipas (22°44'48.2"N 98°58'57.9"W).  Todos los productos químicos utilizados en este estudio son de grado alimenticio. UAE de los pigmentos los factores estudiados en esta experimentacion fueron: temperatura, concentracion de etanol y tiempo. teniendo como niveles: Temperatura: 30ºC. 45ºC y 60ºC Concentracion de etanol: 50%, 70% y 90% tiempo: 15 min, 30 min y 45 min. Se utilizó un dispositivo ultrasónico aquasonic modelo 7500 para la experimentación. La muestra compuesta de 1 g de flor de Bougainvillea glabra y 20 ml de solución de etanol concentrado se puso en contacto con las ondas ultrasónicas. Se llevaron a cabo experimentos por triplicado siguiendo el diseño de Box Behnken. Análisis de los extractos Se utilizó un dispositivo espectrofotométrico PerkinElmer modelo lambda 35 en donde se analizaron los extractos obtenidos. Las extracciones  obtenidas  se diluyeron  tomando 100 μL del extracto y 900 μL de agua destilada, para después leer absorbancias a 540 nm. Los datos obtenidos se analizaron mediante un analisis de varianza optimizando la variable de respuesta obteniendo  la maxima abosrbancia.

CONCLUSIONES

Coclusiones De acuerdo con analisis de varianza obtenido, los factores que tuvieron un efecto significativo fueron: la concentracion de etanol teniendo un efecto positivo y la temperatura teniendo un efecto negativo. Los resultados obtenidos durante la experimentacion indicaron que los valores optimos de extraccion se obtuvieron a  una concentracion de etanol del 57.45 %, una temperatura de 54.58 ºC y un tiempo de 32.10 min.  

Asesor: Dr. José Norberto Farfán García, Universidad Nacional Autónoma de México

SÍNTESIS DE MOLÉCULAS CON POTENCIAL APLICACIÓN DE ÓPTICA NO LINEAL

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SÍNTESIS DE MOLÉCULAS CON POTENCIAL APLICACIÓN DE ÓPTICA NO LINEAL

Contreras Ayala Jesús Enrique, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. José Norberto Farfán García, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La investigación de materiales ha tomado un papel trascendental en el desarrollo de tecnologías y herramientas que permitan mejorar el entorno y calidad de vida de las personas, para que éstas se puedan desarrollar efectivamente y llevar una vida productiva de acuerdo a sus intereses, se han desarrollado materiales como aquellos que involucran polímeros biodegradables, para el tratamiento de cáncer en el área biológica y algunos otros enfocados en el uso de combustibles no fósiles para la obtención de energías renovables. De otra forma se encuentran también los materiales que presentan el fenómeno de óptica no lineal (ONL); los cuales han demostrado ser una alternativa en la aplicación de nuevas tecnologías, tales como los dispositivos fotovoltáicos1 así como para la creación de imágenes médicas2. En este sentido, los derivados de 4,4-diflouro-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno (conocidos como BODIPYs) han presentado resultados prometedores para su estudio en el campo de óptica no lineal, debido a que presentan alto rendimiento cuántico flourescente así como buena absorción de dos fotones. Por lo que en el presente trabajo realizado durante la estancia del programa delfín se muestra la preparación de algunos intermediarios para la obtención del correspondiente BODIPY, dicho fragmento presenta un fragmento fluoreno que incrementa la conjugación del sistema, con el objetivo llevar a cabo una buena absorción de fotones que caracteriza a los materiales con propiedades de óptica no lineal.

METODOLOGÍA

Síntesis de 9,9-dihexil-9H-fluoreno En un matraz de fondo redondo limpio y seco de 250 mL de capacidad y provisto de agitación magnética fue adicionado 1 g. de fluoreno, seguido de 0.1 g. de KI (0.01 eq) los cuales fueron disueltos en 20 mL de DMSO, la mezcla es puesta en agitación constante a 40 °C  hasta disolución del sólido en atmósfera de N2; posteriormente fue adicionado 0.7 g. de KOH (2.1 eq) seguidos de 1.8 mL de 1-bromohexano (2.1 eq) gota a gota durante 10 minutos, despues 4 horas de reacción son adicionados 15 mL de agua y 10 mL de diclorometano, la fase orgánica es separada y lavada dos veces más, evaporada y secada al rotavapor, purificada en columna con silica para obtener aceite que cristaliza con el tiempo.               Síntesis de 9,9-dihexil-2,7-dibromofluoreno El producto 9,9-dihexil-9H-fluoreno se pesó y añadió a un matraz de fondo redondo de 250 mL, provisto de agitación magnética, limpio y seco, seguido se adicionaron 50 mL de CH2Cl2 y 0.02 equivalentes de I2, a esta disolución se le adicionaron gota a gota una disolución Br2/CH2Cl2 2.1 equivalentes Br2/30 mL CH2Cl2, la mezcla se dejó en agitación por 20 horas en ausencia de luz, una vez terminado el tiempo de reacción, la mezcla se colocó en un baño de hielo y se le añadió una disolución de NaHSO3 hasta formar una disolución incolora, se extrajo con CH2Cl2 y secado con Na2SO4 y se purifcó en columna.               Síntesis de 7-Bromo-9,9-dihexil-9H-fluoreno-2-carbaldehido En un matraz de fondo redondo de 250 mL fue adicionado el 9,9-dihexil-2,7-dibromofluoreno obtenido en la reacción anterior, se disolvió con 30 mL de THF, la mezcla fue puesta en un baño de acetona/CO2 (sólido) a una temperatura de -50 a -60 °C, seguido fue adicionado 1 equivalente de BuLi, dejado en agitación magnética durante 1 hora, seguido se añadió 1 equivalente de DMF seco.

CONCLUSIONES

Durante la estancia del programa delfín se logró adquirir conocimientos teóricos sobre las propiedades de BODIPYs, se pusieron en práctica los métodos para la síntesis de estos compuestos, también como su aislamiento y purificación con el uso de columnas cromatográficas, sin embargo al ser un extenso trabajo que aún se encuentra en la fase de síntesis; no fue posible verificar las propiedades del material, aunque se espera actividad dentro del campo de la óptica no lineal.

Asesor: Dr. Jesús Aarón Salazar Leyva, Universidad Politécnica de Sinaloa

ACTIVIDAD ANTI-BACTERIANA DE MUESTRAS DE ORIGEN ANIMAL Y VEGETAL DE AMBIENTES MARINO Y TERRESTRE

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ACTIVIDAD ANTI-BACTERIANA DE MUESTRAS DE ORIGEN ANIMAL Y VEGETAL DE AMBIENTES MARINO Y TERRESTRE

Contreras Machado Perla Lizbeth, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Jesús Aarón Salazar Leyva, Universidad Politécnica de Sinaloa

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El uso de agentes terapéuticos contra microorganismos se ha visto comprometido por el desarrollo de resistencia o tolerancia a compuestos; esto se ha visto relejado en los tratamientos de bacterias, parásitos y hongos. El hecho de que las bacterias se han comenzado a volver resistentes a agentes terapéuticos ha provocado un incremento en problemas de salud. Los problemas de resistencia se han presentado con diferentes tipos de cepas bacterianas. La variación que ha existido en Escherichia coli obliga a disponer de un conocimiento actualizado para adaptar las pautas generales de tratamiento empírico a cada área de salud concreta. En cambio, Staphylococcus aureus es el mayor patógeno humano causante de infecciones a la piel y tejidos. La emergencia de cepas resistentes a meticilina y otros agentes antibacteriales ha llegado a ser una preocupación mayor especialmente en el ambiente hospitalario, esto es por la alta mortalidad debido a las infecciones sistémicas ocasionadas por Staphylococcus aureus meticilino resistente. La necesidad de desarrollar nuevos antibióticos es actualmente más grande con la emergencia de patógenos comunes resistentes. Por esta razón se ha estado realizando una búsqueda de nuevos compuestos de origen natural, entre ellos agentes de origen vegetal o incluso péptidos antimicrobianos, los cuáles se han probado tener actividad contra bacterias resistentes a través de la disrupción de la membrana celular. Es por lo anterior, el objetivo de este estudio es buscar compuestos con actividad bacteriana de diversas fuentes naturales.

METODOLOGÍA

Las muestras de origen protéico fueron hidrolizadas con la ayuda de una enzima comercial (Alcalasa) obteniéndose diferentes grados de hidrólisis (entre 0 hasta 25%); las fracciones fueron ultrafiltradas utilizando membranas de permeado de 10 KDa y 5 KDa, obteniéndose tres fracciones diferentes; superiores a 10 KDa, entre 5-10 KDa y menores de 5 KDa. Las muestras fueron analizadas en su distribución de peso molecular a través de cromatografía de exclusión molecular. Las muestras de origen vegetal fueron procesadas a través de la extracción seriada con solventes orgánicos y llevados a sequedad por medio de presión negativa. La actividad antibacteriana se midió a través de dos técnicas, la primera por difusión en pozo en agar Müller-Hinton y la segunda por turbidimetría en caldo Müller-Hinton; las cepas utilizadas fueron Escherichia coli CAIM21 y Staphylococcus aureus R-101 y como control positivo el antibiótico neomicina.

CONCLUSIONES

Las técnicas de difusión en pozo y cultivo en caldo son útiles para determinar la actividad biológica de compuestos de origen tanto animal como vegetal. Los hidrolizados de aves presentaron actividad antimicrobiana contra la bacteria gram (-) E. coli, mientras que los hidrolizados de agua de cola de origen marino no presentaron actividad contra ninguna cepa. Las fuentes de origen vegetal terrestre no presentaron actividad mientras que las de origen vegetal marino si las presentaron. Es necesario continuar con las investigaciones para determinar la estructura química de los compuestos responsables de la actividad biológica.

Asesor: Dr. Ibiza Martínez Serrano, Universidad Veracruzana

DETERMINACIóN DE PREFERENCIAS DE HáBITAT DE CHELONIA MYDAS EN EL ARRECIFE CABEZO, VERACRUZ, MéXICO.

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DETERMINACIóN DE PREFERENCIAS DE HáBITAT DE CHELONIA MYDAS EN EL ARRECIFE CABEZO, VERACRUZ, MéXICO.

Contreras Montiel Ricardo Axel, Universidad Autónoma de Baja California Sur. Asesor: Dr. Ibiza Martínez Serrano, Universidad Veracruzana

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Estudiante: Ricardo Axel Contreras Montiel Asesores: Dra. Ibiza Martínez Serrano / Dr. Emilio A. Suárez Domínguez. Facultad de Biología, Universidad Veracruzana. Xalapa, Veracruz.  El Parque Nacional Sistema Arrecifal Veracruzano (PNSAV), es considerado el área arrecifal más extensa de todo el Golfo de México, y está constituido por 28 formaciones arrecifales. El PNSAV cuenta con corales escleractinios esencialmente, los cuales permiten la conformación de ecosistemas capaces de sostener altas densidades y diversidad de especies; además, el área cuenta con ciclos cambiantes en la circulación del agua, lo que genera un ecosistema dinámico con zonas muy productivas y biodiversas. Geográficamente, las formaciones arrecifales están divididas por la desembocadura del río Jamapa en dos grandes áreas: una al noroeste y otra al sureste, en esta última, se encuentra el arrecife Cabezo, el cual cuenta con una extensión de 6km de largo. Desde 2016, se han llevado a cabo estudios sistemáticos sobre la densidad y aspectos ecológicos y de salud de la tortuga verde (Chelonia mydas). En México, se han protegido las siete especies de tortugas desde 1996, debido a su vulnerabilidad y actual riesgo de extinción. En el estado de Veracruz, la mayor parte de la información generada para tortugas marinas, proviene de trabajos realizados en campamentos tortugueros. Esta situación abre una ventana de oportunidad para estudiar organismos libre-nadadores. De tal forma que desde 2016, se han realizado esfuerzos de colecta de organismos en el arrecife Cabezo, un sitio que por sus condiciones físico-químicas y de estructura ha favorecido la agregación de estos quelonios. Por lo anterior, ha resultado de interés analizar la distribución espacial de las tortugas en el Sistema Arrecifal Veracruzano, específicamente en el arrecife Cabezo, analizando la relación existente entre su presencia y las características del hábitat como profundidad, temperatura del agua, tipo de fondo entre otros.  

METODOLOGÍA

Las actividades de campo se llevaron a cabo en dos fases, en la primera un vídeo-transecto, en la segunda, una navegación por bojeo del arrecife y la medición de variables fisicoquímicas en el arrecife Cabezo. Para la fase de video-transecto, se realizó un recorrido longitudinal a lo largo del arrecife. Durante dicho recorrido, se hizo un registro de los cambios de al menos 30% en la composición del fondo, estos puntos se señalaron por medio de coordenadas geográficas, y la medición de profundidad. Para la segunda fase, se bordeó el arrecife y se realizó un análisis fotográfico de los cambios en la composición del fondo ymedición de la profundidad. Al finalizar, se tomaron datos fisicoquímicos del mar, salinidad, temperatura y oxígeno disuelto en 12 puntos geográficos tomados de manera aleatoria. La clasificación del tipo de fondo se determinó de la siguiente manera, a partir de los fotogramas del vídeo-transecto y las fotografías capturadas: Si la cobertura de imagen está abarcada en un 80% o más por un solo componente, se clasificó como un solo componente del sustrato, si en la imagen se observan dos componentes en proporciones menores al 80% de cobertura, se categorizó como una combinación de componentes, dando prioridad al más predominante. Finalmente, se realizaron mapas de distribución espacial de acuerdo a cada variable, tipo de fondo, profundidad, salinidad y oxígeno disuelto.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró adquirir conocimientos sobre los comportamientos y las tendencias de distribución de delfines y tortugas en el PNSAV, además de comprender las interacciones con su medio. Asimismo, se identificaron 15 categorías para la composición del fondo y se ha observado una gran presencia de tortugas en regiones cercanas a extensiones de pasto marino y zonas altamente influenciadas por corales.

Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

QUíMICA VERDE EN LA SíNTESIS DE IMINAS POR LA CONDENSACIóN DE CETONAS AROMáTICAS Y CíCLICAS CON AMINAS PRIMARIAS Y SECUNDARIAS

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QUíMICA VERDE EN LA SíNTESIS DE IMINAS POR LA CONDENSACIóN DE CETONAS AROMáTICAS Y CíCLICAS CON AMINAS PRIMARIAS Y SECUNDARIAS

Coral Jaime Patricia Elizabeth, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las iminas o también llamadas bases de Schiff se obtienen por la reacción de condensación de cetonas o aldehídos con aminas. Las condiciones experimentales para su preparación  dependen de la naturaleza de la amina y compuesto carbonílico que determinan el equilibrio de la reacción. De manera general se puede decir que los aldehídos son más reactivos que las cetonas y que los productos obtenidos con cetonas y aldehídos aromáticos son más estables. Se ha reportado que se requiere para su formación tiempos de reacción largos, temperaturas altas y catalizadores. Las iminas pueden hidrolizarse con lo que se obtiene la materia prima; por lo que es necesario eliminar el agua que se produce durante la condensación para desplazar la reacción al producto deseado. Los métodos convencionales involucran el uso de disolventes a través de una destilación azeotrópica con una trampa que atrapa el agua formada llamada Dean-Stark. El presente trabajo se realizaron diferentes esfuerzos para preparar iminas considerando los fundamentes de la química sustentable o también llamada química verde. La química verde propone un diseño de experimentos en donde se reducen o eliminan el uso y formación de compuestos de puedan ser nocivos tanto para el medio ambiente como para salud, entre los principios está la disminución de generación de residuos, el aumento de la eficiencia energética, el diseño de síntesis en donde se disminuya el uso y formación de productos con poca o nula toxicidad y el daño al medio ambiente, la utilización de materias primas renovables y la reducción de potenciales accidentes químicos. Para el diseño de experimento que se apegue a los principios de la química verde es necesario tener en cuenta que la energía de activación es la cantidad de energía mínima necesaria para que se lleve a cabo una reacción química ya que los compuestos deben de vencer fuerzas de repulsión, vibración, translación, etc., que podría existir en los átomos, entre las posibles fuentes de activación que son compatibles con estos fundamentos se encuentra la agitación como condiciones suaves sin disolvente y la mecanoquímica.

METODOLOGÍA

La condensación de benzofenona y α-Metilbencilamina se realizó con 19 horas de agitación. Posteriormente, se filtró en un embudo sobre sulfato de sodio anhidro. Se realizó la misma reacción por triboquímica utilizando además de la materia prima sulfato de sodio como desecante. Se realizó la condensación de benzantrona y α-Metilbencilamina por triboquímica utilizando como desecante sulfato de sodio anhidro. Se realizó la síntesis de imina a partir de benzofenona y feniletilamina por triboquímica empleando como desecante sulfato de sodio anhidro. El producto fue cristalizado y se determinó su punto de fusión. Se realizó la preparación de la imina a partir de benzofenona y feniletilamina por destilación azeotrópica. Se armó el sistema para la destilación azeotrópica con la trampa de Dean-Stark, un refrigerante recto con anticongelante, un condensador y un matraz redondo de 50 mL. Luego de mantener el reflujo durante 24h, se eliminó el disolvente con un sistema de alto vacío. Por medio de triboquímica se preparó la imina a partir de benzofenona y feniletilamina con sulfato de sodio anhidro. Posteriormente, se filtró en un embudo Büchner y acetato de etilo con bomba de vacío, se eliminó el solvente con un rotavapor. Síntesis de imina a partir de 4-Terbutilciclohexanona y feniletilamina por métodos suaves y sin disolvente. Se mezclaron cantidades equimolares de 4-Terbutilciclohexanona y feniletilamina y sulfato de sodio anhidro que se mantuvieron agitando durante 89 horas. Todos los productos obtenidos fueron analizados por medio de la Resonancia Magnética Nuclear (RMN) de 1H y 13C.

CONCLUSIONES

El diseño de experimento empleado principalmente para metodologías que siguen los principios de química verde mostraron a través de los espectros de RMN de 1H y 13C que la reactividad de los compuestos con carbonilos aromáticos como la benzofenona tienen muy poca reactividad debido a la protección estérica de los anillos aromáticos y en el caso de la benzatrona la aromaticidad del compuesto hace que el carbonilo sea muy poco reactivo frente aminas por lo que se observan únicamente trazas de los productos esperados. Para el cambio de benzofenona y feniletilamina por mecanoquímica se obtuvo la formación de producto pero en muy bajos rendimientos, incluso en comparación con la destilación azeotrópica realizada y reportada como método convencional en este tipo de síntesis, por lo que se requiere hacer experimentos más cuidadosos. La última síntesis, debido a conformación de la 4-terbutilciclohexanona en su forma más estable se vea más favorecido el ataque nucleofílico de la feniletilamina, por lo que se espera posteriormente avanzar a reducción del producto a una amina secundaria y posteriormente experimentar con la inclusión de la amina en la β- Ciclodextrina. En general durante la estancia de verano se ha podido experimentar con condiciones diferentes a las convencionales siguiendo mayoritariamente una metodología que se apega a los principios de la química verde y realizando la interpretación de resultados a través de la enseñanza del reconocimiento molecular por Resonancia Magnética Nuclear.

Asesor: Dr. Judith Sánchez Rodríguez, Universidad Nacional Autónoma de México

EXTRACCIóN, PURIFICACIóN Y AISLAMIENTO DE COMPUESTOS BIOACTIVOS DE CASSIOPEA XAMACHANA Y PSEUDOPTEROGORGIA BIPINNATA PARA EVALUACIóN EN BIOENSAYOS

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EXTRACCIóN, PURIFICACIóN Y AISLAMIENTO DE COMPUESTOS BIOACTIVOS DE CASSIOPEA XAMACHANA Y PSEUDOPTEROGORGIA BIPINNATA PARA EVALUACIóN EN BIOENSAYOS

Corona Hinojosa Catalina Margarita, Instituto Tecnológico de Bahía de Banderas. Lopez Romero Rafael, Universidad de Guanajuato. Zamorano Vazquez Luis Alfredo, Universidad Autónoma de Chiapas. Asesor: Dr. Judith Sánchez Rodríguez, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El filo Cnidaria se caracteriza por la presencia de cnidocistos, que son pequeñas células especializadas en secretar toxinas que son utilizadas como mecanismo de defensa o depredación. Existen varios tipos de cnidocistos, el más común, es el nematocisto. Cada nematocisto es un producto complejo secretorio que se forma a la par del desarrollo del cnidocisto. Estas estructuras contienen diversas toxinas, incluyendo enzimas y polipéptidos que interactúan con canales dependientes de voltaje y citolisinas que actúan en la membrana celular. Los organismos marinos son una gran fuente de compuestos bioactivos que pueden ser usados como tratamiento para enfermedades humanas.  En el verano de investigación se buscarán compuestos bioactivos de la medusa Cassiopea xamachana y del coral Pseudopterogorgio bipinnata que se probarán en bioensayos como: actividad de fosfolipasa, actividad hemolítica y citotoxicidad en células de glioma de rata (C6).

METODOLOGÍA

Obtención de extracto crudo Los ejemplares de medusa Cassiopea xamachana y coral Pseudopterogorgia bipinnata, se colocaron en un matraz con 200ml de agua desionizada, para la descarga de los nematocistos, se agitó de manera manual por 30 minutos y se mantuvo una hora en congelación. Se agregó un comprimido de coctel de inhibidores de proteasas (Complete mini de Roche) y se guardó en refrigeración durante 24 h. Se centrifugó a 4000 rpm durante 10 minutos a 4 °C posteriormente se vertieron 35 ml en tubos Falcon de 50 ml, el precipitado fue cortado y macerado en un macerador de tejidos Ten Broeck, para posteriormente verter a tubos de 50 ml y centrifugar a 4000 rpm durante 10 minutos a 4 °C y rescatar el sobrenadante para congelarlos y liofilizarlos en Freeze Drying modelo 77500, Labconco® a una temperatura -45°C. Cromatografía de exclusión molecular Se disolvieron 3 g de extracto crudo liofilizado en 10 ml de agua desionizada y se agitó en un Vortex hasta disolver el extracto,  se centrifugó a 3500 rpm durante 10 minutos, para posteriormente agregar el sobrenadante a una columna de Sephadex G-50 de 1600cm3 equilibrada y eluida con ácido acético 0.3 M con un flujo de 2.5 ml/min con volumen de 20 ml por tubo. Electroforesis (SDS-PAGE) Se realizaron dos geles de acrilamida al 16% y al 20% para el extracto crudo y fracciones de C. xamachana y P. bipinnata respectivamente.  Para cada gel se colocó en cada pozo 18ul de muestra y se dejó correr por 40 minutos a 200 volts. Posteriormente se tiñó el gel con azul de Coomassie durante, y se destiñó durante 24h. Cuantificación de proteínas Se cuantificaron las proteínas por el método de Bradford (1976) en una placa de 96 pozos. Realizando una curva de calibración con las concentraciones de 0.125, 0.250, 0.500, 0.750, 1.000, 1.500 y 2.000 mg/ml de una solución estándar de BSA. Se utilizaron 5ul de solución de cada estándar y 250ul de reactivo de Bradford en cada pozo, de cada extracto crudo y fracción, se utilizaron 5ul de una solución de concentración 20mg/ul y 250ul de reactivo de Bradford y se leyó a 595 nm. Fosfolipasas Se realizó el medio de cultivo de agarosa para probar la actividad enzimatica. La solución se repartió en cajas de Petri de aproximadamente 15ml cada caja, al solidificase se realizaron pequeños orificios con ayuda de una pipeta Pasteur, colocando 10ul de muestra por triplicado en cada orificio teniendo un control positivo de 10ul de veneno de abeja y un control negativo de 10ul de agua. Se registro la actividad de fosfolipasa a las 6, 12, 24 y 48h. Hemólisis Se realizó la extracción de 3ml de sangre los cuales se vertieron en 30ml de solución Alsever (21g dextrosa anhidra, 8g citrato de sodio, 4.2g cloruro de sodio, 0.4g ácido cítrico anhidro y 900 ml de agua desionizada, ajustar pH a 7.4 y aforar a 1000ml), se centrifugaron a 3000 rpm durante 20 minutos, posteriormente se realizaron tres lavados más con 20ml de solución Alsever, centrifugando a 3000rpm por 20 minutos y decantando el sobrenadante entre cada lavado. Se prepararon soluciones madre de 40mg/ml de extracto crudo y las fracciones F5 y F6 de C. xamachana. Viabilidad celular Se realizó el protocolo de descongelado de células para la línea celular C6 (glioma de rata), sembrándose en 3 cajas T-25 y se dejaron incubar hasta que las células se adhirieron al sustrato, alcanzando una confluencia de 90 a 100% (aproximadamente en dos días). Cuando se alcanzó la confluencia, se realizó el protocolo de despegado de células, sembrándolas en dos cajas T-75 y se mantuvo en incubación hasta alcanzar la confluencia necesaria, posteriormente se elaboró el protocolo de plaqueo, sembrando un aproximado de 5,000 células por pozo en una placa de 96 pozos. Teniendo un total de cuatro placas: L1/L2 (24h) y L3/L4 (48h). En cada placa se utilizó el extracto crudo C. xamachana y las fracciones obtenidas de la cromatografía de éste; se dejaron incubar las placas por 24 y 48h.Pasando el tiempo de incubación se realizaron las tinciones de rojo neutro y cristal violeta.

CONCLUSIONES

En la electroforesis de cada extracto crudo y de las fracciones (6 para cada sp), se observaron pesos moleculares de aproximadamente 120KDa y menores a 3.5KDa, sabiendo que los compuestos de mayor peso molecular tienen actividad citolítica y los de menor peso actividad neurotóxica. Al hacer la cuantificación de proteínas del extracto crudo y las fracciones de C. xamachana se obtuvieron concentraciones en un rango de 0.1018 mg/ml a 0.0054mg/ml y para el extracto crudo de P. bipinnata se tuvo una concentración de 0.0426 mg/ml. En cuanto a la actividad de fosfolipasas, se observó un halo de inhibición de 18mm de diámetro a las 72h a una concentración de 20mg/ml de la fracción seis de C. xamachana y de 7mm de diámetro a las 48h a una concentración de 50mg/ml del extracto crudo de P. bipinnata. Se pudo observar actividad hemolítica con el extracto crudo de C. xamachana Para viabilidad celular a las 24h mediante el método de Rojo Neutro se observaron resultados en el extracto crudo y las fracciones menores al 8% y en Cristal Violeta mayores a 90%, lo que nos indica que el extracto y las fracciones tienen una alta inhibición del crecimiento celular.

Asesor: Dr. Laura Rebeca Jiménez Gutiérrez, Universidad Autónoma de Sinaloa

FISIOLOGíA REPRODUCTIVA DE CRUSTáCEOS DE IMPORTANCIA COMERCIAL

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FISIOLOGíA REPRODUCTIVA DE CRUSTáCEOS DE IMPORTANCIA COMERCIAL

Corona Robles Raquel, Universidad de Guadalajara. Ovando Mendez Bryan, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas. Asesor: Dr. Laura Rebeca Jiménez Gutiérrez, Universidad Autónoma de Sinaloa

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La pesca de crustáceos es una industria mundial de gran importancia económica y social. Muchos países dependen fuertemente de la producción de diversas especies de camarón y cangrejos, por lo que son algunos de los sectores acuícolas de más rápido crecimiento en América. Conocer la biología de los decápodos y la expresión de los genes involucrados en el control de la reproducción, es fundamental para establecer mejores estrategias de manejo en las pesquerías y en cultivo. En la actualidad se han estandarizado metodologías que han permitido aislar y caracterizar genes precursores de hormonas y proteínas involucradas en la reproducción, así como cuantificar sus niveles de expresión en tejidos involucrados en dicha regulación. El objetivo de este proyecto es encontrar posibles marcadores del estado reproductivo de diferentes especies de crustáceos de importancia comercial, así como evaluar su presencia en diferentes tejidos en hembras capturadas en el Pacífico mexicano.

METODOLOGÍA

Para lo cual, se contó con organismos obtenidos de barcos que operan en las costas del Pacífico mexicano. Se contó con muestras de las cuatro especies de camarón de mayor importancia: Penaeus vannamei, P. stylirostris. P. brevirostris y P. californiensis y dos especies de jaibas: Callinectes arcuatus y C. toxotes. Los organismos se disectaron y se obtuvieron los órganos hepatopáncreas y gónadas. Se tomó una muestra de tejido de cada uno y se hizo la extracción de ARN total por medio del reactivo TRI Reagent de acuerdo a las especificaciones del fabricante, se cuantificó la concentración de ARN total y la relación 260/280 por medio de un espectofotómetro Nanodrop. Posteriormente, se evaluó la integridad del ARN en gel de agarosa al 1.5%, el cual fue digitalizado por medio de un fotodocumentador. Posteriormente, se realizó la síntesis del ADN complementario (ADNc) usando el sistema comercial First Strand (Invitrogen, USA).  La amplificación de los transcritos se llevó a cabo por medio de Reacción en Cadena de la Polimerasa de punto final. Finalmente, a partir de secuencias de transcriptomas previamente obtenidos por el grupo de laboratorio se realizaron análisis bioinformáticos para identificar posibles marcadores moleculares del estado reproductivo, las cuales fueron confirmadas contra secuencias previamente depositadas en el Genbank.

CONCLUSIONES

De los transcriptomas de especies de P. stylirostris, C. arcuatus y C. toxotes se encontraron un total de 123 transcritos involucrados en el control de la reproducción. De los cuales se confirmaron 109. Los transcritos más importantes fueron: la Vitelogenina y su receptor, Proteína externa de la membrana vitelínica y Proteínas relacionadas con el desarrollo del ovario. Así mismo, se continuará con el análisis para identificar la presencia de dichos genes en cada uno de los tejidos a evaluar.

Asesor: Dr. Gilber Vela Gutierrez, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas

EMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA DE PAPAYA MARADOL Y CHILE

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EMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA DE PAPAYA MARADOL Y CHILE

Castellanos Montesinos Paola Lizethe, Instituto Tecnológico de Tuxtla Gutiérrez. Corona Rodríguez Aliric Guadalupe, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Gilber Vela Gutierrez, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La propagación de plantas, a través de la embriogénesis somática, representa el método más eficiente de multiplicación clonal de plantas que se ha desarrollado hasta la fecha, ha sido empleada como herramienta para la conservación y el mejoramiento genético de germoplasmas,  además, estos métodos son empleados para la conservación de plantas en peligro de extinción. Una de las características sobresalientes de los embriones somáticos es que surgen de células somáticas y por lo tanto presentan la potencialidad de producir duplicados de un genotipo específico.  Esta característica permite la propagación clonal, tanto en especies propagadas vegetativamente como semillas. Los individuos genéticamente modificados pueden ser multiplicados en forma segura y eficiente, evitando los riesgos de la incorporación de genes extraños meioticamente inestables en el resto del germoplasma. La mayor problemática que se presenta en este tipo de cultivos in vitro es la susceptibilidad a la contaminación de las muestras, además de que se requiere un largo periodo de tiempo para su desarrollo; se seleccionaron como materia de estudio los frutos de papaya maradol y chile, debido a que generalmente presentan déficit nutricional en campo y por ello infección vírica o fúngica. Durante el verano de investigación se estudia la serie de eventos que ocurren durante el proceso de embriogénesis somática y cómo solucionar las problemáticas antes mencionadas.

METODOLOGÍA

Se utilizaron frutos inmaduros de papaya Maradol y de chile. Los frutos se lavaron con agua y jabón, y se desinfectaron con una solución al 20% de cloro comercial, posteriormente se limpiaron con etanol al 96%. Las semillas de los frutos se extrajeron y seleccionaron, en condiciones de esterilidad, fueron colocadas en cajas petri estériles para su conservación. Previo a la inoculación, las semillas se desinfectaron con etanol al 96% durante 5 minutos, y con una solución de cloro comercial al 20% durante 20 minutos; posteriormente se realizaron varios lavados con agua destilada estéril. En condiciones de esterilidad se diseccionaron las semillas para obtener embriones; esto se efectuó con la ayuda de un microscopio estereoscópico. Los embriones se cultivaron en placas que contenían medio para inducción de embriogénesis (MEmb: medio fuerte en macro y micronutrientes, hierro, mio-inositol y vitaminas de Murashige y Skoog MS), suplementado con 0.4 g/L de glutamina, 1 mg/L de 2,4-D (2,4- ácido diclorofenoxiacético) 6% de sacarosa. Ajustado a un valor de pH de 5.8; finalmente se adicionaron 8g/L de agar-agar, se mantuvieron en la oscuridad a 26°C alrededor de 2 semanas. El callo embriogénico se forma a partir de los meristemos apicales y radiculares del embrión. Se observó la formación de los callos embriogénicos que portaban color amarillo, consistencia frágil y exudación de líquido claro y denso. Finalmente después de 3 semanas, se realizó la cuantificación de desarrollo de callo y crecimiento adecuado de los embriones de papaya maradol y semillas de chile, obteniendo los porcentajes correspondientes.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano científico se logró adquirir conocimientos teóricos de la embriogénesis somática y ponerlos en práctica con las técnicas de inoculación y cuantificación de crecimiento de embriones y semillas, sin embargo, al ser un extenso trabajo, aún se encuentra en la fase de desarrollo y no se pueden mostrar todos los datos y resultados finales. Hasta el momento se logró obtener los siguientes porcentajes de desarrollo de callos y crecimiento adecuado que fueron desarrollando los embriones de papaya, los cuales fueron 16% y 30% respectivamente; y por el lado de las semillas se notó un crecimiento del 40%.

Asesor: M.C. Lucero Montserrat Cuautle García, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

COMPOSICIóN DE MAMíFEROS MEDIANOS Y GRANDES EN SAN FRANCISCO HUILANGO, TOCHIMILCO.

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COMPOSICIóN DE MAMíFEROS MEDIANOS Y GRANDES EN SAN FRANCISCO HUILANGO, TOCHIMILCO.

Correa Martínez Nancy Araceli, Universidad de Guadalajara. Asesor: M.C. Lucero Montserrat Cuautle García, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

México ocupa el tercer lugar mundial en cuanto al número de especies de mamíferos y 13% de la diversidad mundial. Los mamíferos medianos y grandes juegan un papel importante en el, ecosistema regulan la presencia de plantas y dispersan semillas, influyen  en la dinámica de las comunidades vegetales; a su vez, estas especies son fuente básica de alimento de otros carnívoros, que al encontrarse en lo alto de la cadena alimenticia, suelen ser indicadores de la calidad de un ambiente.  Recientemente, se ha incrementado el conocimiento sobre la distribución de las especies en regiones que no habían sido inventariadas, aumentando así el número de especies. Ante la necesidad de conocer la diversidad biológica de regiones poco exploradas, resulta importante la realización de inventarios biológicos que proporcionen elementos para plantear, desarrollar y promover proyectos sobre la ecología de una especie o de una comunidad particular, y sobre el manejo y la conservación de los recursos naturales en una región. Actualmente los mamíferos medianos y grandes enfrentan serios problemas en su conservación, ya que son cazados por causar daño a los cultivos o al ganado, o bien, para ser consumidos como carne de monte de ahí la importancia de conocer las especies que habitan en lugares que no han sido explorados como la comunidad de San Francisco Huilango, municipio de Tochimilco.

METODOLOGÍA

El trabajo de campo se llevó a cabo durante el periodo del 1 al 5 de Julio de 2019, utilizando metodos de transectos en cuatro sitios de muestreo, con dos tipos de vegetacion. Ademas de la colocación de cámaras trampa, y la búsqueda de huellas, heces y otros rastros, mediante trampas olfativas. Se generó una base de datos de 15 campos en donde se integró información taxonómica, siguiendo la nomenclatura de Wilson y Reeder (2008), ecológica (tipo de vegetación), geográfica (localidad, coordenadas, elevación, paraje), y el tipo de registro (huella, rascadero, cráneos colectados, observación directa, heces, trampas tipo Tomahawk, y trampa cámara). Previo a la salida de campo se elaboró una guía de mamíferos potenciales en la zona a muestrear donde se incluyeron características generales de la familia, además del nombre comun, nombre cientifico y características morfológicas de cada especie.  Obtención de indicios de mamíferos  Transectos Se realizó un transecto en cada sitio, cada transecto de 200 metros de longitud, con un recorrido total de 1 km. Se realizaron recorridos diurnos alrededor de las 9 a.m. en cada sitio para la obtención de indicios de mamíferos. Los transectos se recorrieron a paso lento para la revisión de follaje y suelo, en busca de animales, huellas, heces y otros rastros en un área de 2 m a cada lado de la línea central del transecto. Los avistamientos que se realizaron desde la línea central del transecto se registraron anotando la distancia sobre el transecto a la que el animal fue detectado y el número de animales observados. Foto trampas Se colocaron dos estaciones de fototrampeo a lo largo del muestreo, a la altura de 1 m, cercanas a alguna trampa cebada con sardina, plátano, manzana o avena, al azar.  Trampas olfativas Se realizaron dos trampas olfativas por cada sitio con separación de 50 m en donde se colocaron dos tipos de cebo, plátano con manzana y sardina, los cuales se fueron cambiando al azar. Se elaboró trazando un círculo de 1 m de diámetro, se limpió el área dejándola libre de hojarasca y con una capa aproximada de 3 cm de tierra tamizada para una mejor impresión de las huellas, se colocó un cebo al azar en medio de cada trampa. Durante la revisión de las trampas se tomó en cuenta que estuvieran en operabilidad, considerando operable aquella trampa que se mantuvo en condiciones para el registro de huellas, desde el momento en que se instaló hasta el momento de la revisión y mantenimiento, se consideró como no operables aquellas trampas que se encontraran con la superficie destruida por viento, lluvia u otros factores. La operabilidad de las trampas se verificó dejando una marca reconocible en el sustrato, en este caso fue la huella de la mano del investigador, la permanencia de la marca se verificó en cada revisión. Las huellas encontradas en cada trampa fueron fotografiadas junto con algún objeto con medidas de 2 cm hasta  17.5 cm como referencia de tamaño, para su posterior identificación.  Trampas Tomahawk Fueron colocadas siete trampas de manera aleatoria sobre el transecto de las diferentes coberturas de vegetacion, colocando al interior de la trampa un cebo con sardina o plátano y manzana, los cuales se fueron cambiando al azar para aumentar el éxito de la captura.  Colecta de heces Para la colecta se tuvo cuidado de no desbaratarlas al momento de tomarlas, sobre todo aquellas con poca consistencia. Las excretas húmedas se colocaron en una bolsa de plástico tipo Ziploc para posteriormente secarlas y las excretas secas almacenarlas en bolsas de papel encerado, con todos los datos de colecta marcados en las bolsas con plumón permanente. Se identificaron siguiendo las guías de Aranda (2000) y Navaro & Muñoz (2000).  Otros rastros, como senderos, madrigueras, sitios de descanso, marcas en las plantas o en los troncos y señales de alimentación se registraron tomando fotografías colocando  algún objeto como referencia de tamaño, para su posterior identificación.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró  adquirir conocimientos teóricos sobre los mamíferos y sus hábitos, así como técnicas de muestreo indirecto mediante rastros, además de las técnicas directas como colocación de trampas Tomahawk y cámaras trampa, utilizadas en campo para cada grupo y con ello obtener un mayor éxito en el muestreo. Este proyecto representa el inicio de proyectos posteriores sobre la distribución y habitos de mamiferos.

Asesor: Dr. Roberto Guerra González, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

APLICACIóN DE BIOMATERIALES EN LA LIBERACIóN CONTROLADA DE FáRMACOS PARA LA ELIMINACIóN DE ESCHERICHIA COLI

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APLICACIóN DE BIOMATERIALES EN LA LIBERACIóN CONTROLADA DE FáRMACOS PARA LA ELIMINACIóN DE ESCHERICHIA COLI

Cortés Pomares Paola del Carmen, Universidad Veracruzana. González Colorado María de los Ángeles, Universidad Veracruzana. Guerra Reyes Andres, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Roberto Guerra González, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Desde hace algún tiempo se sabe que las bacterias desarrollan cierta resistencia a factores externos que amenazan su supervivencia, de ahí que hoy en día haya una gran variedad de bacterias que ya no se pueden eliminar tan fácilmente e incluso son resistentes a todos los antibióticos que se han formulado. Esta resistencia se debe en gran medida a que la población no lleva a cabo de manera adecuada el tratamiento recetado, además que anteriormente no se regulaba la venta de estos.  En un informe de la Organización Mundial de la Salud sobre la vigilancia de la resistencia a los antibióticos (2018), se reveló que los niveles de resistencia a algunas infecciones bacterianas graves son elevados tanto en los países de ingresos altos como en los de ingresos bajos, de aquí la importancia de desarrollar nuevos agentes antimicrobianos que inhiban el crecimiento de las bacterias.  Así, se estudiará la inhibición bacteriana con materiales dopados con diferentes fármacos (ya formulados anteriormente), como bactericidas de  Escherichia coli. Los materiales híbridos consisten en la asociación de un hidróxido doble laminar inorgánico, o compuestos tipo hidrotalcita, con moléculas orgánicas con actividad antibacterial, así como de diferentes materiales híbridos a partir de compuestos tipo hidrotalcita conteniendo especies orgánicas provenientes de los ácidos nalidíxico y pipemídico. La evaluación de la actividad antibacterial de estos materiales se realizó en cultivos de cepas de Escherichia coli, pues es una de las bacterias más mutagénicas. 

METODOLOGÍA

Los materiales puestos a prueba fueron previamente elaborados en otro estudio mediante diferentes métodos existentes: coprecipitación de los compuestos tipo hidrotalcita en presencia de la molécula de interés, o por el efecto memoria.  La evaluación de la actividad antibacterial de estos materiales se realizó en cultivos de cepas de Escherichia coli, las cuales fueron provistas por el Laboratorio de Salud Pública Estatal de Morelia.  En primer lugar, las bacterias se resembraron en caldo Soya Tripticaseína y después de 24 horas se sembraron en agar no selectivo Soya Tripticasa. Este proceso se llevó a cabo cuatro veces hasta que la bacteria mostró las características idóneas en cuanto a tamaño y morfología de colonia. Después de este proceso se resembraron en agar MacConkey (medio diferencial para enterobacterias); transcurridas las 24 horas se resembraron nuevamente en caldo Soya Tripticaseína, el cual se utilizó para realizar las diluciones. Se llevó a cabo una prueba por duplicado para cada material a evaluar, para las cuales se diluyó 0.5 ml de la bacteria en 10 ml de caldo nutritivo,  posteriormente se añadió 0.03 g de cada material en diferentes tubos de ensaye. Se realizaron siembras del contenido de los tubos en agar MacConkey con la técnica de estriado masivo a diferentes tiempos de haber añadido los materiales a las bacterias (minuto 0, 15, 30, 60, 90, 120, 150) y las placas se incubaron durante 24 horas. Transcurrido este tiempo se realizó el conteo de colonias para evaluar los resultados.

CONCLUSIONES

En el transcurso de la estancia de investigación se adquirieron conocimientos sobre materiales orgánicos e inorgánicos, los cuales generan en microorganismos patógenos un efecto bactericida o bacteriostático, con lo que se disminuyen o eliminan. Se aprendieron las técnicas para obtener un cultivo puro con bacterias como Escherichia coli, en el cual se probaron diferentes materiales para evaluar su actividad inhibitoria sobre esta bacteria.  En este momento nos encontramos en la etapa de interpretación de resultados por lo que se espera que los materiales probados (MgAI-NO3 ácido nalidixico y MgAI-NO3) presenten un eficaz efecto inhibitorio contra E. coli en las pruebas realizadas.   

Asesor: Dr. Jorge Ramírez Salcedo, Universidad Nacional Autónoma de México

FABRICACIóN, PROCESO Y ANáLISIS DE MICROARREGLOS DE DNA

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FABRICACIóN, PROCESO Y ANáLISIS DE MICROARREGLOS DE DNA

Cortez Orozco Soledad Guadalupe, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. García Bojórquez Paul Eyerik, Universidad Autónoma de Sinaloa. Nava Abrajan Juan, Universidad Autónoma de Guerrero. Saavedra Anaya Alexa Guadalupe, Universidad Autónoma de Guerrero. Sanchez Toledo Andy Jose, Instituto Tecnológico de Morelia. Villanazul Verdugo Marco Cesar, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Jorge Ramírez Salcedo, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los microarreglos de ADN consisten en una serie de sondas de ADN unidas a un soporte sólido en una disposición regular, surgen de la necesidad de analizar información procedente de los proyectos de secuenciación de genomas, facilitando el perfil genómico de miles de genes de forma paralela. La principal ventaja con respecto a las técnicas de biología molecular como la PCR es que pueden detectarse en un único procesamiento miles de genes,permitiendo medir simultáneamente la expresión de todos los genes de un genoma, o al menos de un parte considerable de este; Principalmente han sido utilizados en estudios de perfiles de expresión de microARN, números de copias de ADN, determinación de polimorfismo de nucleótido simple, interacciones de proteínas, farmacogenómica, enfermedades infecciosas y genéticas, cáncer, diagnóstico y toxicología. Durante la estancia se realizó la fabricación, proceso y análisis de microarreglos de DNA y su empleo para la detección simultánea de enteropatógenos.

METODOLOGÍA

Fabricación de microarreglos se utilizó la biblioteca genómica y elbrazo robótic para impresión de estos,con el empleo de laminillas Superepóxico-Arrayit.  El proceso de impresión implicó que el lugar en donde se encuentra el impresor debía estar limpio, aislado del polvo, control de la temperatura(20 a 22°C) y humedad relativa entre 50 y 55%. Se realizaron las pruebas de impresión correspondientes. Se trabajó con muestras pertenecientes a la unidad de microarreglos de ADN del Instituto de Fisiología - UNAM (FY833 vs sit4), realizando una electroforesis de ARN total para observar la integridad del ARNm y posteriormente seguir con el protocolo de marcado de ARN total de eucariontes. Marcado de ARNtotal se utilizó una reacción de síntesis enzimática de ADNc de cadena sencilla; para la purificación se empleó una columna Qiagen, se extrajo el ADNc-aminoalil con agua desionizada, para la incorporación de los colorantes, se mezcló con elADNc-aminoalil y se incubó a TA en la oscuridad durante 2 hrs, después serealizó la purificación del aacDNA marcado (Alexa-AcDNA). Se cuantificó la muestra en el espectrofotómetro y se almacenó  a -20 °C. La hibridización de microarreglos se llevó a cabo según el protocolo para hibridizar microaarreglosimpresos en Superepóxico-Arrayit. Se procedió a la obtención de imagen producida por la fluorescencia de los spots que fueron reconocidos por el ADNc marcado, utilizando el lector InnoScan 700 obteniendodos imágenes por separado, una imagen para cada uno de los fluoróforos, los mapas de bits fueron cuantificados; convertidos en valores numéricos y asociados a cada uno de los genes correspondientes, empleando el software Array - Pro, donde se construyó una retícula asociada a la base de datos del chip correspondiente y se determinó la intensidad de la señal del spot y del fondo alrededor del mismo. Para el análisis estadístico de datos se utilizó el software genArise, que contiene funciones para detectar genes que se expresan de manera significativa en diferentes condiciones de crecimiento. Se llevó a cabo el análisisbioinformático de genes sobreexpresados y sub expresados en la base de datos: Functional AnnotationTool, DAVID Bioinformatics Resources.  Microarreglos para detección y diagnóstico. PCR múltiplex - Identificación de micobacterias. Se preparó un master mix de 72ul (H2O, Buffer A 5x, dNTPs 10 mM, OMix 27/05/19, Robust taq). A 8 tubos se le colocó 9ul de este mix, se les agregó 1ul del DNA ATCC0.25 ng/ul de la mycobacteria (M. tuberculosis,M. bovis, M. avium, M. smegmatis,) correspondientedel tubo 1 al 7, al tubo 8 se le  colocó 1ul de H2O(blanco), se llevaron al termociclador  1 ciclo de desnaturalización 94ºC por 5 min,  30 ciclos de amplificación de 94ºC 15 seg, de 62ºC por 30 seg, de 72ºC por 60 seg, y un ciclo de amplificación final de 72º C durante 5 min. Se realizó la electroforesis en gel de agarosa a partir del producto multiplex de PCR poniendo en evidencia las bandas correspondientes a las diferentes cepas de Mycobacterias. PCR múltiplex - Identificación de enteropatógenos (laminillas Greiner: SENASICA V3-09-25). Se preparó un master mix(H2O, Buffer 5X, dNTPs Cy5, O MIX 200, DNA Dhansenll, Taq Robust); en cada tubo se colocaron 4 ul del master mix; y finalmente a cada uno de los tubos (24 tubos) se les agregó el DNA del enteropatógeno (Lmonocytogenes, B cereus, C freundii, C Jejuni, Yenterocolítica, S aureus, V cholerae, y distintos serotipos de E Coli.) correspondiente. Se llevó al termociclador: ciclos continuos 95º C por 5 minutos, 95º C por 10 seg, 30 ciclos de 20 seg a 60º C, 72º C por 20 seg y finalmente 72º C por 5 min, estos se incubaron durante toda la noche. Al día siguiente, se realizó el protocolo para hibridizar microarreglos laminillas Greiner consistiendo en un pretratamiento del microarreglo, posteriormente un tratamiento y lavados, se procedió a la lectura del microarreglo en el lector  en el cual se determinó la presencia de los enteropatógenos. 

CONCLUSIONES

Los microarreglos de ADN son dispositivos capaces de medir el nivel de expresión génica de manera paralela, en la mayoría de estos experimentos, los ácidos nucleicos a utilizarse son de ARNm del organismo de estudio, ya que este está involucrado en la producción proteíca y, por tanto, mide la expresión del gen, cuantificando de forma relativa la abundancia de moléculas adheridas. Los conocimientos teóricos son reforzados en la práctica, misma que se realizó, analizando e interpretando experimentos de expresión y diagnóstico de agentes enteropatógenos en alimentos, siendo una herramienta útil en la industria alimentaria, también, se realizaron experimentos que propiciaran la detección de micobacterias. A pesar deque los microarreglos representan una técnica de gran importancia en investigación, ésta va acompaña de una serie de técnicas, procesos y/o protocolos, para explotar al máximo los resultados obtenidos.

Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

EVALUACIóN DEL CRECIMIENTO DE PLEUROTUS OSTREATUS EN RESIDUOS DE AGUACATE, COLIFLOR Y NARANJA POR FERMENTACIóN EN ESTADO SóLIDO

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EVALUACIóN DEL CRECIMIENTO DE PLEUROTUS OSTREATUS EN RESIDUOS DE AGUACATE, COLIFLOR Y NARANJA POR FERMENTACIóN EN ESTADO SóLIDO

Cortez Villaseñor Juan Rodolfo, Instituto Tecnológico de Morelia. Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Derivado de procesos de producción y comercialización de los alimentos se generan en abundancia residuos orgánicos de valor perdido, entre ellos cáscaras y hojas que poseen nutrientes potencialmente aprovechables. Alimentos como la naranja, coliflor y aguacate forman parte de la dieta diaria de los mexicanos, en consecuencia, sus producciones ascienden a 7.46 millones, 200 mil y 600 mil toneladas respectivamente, esto según la SAGARPA en México, mismo que se traduce en un volumen importante de residuos. Los procesos biotecnológicos vienen a rescatar esos residuos transformándolos en algún otro producto de valor agregado, evitando así la perdida de nutrientes o que incluso los residuos causen un problema al ambiente. En este contexto la fermentación en estado sólido (SSF por sus siglas en inglés) se presenta como una oportunidad viable de aprovechamiento de residuos a través del proceso de crecimiento de microorganismos de interés, tal como lo es el hongo Pleurotus ostreatus. Justificado en lo anterior, se pretendió evaluar el crecimiento del hongo P. ostreatus en residuos provenientes de naranja, coliflor y aguacate, por medio de la fermentación en estado sólido utilizando como parámetros el porcentaje de invasión y la eficiencia biológica en la producción de setas.

METODOLOGÍA

Se realizó el aislamiento de la cepa de Pleurotus ostreatus mediante la extracción de micelio obtenido a partir de una seta, mismo que fue inoculado en dos tipos de medio de cultivo. Para el primero se usó medio PDA y para el segundo se utilizó una mezcla compuesta por: 27.4% agar bacteriológico, 24.2 % sacarosa (azúcar) y 48.4% harina de trigo integral; usándose este ultimo medio como medio de cultivo principal. Para la incubación se manejó una temperatura de 28-30 °C en un ambiente sin luz. Al mismo tiempo se recolectaron cáscaras de aguacate, cáscaras de naranja y hojas de coliflor, los cuales fueron lavados y sanitizados con agua y cloro comercial (5.5%) para posteriormente secar en una estufa de 2 a 4 días a una temperatura de 60 °C. Para evaluar el crecimiento del hongo se planearon realizar dos experimentos a pequeña y mediana escala. A pequeña escala se pesaron muestras de los tres diferentes residuos, así como también de un control con granos de trigo cocidos, una vez pesados fueron esterilizados en calor húmedo e inoculados con 1 cm2 de agar de medio de cultivo que contenía el micelio del hongo P. ostreatus. Para el experimento a mediana escala se propone probar tres tratamientos con aproximadamente 5 kilos de sustrato elaborado con cada tipo de residuo, el cual se colocará en bolsas de polietileno negras y pasteurizado de 80 a 100 °C para eliminar cualquier posible contaminación. Cada tratamiento se inoculará con micelio madre, el cual se multiplica en granos de trigo cocido y esterilizado con calor húmedo.

CONCLUSIONES

Por medio de la estancia de investigación se consiguió aprender conocimientos teórico prácticos acerca de las buenas prácticas de laboratorio, el uso de plantas y el manejo de microorganismos, trasladando dichos conocimientos a un proyecto integrador que se realizó durante siete semanas obteniéndose diversos resultados. Derivado de la experimentación se pudo notar que el medio elaborado a partir de agar bacteriológico demostró un crecimiento superior a la hora de reproducir el micelio del hongo comparado con el crecimiento en el medio PDA, lo cual lo hace un buen medio de cultivo para obtener cepas de Pleurotus ostreatus. Actualmente están en proceso los experimentos para determinar que sustrato invade más rápidamente el micelio y que por ende presente una mayor eficiencia biológica, con lo que permita determinar si los residuos de naranja, aguacate y coliflor funcionan como un buen sustrato en el crecimiento de Pleurotus ostreatus.

Asesor: Dr. David Morales Morales, Universidad Nacional Autónoma de México

SíNTESIS Y CARACTERIZACIóN DE COMPLEJOS DEL TIPO [PT(η2-N,N’-1,10-FENANTROLINA)(SAR)2].

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SíNTESIS Y CARACTERIZACIóN DE COMPLEJOS DEL TIPO [PT(η2-N,N’-1,10-FENANTROLINA)(SAR)2].

Coss y León Preciado Anaid Ameyalli, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. David Morales Morales, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El cisplatino es un compuesto de coordinación ampliamente conocido por su actividad antitumoral, actualmente es el más utilizado para tratamiento de cáncer. Sin embargo, este medicamento presenta algunos efectos secundarios que se relacionan con su modo de acción, el cual se basa en la coordinación del Pt al ADN. [1],[2] Por lo cual, se ha buscado diseñar nuevos complejos de Pt(II) con un modo de acción distinto a la del cisplatino, que presenten una mayor actividad anticancerígena y con menos efectos secundarios.[3] Esto se ha logrado al introducir ligantes heterocíclicos rígidos como la 1,10-fenantrolina, ya que promueven la intercalación de los complejos con el ADN mediante interacciones no covalentes particularmente del tipo π-π.[4] Por otro lado, los compuestos arílicos fluorados y clorados han sido ampliamente utilizados para el diseño de estructuras supramoleculares, ya que facilitan las interacciones del tipo π-π, por lo que su incorporación en un compuesto que contenga un fragmento poliaromático como la 1,10-fenantrolina puede resultar de gran interés desde el punto de vista supramolecular y medicinal. Con base en lo anterior, el objetivo general de este trabajo consiste en la síntesis y estudio estructural de una serie de complejos del tipo [Pt(η2-N,N’-1,10-fenantrolina)(SAr)2] y su evaluación citotóxica en las lineas celulares cancerosas de mayor incidencia en México. Este objetivo puede dividirse en los siguientes: 1. Sintetizar una serie de complejos de Pt(II) usando como ligantes 1,10-fenantrolina y diferentes bencentiolatos. 2. Caracterizar los compuestos con fórmula general [Pt(η2-N,N’-1,10-fenantrolina)(SAr)2] mediante RMN de 1H, 13C{1H} y 19F{13C}, espectroscopía de masas, análisis elemental. Cuando sea posible se elucidara su estructura molecular mediante difraccion de rayos X de monocristal. 3. Evaluar la actividad citotóxica y el IC50 de los complejos de Pt(II) frente a las diferentes líneas celulares cancerosas. Referencias [1] G. Natile, L. G. Marzilli, Coord. Chem. Rev. 2006, 250, 1315-1331. [2] V. X. Jin, J. D. Ranford, Inorg. Chim. Acta, 2000, 304, 38-44. [3] A. Erxleben, Chimia (Aarau) 2017, 71, 102-111. [4] D. Jaramillo, D. P. Buck, J. G. Collins, R. R. Fenton, F. H. Stootman, N. J. Wheate, J. R. Aldrich-Wright, Eur. J. Inorg. Chem. 2006, 839-849.  

METODOLOGÍA

Todos los reactivos y disolventes fueron adquiridos de Sigma-Aldrich® y usados como se recibieron. Los reactivos [Pt(η2-N,N’-1,10-fenantrolina)(Cl)2], [Pb(SC6F5)2], [Pb(SC6H4F-4)2], [Pb(SC6H3Cl2-2,3)2], [Pb(SC6H3Cl2-3)2] fueron preparados siguiendo los procedimientos descritos en la literatura.[1] Para la determinación de la masa se utilizó una balanza analítica modelo Explorer PRO, marca OHAUS, lectura mínima de 0.1 mg. Los experimentos de RMN se hicieron en un equipo VARIAN, Unity Inova de 500 MHz. Los disolventes empleados fueron DMSO-d6 y CDCl3 los cuales contenían TMS como estándar primario, obtenidos de Cambridge Isotopos Inc. La espectrometría de masas por la técnica IE fue realizada en un espectrómetro de masas Jeol, marca SX 102 A. Para la espectrometría de masa obtenida mediante la técnica MALDI-TOF se utilizó un equipo Flex-PC de tipo microflex. El análisis elemental se obtuvo mediante la técnica de calcinación utilizando un analizador elemental, marca Thermo Scientific, modelo Flash 2000 con temperatura de horno de 950 °C y una microbalanza, marca Mettler Toledo, modelo XP6. Los análisis cristalográficos fueron obtenidos mediante la técnica de difracción de rayos X de monocristal con un equipo Bruker Smart Apex II y fueron analizamos mediante los programas Mercury 4.1 y Olex2-1.2. Síntesis general de los compuestos del tipo [Pt(η2-N,N’-1,10-fenantrolina)(SAr)2] El compuesto [Pt(η2-N,N’-1,10-fenantrolina)(Cl)2] (1 eq.) se disuelve en una mezcla acetona/1,2 dicloroetano a 50°C. A esta disolución se le agregó la sal de plomo deseada [Pb(SC6F5)2], [Pb(SC6H4F-4)2], [Pb(SC6H3Cl2-2,3)2] o [Pb(SC6H3Cl2-3)2] (1 eq.). La mezcla de reacción fue calentada a reflujo durante 24 h. Pasado este tiempo se filtró el [PbCl2] resultante sobre Celita y se removieron todos los compuestos volátiles al alto vacío, obteniendo los productos correspondientes. En todos los casos los rendimientos fueron cuantitativos. Se obtuvieron cristales adecuados para su estudio por difracción de rayos X de monocristal, mediante difusión lenta de hexano en una disolución de acetona/1,2-dicloetano del compuesto deseado. Referencias [1]. a) P. Umapathy, A. Harnesswala, Polyhedron, 1982, 2, 129-136. b) M.E. Peach, Can. J. Chem., 1968, 46, 2699-2706.  

CONCLUSIONES

Se logró la síntesis de los compuestos del tipo [Pt(1,10-fenantrolina)(SAr)2]a través de una reacción de metátesis de ligante. Dichos compuestos se obtuvieron con rendimientos cuantitativos, los cuales son estables bajo las condiciones ambientales. Fueron caracterizados mediante RMN de (1H) y 19F{1H},  espectroscopía infrarrojo (FT-IR), espectrometría de masas y difracción de rayos X de monocristal. Actualmente se esta evaluando la actividad citotóxica de todos los compuestos en las líneas celulares de cáncer de mayor incidencia en México, como cáncer de mama, pulmón, colon, glía del sistema nervioso central, próstata.  

Asesor: Dr. Carlos Alberto Gómez Aldapa, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo

FORMULACIóN Y CARACTERIZACIóN PARCIAL DE UNA PELíCULA ACTIVA DE ALMIDóN DE PAPA CON EXTRACTO ACETóNICO DE HIBISCUS SABDARIFFA

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FORMULACIóN Y CARACTERIZACIóN PARCIAL DE UNA PELíCULA ACTIVA DE ALMIDóN DE PAPA CON EXTRACTO ACETóNICO DE HIBISCUS SABDARIFFA

Covarrubias Rivera Leonardo, Instituto Tecnológico de Tepic. Asesor: Dr. Carlos Alberto Gómez Aldapa, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los problemas de contaminación ambiental son generados por polímeros sintéticos derivados del petróleo o plásticos, estos plásticos son  utilizados en empaques para alimentos. Ante esta problemática, se han realizado investigaciones  enfocadas en  el uso de materiales biodegradables como componentes en la formulación de películas y recubrimientos. Para tener las características y funciones  similares a los sintéticos utilizados en el empacado de alimentos, así como  protección contra daños mecánicos, físicos, químicos e  incluso con efecto activo ante bacterias. De esta manera,  se tiene una alternativa de remplazo para la reducción de empaques plásticos convencionales como polietileno y poliestireno. Como parte de la innovación de películas, se han adicionado compuestos antioxidantes y antimicrobianos extraídos de fuentes naturales, como los cálices de jamaica (Hibiscus sabdariffa). Con lo anterior se tiene como objetivo en presente trabajo la elaboración películas activas a partir de almidón de papa, adicionada con extracto acetónico de  Hibiscus sabdariffa.  

METODOLOGÍA

 Obtención del extracto de Hibiscus sabdariffa  Los cálices de Hibiscus sabdariffa  fueron  donados por el laboratorio de fisicoquímica de alimentos I de  la Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo. Para la extracción, se pesaron 600 g de  cálices de Hibiscus sabdariffa y se maceraron en  bidón con acetona por un lapso de 7 días. Al término de este tiempo, la solución se filtró y se llevó a un rotavapor (BÜCHI, controlador de vacío, V-800) para su concentración, posteriormente  el  concentrado se sometió a un secado final a una temperatura de 50°C por 48 h para la evaporación final de los disolventes.  Elaboración de la película La preparación de las películas consistieron en una formulación con el 4% de almidón de papa, 2% de glicerol y 100 mL de agua. El almidón de papa fue donado por el laboratorio de fisicoquímica de alimentos I de  la Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo. La  solución se sometió a un calentamiento de 25°C hasta los 90°C durante 10 min, con una agitación constante. Al finalizar este tiempo la solución filmogenica se esperó a que estuviera a 45 °C y se adiciono el extracto acetónico a diferentes concentraciones (7mg/mL y 10mg/mL). La solución se vertió en placas de vidrio (28.5 cm x 22 cm de longitud y anchura, respectivamente, con un espesor de 17 mm aproximadamente). Se llevaron a un secado a 40°C durante 24 h. Después, se desprendieron de las placas y se conservaron en empaques herméticos  a 25°C hasta su utilización.  Solubilidad de la película en agua Se cortaron muestras de 2 cm x 2 cm y se almacenaron por 15 días en un desecador (aproximadamente 0% de HR), al término de este periodo las muestras se pesaron y se colocaron en tubos de cónicos de plásticos  con 40 mL de agua desionizada. Las muestras se mantuvieron con agitación constante durante 2h a 25°C. Las muestras se llevaron a un secado a 60°C por 5 h.  El porcentaje del material total soluble se calculó como sigue: Solubilidad (%)= ((Peso seco inicial-Peso seco final)/Peso seco inicial)*100 Medición del espesor de la película El espesor de las películas se evaluó con un micrómetro manual (Mitutoyo Co., Kobe, Japón), realizando mediciones  en 5 posiciones aleatorias de la película. Propiedades mecánicas  El equipo utilizado fue un texturometro (TA.XT plus, Texture Ancityser), para ello, se cortaron muestras de las películas  de 10 cm de largo y 1 cm de ancho, manteniéndolo por 72 h en un desecador con una solución saturada de NaBr (57% HR), para su acondicionamiento. La medición de cada una de las películas consistió en colocar cada muestra de película a una distancia de 6 cm de distancia entre los extremos del texturometro, la velocidad de formación fue de 24 mm/min.  Actividad antimicrobiana de películas  Se utilizó la técnica de difusión en agar, para este  ensayo.  Se utilizaron 100 μL de cultivo de Listeria monocytogenes  y Escherichia coli de una concentración (aproximada  de 1 × 10 6  CFU / mL) el inoculo se extendieron sobre la superficie del agar usando un esparcidor de vidrio y dejando que el inoculo se absorbiera uniformen te, luego se cortaron discos de películas con la utilización de una perforadora  y se colocó directamente sobre las placas de agar inoculados, esperando a que las películas se absorbieran completamente en el agar.  Las placas de agar se sellaron y se llevaron a una incubación a 37 ° C. por 24 h. se midieron los diámetros de las zonas de inhibición, al término de este periodo,  con la utilización de un micrómetro manual (Mitutoyo, Japón).

CONCLUSIONES

Como parte de mi estancia realizada en el verano de investigación delfín, logre obtener una película activa, elaborada con almidón de papa adicionada con extracto acetónico de Hibiscus sabdariffa en diferentes concentraciones (0, 7, 10 y 15 mg/mL). En la cual, mediante las pruebas mecánicas y antimicrobianas, se observó un efecto con la adición del extracto acetónico, permitiendo tener una mejora en la tensión a la fractura así como el porcentaje de elongación, que permitió que las películas fueran menos quebradizas y más flexibles, así como, un mayor efecto antimicrobiano ante las bacterias de L. monocytogenes y E. coli utilizadas.  Es por ello que el almidón de papa utilizado en la elaboración de películas activas adicionadas con extracto acetónico, puede ser considerado como un material de empaque para su posterior uso en la industria de los alimentos.

Asesor: Dr. Pindaro Diaz Jaimes, Instituto de Ciencias del Mar y Limnología (UNAM)

DIVERSIDAD GENéTICA DEL TIBURóN MARTILLO SPHYRNA LEWINI EN EL GOLFO DE MéXICO MEDIANTE EL USO DE MICROSATéLITES.

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DIVERSIDAD GENéTICA DEL TIBURóN MARTILLO SPHYRNA LEWINI EN EL GOLFO DE MéXICO MEDIANTE EL USO DE MICROSATéLITES.

Crespo Valdez Soraya Jazmines, Universidad Autónoma de Baja California Sur. Ruiz Flores Sara Isabel, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Pindaro Diaz Jaimes, Instituto de Ciencias del Mar y Limnología (UNAM)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Sphyrna lewini es un tiburón que presenta una distribución global que es posible encontrar tanto en ambientes costeros como pelágicos. A diferencia de la mayoría de los peces teleósteos, estos son vivíparos, produciendo pequeños números de neonatos altamente desarrollados que son capaces de nadar y navegar poco después del parto, sin embargo durante cierto tiempo suelen mantenerse cerca de la madre en zonas específicas como estuarios o pequeñas bahías que son utilizadas como áreas de crianza (Branstetter, S. 1990; Holland, et al., 1993; Carrier, et al., 2004; Engel, et al., 2012). Gracias a esto, es importante realizar estrategias de conservación de las zonas de crianza. Se tiene conocimiento de que las hembras del tiburón martillo muestran filopatría a sitios como litorales, archipiélagos, o áreas de viveros (Engel, et al., 2012).  Cabe mencionar que dentro de los estudios relacionados a la genética de poblaciones, para determinar si existe filopatría se hace el uso de marcadores nucleares y mitocondriales (microsatélites y  ADN mitocondrial). Proporcionando información biparental e información concisa de herencia materna respectivamente (Avise, 2009; Castillo-Olguín, et al., 2011). En diversos artículos se concluye que la zona del Golfo de México es aquella con mayor diferenciación de todas las zonas estudiadas, por lo que se sugiere estudiar las subpoblaciones de esta misma (Duncan, 2006; Nance, 2011; Engel, et al., 2012). En dichos estudios se utiliza como marcador el ADN mitocondrial comparando el área del Golfo con otras zonas, como el océano Pacífico, pero no se ha estudiado esta región a nivel local. Es por ello que, en este trabajo, se evalúa la diversidad específica de las poblaciones del Golfo de México usando marcadores nucleares.  

METODOLOGÍA

Extracción de DNA Se trabajó con 32 muestras de tres poblaciones diferentes, Tabasco, Tamaulipas y Campeche, colectadas en los años 2013, 2018 y 2019 respectivamente, correspondiendo un número de muestra de 17 individuos de Tabasco, 6 de Tamaulipas y 9 de Campeche. Estos tejidos fueron conservados en etanol al 70% a temperatura ambiente. Las muestras de todas las localidades fueron extraídas con el método de fenol-cloroformo de Sambrok 1989, para ello se llevaron a cabo lavados con fenol, cloroformo, y cloroformo: alcohol isoamílico, a una proporción 25:24:1, para al final quedar en una proporción 1:1 entre la muestra y el PCI (fenol: cloroformo: alcohol isoamílico). Al final se hace un último lavado añadiendo 200 μL de fase acuosa, 20 μLde NaCl (0.04X 5M) y 1 mL de etanol absoluto. Por último se añadieron 200 μL de etanol al 70% para volver a centrifugar; una vez evaporado el etanol en la centrífuga al vacío se resuspendió el pellet en 30 μL de TE y se conservó a 4°C. Cuantificación y estandarización La cuantificación se llevó a cabo por medio de espectrofotometría de rayos ultravioleta, en nanodrop 2000; de este modo se evaluó la pureza de las muestras y con esa información se hicieron los cálculos con la fórmula V1C1=V2C2 para normalizar todas las muestras a una concentración  final de 20 ng/μL en un volumen final de 5 μL. Amplificación y secuenciación de microsatélites Se eligieron cuatro loci de genoma nuclear (Sle 027, Sle 028, Sle 038 y Sle 045), tomados como referencia del estudio realizado por Nance en el 2011, para todas nuestras poblaciones, los cuales se amplificaron con el Kit Type-it Microsatellite PCR Kit de Qiagen, en un volumen final de 5 μL. El programa de PCR utilizado se inició con una etapa de desnaturalización inicial de 5 minutos a 95°C, continuó con un ciclo de 27 repeticiones de una etapa de desnaturalización de 30 segundos a 95°C, hibridación durante 1:50 minutos a 60°C y elongación por 30 segundos a 70°C, por último finalizó con una etapa de elongación final de 30 minutos a 60°C. Se utilizó un primer mix al 2% con cebadores fluorocromados sintetizados por la empresa Applied Biosystem, cada locus fue marcado con un color diferente, de manera que se permita la lectura posterior para la genotipificación. La secuenciación fue llevada a cabo en el Laboratorio de Secuenciación Genómica de la Biodiversidad y de la Salud del Instituto de Biología de la UNAM, a cargo de la Dra. Laura Margarita Márquez Valdemar.       Análisis de datos La genotipificación de las muestras, así como la determinación de los alelos de cada loci fue llevada a cabo en el programa GenMapper v5.0. Los análisis de frecuencias alélicas y genotípicas, la prueba de Hardy Weinberg y las pruebas de diferenciación genética fueron realizadas con los programas Genepop version 4.2 y Arlequín versión 3.5.5 para así poder hacer una comparación entre los resultados de ambos programas. En ambos programas se utilizó una significancia del 0.05.

CONCLUSIONES

El análisis de datos arrojó los siguientes resultados: La población con menor heterocigosidad fue Tamaulipas con un Ht de 0.333, igualmente, la mayor heterocis se mostró en ésta misma población en un loci distinto, al igual que en Tabasco, con un Ht de 1.000. Una vez realizada la prueba de X2 se encontró que el único valor de P siendo menor a la significancia tomada, fue en Tabasco, en el loci 0.045, con el valor de P de 0.00989. Sin embargo, no se toma como un hecho significativo, ya que solo se presenta en un único loci del total de sus poblaciones. De acuerdo con los resultados anteriores todas las poblaciones se encontraron en equilibrio Hardy Weinberg, lo que denota que no ha habido cambios en las frecuencias génicas y genotípicas, además se encontró que no existe diferenciación estadísticamente significativa entre las localidades, demostrando un resultado similar al estudio realizado por Engel et al., en el 2012, donde se muestra que la zona del Golfo de México se comporta como una única población homogénea. Sin embargo, estos resultados deben tomarse con discreción ya que pudieron existir sesgos debido al bajo número de muestras y  loci analizados y de que el tamaño de la muestra de las localidades no es homogéneo.

Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

SíNTESIS DE PIRROLES A PARTIR DE 2,5 - HEXANODIONA Y AMINAS ALIFáTICAS SIGUIENDO LOS PARáMETROS DE LA QUíMICA VERDE.

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SíNTESIS DE PIRROLES A PARTIR DE 2,5 - HEXANODIONA Y AMINAS ALIFáTICAS SIGUIENDO LOS PARáMETROS DE LA QUíMICA VERDE.

Cruz Angeles Samanta Estefanía, Tecnológico de Estudios Superiores de Jocotitlán. Asesor: Dr. Armando Ariza Castolo, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La innovación en la síntesis de compuestos químicos tiene un amplio auge en la actualidad, siendo imprescindible el considerar dentro de esta el cuidado del medio ambiente. El mantener una relación estrecha de la química sustentable (química verde) con la constante mejora en los procesos químicos constituye un reto para la comunidad científica. Debido a esto, se han desarrollado diversos métodos y técnicas cuyas consideraciones son amigables con el entorno.  Dentro de los objetivos planteados en la realización de este proyecto, se consideró el mantener las metodologías para lograr las metas planteadas siguiendo los principios de la química verde, buscando seguir una ruta sintética que evite la creación de residuos, así como el uso de disolventes y condiciones seguras de reacción. La identificación y la asignación de las moléculas obtenidas en cada uno de los pasos del proyecto, se realizó mediante la interpretación de los espectros de Resonancia Magnética Nuclear (RMN) que se obtuvieron en los equipos de RMN del Cinvestav. (Jeol ECA-500)

METODOLOGÍA

El proyecto realizado se puede dividir en la síntesis y reducción de los productos obtenidos en la síntesis 1 y 2. A continuación, se describirán brevemente la respectiva metodología. Síntesis 1: La primera reacción consistió en la síntesis de una base de Schiff a partir de la 2,5 - hexanodiona (Acetonilacetona) y de la α-Metilbencilamina (R/S). Se mezclaron los reactivos en una relación 1:2 manteniéndolos a temperatura y presión del laboratorio; después, de agitar durante treinta minutos, fue filtrado sobre sulfato de sodio anhidro. Se secó y determinó su rendimiento. El análisis de los espectros RMN de 1H y 13C mostro evidencia de que la síntesis había sido parcial, debido a que se apreciaba la presencia de los reactivos. También se encontraron señales que evidenciaban la existencia de un producto, sin embargo, este no era la base de Schiff propuesta inicialmente. Se pudo demostrar que el producto mayoritario era el 2,5-dimetil-1(1- feniletil)-1H-pirrol (C14H17N). Síntesis 2: Se realizó la misma metodología que en la síntesis 1, sin embargo, se agregaron los reactivos con un pequeño exceso de acetonilacetona en condiciones del laboratorio. Se mantuvo en condiciones estándar de presión y temperatura. Así mismo, se mantuvo en agitación constante por 22 horas y se obtuvo un rendimiento del 81.91%. Los espectros de RMN de 1H y 13C mostraron evidencia del 2,5-dimetil-1(1- feniletil)-1H-pirrol, de igual forma se encontraban señales de un producto secundario en menor proporción respecto al pirrol. El producto secundario se sospecha que es el intermediario en la formación del pirrol. Dentro del equilibrio tautomérico se encontraba con mayor estabilidad la formación de una imina-enamina. Sin embargo, en el espectro que se obtuvo de la muestra dos días después, se evidenció la presencia del pirrol mientras que las señales de la imina-enamina no se pudieron observar. Ambos espectros daban evidencia de presencia de los reactivos.   Reducción 1: Se intentó realizar la reducción del producto obtenido en la síntesis 2 con NaBH4 y con LiAlH4 obteniendo de acuerdo con los espectros de RMN, 2,5-dimetil-1-(1-feniletil)-1H-pirrol, como único producto. Síntesis 3: Los resultados obtenidos en las síntesis 1 y 2, así como la purificación [jq5] del pirrol obtenido al ser sometido al proceso de reducción, dieron pauta a considerar la posibilidad de sintetizar pirroles con más de un solo tipo de amina, debido a esto se optó por cambiar de reactivo y proporción para la realización de la síntesis 3. Para este experimento se consideraron como reactivos a la 2,5 - hexanodiona y la feniletilamina en una proporción 1:1 mmol. En un vial previamente pesado y etiquetado se agregaron cantidades estequiométricas de 2,5-hexanodiona y feniletilamina. La mezcla de reacción se dejó en agitación durante 22 horas. Se analizó el productor por RMN. Dentro de las observaciones que se pudieron realizar en el espectro de RMN de 13C y 1H se pudo comprobar que se obtuvo únicamente 2,5-dimetil-1-(3-fenilpropil)1H-pirrol (C15H19N).

CONCLUSIONES

Debido al equilibrio tautomérico imina-enamina es posible realizar el ataque nucleofílico intramolecular del par de electrones no compartido del nitrógeno con el carbonilo produciendo el pirrol correspondiente. Utilizando química verde se logró obtener mejores rendimientos que los previamente reportados, utilizando catalizadores, altas temperaturas y disolventes. La identificación de los productos está de acuerdo con reportes previos (SM Pridmore, et. al., Tetrahedron, 2009;65:8981).

Asesor: Dr. Itzel López Rosas, Colegio de Postgraduados

CLONACIóN DEL GEN HYMENOPTAECINA DE APIS MELLIFERA

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CLONACIóN DEL GEN HYMENOPTAECINA DE APIS MELLIFERA

Cruz Bautista Yahaira Alejandra, Consejo Quintanarroense de Ciencia y Tecnología. Asesor: Dr. Itzel López Rosas, Colegio de Postgraduados

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La producción de miel en la península de Yucatán es transcendental siendo uno de los principales productores de miel en México; sin embargo, los apicultores se han tenido que enfrentar a varias problemáticas, una de las más importantes son las enfermedades por microorganismos patógenos, como lo son Nosemosis, Loque americana, Varroosis, entre otras. Una de las principales enfermedades a nivel mundial es la Nosemosis, causada por Nosema apis. De la misma manera se ha visto un descenso de la población de abejas por diversos factores, como lo es el uso indeterminado de pesticidas o agroquímicos, así como el aumento de la temperatura ambiental y las enfermedades, como ya se ha mencionado anteriormente. Por consiguiente, algunos tratamientos para acabar con estas enfermedades parásitas son demasiado invasivos, como la quema de colmenas completas, o inclusive algunos medicamentos suelen contaminar los productos derivados de la colmena restándoles inocuidad. Es por eso que esta línea de investigación busca implementar la manera de utilizar péptidos antimicrobianos propios de la abeja melífera mediante el usos de un sistema heterólogo de producción de péptidos recombinantes. En este proyecto se contribuirá con la clonación del péptido hymenoptaecina de Apis mellifera, para su posterior caracterización funcional.

METODOLOGÍA

El proyecto se llevó a cabo en el laboratorio de Biología Molecular y Genómica Funcional del Colegio de Postgraduados, campus Campeche en el área de proteómica. Como primer punto se hizo la colecta de ejemplares de Apis mellifera en el apiario del colegio la cuales fueron empleadas para la trituración de los ejemplares con nitrógeno líquido con el fin de extraer ADN genómico y ARN total. Del ARN extraído se prosiguió a sintetizar cDNA a través de la RT- PCR. Una vez sintetizado el cDNA se realizó la amplificación del gen AmHym con la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) a una TM de 54 °C. Se analizó la amplificaicón del gen en geles de agarosa al 2 % y teñidos con BrEt. Posteriormente se procedió a purificar los amplicones con un kit purificación de ADN en gel. Los productos purificados se clonaron en el plásmido pJET2.1. EL producto de ligación AmHym-pJET se transformaron en bacterias Escherichia coli competentes mediante la técnica de choque térmico, inmediatamente se sembraron en medio LB agar con ampicilina (Amp) y se dejaron crecer 12h a 37C. Después  se realizó un análisis de  las clonas positivas por PCR de colonia para seleccionar algunas de ellas. De las colonias seleccionadas se realizó la extracción de ADN plasmídico por lisis alcalina. Los plásmidos obtenidos se analizaron por restricción enzimática y electroforesis. Los insertos correspondiente a AmHym se liberaron del vector de clonación y se subclonaron en el vector de expresión pQE80L para a futuro realizar para la sobreexpresión del péptido recombinante Hym  E. coli M15.

CONCLUSIONES

Una vez obtenidas las clonaciones  de manera exitosa se mandaran a secuenciar para verificar que se tienen en  marco de lectura abierto  que se pueda realizar a futuro el ensayo de expresión del péptido recombinante hymenoptaecina. La obtención del péptido permitirá hacer análisis se funcionalidad in vitro mediante ensayos de inhibición de crecimiento de bacteria y/o hongos.  Este proyecto suma a tener el mayor número de péptidos antimicrobianos de abejas que más adelante se propone puedan ser empleados para el tratamiento y/o control de enfermedades, como una nueva alternativa para combatir las enfermedades de microorganismo patógenos de las abejas.

Asesor: Dr. Genaro Diarte Plata, Instituto Politécnico Nacional

CARACTERIZACIÓN PARCIAL DE BACTERIAS EN LA MEDUSA BOLA DE CAÑÓN STOMOLOPHUS MELEAGRIS

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CARACTERIZACIÓN PARCIAL DE BACTERIAS EN LA MEDUSA BOLA DE CAÑÓN STOMOLOPHUS MELEAGRIS

Cruz Cervantes Anyela Maria, Universidad Autónoma de Occidente. Asesor: Dr. Genaro Diarte Plata, Instituto Politécnico Nacional

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las medusas son animales planctónicos, Se alimentan de animales microscópicos conocidos como zooplancton, incluyendo fases embrionarias y larvarias de otras especies como peces, crustáceos y moluscos.  Debido a su cavidad gástrica, las medusas pueden nadar y alimentarse al mismo tiempo, que además de digerir el alimento, funciona como parte del sistema de locomoción, por la que mantiene un flujo constante de alimento en su interior (SAGARPA, 2012).  Stomolophus meleagris, la medusa bola de cañón, es más abundante en el sudeste de los Estados Unidos y la costa del Golfo. También habitan en el Atlántico occidental desde Nueva Inglaterra a Brasil, el este del Pacífico desde el sur de California a Ecuador, y el Pacífico occidental del Mar de Japón hasta el Mar del Sur de China. Biogeográficas Regiones: océano atlántico (nativos); océano pacífico (Nativo). La medusa bola de cañón, se encuentra dentro de salinas y estuarios aguas de la costa. Las aguas que habitan son generalmente alrededor de 23,1 grados C y, en promedio, la salinidad del agua es 33.8 ups. En regiones de hábitat  tropical de agua salada o marinos. La pesca de medusa bola de cañón es una actividad que se ha realizado desde hace pocos años en el estado de Sonora, dejando gran derrama económica, por lo que representa una gran oportunidad comercial para los principales dependientes de la pesca, hacia la mejora de la economía de su comunidad. Actualmente México es uno de los principales productores mundiales de medusa, junto con Indonesia, Bahrein, Tailandia y Pakistán, en su mayor parte gracias a la medusa capturada en Guaymas. La talla mínima de captura es de 110 mm de diámetro de la campana, y la luz cuchara no debe ser menor a 5 pulgadas.Tambien esta especie, puede ser origen de bacterias con potencial probiotico, las cuales pueden tener impacto benefico en la acuacultura de diversas especies de importancia comercial.  

METODOLOGÍA

Se caracterizara parcialmente (bioquimica) las cepas bacterianas aisladas del esofago de la medusa bola de cañon Stomolophus meleagris, se recurrira a las siguientes pruebas:  Tinciòn de Gram Hemolisis de sangre humana Catalaza Hidrofobicidad

CONCLUSIONES

Se espera obtener cepas bacterianas con carcteristicas de hemolisis gama que sean negativas la catalaza y tengan hidrofobicidad alta, con forma de bacilos y cocos.

Asesor: Dr. Blenda Ramirez Pereda, Instituto Tecnológico de Culiacán

EVALUACIÓN TEÓRICA DE LA GENERACIÓN DE IONES FE²/FE³ A PARTIR DE UN ÁNODO DE SACRIFICIO PARA EL TRATAMIENTO DE CONTAMINANTES

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EVALUACIÓN TEÓRICA DE LA GENERACIÓN DE IONES FE²/FE³ A PARTIR DE UN ÁNODO DE SACRIFICIO PARA EL TRATAMIENTO DE CONTAMINANTES

Cruz Nevarez Aneth del Carmen, Instituto Tecnológico de Sonora. Asesor: Dr. Blenda Ramirez Pereda, Instituto Tecnológico de Culiacán

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

I. Aguas Residuales El agua residual se puede definir como el agua que procede de un agua natural que se ha contaminado y a la eliminación de esta se le conoce como vertido. Las aguas residuales no tratadas contaminan el medio ambiente, provocan epidemias y dañan los ecosistemas. Estas aguas pueden ser procesadas de forma eficiente por algún tratamiento convencional aunque en ocasiones estos procedimientos resultan inútiles para alcanzar el grado de pureza que especifica la ley para poder verterla. II. Procesos Avanzados de Oxidación Cuando los tratamientos convencionales no son suficientes para la eliminación de alguna  sustancia es cuando se recurren a los Procesos Avanzados de Oxidación (PAOs) que por sí solos, combinados o en conjunto con los procesos convencionales se logran degradar y mineralizar los contaminantes recalcitrantes. Los PAOs son procesos que producen especies poderosas principalmente los radicales hidroxilo (HO•). El radical hidroxilo posee una alta capacidad para oxidar materia orgánica y se puede obtener por diversos medios fotoquímicos u otra forma de energía. El objetivo de los procesos de oxidación avanzada es la degradación completa de los contaminantes de tipo orgánico para convertirse en componentes inorgánicos como el H2O y CO2. III. Electro-coagulación Existen varias tecnologías disponibles para el tratamiento de efluentes con colorantes, entre las que se tienen algunos métodos físico-químicos como adsorción, coagulación-floculación, oxidación avanzada y filtración en membranas. El método de electro-coagulación genera coagulantes in-situ por medio de una disolución electroquímica que se lleva a cabo para poder obtener iones de hierro usando el material como electrodo. La generación de los iones metálicos toma lugar en el ánodo, liberándose hidrógeno en forma gaseosa en el cátodo lo que ayuda a la flotación de las partículas floculadas inmersas en el agua, por lo que este proceso recibe también el nombre de electro-floculación. IV. Reactivo  Fenton El reactivo de Fenton es una mezcla de peróxido de hidrógeno e ion ferroso (Fe 2+) que produce el radical libre hidroxilo (HO•) y el ion férrico (Fe 3+). Fe 2+ + H2O2 → Fe3+ + • OH + OH -  Fe3+ + H2O2 → Fe 2+ + • O2H + OH+ V. Electro-Fenton La reacción de generación de H2O2 en medio ácido por la reducción de O2 gaseoso se describe como sigue: O2(g) + 2H+ + 2e-→H2O2 Para el Fe2+ se utiliza un ánodo de sacrificio hecho del mismo elemento, en el que por medio de la reacción de oxidación el metal en estado sólido con estado de oxidación 0, pasa a 2+ por la pérdida de 2 electrones, por lo tanto queda de la siguiente forma: Fe0→ Fe2+ + 2e- El H2O2 y el Fe2+ se mezclan produciendo así los radicales hidroxilos oxidando aún más al Fe, el cual pasa a Fe3+ . Fe2+ +H2O2→Fe3++OH•+OH- 

METODOLOGÍA

Se llevó a cabo la electrólisis de activación de peróxido, después se llenó una tabla con los siguientes puntos: Tiempo (min) Voltaje (V) Corriente(A) H2O2 (moles) Fe2+ acumulado (moles) Energía requerida(Wh/l) La concentración de peróxido de hidrógeno se determinó por medio del método de titulación por permanganato de potasio (KMnO4), donde se tomaron muestras de una solución de 1 l. Las muestras tomadas fueron de 10 ml a la cual se le agregó 1 ml de ácido clorhídrico (HCl).  Se llenó una bureta de permanganato de potasio y gota a gota se le añadió a la muestra hasta notar el cambio de la misma, desde un intenso color violeta hasta uno incoloro. Una vez observado el cambio de color se midió el volumen gastado en la bureta, y la concentración se calculó con la siguiente ecuación:  C (H2O2)= (1.7 • V(KMnO4))/ (V(muestra) • PMH2O2) Donde V(KMnO4) es el volumen de permanganato gastado que señala la bureta, V(muestra) es el volumen de la muestra de la solución que fue de 10 ml y PMH2O2  es el peso molecular del peróxido de hidrógeno.

CONCLUSIONES

Según los resultados que arrojó la tabla llenada a partir de la electrólisis, se obtuvieron algunas gráficas. La primer gráfica muestra el ion ferroso acumulado y el peróxido de hidrógeno en moles en función del tiempo en minutos, se observa cómo es que a medida que el Fe2+ se electrogenera, el H2O2 disminuye por lo que se deduce que ocurre una reacción Electro-Fenton en donde por cada mol de ion Fe2+ electrogenerado reacciona un mol de H2O2, generando a su vez un mol de radical hidroxilo. En la segunda gráfica se indica el peróxido de hidrógeno activado en moles en función del tiempo en minutos, lo que señala que aproximadamente a los 10 minutos de haber iniciado la electrólisis se tenía una tendencia lineal, y que aproximadamente a los 40 minutos es en donde se deja de electrogenerar el ion Fe 2+ por el notorio decaimiento del peróxido de hidrógeno que se activó. El tercer gráfico donde el Fe2+ acumulado en moles en función de la carga acumulada en C, tiene un comportamiento exponencialmente estable y predice cuanta carga se utilizó para la generación de los iones Fe2+  y probablemente para la generación de Fe3+ y H+. En cierto punto se convierte en una asíntota que se refiere a que ya no hay mas electro-generación de alguna especie. La cuarta gráfica muestra la energía consumida en la electrólisis para la generación de iones Fe2+ en unidades de Wh/l que se calcula con la siguiente ecuación: E= Vit/v Donde E es la energía requerida, V es el voltaje utilizado, i la corriente eléctrica y v es el volumen sobre el que se trabajó. Todo lo anterior se  refleja principalmente en costos de operación por la energía consumida, por lo tanto la parte electroquímica teórica del proyecto, cumplió con el objetivo satisfactoriamente y servirá para futuras investigaciones y experimentos.    

Asesor: Dr. Cristian Robert Munteanu -, Universidad de la Coruña (España)

APLICACIóN DE APRENDIZAJE AUTOMáTICO (ML), PARA LA DETERMINACIóN DE UN MODELO QSAR CAPAZ DE PREDECIR EL PATRóN DE PROTEíNAS PARA SER UTILIZADAS COMO TARGETS TERAPéUTICOS.

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APLICACIóN DE APRENDIZAJE AUTOMáTICO (ML), PARA LA DETERMINACIóN DE UN MODELO QSAR CAPAZ DE PREDECIR EL PATRóN DE PROTEíNAS PARA SER UTILIZADAS COMO TARGETS TERAPéUTICOS.

Cruz Segundo Carlos Manuel, Tecnológico de Estudios Superiores de Jocotitlán. Asesor: Dr. Cristian Robert Munteanu -, Universidad de la Coruña (España)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El genoma humano está formado por aproximadamente 20,000 genes codificantes de proteínas, pero no todas las proteínas son adecuadas para objetivos farmacológicos. El proteoma drogable se podría definir como el porcentaje de proteínas que tienen la capacidad de unirse a un anticuerpo o molécula pequeña con propiedades químicas y afinidad adecuadas. La capacidad de carga es la propiedad de una molécula que se puede administrar mediante fármacos (es decir, una diana biológica) en virtud de la cual provoca una respuesta clínica favorable cuando entra en contacto con un compuesto similar a un medicamento. Se estima que el 60% de los proyectos de descubrimiento de fármacos de moléculas pequeñas fracasan en el golpe al plomo porque se encuentra que el objetivo biológico no es "aptos para medicamentos". Por lo tanto, es importante poder predecir qué tan farmacológico es un nuevo objetivo en el descubrimiento temprano de un medicamento porque solo el 10% del genoma humano representa objetivos que se pueden administrar, y solo la mitad de ellos son relevantes para la enfermedad.

METODOLOGÍA

En la determinación del mejor Modelo Clasificador Relación Cuantitativa Estructura-Actividad (QSAR), en donde el modelo final se usará para predecir  el patrón de proteínas visualizando la viabilidad de ser utilizados como targets terapéuticos, se aplicó Aprendizaje Automático (ML). Para la obtención del modelo QSAR se utilizaron proteínas positivas que significa que las proteínas están relacionadas con fármacos aprobados por la FDA y secuencias de proteínas negativas que son de fosforilación no asociadas con fármacos están en el formato FASTA. Posteriormente se utilizaron las herramientas del software R para convertir los formatos FASTA de las proteínas positivas y negativas en variables numéricas denominados descriptores moleculares siendo estos los siguientes: Composición de Aminoácidos (AAC), Composición de Di-aminoácidos (DC) y Composición de Tri-aminoácidos (TC). Después de obtener los descriptores para cada caso estos se limpiaron para obtener una matriz numérica la cual la primera fila será el nombre del descriptor y una columna al final con el nombre de la clase (Positiva, Negativa), se prosiguió a obtener un nuevo conjunto de datos el cual se constituye de la unión de los valores de lo descriptores positivos y los negativos respectivamente para cada caso. Una vez obtenido el nuevo conjunto de datos se utilizó Weka, software que permite obtener Modelos de clasificación empleando ML. Para ello se aplicaron filtros que permitirán obtener mejores resultados siendo estos los siguientes: Normalización que mantiene los valores numéricos en un rango de [0,1], selección por características (Modo Rankin) como resultado sé muestran el orden de los descriptores de acuerdo a su importancia, con la finalidad de seleccionar los 20 mejores descriptores de DC y TC, finalmente se aplicó un mezclado aleatorio de las filas del conjunto de datos. Con lo anterior se obtuvo el conjunto de datos listo para aplicar ML en ellos. Los valores  que tuvieron mayor importancia en los resultados del ML son: la precisión del modelo y el Área bajo la curva, en donde estos valores nos darán la fiabilidad del modelo para predecir la clasificación de las proteínas. Al obtener el modelo QSAR con los mejores resultados se realizó un Tés de prueba el cual permitió verificar la precisión del modelo para ello se utilizó el conjunto de datos con el cual se obtuvo el modelo.

CONCLUSIONES

El conjunto de datos utilizados en el desarrollo del trabajo fueron 885 proteínas de las cuales 666 son proteínas relacionadas con fármacos (positivas) y 219 proteínas que son de fosforilación no asociadas con fármacos (negativas). Los descriptores obtenidos para AAC son 20  por lo cual no fue necesario aplicar FS, en el caso de DC y TC se tiene un número de descriptores de 4000 y 8000 respectivamente por lo que en este caso al aplicar el FS  se tiene que para el caso de los DC se utilizan los siguientes descriptores SR, TR, HC, YE, SQ, VG, VH, CI, SI, QF, IF, MF, TF, SP, RS, ES, YT, CW, WW y HV. Y para TC se utilizaron CSA, VMR, VSR, FWR, WPD, VHC, IME, WEQ, HGG, LVH, AYL, WRM, WQM, YLM, YWP, SRS, HCS, DFW, NRY e IHV. Las series de cada proteína se han utilizado para encontrar el mejor modelo de clasificación con la finalidad de determinar el patrón de las proteínas para ser targets terapéuticos, empleando métodos de aprendizaje automático incluidos en Weka. Para encontrar un modelo aceptable este debe tener un valor de precisión mayor o igual al 75%, por lo que los métodos con mejores resultados predominan los siguientes LDA, BLR, KLR,LR, MP, DT, SVM y RF esto para los descriptores AAC, DC y TC. El modelo Random Fores (RF) es el que presenta el valor más aceptable de 79% para AAC, así como para DC con una precisión de 76.5% y para TC el modelo más aceptable es SVM y MP con 75.3% de exactitud. De acuerdo a los resultados obtenidos se tiene que Random Forest empleando los descriptores AAC es el modelo más óptimo resultante para predecir para el patrón de las proteínas para ser targets terapéuticos con una precisión del 79% y un área bajo la curva de 78.1%. Al aplicar el test de prueba se comprueba que el modelo tiene la exactitud del 79% en la clasificación de las proteínas de los descriptores AAC. El trabajo fue desarrollado en la Facultad de Informática, Universidad da Coruña, Coruña (España) con el grupo de investigación RNASA-IMEDIR y  en colaboración con: Andrés López-Cortés1,2., Alejandro Cabrera-Andrade2,3., Carlos M. Cruz-Segundo2,4., Julian Dorado2,5., Alejandro Pazos2,8., Humberto Gonzáles-Díaz6,7., César Paz-y-Miño1., Yunierkis Pérez-Castillo3., Eduardo Tejera3., Cristian R. Munteanu2,5,8. Universidad UTE, Ecuador University of Coruna, Spain Universidad de Las Américas, Ecuador Tecnológico de Estudios Superiores de Jocotitlán, México. CITIC, Spain University of the Basque Country UPV/EHU, Spain Basque Foundation for Science, Spain INIBIC, University Hospital Complex of A Coruña, Spain    

Asesor: M.C. Lucero Montserrat Cuautle García, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

CAUSAS DE LA FRAGMENTACIÓN DE HÁBITAT EN UNA ZONA DE AUTOCONSTRUCCIÓN EN SAN MIGUEL CANOA, PUEBLA.

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CAUSAS DE LA FRAGMENTACIÓN DE HÁBITAT EN UNA ZONA DE AUTOCONSTRUCCIÓN EN SAN MIGUEL CANOA, PUEBLA.

Cruz Soto Flor Carolina, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: M.C. Lucero Montserrat Cuautle García, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La fragmentación es la división de un hábitat continuo en pedazos más pequeños y aislados, cuyo resultado es la reducción del área total de hábitat, esta se puede dar por diversos factores ya sean naturales o antropogénicos. Este fenómeno ocurre principalmente en las áreas que son más accesibles, las de topografía poco accidentada y las de alta productividad, son las primeras en ser alteradas para utilizarlas con fines agrícolas, asentamientos humanos o extracción forestal. La investigación se realizara en la comunidad de San Miguel Canoa la cual es una de las comunidades que se encuentran ubicadas en las faldas de La Montaña la Malinche, declarada Parque Nacional, esto hace a San Miguel Canoa una comunidad muy importante, por la relación que tiene con la montaña, en los últimos años se ha visto un aumento en su población, y esto ha llevado a la población a buscar otros lugares para construir sus viviendas; sin embargo, esto ha tenido graves consecuencias para el hábitat de diversas especies de flora que habitan en el lugar, algunas especies de alta importancia para la zona.

METODOLOGÍA

Se realizaron salidas a campo durante la semana del 24 al 28 de junio del 2019 en las cuales obtuvo la cobertura vegetal, se colectaron solo aquellas especies de importancia cultural y biológica en la comunidad. Una vez colectadas las especies, se tomaron las coordenadas y se herborizaron. Proceso de herborización. Materiales: Prensa Periódico Cartón Cuerdas Secadora Para arborizar primero se colocaron las plantas sobre la prensa, acomodando un pedazo periódico antes de poner la planta después la misma planta se volvía a cubrir con periódico y se ponía un pedazo de cartón, se siguió ese procedimiento hasta que se terminaron de poner las plantas, después se colocaron en la prensa para ser llevadas a la secadora, donde estuvieron alrededor de tres días a una temperatura de 45 °C, algunas duraron más de tres días en secarse ya que estaban muy húmedas, una vez secas las plantas se procedió a realizar el montado. Montado. Materiales: Hoja opalina Hilo y aguja Pegamento Tijeras El montado se realizó primeramente eligiendo las plantas que mejor habían quedado, eligiendo las que tenían flor y fruto para facilitar la identificación y que cupieran en la hoja opalina, también se arreglaban algunas hoja y ramas para que estas cupieran mejor, cuando ya se había colocado bien la planta se procedía a coser de manera que las puntadas no se notaran y que las plantas quedaran fijas en la hoja. Identificado. Cuando las plantas estuvieron ya montadas procedimos a identificarlas, para esto se consultó el libro Vegetación del valle de México de Rzedowski, el cual contiene la guía para identificar las plantas dicotiledóneas y también un listado de las plantas que existen en el volcán la Malinche, se observaba la planta en el estereoscopio para revisar cada detalle y asegurarnos que fuera la especie que estábamos analizando.

CONCLUSIONES

Como conclsuión durante las salidas a campo se pudo observar que el principal prolema de la fragmentación del habitat en San Miguel Canoa Puebla es la sobre población del sitio puesto que al haber tantas familias en este lugar, estas han buscado otros lugares para hacer sus viviendas, ocupando así las zonas establecidas como areas verdes, esto a afectado mucho a la flora del lugar pues ha frgamentado su habitat por las actiidades que los pobladores realizan dentro del sitio, este problema es muy grave pues en estas zonas se puede encontrar vegentación de importacia cultural y biologíca.  Las habilidades obtenidas durante mi estancia delfin fueron, trabajo en equipo, toma de decisiones, así como tambien a identificar especies de plantas.

Asesor: Dr. Lerma Hanaiy Chan Chan, Universidad de Sonora

SíNTESIS DE NANOHíBRIDOS DE POLIURETANO SEGMENTADO Y óXIDO DE GRAFENO

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SíNTESIS DE NANOHíBRIDOS DE POLIURETANO SEGMENTADO Y óXIDO DE GRAFENO

Cruz Trujillo Fidel Aldair, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Asesor: Dr. Lerma Hanaiy Chan Chan, Universidad de Sonora

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los nanohíbridos o compositos son materiales conformados por la unión de 2 o más materiales, ellos cumplen un papel esencial en diferentes disciplinas ya que estos obtienen las características principales de los materiales que lo conforman, es por ello que uno de los mejores ejemplos es la unión entre el poliuretano y el grafeno debido que en forma de composito el material resulta ser mas dúctil, así mismo no pierde su resistencia y es capaz de transferir corriente eléctrica. También es empleado dentro de la rama de la biomedicina teniendo alcances como biosensor, liberador inteligente de fármacos, etc. Uno de los principales problemas dentro de la conformación de compositos es la correcta dispersión del grafeno dentro del poliuretano, si esta no es uniforme o presenta grumos, sus propiedades se verán afectadas, por ejemplo, no será capaz de transferir corriente de una manera eficiente, además de que será más frágil.

METODOLOGÍA

Para la obtención del poliuretano segmentado (PU) se emplearon los siguientes reactivos: la policaprolactona diol (PCL), hexametilen diisocianato (HDI), 2 eti hexanoato de estaño (II) (Catalizador), dimetilforamida (DMF), polietilenglicol (Gly). Los cuales se hicieron reaccionar por 4 horas bajo una atm de N2 a una temperatura constante de 70ºC, pasando este tiempo el PU resultante se vierte sobre un vaso de precipitado con agua destilada dejándose reposar por 12 horas, posteriormente se pasó a realizarse 3 lavados a la muestra con agua destilada, el producto ya lavado se deja reposar sobre un molde antiadherente donde se deja secar a temperatura ambiente por 12 horas y 24 horas en un horno al vacío a 60ºC. Para realizar la adhesión del Oxido de grafeno (OG) en el PU se emplearon 2 procedimientos uno durante la síntesis y otro en mezcla. En el proceso de síntesis, el OG necesario para obtener concentraciones de 0.5% y 2%, se agregó en la parte final de la síntesis en 2 lotes de PU y el procedimiento continuo hasta la desecación en horno de vacío a 60ºC. Para el proceso de mezcla se colocó en 2 viales de vidrio de 15 ml, 1 gr de PU el cual se diluyo en 5 ml de tetrahidrofurano (THF), así mismo a uno de ellos se le agregó 0.005gr de OG diluidos en 1 ml de THF y al otro se le agregaron 0.02 gr de OG en 1 ml de THF, estos 2 viales se colocaron en sonicacion por una hora. Se prepararon las muestras para poder realizar la formación de películas, para ello se tomó 1 gr de cada lote de PU obtenido durante la síntesis (PU-G2%S y PU-G0.5%S) se colocaron en viales de vidrio de 15ml, se diluyeron en agitación en 6 ml de THF, se tomaron las muestras obtenidas durante el proceso de mezcla (PU-G2%M y PU-G0.5%M) y se realizó un blanco con 1 gr de PU en 6 ml de THF (PUG-0%) colocado en un vial de vidrio 15ml. Las 5 muestras se vertieron en moldes dejándose reposar a temperatura ambiente por 12 horas y 24 horas en un horno al vació a 60ºC; posteriormente se pasó al desmolde y almacenaje de las mismas. Con el fin de medir la ductilidad y resistencia del polímero se realizaron pruebas de tracción. Para poder llevar a cabo la prueba a cada una de las 5 películas se les realizaron cortes para obtener 5 tiras de 1 cm de largo por 2 mm de ancho; a cada una de ellas se les midió nuevamente el ancho y el grosor antes de colocarse dentro de la máquina, se corrió la prueba y se recopilaron los datos. Posteriormente los datos recopilados se graficaron con ayuda del programa origin para obtener así 5 graficas de Esfuerzo entre porcentaje de deformación, los resultados fueron analizados y comparados. Para poder observar la dispersión del óxido de grafeno dentro del polímero se realizó microscopia óptica. Para ello parte de cada una de las 5 muestras se colocó en el microscopio y se compararon los resultados. Para corroborar la formación del poliuretano se empleó el FTIR modo ATR. cada muestra se colocó sobre la máquina y se corrió la prueba, una vez obtenidos los datos se interpretaron y se compararon.

CONCLUSIONES

Durante la estancia del verano de investigación se lograron obtener conocimientos teóricos y prácticos sobre la obtención de poliuretano, creación de nanohíbridos y la realización de distintas pruebas y estudios tales como la prueba de tracción, microscopia óptica y FTIR, gracias a ello se llegó a la conclusión que la mejor manera de lograr una correcta dispersión del grafeno dentro del poliuretano es mediante el método de síntesis, debido a que durante las pruebas de microscopia se observó que las dispersiones eran más uniformes, así mismo observo que dependiendo de las concentraciones de grafeno se afectan las propiedades mecánicas del poliuretano, aumentando su rigidez.

Asesor: Mtro. Eduardo Juventino Ramirez Chavez, Universidad del Mar

USO DE LOS DRONES PARA EL RECONOCIMIENTO DE PATRONES E INCENDIOS FORESTALES EN LA LOCALIDAD DE ZAPOTENGO, OAXACA

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USO DE LOS DRONES PARA EL RECONOCIMIENTO DE PATRONES E INCENDIOS FORESTALES EN LA LOCALIDAD DE ZAPOTENGO, OAXACA

Cruz Vicente Guadalupe Areli, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Mtro. Eduardo Juventino Ramirez Chavez, Universidad del Mar

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los incendios forestales han contribuido en todo el mundo al deterioro de los recursos naturales, pérdidas económicas (directas o indirectas) y pérdidas de vidas humanas. De acuerdo con las condiciones climáticas y meteorológicas cada año se presentan incendios forestales de diversas magnitudes. Para llevar a cabo este monitoreo de incendios que se realiza a través de un Sistema de Alerta Temprana donde trabajan en conjunto CONABIO y CONAFORT utilizan imágenes satelitales para la detección de diferentes variables como temperatura e índices de humedad del suelo y mediante un Algoritmo de Flasse y Ceccato (1996) se pueden interpretar dichos datos para determinar cuándo es un potencial de incendio o cuándo no, lo cual consiste en establecer un umbral de brillantez a los pixeles que componen las bandas de una imagen satelital y mediante la fórmula del Algoritmo se obtienen los pixeles que tienen potencial de incendio. La mayor problemática que se presenta en este tipo de monitoreo de incendios son las limitantes: Al considerar como un punto de calor cualquier punto de la superficie terrestre que emita suficiente temperatura para que el pixel de una imagen de satélite lo reporte con una temperatura elevada. En un incendio la magnitud de esté puede ser menor al valor dado del pixel por el algoritmo utilizado. Puede haber presencia de nubes arriba del incendio. La imagen del satélite puede no alcanzar a cubrir la zona de un incendio debido a que el satélite no pasó por ahí. La resolución espacial del incendio es menor a la resolución espacial del satélite, por lo tanto no se ve. Estas limitantes que tienen las imágenes satelitales dan la oportunidad para que se usen los drones, es decir sensores a escala fina. Durante la estancia de verano se llevó acabo la escritura de un artículo de investigación de un incendio que ocurrió en la comunidad del Zapotengo, Oaxaca. En lo que va del año 2019 a nivel mensual para el país mexicano el total de incendios es de 5,989 y un total de 343,545 hectáreas afectadas y a nivel estatal Oaxaca ocupa el primer lugar en superficie afectada con 45,047 ha de 199 incendios.

METODOLOGÍA

La localidad del Zapotengo está ubicada a 10 minutos del municipio de Pochutla, Oaxaca. Del 18 al 20 de febrero del año 2017 una serie de incendios se presentaron en estos terrenos lo cual provoco poca visibilidad sobre la carretera Federal N. 200. Al tercer día que el incendio fue sofocado, se realizó un recorrido con un drone donde se llevaron a cabo dos planes de vuelo ramificados para obtener un sobrelape que cubriera un poco más de la zona afectada, así mismo se realizó otro recorrido a pie para tener puntos de control y verificar la vegetación no quemada, carbón, ceniza y vegetación seca. Se obtuvieron alrededor de 250 fotos por cada vuelo y con ello se construyó un modelo fotogramétrico del cual se elaboró un modelo digital de elevación por medio de un software de SIG para obtener la pendiente en %, de los puntos de control se realizó una clasificación supervisada en el mismo Software utilizando el método de máxima verosimilitud para obtener una clasificación de vegetación y con estos dos índices construir un modelo de Rothermel para determinar el combustible vegetal en la zona. Este modelo divide la vegetación en cuatro grupos: pastos, matorrales, hojarasca, restos de silvicultura, se trabajó con el grupo de matorrales por ser el tipo de vegetación de la zona. Posteriormente al obtener el modelo de Rothermel se contrasto con el Índice de VARI (Índice de Resistencia Atmosférica Visible)  por ser el índice que se acopla a las bandas de las imágenes del drone y con ello se obtener el estado de la vegetación. Después de tres meses tras unas tormentas (Beatriz y Calvin) se aplicó la misma metodología ya descrita, utilizando el Índice de VARI para volver a determinar las zonas de vegetación sana.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró adquirir conocimientos acerca de los programas utilizados, la  interpretación de los índices de vegetación en las bandas de las imágenes de lo drones o satélites. Los datos obtenidos no se pueden mostrar ya que el trabajo aún se encuentra en proceso. Como aprendizaje se tiene que los drones nos ayudan a monitorear zonas que no son detectadas por el Sistema de Alerta Temprana y se sugiere que para ser más eficientes el uso de drones se cuente con cámaras en infrarrojo o térmicas.

Asesor: Dr. Lerma Hanaiy Chan Chan, Universidad de Sonora

SíNTESIS DE POLIURETANO SEGMENTADO BIODEGRADABLE CON ARGININA COMO EXTENSOR DE CADENA PARA LA PREPARACIóN DE NANOPARTíCULAS

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SíNTESIS DE POLIURETANO SEGMENTADO BIODEGRADABLE CON ARGININA COMO EXTENSOR DE CADENA PARA LA PREPARACIóN DE NANOPARTíCULAS

Cuevas Zepeda André Francisco, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Lerma Hanaiy Chan Chan, Universidad de Sonora

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las propiedades de nanopartículas poliméricas son de interés debido a las varias áreas de aplicación que tienen, entre ellas la industria farmacéutica para el transporte y suministro de medicamentos. Siendo el poliuretano un polímero popular con grandes aplicaciones, entre estas el área biomédica, se ha estudiado en la producción de nanomateriales biodegradables. Uno de los retos que presentan las nanopartículas es optimizar su preparación en términos de tamaño y forma. Por lo que es de importancia caracterizar las nanopartículas y documentar el tamaño de diámetro efectivo, así como la polidispersidad que se puede obtener con el polímero biodegradable sintetizado.

METODOLOGÍA

Se sintetizó poliuretano segmentado con aminoácido como extensor de cadena. Los componentes principales de la reacción son: un poliol, un diisocianato y un extensor de cadena.  El poliol utilizado fue policaprolactona (PCL), diisocianato de hexametileno (HDI) y arginina como extensor de cadena. Con una atmosfera libre de humedad y una temperatura de 70°C, se inició la síntesis con los reactivos en agitación; la PCL y el HDI reaccionaron para formar el prepolímero. Una vez formado el prepolímero se procedió a agregar la arginina para obtener el poliuretano segmentado. El polímero se agregó en agua destilada para que se precipitara, después se pasó a la etapa de filtrado, luego secado al medio ambiente y al vacío con una temperatura de 60°C. Una vez obtenido el polímero se hizo uso de la técnica de espectroscopía de infrarrojo con transformada de Fourier (FTIR) para evidenciar la formación del polímero segmentado analizando los numero de onda características. Para la elaboración de nanopartículas se utilizó el método de nanoprecipitación. En viales se prepararon soluciones de polímero en tetrahidrofurano (THF) de 1 mg/mL, 16 mg/mL y 36 mg/mL de 5 mL aproximadamente; después se puso en sonicación por media hora para disolver completamente el polímero. Después por cada solución se preparó un vial con 10 mL de agua destilada y se agitó a 800 rpm para hacer un vórtex. La solución de polímero en THF se vació con una jeringa por gravedad entre la pared del vial y el vórtex en la parte mas profunda posible. Se retiró el solvente en un horno a 60°C durante una hora y media; de esta forma se obtuvieron las nanopartículas poliméricas en agua. Para caracterizar las nanopartículas se utilizó la técnica de dispersión dinámica de luz (DLS) con un ángulo fijo de 90° con láser a una longitud de onda de 637 nm, la cual proporcionó los datos de tamaño de diámetro efectivo y polidispersidad. En celdas se vertieron 2 mL de solución y por cada una se hicieron tres corridas con la cual se hizo el análisis de datos y se hizo un gráfico de la distribución de tamaño de partícula con las concentraciones manejadas. 

CONCLUSIONES

Los resultados nos muestran que la variación de la concentración de polímero no provoca diferencias significantes en el tamaño de partícula y polidispersidad. Por lo que, se recomienda hacer un estudio variando concentración de polímero, temperatura y velocidad de agitación para analizar que factor es el que tiene mayor influencia al elaborar nanopartículas con este polímero para tener un control en el producto final.

Asesor: Dr. William Rolando Cetzal Ix, Instituto Tecnológico de Chiná

ESTANCIA CIENTíFICA EN EL LABORATORIO DE AGROECOSISTEMAS Y CONSERVACIóN DE LA BIODIVERSIDAD

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ESTANCIA CIENTíFICA EN EL LABORATORIO DE AGROECOSISTEMAS Y CONSERVACIóN DE LA BIODIVERSIDAD

Damian Elizondo Lizeth Abigail, Instituto Politécnico Nacional. Lugo de la Cruz Arely Joseline, Instituto Politécnico Nacional. Asesor: Dr. William Rolando Cetzal Ix, Instituto Tecnológico de Chiná

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La formación científica en el área de la Biología requiere de poseer y adquirir conocimientos, métodos y técnicas que evalúen y analicen la diversidad que poseen los ecosistemas. Estos conocimientos deben basarse en una perspectiva de manejo y producción sustentable de los recursos naturales que integre a las comunidades rurales, los cuales son los principales usuarios de estos ecosistemas. En este sentido, el Laboratorio de Agroecosistemas y Conservación de la Biodiversidad (LACB) genera conocimientos de los recursos naturales en aspectos de polinización, taxonomía, patrones de distribución y producción sustentable de flora nativa con el objetivo de proveer alternativas económicas a las comunidades rurales del sureste de México. Además, se realiza estudios de diversidad de insectos, aves, mastozoológica, caída de hojarasca, calidad de néctar, etc., con el objetivo de difundir este conocimiento a través de publicación de artículos científicos.

METODOLOGÍA

Durante el verano científico se recibió diversos curso-talleres desarrollados en el LACB del Instituto Tecnológico de Chiná. 1) Formulación y evaluación de proyectos (Jesús Martínez), enfocado a la elaboración de un proyecto de investigación con impacto social, ecológico o económico, donde se plantearon proyectos relacionados al área de la biología que pudiesen aportar conocimiento a la sociedad y al mismo tiempo generar estrategias de conservación. 2) Generalidades morfológicas, métodos de recolección y preservación de insectos (Ignacio Cuellar & Julissa Rosado), se presentó los antecedentes históricos de los insectos, su evolución y sus diferentes características morfológicas, se reforzó estos conocimientos con prácticas de recolección y montaje de insectos. 3) Se recibió un entrenamiento en el Laboratorio de Biotecnología (Norma Rodríguez), que consistió en una clase teórica sobre el cultivo de tejidos vegetales, micropropagación y sus aplicaciones; además, una clase práctica sobre preparación del medio de cultivo MS (Murashige & Skoog) y su posterior sembrado de cepas de hongos con la técnica de estría cruzada. 4) Curso de Sistemas de Información Geográfica (Eduardo Ucán), se aprendió a utilizar el programa QGIS para poder capturar, manipular y almacenar información geográfica, así como elaborar mapas para la proyección de datos de diversidad biológica.  5) Taller Técnicas para la identificación y monitoreo de aves en ecosistemas tropicales (Héctor López & Juan Canul), se presentó de manera general las características morfológicas de la avifauna de ecosistemas tropicales, los principales hábitats donde se encuentra y algunas características evolutivas. 6) Curso de Presentación y elaboración de artículos científicos (Dr. William Cetzal Ix), se presentó estrategias para la publicación de artículos científicos, selección de revistas JCR en función del área de investigación, consejos para la escritura y presentación y la manera adecuada de redactar correctamente un artículo científico para poder publicarlos en revistas de prestigio y alto factor de impacto. 7) Metodologías para el estudio de caída de hojarasca en ecosistemas tropicales (José Germain López & Justo Enríquez), se presentó métodos de recolección de la hojarasca y su impacto ambiental y económico, así como los beneficios que aporta el reciclaje de nutrientes para los agroecosistemas y ecosistemas. 8) Técnicas de morfometría, recolecta, identificación y análisis de diversidad mastozoológica (Andrea Vásquez & Justo Enríquez), se presentó métodos para identificar mamíferos, así como métodos de morfometría a través de prácticas con animales domésticos y silvestres. 9) Cursos de Técnicas de muestreo para evaluar visitantes florales y polinizadores en angiospermas y Métodos para la evaluación de la calidad del néctar para la actividad apícola (Ángel Ríos & Justo Enríquez), se adquirieron conocimientos sobre los métodos de muestreo del néctar y el ciclo de vida de la Apis mellifera L., así como su distribución, características morfológicas y sus capacidades visuales. 10) Taller de Métodos de recolecta montaje y preservación de ejemplares botánicos (María Chan), se presentó las diversas formas de recolecta botánica. Además, se conoció sobre la importancia de los herbarios internacionales y nacionales como fuente de colecciones históricas y para realizar diversos estudios biogeográficos o de conservación. 11)Codificación de caracteres morfológicos y manejo y análisis de secuencias moleculares para estudios filogenéticos (Dr. William Cetzal Ix) se presentó métodos de codificación de caracteres morfológicos para estudios filogenéticos, así como el ensamblaje de secuencias y su posterior análisis para entender las relaciones filogenéticas de grupos de plantas.

CONCLUSIONES

En el LACB se adquirieron aprendizajes acerca de diferentes temas que tienen impacto social y ambiental, así como metodologías para recolección y análisis de diferentes datos biológicos, que cumplen un papel importante dentro de los agroecosistemas y ecosistemas, dando alternativas a la sociedad para el aprovechamiento adecuado de sus recursos naturales. En este sentido, durante los diversos cursos impartidos, se seleccionó una práctica al tema de la caída de hojarasca, debido a los beneficios que posee el reciclaje de nutrientes para la conservación de los ecosistemas e incrementar la producción de cultivos sustentables en agroecosistemas.  

Asesor: Dr. Ma. Soledad Vázquez Garcidueñas, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

IDENTIFICACIÓN DE INTEGRÓN CLASE II Y GEN SUL1 EN CEPAS DE ESCHERICHIA COLI UROPATÓGENA MULTIRRESISTENTE A ANTIBIÓTICOS

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IDENTIFICACIÓN DE INTEGRÓN CLASE II Y GEN SUL1 EN CEPAS DE ESCHERICHIA COLI UROPATÓGENA MULTIRRESISTENTE A ANTIBIÓTICOS

de Jesús Carlos Ma.del Rocío, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Ma. Soledad Vázquez Garcidueñas, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Escherichia coli es el microorganismo aislado más frecuentemente en infecciones del tracto urinario (itu); estas bacterias pueden presentar resistencia a diferentes antibióticos, entre ellos cefalosporinas de tercera generación, aminoglucósidos, sulfonamidas y quinolonas, en el caso de sulfonamidas ejercen un efecto bacteriostático sobre las bacterias y su aplicación química está limitada debido al desarrollo de resistencia bacteriana se utilizan en combinación para potenciar el efecto contra infecciones urinarias, se han demostrado  fenotipos de multirresistencia, lo que supone grandes complicaciones en el tratamiento antibiótico cuando éste es requerido. Este aumento de resistencia antibiótica se debe a la adquisición de diferentes mecanismos moleculares de resistencia mediante mutaciones puntuales a nivel cromosómico o transferencia horizontal de material genético entre especies relacionadas o diferentes, facilitada por algunos elementos genéticos tales como los integrones. El presente trabajo tiene como objetivo, Identificar mediante PCR la presencia del gen de sul1 asociado a la resistencia a sulfonamidas, así como del Integron clase II en las cepas de estudio, para determinar si estos elementos son los responsables de la multirresistencia presentada

METODOLOGÍA

Cepas utilizadas. Se analizaron 19 cepas de E. coli identificadas por métodos bioquímicos convencionales y aisladas de pacientes con infecciones urinarias crónicas. Las cepas se recuperaron de agar francés en agar LB por estriado en cuadrante incubando 24 h a 37°C.  Extracción de ADN. El ADN genómico se extrajo mediante el método del fenol-cloroformo a partir de dos asadas de las colonias aisladas en medio LB. Posteriormente se trató con RNAsa. El ADN obtenido se resuspendió en 25 µL de agua desionizada y su calidad de verificó mediante electroforesis en gel de agarosa al 0.8%. Ensayos de amplificación por PCR. La mezcla de reacción fue la siguiente: Tris-HCl  20 mM (pH 8.2), KCl 50mM, MgCl2 1.0 mM, 0.2 mM de la mezcla de dNTP, 0.5 mM de cada iniciador: para la amplificación del intrón clase II se utilizaron los iniciadores R: GTAGCAAACGAGTGACGAAATG y F: CACGGATATGCGACAAAAAGGT. Para el gen sul1 se usaron los iniciadores R: TCCGAGAAGGTGATTGCGCT y L: GTGACGGTGTTCGGCATTCT.  0.05 U de Taq DNA polimerasa (Invitrogen, USA) y 25 ng de ADN, en un volumen final de 15 µL. Las reacciones se realizaron en un termociclador Veriti utilizando el siguiente programa: 94°C por 4 min, seguido por 35 ciclos de 94°C por 1 min, 51°C para el intrón y 68°C por 1 min para el gen sul1, 72°C por 1 min y una extensión final a 72°C por 7 min. Los productos de PCR obtenidos se visualizaron en geles de agarosa al 2% teñidos con bromuro de etidio.  

CONCLUSIONES

 El gen sulf1 se detectó en 6 de las cepas mientras que el Integron de clase II no se encontró en ninguna de las cepas.  Estos resultados indican que deben existir otros determinantes genéticos responsables de la multirresistencia.

Asesor: Dr. Elizabeth Bautista Rodriguez, Universidad Popular Autónoma del Estado de Puebla

EFECTO DE LA 8 HIDROXIQUINOLONA SOBRE LA REGULACIóN DE LA TRANSCRIPCIóN DE LOS GENES QUE REGULAN EL METABOLISMO DEL HIERRO EN CéLULAS DE GLIOBLASTOMA MULTIFORME

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EFECTO DE LA 8 HIDROXIQUINOLONA SOBRE LA REGULACIóN DE LA TRANSCRIPCIóN DE LOS GENES QUE REGULAN EL METABOLISMO DEL HIERRO EN CéLULAS DE GLIOBLASTOMA MULTIFORME

de Jesús Reyes Abigail, Universidad Autónoma del Estado de México. Asesor: Dr. Elizabeth Bautista Rodriguez, Universidad Popular Autónoma del Estado de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El glioblastoma multiforme (GBM) es el tumor primario maligno más frecuente y con peor prognosis del sistema nervioso central. Su tratamiento consiste en cirugía, radioterapia y quimioterapia y a pesar de su gravedad. A pesar del sometimiento de distintas cirugías aplicadas, radioterapia y quimioterapia la prognosis para pacientes que padecen este cáncer es de 14-15  meses de vida. Se ha reportado que las células cancerígenas tienen alta demanda de hierro comparadas con células no cancerígenas, dicho efecto ha sido asociado con la inducción de la proliferación celular. El objetivo de este trabajo es evaluar del efecto anti-proliferativo del quelante de hierro 8-hidroxiquinolina. La 8HQ por su parte es un quelante que forma complejos con iones metálicos divalentes, principalmente con el hierro. Parte de su efecto anticancerígeno se debe a la formación de complejos que entran, se distribuyen dentro de las células y causan daño masivo al ADN.

METODOLOGÍA

Cultivo de Células. Las células C6 (Rattus norvegicus) de GBM fueron cultivadas en medio DMEM F12 suplementado con 10% suero fetal bovino, 2 mM de l-glutamina, 50 u/ml de penicilina y 50 mg/ml de estreptomicina. Mantenidas al 5% de CO2 a 37°C. Las células fueron expuestas a 62.5 y 0.9 µM de 8HQ. Extracción de RNA. Se realizo la extraccion de RNA siguiendo el método de extracción fenólica con Trizol (Reagent ® Invitrogen). Posteriormente se realizó la cuantificación de RNA total mediante absorbancia y después la verificación de la integridad del RNA total. Síntesis del cDNA. Se agregaron los siguientes componentes en un tubo de microcentrifuga libre de nucleasas: 1µL de Oligo dT, 10 pg-5 µg RNA, 1 µL 10 mM de mix dNTP, 13 µL de ddH2O. Se calentó el mix anterior a 65ºC por 5 minutos y se incubo en hielo por aproximadamente 1 minuto. Se colectó todo en un tubo de centrifuga y se agregó: 4 µL del Superscript buffer (5X), 1µL 0.1 M DTT, 1µL de inhibidor de RNAsas, 1µL enzima Superscript III (transcriptasa reversa). Se homogeneizó pipeteando arriba y abajo. Se incubó a 50 º C por 45 minutos aproximadamente, se incrementó la temperatura a 55 ºC. Se llevó a una temperatura de 70 º C por 15 minutos para inactivar la reacción.  Estandarización de condiciones de productos de PCR para TFRC, Ferroportina, Transferrina y β-Actina mediante PCR Punto final. Se realizarón reacciones de 10 µL para cada gen, con gradientes de temperatura por debajo y por arriba de la temperatura de alineamiento obtenida por análisis bioinformática de los primers correspondientes a cada gen (TFRC, Ferroportina, Trabsferrina y β-actina). Las reacciones tenían lo siguiente: 5 µL Sybr Jenna Master Mix, 3.5 µL ddH2O, 0.25 µL de cada primer (Fw y Rv) específicos para cada gen, 1 µL de muestra (cDNA). TFRC Activación (Taq): 50 º C 2 minutos Desnaturalización: 95 º C 5 minutos Desnaturalización: 95 º C Alineamiento: 56, 58, 60 y 62 º C 37 segundos Extensión: 72 º C  16 segundos Extensión final: 72 º C  5 minutos Conservación: 4 º C  ∞ Ferroportina Activacion (Taq): 50 ºC 2 minutos Desnaturalización: 95 ºC 5 minutos Desnaturalización: 95 ºC 20 segundos Alineamiento: 56, 58, 60 y 62 ºC  20 segundos Extensión: 72 ºC  13 segundos Extensión final: 72 ºC  5 minutos Conservación: 4 ºC  ∞   Transferrina Activación (Taq): 50 º C 2 minutos Desnaturalización: 95 º C 5 minutos Desnaturalización: 95 º C Alineamiento: 62 y 64 º C 30 segundos Extensión: 72 º C  13 segundos   Extensión final: 72 º C  5 minutos Conservación: 4 º C  ∞ β-Actina Activación (Taq): 50 º C 2 minutos Desnaturalización: 95 º C 5 minutos Desnaturalización: 95 º C Alineamiento: 55, 57 y 60 ºC 30 segundos Extensión: 72 ºC  13 segundos Extensión final: 72 ºC  5 minutos Conservación: 4 ºC  ∞ Para TFRC, Ferroportina y Transferrina, los pasos 1, 2, 6 y 7 fueron de 1 ciclo y los pasos 3, 4 y 5 fueron de 40 ciclos. Para β-Actina los pasos 1, 2, 6 y 7 fueron de 1 ciclo y los pasos 3, 4 y 5 fueron de 35 ciclos. Se realizó la PCR con diferentes concentraciones de cDNA: 50, 250, 500 y 1000 ng y cada gradiente de temperatura y concentración con su blanco correspondiente.  Posteriormente se realizó la electroforesis con un gel de agarosa al 2% de cada PCR para detectar el gradiente en el que mejor amplificaba el gen, la detección se hizo en un transiluminador. Después de la obtención de las condiciones óptimas para la PCR de cada gen, se realizó la reacción con el mismo volumen en el Rotor Gene Qiagen, para PCR en tiempo real. Las condiciones de alineamiento adecuadas para cada gen fueron las siguientes: TFRC: 62 º C Ferroportina: 62ºC Transferrina: 62ºC β-Actina: 57 ºC Se obtuvieron las Ct de cada gen, para monitorear el incremento del número de copias del material genético y ver en que ciclo aproximadamente comenzaba la amplificación. Durante la estancia se logró aprender distintas técnicas moleculares como PCR punto final, PCR tiempo real, electroforesis, Western Blot. Así como manejar equipo del laboratorio como la cabina de flujo laminar, la cámara de electroforesis, el termociclador, el rotor gene, el transiluminador. También se consolidaron conocimientos acerca de la PCR y los problemas que se pueden presentar al realizar los distintos experimentos, pero sobre todo buscar soluciones eficaces para cada situación.

CONCLUSIONES

Se obtuvieron las condiciones óptimas para la amplificación de los transcritos: TFRC, ferroportina, transferrina y β-actina. Las condiciones fueron para punto final y tiempo real, usando células de glioblastoma multiforme C6.  

Asesor: Dr. Marisol Rosas Díaz, Universidad Autónoma de Tamaulipas

ESTANDARIZACIóN DE LA TéCNICA MIRU-VNTR 24 LOCI EN MUESTRAS CLíNICAS DE PACIENTES CON TUBERCULOSIS PULMONAR ACTIVA.

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ESTANDARIZACIóN DE LA TéCNICA MIRU-VNTR 24 LOCI EN MUESTRAS CLíNICAS DE PACIENTES CON TUBERCULOSIS PULMONAR ACTIVA.

de la Garza Buentello Cinthia, Universidad Autónoma de Tamaulipas. Asesor: Dr. Marisol Rosas Díaz, Universidad Autónoma de Tamaulipas

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

 Las enfermedades infecciosas como la tuberculosis, representan un grave problema de salud a nivel mundial. Actualmente existen 10.4 millones de casos de infección por Mycobacterium tuberculosis provocando 1.6 millones de muertes anualmente, además de que existen 558 casos nuevos de tuberculosis multidrogoresistente. Gracias a la secuenciación completa de Mycobacterium tuberculosis H37Rv; se ha podido realizar diversos estudios genéticos y epidemiológicos para la identificación de las diferentes cepas y linajes de esta micobacteria, esto ayudando al sector salud en brindar un tratamiento individualizado a cada paciente, además de encontrar reinfecciones exógenas o endógenas de una misma o diferente cepa, así mismo de contaminaciones cruzadas en el laboratorio, la capacidad infecciosa, virulencia y la drogo resistencia. Cabe destacar que a nivel nacional existen muy pocos estudios que brinden información epidemiológica de esta micobacteria, por lo que este proyecto plantea la estandarización de las 24 regiones variables repetitivas en tándem que presenta la micobacteria.

METODOLOGÍA

Se recolectaron 50 muestras de esputo de pacientes con tuberculosis pulmonar activa del Centro Regional de Tuberculosis de la Jurisdicción Sanitaria #4 de la Cd. Reynosa, Tamaulipas. Estas fueron trasladadas al Laboratorio de Biología Molecular de la UAT-UAMRA. Posteriormente se les realizó extracción de ADN mediante la técnica Fenol-Cloroformo; más tarde se aplicó la técnica PCR para la localización de las 24 regiones repetitivas en tándem de la micobacteria, y finalmente se observaron las amplificaciones obtenidas en un gel de agarosa del 2% a 120 V, por 1 hora.

CONCLUSIONES

Con los resultados obtenidos mediante la metodología se logró estandarizar 6 regiones repetitivas en tándem de muestras clínicas, pero con estos resultados no es posible hacer una identificación correcta de la micobacteria. Se pretende seguir con la estandarización y el procesamiento de muestras para determinar los diferentes linajes de esta bacteria. Se espera según revisión científica encontrar en nuestro estado el linaje 4 (Euro-Americano) y linaje 3 (africano-indio), esto debido a la migración de las personas a nuestra entidad federativa.

Asesor: Dr. Eusebio Nava Perez, Centro Interdisciplinario de Investigacion para el Desarrollo Integral Regional (IPN)

EFECTO DE EXTRACTOS DE PLANTAS SOBRE EL CRECIMIENTO DEL HONGO FUSARIUM SP.

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EFECTO DE EXTRACTOS DE PLANTAS SOBRE EL CRECIMIENTO DEL HONGO FUSARIUM SP.

de la Rosa Arce Gisela Itzamar, Universidad Autónoma de Occidente. Asesor: Dr. Eusebio Nava Perez, Centro Interdisciplinario de Investigacion para el Desarrollo Integral Regional (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En el manejo y control de plagas agrícolas se utilizan un gran número de productos químicos en la mayoría de los casos altamente nocivos para el ambiente y la salud humana, las personas que los aplican corren riesgos de intoxicación y consecuencias más severas. En el ambiente estos productos pueden provocar daños a plantas y animales, así como a la microflora del suelo. Algunos de plaguicidas que han sido identificados como un peligro para el ambiente y la salud humana son: el Aldrín, Clordano, DDT, Dieldrín, Endrín, Heptacloro, Mirex y Toxafeno. Estos contaminantes, por su característica de ser liposolubles, pueden acumularse en la grasa de los animales vivos y rápidamente tener efectos fisiológicos de largo plazo. Los hongos son plagas que atacan a los cultivos causando perjuicios graves, estos afectan tanto a la planta como a la cosecha, provocando pérdidas económicas y riesgos a la salud del consumidor. El hongo Fusarium puede producir micotoxinas que contaminan todo aquello que el hongo coloniza, y afectan en cualquier punto de la cadena de producción, almacenamiento o industrialización. El daño que las micotoxinas causan puede ser variable, se ha demostrado que algunas de ellas como las aflatoxinas tienen un efecto mutagénico, teratogénico y cancerígeno en animales controlados de laboratorio. El consumo de alimentos contaminados con aflatoxinas ha sido correlacionado con cáncer hepático de algunas poblaciones humanas. Para el control de los hongos al igual que de otras plagas se han buscado alternativas naturales como los extractos de plantas, que en el pasado ya se utilizaban, los cuales no son peligrosos para los aplicadores del producto ni para la flora y fauna del lugar donde se usen, resultan sencillos de elaborar y no requieren de reactivos químicos dañinos para el ambiente. En este verano se realizaron dos experimentos para probar los efectos de extractos de tres plantas sobre el hongo fitopatógeno Fusarium, éstas son: Neem (Azadirachta indica), Gobernadora (Larrea tridentata) y Epazote (Dysphania ambrosioides) consumidas comúnmente por sus propiedades curativas.

METODOLOGÍA

Se aisló el hongo Fusarium de una semilla de maíz contenida en una caja Petri, se esperó a que el hongo aislado creciera hasta llenar la caja con medio de cultivo PDA, lo cual tardó 10 días. Se prepararon los extractos pesando 20 gr de hojas y ramas secas trituradas de las plantas neem, epazote y gobernadora, se colocaron los 20 gr en un matraz para cada planta y se les añadió 200 ml de etanol, se dejaron por 48 horas en reposo, se filtraron utilizando un matraz Kitasato y un embudo de Büchner, y esta mezcla se pasó por un rotavapor para evaporar el etanol. Para probar los extractos en el hongo Fusarium, se realizaron 2 experimentos. En el primer experimento se prepararon 200 ml de medio de cultivo PDA en un matraz, este se esterilizó en una olla de presión y se vacío en cajas Petri. Del hongo Fusarium aislado se hicieron rodajas de 5 mm con un sacabocados, usando una aguja estéril se tomaron y se pusieron en el centro de las cajas. En cuatro cajas se colocaron empapadas por extracto rodajas de papel filtro estéril de un diámetro de 5 mm, quedando equidistantes con el hongo, se realizó este procedimiento con los tres extractos (neem, gobernadora y epazote) habiendo cuatro cajas de cada tratamiento. Se efectuó el procedimiento anterior para un tratamiento control donde las rodajas de papel filtro se empaparon con agua destilada. Todos estos procedimientos se hicieron dentro de una campana de flujo laminar y las cajas fueron selladas con papel parafilm. Se estuvieron tomando cada 24 horas fotografías a las cajas de los tratamientos. Esto durante siete días que tardó en llenar el hongo las cajas del tratamiento control. En el segundo experimento se prepararon cuatro matraces de medio PDA y se esterilizaron en una olla de presión. A tres de los matraces se les agrego de un extracto diferente, teniendo 100 ml de medio en cada uno con una concentración al 10% (v/v) del extracto. Cada medio con extracto se vacío en cuatro cajas Petri, obteniendo 12 cajas con tres medios, en otras cuatro cajas se vacío medio PDA que no contenía extracto para tener un tratamiento control. Teniendo los medios gelificados en las cajas Petri se procedió a colocar en el centro de éstas con una aguja estéril rodajas del hongo Fusarium hechas con sacabocados y fueron selladas con papel parafilm. Estos procedimientos se realizaron dentro de campanas de extracción. Se estuvieron tomando las medidas del crecimiento radial de los hongos, en el noveno día cuando los hongos del tratamiento control llenaron las cajas se tomó una fotografía a una caja de cada tratamiento juntas.

CONCLUSIONES

En este verano se obtuvieron conocimientos que contribuyen en el aprovechamiento académico del área biológica y ambiental. Al conocer ahora la efectividad de estos extractos se puede hacer uso de ellos evitando las consecuencias que provocan los plaguicidas químicos. En el primer experimento el efecto del extracto gobernadora sobre el hongo Fusarium fue significativo ya que se observó claramente el halo de inhibición conforme el hogo crecia. En los demás tratamientos (neem y epazote) no se observó el halo, pero el hongo tuvo un crecimiento más lento que en el tratamiento de control. Esto nos indica que la concentración en el extracto de la planta gobernadora es eficiente para evitar el crecimiento del hongo, mientras que del neem y epazote es insuficiente y al acercarse el hongo a las rodajas de papel filtro donde estaban los extractos los metabolitos de estos ya estaban degradados y no tenían efecto sobre el hongo. En el segundo experimento al encontrarse el extracto en el medio de cultivo PDA los hongos no revelaron crecimiento, esto muestra que los extractos si tienen efecto para evitar el crecimiento del hongo. En este experimento fue más evidente ya que este se hallaba directamente en el medio de cultivo de donde los hongos se nutrirían. El hongo solo creció en el tratamiento control y tardo 9 días en llenar la caja Petri.

Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

DEFINICIóN DE HáBITATS DE LOS LANGOSTINOS CON DESARROLLO LARVAL ABREVIADO DEL GENERO MACROBRACHIUM

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DEFINICIóN DE HáBITATS DE LOS LANGOSTINOS CON DESARROLLO LARVAL ABREVIADO DEL GENERO MACROBRACHIUM

de los Santos Contreras Arianna, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Todo ecosistema esta compuesto de componentes bióticos y abióticos, los factores físicos que tienen efecto sobre el ecosistema  son: luz solar, temperatura, precipitación, viento, altitud y corrientes de agua. Los ecosistemas de agua dulce son cuerpos de agua como los ríos, lagos y pantanos. Se diferencian de los ecosistemas marinos por que estos tienen una gran concentración de sales. ¿Cómo se forman los sistemas dulceacuícolas? Movimientos tectónicos Actividad volcánica Actividad glacial Disolución de material Acción del viento Fluctuaciones Problema ¿Cuáles son los tipos de hábitats identificables? Los tipos de hábitat se clasifican por: Loticos, Lenticos, Epigeo, Hipogeo 

METODOLOGÍA

Para la metodologia  se utilizaron datos de 79 sitios que abarcaban ríos y lagos del suroeste de la republica hasta Guatemala y Belice, se uso el programa Primer-e versión 6.1 para realizar este trabajo, primero se copiaron los datos hacia el programa, se procedió a estandarizarlos, se analizó el Domdis: que es el análisis de distancia multivariado, se analizó también el cluster que se encarga de agrupar a los grupos cercanos para analizar el sistema métrico no paramétrico de escala multidimensional usando la prueba de Kruskal Wallis.

CONCLUSIONES

De los 79 datos se obtuvieron tres grupos en los cuales: Primer grupo: presenta la mayor altitud 175 - 844 (mayor solubilidad de oxigeno) Segundo grupo: profundidad menor a 1 (velocidad menor) Tercer grupo: salinidad menor a 1 (mas concentración de PH) Conclusión Debido a las características que presentaban cada grupo, el primer grupo el cual presento mayor altitud y debido a esas características mayor solubilidad de oxigeno  se clasifico como un sistema Lotico Epigeo el cual pertenece a los ríos y lagos, estos se desarrollan en la superficie del suelo. El segundo grupo por tener menor profundidad y la velocidad de la corriente al ser menor se clasifico como sistema lentico Hipogeo el cual Se desarrollan bajo la superficie del suelo como grutas, cavernas, madrigueras, pozos o túneles. En el tercer grupo debido a características y variaciones diferentes a los dos grupos anteriores se consideró como una mezcla o grupo de transición entre un sistema lótico y un léntico, al no tener un nombre especifico se le conoce como un ecotono  ribereño.

Asesor: Dr. Luis Eduardo Segura García, Universidad de Guadalajara

DETERMINACIóN DE SALMONELLA EN CARNE DE RES

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DETERMINACIóN DE SALMONELLA EN CARNE DE RES

del Toro Díaz Dalia Karely, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Luis Eduardo Segura García, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Salmonella es una bacteria que causa distintas enfermedades, como lo es salmonelosis una afección transmitida en su mayoría a través de los alimentos destacando aquellos de origen animal. Ésta es una de las razones por las que se necesitan medidas adecuadas en cuanto a la manipulación y almacenamiento de los alimentos, para prevenir un brote de infecciones en la población. El objetivo de esta investigación es determinar cuál es el porcentaje de muestras que presentan Salmonella, para conocer el estado de inocuidad que emplean en distintas carnicerías de Jalisco.

METODOLOGÍA

Se recolectaron muestras de carne de res molida en las ciudades de Guadalajara, Zapopan y Tlaquepaque. A cada muestra de 375 g se le agregó 1,125 mL de agua peptonada amortiguada ISO para proporcionarle un pre-enriquecimiento, se masajeó durante dos minutos para homogeneizar, después se incubaron a 41 °C por 18 horas. Luego se tomaron dos alícuotas de cada muestra de carne de 0.1 mL y 0.5 mL para inocularse en 10 mL de caldos de cultivo Rappaport-Vasiliadis y Tetrationato respectivamente, se dejó nuevamente en la incubadora a 41 °C por 18 horas. Posteriormente se estrió cada muestra de ambos caldos en los agares selectivos diferenciales verde brillante y sulfito de bismuto, después fueron colocados en la incubadora a 35 °C por 24 horas. De cada agar se realizaron pruebas bioquímicas presuantivas TSI, LIA, UREA, que se sometieron a incubación a 35 °C durante 24 horas.

CONCLUSIONES

La prevalencia de Salmonella en carne molida de res de las carnicerías de la zona metropolitana muestran un 64% de muestras presuntivas positivas, teniendo el municipio de Guadalajara con 94% de muestras presuntivas positivas, el municipio de Tlaquepaque con 83% de muestras presuntivas positivas y el municipio de Zapopan con el 86% de muestras presuntivas positivas. La alta prevalencia de Salmonella en carne molida de res, muestras que las prácticas higiénicas no son las adecuadas y que hace falta realizar una concientización del personal que labora en las carnicerías y manipula la carne, para evitar la contaminación. Salmonella representa un riesgo de infecciones intestinales alto, para la zona metropolitana de Guadalajara, por lo que se sugiere, cocinar bien los alimentos y no consumir carne, cruda, medio cocida o cocida con limón, debido a que requiere un tratamiento térmico adecuado para la destrucción de la bacteria y el riesgo de enfermarse.

Asesor: Dr. Juan Florencio Gómez Leyva, Instituto Tecnológico de Tlajomulco

EVALUACIÓN DE FITOREGULADORES PARA LA MICROPROPAGACION IN VITRO DE PLATANO, VARIEDAD “ENANO GIGANTE”.

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EVALUACIÓN DE FITOREGULADORES PARA LA MICROPROPAGACION IN VITRO DE PLATANO, VARIEDAD “ENANO GIGANTE”.

del Val Valencia Julissa Maria Guadalupe, Instituto Tecnológico Superior de Apatzingán. Asesor: Dr. Juan Florencio Gómez Leyva, Instituto Tecnológico de Tlajomulco

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los métodos de propagación tradicional de banano no satisfacen la demanda del cultivo ni garantizan la obtención de plantas libres de enfermedades o altos rendimientos al ser propagados por la vía tradicional, producto del ataque de enfermedades. (Cruz-Rosero, 2017) La propagación in vitro es la técnica en la cual se extrae una pequeña parte de la planta (explantes) y se cultiva en condiciones asépticas en un medio de cultivo, formado por macronutrientes, micronutrientes, carbohidratos, vitaminas, reguladores de crecimiento y a veces aminoácidos, todo esto debe estar bajo ambiente controlado (Sandoval et al. 1991). Esta técnica comprende las etapas de iniciación o establecimiento, multiplicación, enraizamiento y endurecimiento (Rodríguez Burgos 2013). Dentro del estado de Michoacán, Municipio de Tierra caliente, diversos productores presentaron diferentes tipos de plagas como son enfermedades por hongos, bacterias y virus, entre las enfermedades causadas por hongos, se encuentran Sigatoka negra (Mycosphaerellafijiensis) y Fusarium oxyporum f. sp cubense (FOC raza 1 y recientemente raza 4) (Álvarez et al. 2013). Afectando a sus cultivos de banano, variedad enano gigante, por lo cual se optó por la micropropagación in vitro, debido a que esta técnica permite obtener diversos explantes genéticamente puros que cubren con la demanda de la población. La mayor problemática que presenta este tipo de procesos, es lo susceptible que es el medio MS (Murashige y Skoog, 1969) a la contaminación y como afecta a los explantes, por lo que, durante la presente estancia de verano, se pretende cumplir con los criterios propios de una micropropagación exitosa.

METODOLOGÍA

MATERIAL VEGETAL Se utilizaron los hijos de la planta de banano enano gigante, recolectados en el poblado de Plaza Vieja municipio de Tepalcatepec, estado de Michoacán, estos fueron trasladados al laboratorio de Biología Molecular en el Instituto Tecnológico de Tlajomulco. Inicialmente fueron reducidos de tamaño hasta 2.5 cm de diámetro y de 4 a 5 cm de altura, donde fueron lavados con agua corriente y desinfectados con una solución de jabón al 20%, permaneciendo ahí durante 20 min. Posteriormente fueron lavados nuevamente, esta vez con agua destilada estéril, para después ser agregados a una solución de hipoclorito de sodio al 30% durante 20 min, pasado este tiempo, se lavaron nuevamente, siguiendo con el protocolo de agua destilada estéril, esta vez dejándolos 30 min en una solución de hipoclorito de sodio al 30%. Dentro de la cámara de flujo laminar, se realizó una segunda reducción de los ápices hasta llegar a un tamaño de 1.5 cm de diámetro de la base y de 2 a 3 cm de altura; el proceso de reducción de tamaño continuó hasta obtener el explante apropiado. Fase de iniciación, establecimiento e inducción del crecimiento de explantes de banano enano gigante. Durante esta fase se obtuvieron los brotes adecuados para la multiplicación in vitro. La extracción y siembra de los meristemos apicales fue realizada en la cámara de flujo laminar después de haber sido desinfectados. Los meristemos aislados se cultivaron en un medio de iniciación cultivo MS (Murashige y Skoog, 1969) que contenga 1 mg. L de ANA (Ácido naftalenacético), 3 mg. L de 6-BAP (6-Bencilaminopurina) como fitorreguladores y 4 ml.L de antibiótico enroxil 10%, con pH ajustado de 5.8, estos son colocados bajo un fotoperiodo de 16 horas luz y 8 horas oscuridad. Al paso de 2 días, los meristemos aislados fueron extraídos del medio de iniciación e inducidos en medio MS sólido al 50% con las concentraciones correspondientes de 1 mg. L de ANA (Ácido naftalenacético), 3 mg. L de 6-BAP (6-Bencilaminopurina) como fitorreguladores y 4 ml.L de antibiótico enroxil 10% con pH ajustado de 5.8. Pasadas 2 semanas y al no observarse contaminación alguna, los explantes fueron nuevamente extraídos del medio solido con antibiótico e inducidos en medio solido MS, pero esta vez la concentración al 100%, añadiéndole 4 g. L de carbón activado y omitiendo el antibiótico.  

CONCLUSIONES

Al ser utilizado inicialmente el medio MS (Murashige y Skoog, 1969) con antibiótico como medio de iniciación, este arrojó un índice menor de contaminación, llegando así a obtenerse solamente un del 15%, su mayoría presentaban bacterias de origen desconocido, no obstante, los ápices contaminados lograron ser integrados nuevamente a medios libres de contaminación. La mejor combinación de fitorreguladores encontrados fue la de 3 mg. L de BAP y 1 mg. L de ANA, esto quedando demostrado debido a que al ser agregados solamente 2 mg. L de BAP, presentó un desarrollo de 2 cm de altura y una coloración opaca, mientras que por otro lado la primera combinación presentó un desarrollo de 4 cm de altura y una coloración más prominente.   Álvarez E, Ceballos G, Gañan L, Rodríguez D, González S, Pantoja A. 2013. Producción de material de ‘siembra’ limpio en el manejo de las enfermedades limitantes del plátano. Cali (Colombia). Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT). p. 2. [internet]. [ Consultado 2016 septiembre 13]. http://www.fao.org/3/a-as090s.pdf.   Cruz-Rosero, N., Canchignia-Martínez, H., Morante-Carriel, J., Nieto-Rodríguez, E., Cruz-Rosero, E., & Cabrera-Casanova, D. (2017). In vitro propagation of the Orito banana cultivar (Musa acuminata AA). Biotecnología Aplicada, 33(4), 4201-4204. Rodríguez Burgos PA. 2013. Cultivo de Tejidos. Módulo Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD. Escuela de Ciencias Agrícolas Pecuarias y del Medio Ambiente.Contenido didáctico del curso Cultivo de Tejidos. Bogotá (Colombia). p. 34.   Sandoval J, Brenes G, Pérez Sánchez L. 1991. Micropropagación de Plátano y Banano (Musa AAB, AAA) en el CATIE. Serie técnica, Informe técnico CATIE N° 186.Turrialba (Costa Rica). p. 2.

Asesor: Dr. Adolfo Virgen Ortiz, Universidad de Colima

BIOSíNTESIS DE NANOPARTíCULAS DE LITIO CON EXTRACTO DE OPUNTIA FICUS

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BIOSíNTESIS DE NANOPARTíCULAS DE LITIO CON EXTRACTO DE OPUNTIA FICUS

Delgadillo Lizaola James Frank, Universidad de Guadalajara. Ornelas Bretado Angelica Natalia, Universidad de Guadalajara. Asesor: Dr. Adolfo Virgen Ortiz, Universidad de Colima

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las enfermedades crónico degenerativas presentan un problema de salud pública por su prevalencia y mortalidad, este tipo de enfermedades se presentan principalmente en la población que se encuentra en edad productiva, por lo que produce altos costos y una consecuente carga para la sociedad. Las enfermedades neurodegenerativas constituyen un grupo heterogéneo de enfermedades que afectan al sistema nervioso central (SNC) y se caracterizan por una pérdida neuronal progresiva en áreas concretas cerebrales o sistemas anatomo funcionales. [1] El litio es un metal alcalino que se encuentra en todas las células de nuestro cuerpo, que es principalmente obtenido del consumo de agua, vegetales y granos. El litio tiene un rol importante en psiquiatría; en el tratamiento de distintos desordenes, tales como depresión, bipolaridad, enfermedad de Parkinson y síndrome Prader-Willi. Sin embargo, la dosis estándar recomendada de su consumo es de 25 μg por día, mientras que las dosis farmacológicas son de 500 a 1,500 mg por día o mayores, lo cual causa niveles altos de toxicidad en el cuerpo humano. [2] Por otro lado, en un estudio reciente se menciona que una dienta enriquecida en nopal u Opuntia ficus-indica, por su nombre científico, tiene efectos inhibidores en el daño renal y cardiaco causado por la toxicidad de carbonato de litio. La planta Opuntia ficus-indica tiene propiedades antioxidantes que ayudan a disminuir el estrés oxidativo generado a causa de un exceso de litio. [3]   Tomando en cuenta lo anterior, se propone la síntesis de nanopartículas de litio empleando extractos de Opuntia ficus, y mediante estrategias de química verde. OBJETIVO Establecer factores críticos en la obtención de nanopartículas metálicas de litio utilizando extracto acuoso de Opuntia ficus-indica.

METODOLOGÍA

La obtención de material verde de Opuntia ficus se realizó en un plantío ubicado en Colima, Colima. Se obtuvieron cladodios de tres distintas especies, donadas por el Sr. Irineo Molina Villareal, dueño del plantío, con la finalidad de encontrar la especie de nopal más adecuada al proyecto. Uno de los pasos más importantes fue encontrar las mejores condiciones para la preparación del extracto de nopal que utilizaríamos posteriormente en la síntesis. Los cladodios de nopal fueron lavados con agua desionizada, cortados y licuados moderadamente con material de acero inoxidable para evitar su oxidación. A 25 g de Opuntia ficus-indica se le añadió 50 ml de agua desionizada a 60°C, para posteriormente sonicar la solución a la misma temperatura. Se llevaron a cabo distintos medios de filtración para encontrar el mejor rendimiento; tales como filtración a vacío con papel, algodón, vidrio poroso y centrifugación. La diferencia de rendimiento entre los distintos métodos fue mínima, sin embargo, se encontró que se lograba con mayor rapidez al centrifugar. En el diseño de síntesis se utilizó como sustrato 25 ml de Litio a 1 x 10-3 M, variando la cantidad de extracto de Opuntia ficus-indica a utilizar (3 y 6 ml), la temperatura (60°C y Amb), y el tiempo de reacción (30 min, 1 h, 2 h, y 24 h). Esto con la finalidad de encontrar las mejores condiciones de la formación y tamaño de las nanopartículas buscadas. Se obtuvieron soluciones de color verde tenue en donde se esperaría la presencia de nanopartículas de litio, además de materia orgánica. Se realizo una prueba para intentar separar la materia orgánica de las nanopartículas metálicas, ultra-centrifugando a 100 000 g por 1h y 3 h. Y otra mediante filtración de membrana. Se obtuvo un precipitado color verde oscuro, y blanco en el caso de la membrana; a los cuales posteriormente se les agregó 250μL de etanol realizando tres lavados utilizando una centrifuga.

CONCLUSIONES

Los factores críticos para la formación de nanopartículas empleando la especie Opuntia ficus fueron; el tipo de nopal, el estadio fresco o seco, el tipo de molienda de los cladodios, el tiempo de uso del extracto posterior a su preparación y su conservación. La caracterización preliminar por espectroscopía de UV permite dar seguimiento en tiempo y cantidad del tipo de nanopartículas formadas. Es importante informar que el extracto por sí mismo presenta bandas de absorción a 230, 265, 322 nm por lo que es importante discriminar las mismas de aquéllas esperadas para las nanopartículas. Agradeciendo la donación de las pencas de opuntia ficus y la asesoría de la Dra. Hortensia Parra y de la QFB. Lina Barragán Mendoza de la Universidad de Colima.   REFERENCIAS Organización Mundial de la Salud. (2016). ¿Qué son los trastornos neurológicos?. 28/07/2019, de OMS Sitio web: https://www.who.int/features/qa/55/es/ Laurie Mischley, ND, MPH, PhD(c)1,2. (2014). The Role of Lithium in Neurological Health and Disease. University of Washington School of Public Health, Department of Nutritional Sciences. Anuar ben Saad, Ilhem Rjeibi, Sana Ndb, Nadm Zouari and Laxhar Zourgui. (10 December 2017). Ameliorative Effect of Cactus (Opuntia ficus indica) Extract on Lithium-Induced Nephrocardiotoxicity: A Biochemical and Histopathological Study. BioMed Research International, 2017, 8 pages. 

Asesor: Dr. Maria de los Angeles Camacho Ruiz, Universidad de Guadalajara

SÍNTESIS DE SUSTRATO CROMOGÉNICO PARA EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE B-ETERASAS

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SÍNTESIS DE SUSTRATO CROMOGÉNICO PARA EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE B-ETERASAS

Deloya Padilla Joyarit, Instituto Tecnológico de Acapulco. Hernández Martínez Karen Magdalena, Instituto Tecnológico de Tuxtla Gutiérrez. Asesor: Dr. Maria de los Angeles Camacho Ruiz, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La lignina es una sustancia natural que forma parte de la pared celular de muchas células vegetales, a las cuáles le da dureza y resistencia. La lignina es creada por la polimerización enzimática de tres monómetros, alcohol coniferílico, sinapílico y p-coumarílico. La estructura es una macromolécula compleja con una gran variedad de grupos funcionales con diferentes tipos de enlace. Las eterasas juegan un papel importante en la degradación de materiales naturales y contaminantes industriales, además con útiles en la síntesis de compuestos ópticamente puros y son ampliamente utilizadas en la industria textil y cuentan con potenciales aplicaciones agricultura, alimentos e industrias farmacéuticas. No existen al momento métodos analíticos rápidos compatibles con el cribado de alto rendimiento, para medir la actividad de las ß-eterasas, el diseño de una metodología espectrofotométrica permitirá contar con una herramienta útil para la selección de clones recombinantes, purificación de la enzima, búsqueda de enzimas nativas, etc. Se propone la síntesis de un sustrato para la ß-eterasa, cuya catálisis pueda se monitoreada por métodos espectrofotométricos, mediante la liberación del p-nitrofenolato (cromóforo). Por lo que durante el verano de investigación se estudió un protocolo para sintetizar la molécula 1-(4-hidroxi-3metoxifenil)-2-(4-nitrofenoxi)-etan-1-ona (PNP-GE). El sustrato sintético resulta en un nuevo ß-O-4 aril-éter, que se postula como sustrato efectivo para el cribado de actividad ß-eterasa.

METODOLOGÍA

Activación de la Lig F recombinante: Se inocularon cepas de E. coli en agar LB por la técnica de estría cruzada para la obtención de colonias aisladas, esperando 24 hrs para su crecimiento, posteriormente éstas se inocularon en el caldo LB sin antibiótico, manteniéndolo en agitación durante 24hrs. Obtención de la enzima ligninolítica: Se Centrifugó el caldo LB con el crecimiento celular para la obtención de la biomasa, descartando el sobrenadante. Las células de E. coli se sometieron a lisis celular con perlas de vidrio y buffer de equilibrio con pH de 8, para romper su pared celular y poder extraer la enzima, descartando el pellet y recuperando el sobrenadante (extracto crudo). Purificación de la Proteína (Enzima Ligninolítica): Se prepararon buffers para la utilización en el procedimiento de la purificación de la proteína recombinante, que contiene histidina: buffer de equilibrio, pH 8 y buffer de elución, pH 8. Para este procedimiento se utilizó una columna de níquel disuelto en etanol, se lava el gel de afinidad con 2 volúmenes de agua destilada para eliminar el etanol y luego 3 volúmenes de buffer de equilibrio, se retira la mayor parte del buffer de la parte superior de la columna antes de ser utilizada. Se carga el extracto crudo clarificado en la columna 3 volúmenes/hora. Una vez cargado todo el extracto lavar la columna con buffer en un gradiente escalonado de buffer de equilibrio: buffer de elución, de 10:0 - 0:10 (v:v). Con un volumen de columna por gradiente. Se prepararon fracciones de aproximadamente 1 ml en tubos eppendorf. La proteína que tiene histidina se eluye de la columna, utilizando 5 volúmenes/hora de columna de buffer de elución, recogiendo las fracciones para ser analizadas. Cromatografía SDS (electroforesis): Para la elaboración del gel se realizó la preparación del gel inferior (de corrida) el cual contiene acrilamida/bisacrilamida 30%/0.8%, Tris 3 M con pH 8.8, agua, SDS 10%, APS 10%, temed; gel superior (de concentración): acrilamida/bisacrilamida 30%/0.8%, Tris 1M con pH 6.8, agua, SDS 10%, APS 10%, temed. Como también tampón de migración (10X): Tris 0.25M con pH 8.5, glicina, SDS 1%. Se analizaron cinco muestras las cuales fueron: Volumen muerto, lavado, permeado, extracto crudo, Ligf puro, las cuales se cargaron con TS y TD, siendo sometieron a calentamiento a 96°C durante 5 min. Se cargó el gel con las muestras y el marcador molecular, una vez terminada la corrida se tiñó el gel por 24 hrs en agitación a 100 rpm, para retirarle la tinción se le colocó una solución decolorante de ácido acético, etanol al 95% y agua; obteniendo así las lecturas de las proteínas obtenidas en cada una de las muestras de acuerdo a su masa molecular. Purificación de sustrato por cromatografía flash: Se utilizó como fase estacionaria una columna de 10 ml empacada con silica gel. La fase móvil consistió en un gradiente escalonado de hexano: acetato de etilo, de 10:0-0:10 (v:v), con un volumen de columna por gradiente. Se prepararon fracciones de aproximadamente 5 ml en tubos de ensayo. Se realizó un análisis por cromatografía en capa fina (TLC) de las fracciones, utilizando una fase móvil de hexano:acetato de etililo 2:1 (v/v). Se recolectaron en tres frascos dependiendo de la molécula contenida y se evaporó el solvente en atmósfera reducida en un sistema de Rotavapor. Actividad ß-eterasa: En una microplaca, se depositaron 5µl de extracto intracelular que contenía a la enzima recombinante LigF, convenientemente diluida. Se añadieron 50 µl de glutationa reducida 12 mM en tampón tris-HCl 25 mM, pH 8.0. En seguida, se añadieron 50 µl de una emulsión de sustrato 2 mM, en tampón tris-HCl 25 mM, pH 8.0 +4% (v/v) de DMSO. Inmediatamente después, se colocó la microplaca en un lector de microplacas y se hicieron lecturas, en lapsos de 30 s con agitación previa en lugar de 5 s durante 15 min, a 410 nm.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró cumplir con los objetivos planteados del proyecto, como también se adquirió conocimientos prácticos y nuevas técnicas de cromatografía como: de purificación de proteína, la cual fue identificada por electroforesis SDS y obtuvimos el peso molecular aproximado de la proteína y  purificación de sustrato, este permitió medir la catálisis en tiempo real y fue monitoreada por métodos espectrofotométricos en formato microplaca, se obtuvo que la actividad enzimática fue de 1238.3 (mDO/min)/mg.  

Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

ESTABLECIMIENTO DE LAS CONDICIONES DE FERMENTACIÓN PARA LA OBTENCIÓN DE ÁCIDO LÁCTICO A PARTIR DE ALMIDÓN EXTRAÍDO DE SEMILLA MANGO.

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ESTABLECIMIENTO DE LAS CONDICIONES DE FERMENTACIÓN PARA LA OBTENCIÓN DE ÁCIDO LÁCTICO A PARTIR DE ALMIDÓN EXTRAÍDO DE SEMILLA MANGO.

Alcantar Huerta Esmeralda, Instituto Tecnológico de Morelia. Díaz Aguilar Juan Jose, Instituto Tecnológico de Morelia. Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

  El ácido láctico es un ácido orgánico ampliamente utilizado en diversas industrias como lo son la industria alimentaria, plásticos, fertilizantes, entre muchas otras. La producción biotecnológica del ácido láctico ha adquirido gran importancia debido a los beneficios ambientales y al uso de recursos renovables en lugar de los petroquímicos. Al aprovechar un desecho orgánico como lo es la semilla de mango se ofrece una alternativa rentable y sustentable ofreciendo múltiples ventajas como lo es el alto rendimiento del almidón además de la facilidad de recolección y abundancia del diseño en la mayor parte del año en comparación con otras investigaciones sobre el desarrollo de métodos biotecnológicos para la producción de ácido láctico, con el objetivo de hacer el proceso más eficiente y económico. De acuerdo a lo reportado en la literatura, se propuso establecer las condiciones de fermentación, a fin de obtener mejores resultados en el proceso homofermentativo para la producción de ácido láctico.

METODOLOGÍA

Se comenzó por abrir el hueso de mango y se extrajo el cotiledón, el cual posteriormente se llevó a un horno de secado a 30°C por 96 horas. Se molió hasta obtener un tamaño de partícula de 0.125 mm aproximadamente. Se hidrolizó el almidón con ácido sulfúrico utilizando concentraciones de 2, 3 y 4% v/v para ser llevado a él autoclave por 15 minutos a 15 psi y 115°C. El proceso para aislar el lactobacilo del suero de leche consistió en preparar medio agar MRS en cajas de Petri, para posteriormente llevar a cabo la siembra del mismo y mantener en incubación por 48 horas a 30°C. Para poder llevar a cabo el establecimiento de las condiciones de fermentación se optó por neutralizar el hidrolizado con NaOH 1M para llevar a cabo la prueba de DNS propia para identificar los azúcares reductores. Finalmente se prepararon en 4 matraces Erlenmeyer de 250 ml, 2 preinoculos de 100 y 2 más de 50 ml donde estos contenían el hidrolizado de almidón previamente neutralizado, acetato de sodio, extracto de levadura, sulfato de magnesio heptahidratado y fosfato de sodio en los cuales se sembró el lactobacilo aislado para mantener en incubación por 72 horas a 100 rpm a 37°C. Finalmente se determinó la concentración celular (célula/ml).

CONCLUSIONES

Al realizar la prueba de DNS para azúcares reductores en las concentraciones de 2, 3 y 4% de ácido sulfúrico v/v, se determinó que en la concentración al 3% es donde se presentó una concentración de 37.9962 g/L, mientras que para las concentraciones de 2 y 4% se obtuvieron valores de 23.0251 g/L y 13.3764 g/L respectivamente. Después de observar los resultados obtenidos, se volverá a repetir la misma metodología, pero evaluando concentraciones más cercanas al 3% a fin de determinar si existe la posibilidad de obtener una concentración aún más alta a la ya obtenida.

Asesor: Dr. Julian Torres Jacome, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

ALTERACIóN DE RITMO CARDIACO EN RATONES POR CAMBIO DE MICROBIOTA

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ALTERACIóN DE RITMO CARDIACO EN RATONES POR CAMBIO DE MICROBIOTA

Domínguez Hernández Daniel, Universidad Veracruzana. Asesor: Dr. Julian Torres Jacome, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Actualmente en nuestro país ha presentado un incremento de enfermedades crónicas no transmisibles, tales como diabetes, hipertensión, dislipidemia y obesidad. Las cuales presentan un problema para la salud pública, debido a su aumento en mortalidad general, enfocando en Diabetes Mellitus tipo 2 en México la carga económica de la diabetes se estimó en 362,859.82 millones de pesos, estos gastos se dividen en gastos directos e indirectos, en directos se estimó $179,495.3 millones de pesos,  del total el 87% es para tratar las complicaciones, en el estimado de los gastos indirectos de  se estimaron en $183,364.49 millones de pesos, la muerte prematura siendo la de mayor impacto en gasto con un 72% del total. Se debe recalcar que cada vez afecta a población más joven, incluso niños, lo que sin duda alguna representa un panorama desalentador. Cifras actualizadas en México nos coloca como uno de los países con mayor prevalencia de síndrome metabólico (con 36.8%), sobrepeso y obesidad (71.3%) e hipertensión arterial (31.5%) y nos encontramos en el lugar número 5 con más alto índice de diabetes, con un total de 12 millones de personas viven con diabetes. Los problemas a corto, mediano y largo plazo se deben detener lo antes posible, debido a su alto impacto. En este verano de investigación mediante la medición de electrocardiogramas se buscan anormalidades en la frecuencia cardiaca a causa de la diabetes, tomando en cuenta que la diabetes el primer órgano que afecta es el corazón, la idea principal de la investigación es la creación de un marcador biológico para determinar el tiempo de la presencia de diabetes en el paciente.

METODOLOGÍA

El modelo con el que se trabajó fue de ratones con obesidad debido a dieta alta en sacarosa. Hay dos modelos los cuales son animales bajo tratamiento de metformina procedente de mamás obesas y otro modelo de animales control de procedencia de mamás flacas. Al modelo con el que trabaje desconozco su procedencia. En ambos modelos se les hace registro de electrocardiograma para observar si hay presencia de anormalidades en su frecuencia cardiaca. Una vez teniendo los electrocardiogramas del grupo de ratones se procede a analizar cada ciclo cardiaco en busca de cualquier tipo de anormalidad, ya sean arritmias supra ventriculares y ventriculares, se enfoca principalmente en el intervalo RR, intervalo PP, intervalo PR y duración de onda P, siempre teniendo en cuenta la morfología normal de todo el complejo. Al analizar los electrocardiogramas se tiene presencia desde anormalidades en la onda P, donde hay presencia de onda P bifásica, mellada o invertida. Donde la bifásica nos podría indicar que uno de los modelos presentaba crecimiento auricular izquierdo o derecho dependiendo la morfología que presentará. Al haber presencia de onda P mellada se podría sospechar de una dilatación auricular, en un retraso o bloqueo. En cuanto a la onda P invertida nos indica ritmos auriculares bajos o posiblemente hubo un error al colocar los electrodos. Si hay ausencia de la onda P puede ser causa de una fibrilación auricular, flutter auricular en ambos casos hay presencia de las ondas f, también puede presentar algún bloqueo sinoauricular, taquicardias, taquicardias ventriculares en donde la onda P aparecerá retrograda, también se puede afectar por una hiperpotasemia. En el intervalo PR, se presenta prologado por causa de algún tipo de bloqueo auriculoventricular de primer, segundo o tercer grado; En el de primer grado se debe por un retraso de la conducción de las aurículas a los ventrículos, el de segundo grado es más común que el anterior y se caracteriza por una mayor prolongación de PR, donde hay ausencia de RS-T  (latido fallido), en donde puede ser un bloqueo tipo I o II, el primero causado por una anomalía en el nódulo AV y en el tipo II se puede caracterizar por un número fijo de ondas P que no se conducen con el intervalo RS, este se puede deber por una anomalía del haz del sistema de His-Purkinje; en el bloqueo de tercer grado es por un bloqueo completo del impulso desde las aurículas hacia los ventrículos. Cuando el intervalo PR se encuentra acortado se puede deber a una extrasístole auricular o por una pre excitación, puede ser una pausa compensatoria. Dentro del análisis fue lo que más se presentaba y se podía tener la idea de una diagnostico que presentaba cada modelo. De igual forma se podía apreciar que en algunos modelos presentaban una despolarización ventricular prolongada o con voltaje elevado, pueden ser por extrasístoles ventriculares, en el primero no sigue su conducción en el sistema de Purkinje y en el otro el impulso no se neutraliza debido a que no pasan simultáneamente en ambos ventrículos. En el modelo Ratón 1 del lote 11 de octubre MetfCL en el análisis de su electrocardiograma presenta una morfología anormal en el segmento ST, este presenta elevación, la cual se podría deber a una repolarización precoz.

CONCLUSIONES

Durante el verano de investigación adquirí conocimientos acerca de enfermedades crónicas no transmisibles, en la línea de investigación se busca un marcador biológico para la diabetes. Los modelos estudiados en varios de estos hay presencias de anormalidades en su frecuencia cardiaco asociada a su alimentación y a su estado de salud inducido. El control de enfermedades crónicas (hipertensión arterial, diabetes, síndrome metabólico y la obesidad) es un tema al cual se le debe dar una solución, porque la epidemia ya está presente y no proyecta un buen futuro. Al hacer la medición de los electrocardiogramas observo que el cambio de su alimentación provoco en los modelos arritmias, por la presencia de lo que es la diabetes, la diabetes daña órganos siendo el corazón el primero es ser afectado, las arritmias pueden causar complicaciones que pueden llevar a comprometer la vida.  Me deja la idea que el caso de diabetes en México se presenta por el incremento en la prevalencia de la obesidad relacionada con cambios en los estilos de vida, aumento en la densidad calórica de la dieta y reducción en la actividad física.

Asesor: Dr. Didilia Ileana Mendoza Castillo, Instituto Tecnológico de Aguascalientes

OBTENCIÓN DE PRODUCTOS DE VALOR AGREGADO A PARTIR DE LA SEMILLA DE GUAYABA

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OBTENCIÓN DE PRODUCTOS DE VALOR AGREGADO A PARTIR DE LA SEMILLA DE GUAYABA

Domínguez Rico Sebastián Alberto, Instituto Tecnológico de Tapachula. Asesor: Dr. Didilia Ileana Mendoza Castillo, Instituto Tecnológico de Aguascalientes

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En los últimos años, el aumento de la demanda energética e impactos ambientales que han sido ocasionados por el consumo de combustibles convencionales, han generado un interés en investigar fuentes renovables amigables con el medio ambiente. Por tanto, se ha considerado a la biomasa como una fuente potencialmente valiosa para la obtención de productos con valor agregado. Sin embargo, algunos países utilizan biomasas que se consideran de consumo humano (aceite de soya y maíz) en la obtención de energéticos. Lo anterior incide en el costo final de producción. Por tal motivo, en este proyecto se propuso el uso de biomasa residual de guayaba como una alternativa atractiva debido a que no interviene con el suministro destinado al consumo humano. Además, es una solución para la eliminación de grandes cantidades de materia desechada por la industria agroindustrial.

METODOLOGÍA

Los residuos agroindustriales, que consistieron en las semillas de la guayaba, se obtuvieron de una empresa local ubicada en Aguascalientes, Ags. llamada Valle Redondo. Dichos residuos se secaron utilizando energía solar. Una vez que se eliminó la mayor cantidad de humedad, la materia prima se sometió a un segundo proceso de secado a 100°C durante 15 h. Posteriormente se trituró y se tamizó para obtener diferentes tamaños de partículas. La biomasa se sometió a un proceso de extracción para la recuperación de lípidos. Para este fin, los lípidos se extrajeron utilizando solventes orgánicos (hexano y mezcla hexano-etanol, relación en volumen 3:1). Se llevaron a cabo cinéticas de extracción utilizando 50 g de semilla de guayaba con un tamaño de partícula entre 0.0860 - 0.0165 pulgadas, en contacto con 100 ml de hexano en recipientes de 250 ml. Se establecieron 6 intervalos de tiempo para la cinética, los cuales fueron 0.083, 0.5, 1, 3, 5 y 9 h. Además, se evaluó el efecto de la temperatura sobre el proceso de extracción, para lo cual se emplearon dos temperaturas: 25 y 40°C. Todos los experimentos se realizaron por duplicado. Después de completar los intervalos de tiempo en el baño, la mezcla biomasa-solvente se dejó reposar durante 15-24 h. La fase líquida se recuperó y se sometió a filtración, el líquido filtrado se introdujo en un recipiente previamente pesado. Del mismo modo, el hexano se eliminó al vacío dejando la materia de interés. Por diferencia de pesos se determinó la cantidad de lípidos contenidos en la semilla de guayaba. Los lípidos fueron sometidos a una reacción de transesterificación empleando metanol y ácido clorhídrico para determinar la composición de los ácidos grasos. Se empleó un cromatógrafo de gases de la marca Thermo Scientific para determinar la composición del aceite bajo estudio. Por otra parte, se determinó el porcentaje de ceniza por diferencia de peso sometiendo a la semilla a una temperatura 555°C por 3 h en una mufla Thermo Scientific. Finalmente, la biomasa que se sometió al proceso de extracción, se utilizó como precursor para preparar un material carbonizado que se puede emplear como adsorbente o catalizador. Para dicho fin se tomaron 100 g de semilla de guayaba a la que previamente se le extrajo el aceite. La semilla se lavó con agua desionizada y se dejó secar durante 24 h a una temperatura de 50°C. Posteriormente, se sometió a un proceso de pirolisis a 600°C durante 2 h en atmósfera de nitrógeno. El producto de la pirolisis se lavó con agua desionizada y se filtró para remover impurezas.

CONCLUSIONES

Los experimentos realizados para la extracción de aceite muestran que se puede obtener de un 8 a 14% de rendimiento en peso de aceite de la semilla de guayaba, dando mejores resultados usando la mezcla de solventes hexano-etanol (relación volumen 3:1). Se observó que en partículas más pequeñas, la obtención de aceite fue mayor. El análisis de cromatografía de gases reveló que aproximadamente el 80% del aceite contiene ácido linoléico. Además, se identificaron otros ácidos grasos como el ácido palmítico, oleico y mirístico en menor proporción. En el estudio cinético se determinó que el tiempo de contacto no es un factor que afecte el rendimiento en la extracción de aceite ya que desde los primeros tiempos de contacto se obtuvo la mayor cantidad de aceite. Por otra parte, el incremento en la temperatura afectó negativamente el proceso de extracción, obteniendo menor  rendimiento. Por ende, en las condiciones en las que se obtuvo mejor cantidad de aceite fueron a 25°C. Finalmente, el estudio de cenizas demostró que el contenido de materia inerte es menor al 3%. Por tanto, se puede concluir que la semilla de guayaba puede tener un amplio uso en la ingeniería ambiental, ya que a partir de ella se pueden obtener diversos productos de valor agregado.

Asesor: Dr. Jacinto Treviño Carreón, Universidad Autónoma de Tamaulipas

GERMINACIóN DE SEMILLAS

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GERMINACIóN DE SEMILLAS

Dorado García Elia María, Instituto Politécnico Nacional. Asesor: Dr. Jacinto Treviño Carreón, Universidad Autónoma de Tamaulipas

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Una planta que fue germinada y continua desarrollándose bajo condiciones naturales de luz solar; la cantidad, la calidad y la duración dependen en gran medida de la estación del año, la hora del día, la ubicación geográfica y el clima. La luz solar puede incluso comprender los colores violeta, azul, verde, amarillo, naranja y rojo. En general, los diferentes colores de la luz tienen diferentes efectos sobre las plantas, pero depende de la especie, por ello es importante reconocer los efectos que causa en ellas cada tipo de luz y bajo qué condiciones se deben encontrar para conservar las especies.

METODOLOGÍA

Recolección de Semillas Se recolectaron frutos provenientes de dos localidades de la especie de Stenocereus griseus (Jaumave y Tula) y frutos de Myrtillocactus geometrizans (Garambullo). Los frutos fueron almacenados para posteriormente extraer las semillas del fruto. En papel de periódico se fue esparciendo la pulpa del fruto y este fue expuesto al sol para que se secara por completo y así facilitar la obtención de la semilla. Esterilización de Semillas Se utilizó el método de flotación para identificar las semillas que están en posibilidades de germinar (viables) y estas se utilizaron en el experimento de germinación. Por último, estas semillas se esterilizaron de la siguiente manera: Esterilizar la Campana de Flujo laminar, limpiando con alcohol al 90% y algodón de abajo hacia arriba en las tres paredes y de atrás hacia adelante en la base de la campana. Las semillas se colocan en un vaso de precipitado y se agrega alcohol a 90% con dos gotas de shampoo neutro (Se utiliza este tipo de jabón debido a su nivel de pH balanceado) y se dejan durante cinco minutos. Se enjuagan siete veces con agua destilada durante 15 minutos (dependiendo de la semilla). Una vez enjuagados, se les agrega cloro (10 ml) y agua destilada (90ml) en el vaso de Precipitado, para desinfectar las semillas (7 repeticiones). Siembra de Semillas La siembra se realizó colocando papel filtro de polipropileno en la superficie de las cajas petri, el papel filtro se humedece con 2ml de agua destilada. Posteriormente se utiliza una espátula esterilizada para depositar 50 semillas distribuidas uniformemente en cada caja petri. Se establecieron 20 repeticiones por localidad de Stenocereus griseus y 12 repeticiones para la especie de Myrtillocactus geometrizans. Una vez terminada la siembra en las cajas petri y para evitar la contaminación de las semillas, estas fueron selladas con Kleen-pack. Además de los tratamientos en cajas petri, también se realizo una segunda siembra en tierra negra, en vasos de plástico, el cual se lleno hasta la mitad y se colocaron 15 semillas, para después cubrirlas con un centímetro de tierra. Se establecieron 20 vasos para las semillas de Stenocereus griseus de Jaumave, Tula y 20 para las semillas de Myrtillocactus geometrizans. Incubación de Semillas Las cajas Petri se colocaron en un prototipo de Germinadora, en tratamientos con 4 tipos de luz (Azul, Verde, Roja y Blanca) con su respectiva potencias de calor cada una. Finalmente se etiquetaron y registraron todos los tratamientos tanto en caja petri como en los vasos con suelo, y se acomodaron en la Germinadora de la siguiente manera: 5 cajas petri de Jaumave, 5 cajas petri de Tula, 3 cajas petri de Garambullo, 5 vasos con semilla de Jaumave, 5 vacos con semilla de Tula y 5 vasos con semilla de Garambullo. Estas cantidades por cada una de las luces. Monitoreo de Semillas Las semillas se mantuvieron bajo observación la cantidad de días dependiendo de la fecha en la que fueron sembradas, tanto en caja petri como en suelo. Por ello las listas donde se fueron registrando los datos de todas las semillas quedaron con la cantidad de días observados, de la siguiente forma: Jaumave en caja petri - 25 días Jaumave en suelo - 19 días Tula en caja petri - 25 días Tula en suelo - 19 días Garambullo en caja petri - 12 días Garambullo en suelo - 12 días Trasplante de Semillas El trasplante se realizó únicamente para las semillas que fueron sembradas inicialmente en las cajas petri, cuando las semillas empezaron a germinar se agrego agua conforme se observó la necesidad, para mantenerlas con vida. Se fueron monitoreando diariamente y se fue registrando cada semilla germinada en cada uno de los tratamientos, los datos fueron registrados diariamente, para finalmente desarrollar las gráficas de porcentaje y velocidad de germinación. Cuando las plantas alcanzaron un tamaño ideal para el trasplante de las cajas petri a sustrato sólido, se sacaron y se pasaron a envases de plástico con suelo para aportarles a las plantas nutrientes. Análisis de Datos

CONCLUSIONES

Para las semillas que pueden estar bajo control y observación en un laboratorio, daría mejores resultados bajo la luz verde, siempre y cuando germinen inicialmente en luz verde para despues ser transplantadas a suelo sin cambiar la luz. A las semillas que crecerán directamente en área abierta necesitan sembrarse a 1 cm de profundidad, procurando estar en una ubicación donde se les pueda aportar luz solar con una calidad similar a las luces roja y azul.     Cuando se siembra una semilla en suelo, la semilla queda bajo tierra en una determinada profundidad y recibe una calidad de luz la cual le ayuda en el proceso de germinación. En este caso las semillas que fueron germinadas en suelo necesitan de la luz azul y roja. Cuando fueron sembradas en las cajas petri, la semilla sufre un tipo de confusión y piensan que con la luz verde estan sembradas en suelo.

Asesor: Dr. Ali Margot Huerta Flores, Universidad Autónoma de Nuevo León

DESARROLLO DE HETEROESTRUCTURAS A BASE DE HEMATITA Y SEMICONDUCTORES PARA SU USO EN UNA CELDA PEC PARA LA GENERACIóN FOTOELECTROQUíMICA DE COMBUSTIBLE BASE SOLAR

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DESARROLLO DE HETEROESTRUCTURAS A BASE DE HEMATITA Y SEMICONDUCTORES PARA SU USO EN UNA CELDA PEC PARA LA GENERACIóN FOTOELECTROQUíMICA DE COMBUSTIBLE BASE SOLAR

Dorado López Fabián Guillermo, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Ali Margot Huerta Flores, Universidad Autónoma de Nuevo León

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El uso excesivo de combustibles fósiles está afectando a nuestro planeta en forma de calentamiento global, conflictos energéticos entre naciones y el agotamiento de las reservas energéticas. El hidrógeno es una prometedora fuente de energía para sustituir a los combustibles fósiles debido a que es una fuente de energía limpia, renovable y almacenable. Entre las tecnologías destinadas a la producción de hidrógeno a través de la hidrólisis del agua, los enfoques fotocatalíticos y fotoelectroquímicos han sido ampliamente estudiados como una fuente de energía sin contaminación ambiental adicional.  Algunos óxidos metálicos han sido extensamente utilizados como fotocatalizadores para la producción de hidrógeno debido a la combinación favorable de ciertas propiedades como estructura electrónica, características de absorción de luz, características de transporte de carga y tiempos de vida de excitación. Entre ellos se encuentra la hematita (Fe2O3), cuyas características de bandas podrían generar buenos resultados en cuanto a la producción de hidrógeno mediante fotocatálisis.

METODOLOGÍA

Se prepararon suspensiones precursoras de 4 materiales (sus1, sus2, sus3 y sus4) utilizando la técnica sol-gel, además de dos mezclas 1:1 de estas soluciones (sus1-sus4 y sus2-sus4). A partir de las 4 suspensiones precursoras y las dos mezclas, se prepararon 12 celdas (A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K y L) con diferentes heteroestructuras multicapa en sustrato de ITO, utilizando la técnica de spin-coating para depositar y calcinando en mufla a 500 C por 3 horas en aire para la síntesis de los semiconductores en la capa fina. Se determinó el espectro de rayos X, con un difractómetro de rayos X, y la morfología superficial, con un microscopio electrónico de barrido. Se analizaron los espectros de absorción de las 12 celdas para determinar la energía de banda prohibida, utilizando un espectrofotómetro UV-vis.  Para la determinación de las propiedades fotoelectroquímicas y fotocatalíticas de las celdas, se elaboró un electrodo por cada celda con alambre de cobre. Posteriormente se realizaron en un potenciostato las pruebas de OCP, Voltametría Cíclica, Cronoamperometría y espectroscopia de impedancia electroquímica, de donde se obtuvieron las gráficas de Nyquist y Mott-Schottky. Con estas pruebas se determinaron las eficiencias de fotoconversión, densidad de donadores y el potencial de banda plana de cada electrodo. Para la determinación de producción de hidrógeno se utilizaron los electrodos cuyas eficiencias de fotoconversión fueron más elevadas. Esto se realizó en un reactor con 200 mL de agua destilada, en agitación, acoplado a un cromatógrafo de gases. La luz de excitación fue una lámpara de luz UV con longitud de onda de 254 nm. En cada experimento se tomó muestra, por duplicado, cada 30 min durante 3 horas. 

CONCLUSIONES

Los espectros de rayos X demuestran que se obtuvieron las fases puras de los materiales sobre los sustratos. Las energías de banda prohibida calculadas para cada material individual resultaron similares a las reportadas en la bibliografía, mientras que en las heteroestructuras las energías de banda prohibida disminuyeron en comparación al material puro..  Las heteroestructuras G, J, K y L mostraron las mejores eficiencias de fotoconversión, 1.17, 1.14, 1.41 y 1.14, respectivamente. Con estas se realizó el experimento de producción de hidrógeno, produciendo 1223.12 µmol/gh, 1940.06 µmol/gh, 2355.2 µmol/gh y 1460.44 µmol/gh para G, J, K y L respectivamente.  En conclusión, las heteroestructuras propuestas podrían ser utilizadas para la producción de hidrógeno a partir de agua por fotocatálisis.

Asesor: Dr. Luis Javier Martínez Morales, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

ANáLISIS DEL INSERTO DEL GEN PHBC DE AZOSPIRILLUM BRASILENSE SP7 EN CEPAS DE E. COLI XL1-BLUE

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ANáLISIS DEL INSERTO DEL GEN PHBC DE AZOSPIRILLUM BRASILENSE SP7 EN CEPAS DE E. COLI XL1-BLUE

Duarte Andrade Fernanda Guadalupe, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Luis Javier Martínez Morales, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En el presente proyecto se trabajó con el gen phbC de la bacteria Azospirillum brasilense, que se encuentra en el plásmido 3 y tiene un tamaño de 1.2 kb. Después del análisis bioinformatico se diseñaron primers para amplificar dicho gen.   Para cada aplicación de la PCR es necesario ajustar las condiciones y el diseño de la reacción, tales como: la duración de las fases de apareamiento y elongación el tipo de cebadores o primers empleados y sus temperaturas de fusión  el tipo de polimerasa utilizada las cantidad de los reactivos y de ADN molde la longitud del amplicón o producto de PCR obtenido Una pareja de primers debe tener temperaturas de alineamiento muy cercanas para maximizar el rendimiento, lo cual suele traducirse en un contenido en GC similar, entre 50% y 60%.  Las características de los primers se obtuvieron con ayuda de  programas informáticos como oligocalc y molbiol.       

METODOLOGÍA

Se realizó la purificación y elaboración de células quimiocompetentes de cepas de E. coli XL1-Blue​, sembrándolas en medio LB y posteriormente agregándole CaCl2 y choque térmico, permitiendo que los poros se abran dejando entrar el DNA deseado. La transformación de E. coli XL1-Blue​ se llevó a cabo con plásmido pGLO para la comprobación de la eficacia de las células generadas, obteniendo células resistentes a ampicilina. La PCR se llevó a cabo con las siguientes condiciones: desnaturalización inicial: 95 °C por 5 min, desnaturalización: 95 °C por 30 seg, alineamiento: 67.5 °C por 30 seg, extensión: 72 °C/2.5 min, extensión final: 72 °C/10 min, número de ciclos: 35. El producto se mantuvo a 4 °C al finalizar la amplificación. Posteriormente se analizó el producto de PCR  mediante electroforesis en gel de agarosa al 0.8% y se tiñó con bromuro de etidio para revelar las bandas.  

CONCLUSIONES

Se realizo la comprobación de la construcción obtenida con pCR2.1-TOPO:phbB mediante una digestión doble con enzimas de restricción EcoRV y HindIII. Al realizar la electroforesis obtuvimos ambas bandas deseadas: con 1.2 kb el gen phbB y con 3.9 kb el vector 2.1-TOPO, comprorbando que inicialmente se insertó. Para una comprobación más exacta se subclonará en el vector pEQ31 para expresar la proteína Phb sintasa (phbC).

Asesor: Dr. Daniel Ricardo Delgado, Universidad Cooperativa de Colombia (Colombia)

ESTUDIO TERMODINáMICO DE LA SOLUBILIDAD DEL TRICLOCARBAN EN MUESTRAS COSOLVENTES ETILENGLICOL + AGUA.

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ESTUDIO TERMODINáMICO DE LA SOLUBILIDAD DEL TRICLOCARBAN EN MUESTRAS COSOLVENTES ETILENGLICOL + AGUA.

Aguiar Sevilla Jesús Uriel, Instituto Tecnológico de Tepic. Duarte Arcadia Elissa, Instituto Tecnológico de Tepic. Asesor: Dr. Daniel Ricardo Delgado, Universidad Cooperativa de Colombia (Colombia)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

¿Cómo afecta la composición cosolvente y la temperatura la solubilidad del Triclocarban? La cuantificación de la solubilidad de fármacos en medios acuosos es el primer paso para el desarrollo de cualquier forma farmacéutica, por lo que la industria farmacéutica además de laboratorios de investigación invierte una gran cantidad de recursos en esta etapa. Por tanto, la determinación experimental de la solubilidad de fármacos en diferentes sistemas co-solvente en función de la temperatura, arroja datos de gran relevancia que permiten elucidar de mejor manera los mecanismos involucrados en las interacciones moleculares fármaco-solvente.

METODOLOGÍA

En la mezcla de disolvente {Ethane-1,2-diol (1) + Agua (2)} se agregó una cantidad suficiente de triclocarbán (TCC) hasta saturar la solución en matraces de vidrio oscuro tapados. La experimentación se realizó basándose en diez diferentes concentraciones, en un aumento de 0.1 en 0.1 en fracción másica, siendo la décima etilenglicol del 99%. Los matraces se colocaron en termostatos de enfriamiento (Medingen K-22 / T100, Alemania) mantenidos a 318.15 (± 0.05) K durante dos días para alcanzar el equilibrio. Durante esos se requería agitación de cada uno de los matraces para que pudieran alcanzar la condición necesaria de la experimentación. Previamente se realizó una curva de calibración mediante la técnica de absorbancia de luz UV para así poder determinar la concentración de TCC de cada solución realizando una interpolación de la curva de calibración gravimétrica espectrofotométrica UV construida anteriormente. (espectrofotómetro UV / VIS EMC-11-UV, Alemania). Se realizó la misma experimentación a 308.15 K, 298.15 K y 288.15 K.   

CONCLUSIONES

La solubilidad de TCC en los disolventes de la mezcla investigada aumentó con el aumento de la temperatura; estos resultados indican que el proceso de disolución es endotérmico, la energía de Gibss de igual manera, y solo en el frasco que presentaba una masa total de agua se obtuvo un valor de entropía negativo, lo que nos indica un mayor ordenamiento de klas moléculas en el proceso; por lo tanto, las funciones termodinámicas obtenidas son útiles para comprender el proceso de disolución de TCC en los diferentes disolventes orgánicos. 

Asesor: Dr. Ma. Soledad Vázquez Garcidueñas, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

RESPUESTA IN VITRO DE LAS CEPAS DE SALMONELLA ENTERICA SEROTIPO TYPHIMURIUM GENOTIPOS ST19 Y ST213, AL ESTRÉS ÁCIDO Y OXIDATIVO ASOCIADOS AL TRACTO DIGESTIVO.

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RESPUESTA IN VITRO DE LAS CEPAS DE SALMONELLA ENTERICA SEROTIPO TYPHIMURIUM GENOTIPOS ST19 Y ST213, AL ESTRÉS ÁCIDO Y OXIDATIVO ASOCIADOS AL TRACTO DIGESTIVO.

Duarte Ortiz Diego Alejandro, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Ma. Soledad Vázquez Garcidueñas, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Planteamiento del problema Salmonella enterica es uno de los agentes etiológicos más importantes de las enfermedades transmitidas por alimentos, pudiendo sobrevivir períodos de estrés prolongados fuera del huésped. Durante su tránsito a través del tracto digestivo del huésped, S. enterica enfrenta las condiciones ácidas del estómago, la exposición a especies reactivas de oxígeno, entre otros. La secuencia tipo 19 (ST19), determinado por Multi Locus Sequence Typing, es el genotipo fundador de las variantes de serotipo Typhimurium y el más abundante en todo el mundo. Se ha documentado que el genotipo ST213 está desplazando al ST19 en Michoacán. ST213 es un genotipo emergente descrito por primera vez en México, lo que sugiere que se están generando nuevas variantes genéticas de S. Typhimurium dentro del estado y el país. Nuestra hipótesis es que ST213 es más resistente al estrés dentro del hospedero y más virulento que ST19, por lo que es relevante para la salud pública.

METODOLOGÍA

Material biológico. En este trabajo se analizaron las cepas de Salmonella enterica serotipo Thyphimurium, genotipos ST213 y ST19, aisladas de alimentos de Michoacán. También se incluyó la cepa de referencia S. Thyphimurium ATCC14028 (ST19).   Recuperación post estrés ácido Cultivos en fase estacionaria de las tres cepas se ajustaron a una densidad óptica de 0.5, para posteriormente incubarse en reposo durante una hora a 37°C en caldo LB a pH 1.5, simulando el pH estomacal más bajo, al término de este estrés se evaluó su capacidad de recuperación en caldo LB durante 6 h mediante conteo de UFC/mL cada dos h.   Ensayos de estrés oxidativo. Cultivos de toda la noche de las tres cepas, se ajustaron a una D.O. de 0.05 y después se dejaron crecer a una D.O. de 0.3; se agregó H2O2 1Mm y finalmente se realizó el conteo cada dos h de UFC/mL durante 6 h de estrés en esta condición. Todos los ensayos se realizaron por triplicado en tres experimentos independientes.  

CONCLUSIONES

En la recuperación post estrés ácido se observó que, a las 6 h la cepa ST213 mostró mayor conteo de UFC/mL (2.1x109) respecto a la cepa de referencia (4.2x107) y la ST19 (2.7x107). Durante el estrés oxidativo se espera encontrar una diferencia significativa entre las cepas probadas a una concentración de H2O2 1Mm.

Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

EXTRACCION HIDROALCOHOLICA DE ERYNGIUM CARLINAE Y RAIZ DE SCHINUS MOLLE PARA COMPARAR LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE SUS COMPUESTOS CON EFECTOS HIPOLIPIDEMICOS.

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EXTRACCION HIDROALCOHOLICA DE ERYNGIUM CARLINAE Y RAIZ DE SCHINUS MOLLE PARA COMPARAR LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE SUS COMPUESTOS CON EFECTOS HIPOLIPIDEMICOS.

Durán Durán Araceli, Instituto Tecnológico de Morelia. Asesor: Dr. José Fernando Covián Nares, Instituto Tecnológico de Morelia

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las enfermedades cardiovasculares son la principal causa de mortalidad en Mexico (INEGI 2013) y están ampliamente ligadas a niveles de colesterol alto en sangre. Algunos de los agentes anticolesterolemicos han sido limitados para su uso por los efectos secundarios que producen. Es necesario el estudio de las plantas, las cuales pueden ser una buena opción como substitutos de los fármacos, dado que gran parte de la población de los países en vías de desarrollo dependen aun de la medicina tradicional y de los remedios a base de plantas para su atención primaria, sin embargo, últimamente el interés por el uso de terapias alternativas naturales a ido incrementando en los países industrializados también (Benzie y Watchen- Galor, 2011). En los últimos años se han centrado los estudios de plantas empleadas en la herbolaria tradicional en la presencia de sustancias benéficas por su actividad antioxidante denominados polifenoles. Muchos de los efectos de los polifenoles son fundamentalmente consecuencia de sus propiedades antioxidantes. Estos compuestos presentan efectos vasodilatadores, son capaces además de mejorar el perfil lipídico y atenúar la oxidación de las lipoproteínas de baja densidad (LDL), lo que los coloca como una alternativa natural para el control del colesterol.

METODOLOGÍA

Es muy común que para extraer los principios activos de la raíz de pirul y de la hierba del sapo de acuerdo a los antecedentes encontrados, sea por medio de una infusión o decocción. En cambio, para analizar las propiedades medicinales de una droga vegetal, se recurre a métodos de extracción más complejos, que permitan obtener métodos reproducibles para cuantificar compuestos activos en lo posible. Para la obtención de los extractos se procedió a realizar una extracción por maceración que es un método de extracción solido-liquido donde el material vegetal que se pretende extraer contiene compuestos solubles en el líquido de extracción. Para realizar este proceso el material vegetal se corta en pequeños trozos como fue el caso de la raíz de pirul y la hierba del sapo. Una vez cortados se procedió a dejarlos secar a temperatura ambiente para posteriormente someterlos a la molienda. A continuación, se colocó en un matraz de bola la raíz de pirul y la hierba del sapo en otro, añadiendo para cada muestra como solvente etanol y en otro solo agua. Finalmente se obtuvieron cuatro extractos; raíz de pirul-agua,,raíz de pirul-etanol, hierba del sapo-agua y hierba del sapo-etanol. Los extractos se filtraron y se colocaron en recipientes para almacenarlos y posteriormente utilizarlos en la experimentación. A cada una de las muestras obtenidas se les determino la presencia de polifenoles totales mediante la técnica de Folin-Ciocalteu, para ello se les agregó bicarbonato de sodio, agua destilada y folin. Se dejaron por 10-30 min en oscuridad y se leyeron las muestras en el espectrofotómetro a una longitud de onda de 760 nm para obtener las absorbancias de las muestras. Previamente se realizó una curva de calibración con concentraciones conocidas de ácido gálico.  Para determinar la actividad antioxidante se utilizó la técnica de DPPH, donde se usó como control el reactivo DPPH con 1ml de metanol, mientras que para las demás muestras fueron 2 ml de metanol, 1 ml de DPPH y 1 ml de la muestra. Después de colocaron en el espectrofotómetro para leer absorbancia a 517 nm y posteriormente se obtuvo el % de actividad antioxidante de cada una de las cuatro muestras con una formula previamente establecida en la literatura. El uso de radicales estables coloreados como el 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo (DPPH) utilizado en este experimento es un criterio preliminar para jerarquizar las distintas plantas y extractos de acuerdo a su poder antioxidante. Así mismo, se decidió el realizar una cromatografía en capa fina para corroborar la presencia de compuestos polifenolicos empleando ácido gálico como estándar. La cromatografía en capa fina es una técnica analítica rápida y sencilla, que permite separa una mezcla de compuestos, determinar el grado de pureza y realizar el seguimiento de una reacción química. La cámara se saturo con una mezcla de metanol/cloroformo. Al final de la corrida se determinó el frente de referencia para los compuestos de interés. Para calcular el frente de retención (Rf), la distancia recorrida por el compuesto se mide desde el centro de la mancha y se aplica la siguiente ecuación: Rf= distancia recorrida por el compuesto (x)/ distancia recorrida por el eluyente (y) La visualización de los compuestos activos se realizó con una lámpara de la luz ultravioleta ( 254 nm).

CONCLUSIONES

Para el estudio de las plantas medicinales se comprenden una serie de etapas basándose en investigaciones bibliográficas exhaustivas para conocimiento del uso tradicional y los efectos de las plantas dotadas con propiedades medicinales. La actividad biológica hace la comprobación científica por medio del uso terapéutico de ensayos que involucran la evaluación in vitro, mientras que un estudio fotoquímico permite determinar cualitativamente los principales grupos químicos presentes en la planta a partir del cual puede orientarse el fraccionamiento de los extractos. La actividad antioxidante puede estar relacionada con los polifenoles presentes en cada muestra.

Asesor: Dr. Miguel Angel Mazorra Manzano, Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo (CONACYT)

PARTICIóN TRIFáSICA: UN MéTODO NOVEDOSO PARA LA CONCENTRACIóN Y PURIFICACIóN DE PROTEASAS VEGETALES

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PARTICIóN TRIFáSICA: UN MéTODO NOVEDOSO PARA LA CONCENTRACIóN Y PURIFICACIóN DE PROTEASAS VEGETALES

Duran Guzman Valeria, Instituto Tecnológico de Tepic. Asesor: Dr. Miguel Angel Mazorra Manzano, Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo (CONACYT)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las enzimas proteolíticas obtenidas de fuentes vegetales brindan un alto potencial para su aplicación en la industria y como sustituto del cuajo en la producción del queso. La separación trifásica (TPP) es una técnica para extraer, separar y purificar proteínas. El objetivo de este estudio fue llevar a cabo el método de separación trifásica para concentrar y purificar enzimas proteolíticas presentes en el extracto enzimático de trompillo Solanum elaeagnifolium y melón blanco Cucumis melo. 

METODOLOGÍA

Los extractos fueron caracterizados en base a su contenido de proteína, actividad proteolítica y análisis electroforético antes y después del proceso de TPP. El TPP se realizó mediante la adición de sulfato de amonio y t-butanol, la sal precipita la proteína con la ayuda del solvente, teniendo este último la función adicional de formar capas de tres fases y eliminar compuestos de bajo peso molecular tales como lípidos, fenólicos y algunos detergentes. Esto causa una purificación y concentración parcial de la proteína. La interfase previamente resuspendida y la fase acuosa, fueron analizadas en su contenido de proteína y actividad proteolítica.

CONCLUSIONES

El método TPP resultó ser eficiente para concentrar hasta 1.6 veces las proteasas de trompillo, mientras que con melón se tuvo una pérdida en actividad y pureza, lo cual se confirmó mediante su análisis electroforético.  El uso de solventes en la TPP fue un método adecuado para la purificación de proteasas de trompillo el cuál puede ser eficientado mediante la modificación de factores (e.g. pH, concentración de sal y solvente).

Asesor: Dr. Fabian Mendoza Hernández, Instituto Politécnico Nacional

SíNTESIS VERDE DE NANOMATERIALES PARA APLICACIONES EN CATáLISIS ASIMéTRICA, LUMINISCENCIA, CORROSIóN, ALMACENAMIENTO Y CONVERSIóN DE ENERGíA

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SíNTESIS VERDE DE NANOMATERIALES PARA APLICACIONES EN CATáLISIS ASIMéTRICA, LUMINISCENCIA, CORROSIóN, ALMACENAMIENTO Y CONVERSIóN DE ENERGíA

Durán Lozano Oscar, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Asesor: Dr. Fabian Mendoza Hernández, Instituto Politécnico Nacional

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La síntesis de materiales para diversas aplicaciones ha sido reconocida durante años como un elemento esencial en el avance tecnológico. En la actualidad, existe la necesidad de producir materiales diseñados para realizar funciones específicas con un alto grado de eficiencia de la manera más amigable posible en términos ambientales.  Los problemas actuales asociados al cambio climático hacen necesarios hacer cambios en la forma en que los procesos industriales se llevan a cabo habitualmente con la finalidad de hacer procesos más eficientes y menos perjudiciales para el ambiente, la Química Verde juega un papel importante para lograr el objetivo deseado. Así, la Química Verde no es un simple eslogan; es una de las claves para la supervivencia de la humanidad.  Por lo antes mencionado, durante el verano de investigación, se ponen en práctica aspectos importantes a tomar en cuenta dentro de la Química como son el uso de nuevas rutas de síntesis alternativas a las tradicionales, hacer más eficientes los procesos seguidos hasta el momento en la obtención de diversos productos; así mismo, se plantea el uso de catalizadores que permitan llevar a cabo en menores tiempos las reacciones que se llevan a cabo en diversas áreas.  

METODOLOGÍA

Síntesis del catalizador de Jacobsen   El catalizador de Jacobsen se obtuvo mezclando 0.5 mmol de la (R)-1,2- diaminociclohexano, 1 mmol de 3,5-ditercbutil-salicilaldehído, 0.5 mmol de acetato de manganeso (Mn(OAc)2) y 0.5 mmol de NaCl en 4 ml de etanol (EtOH) en un vial de 5 ml. El vial se sella perfectamente y la mezcla en agitación se irradia con el ultrasonido. Se usó la irradiación del ultrasonido a la potencia y frecuencia iniciales, (280 W de potencia y 40 KHz de frecuencia).  durante un tiempo de reacción de 10 minutos, asì como a 60 minutos de reacción, a temperatura ambiente. Posteriormente, el disolvente se elimina a vacío y el producto sólido se lava con agua para retirar los residuos de las sales y el ácido acético generado en el proceso.       Síntesis verde de ligandos organicos de bases de Schiff   En un matraz se colocaron 249.22 mg (1 mmol) de salicilaldehído en 5ml de etanol (EtOH), a la mezcla anterior se agregó 110.34 mg (1 mmol) de o-fenilendiamina en agitación durante 3 minutos.La mezcla se irradiò con microondas (1050 W de potencia y 245 KHz de frecuencia) durante 10 segundos. El mismo procedimiento de preparaciòn de la soluciòn se llevò a cabo para ser irradiada con ultrasonido (280 W de potencia y 40 KHz de frecuencia) durante 10 minutos. Los dos productos de reacciòn se obtuvieron enfriando las mezclas, filtrando a vacìo y dejando secar a temperatura ambiente para obtener el ligando orgànico deseado.   Síntesis verde multicomponente de complejos metálicos ( Ca2+ Mn2+, Ni2+, Co2+, Cu2+, Zn2+) de bases de Schiff   En un matraz se colocaron 125.04 mg (0.5 mmol) de acetato de manganeso, 124.61 mg (0.5 mmol) de salicilaldehído en 5ml de etanol (EtOH), a la mezcla anterior se agregaron 55.17 mg (0.5  mmol) de o-fenilendiamina. La mezcla se irradiò con microondas (1050 W de potencia y 245 KHz de frecuencia) durante 10 segundos. El mismo procedimiento de preparaciòn de la soluciòn se llevò a cabo para ser irradiada con ultrasonido (280 W de potencia y 40 KHz de frecuencia) durante 10 minutos.La metodologìa de preparaciòn del material se llevò a cabo para 0.5 mmol de, acetato de niquel, acetato de cobalto, sulfato de cobre, acetato de zinc y cloruro de calcio. Los productos de reacciòn se obtuvieron enfriando las mezclas, filtrando a vacìo y dejando secar a temperatura ambiente para obtener el complejo metálico deseado.   Síntesis de MOF´s: MOF-Cu2+, MOF-Co2+, MOF-Zn2+, MOF-Ni2+, MOF-Eu2+   En un matraz se disolvieron 202.6 mg de ácido tereftálico en 16 ml de DMF. En un segundo  matraz se disolvieron 679.6 mg de acetato de zinc en 20 ml de DMF. Después, por goteo lento se agregó la solucòn metàlica a la solución orgànica durante aproximadamente 15 minutos,  se agitó a temperatura ambiente por 1 hora.La metodologìa de preparaciòn del material se llevò a cabo para acetato de niquel, acetato de cobalto, sulfato de cobre, acetato de zinc y cloruro de europio Finalmente, por filtración al vacío y realizando lavados con etanol frío se obtuvieron los producto de reacción.  

CONCLUSIONES

Durante la investigación se logró llevar a cabo la síntesis del catalizador de Jacobsen en una sola etapa bajo irradiación por ultrasonido. El método resulta ser muy práctico, económico y altamente eficiente ya que los reactivos son capaces de reaccionar casi en su totalidad. Así mismo se llevaron a cabo las síntesis verde de ligandos orgánicos, de  multicomponentes complejos metálicos ( Ni2+, Co2+, Cu2+, Zn2+ y Eu2+) de bases de Schiff y de MOF's con Cu, Co, Ni y Eu. Hasta el momento se continúan las pruebas experimentales de almacenamiento de gases con los MOF,s sintetizados, además del proceso de trámite de una patente resultante de los materiales obtenidos.  

Asesor: Dr. Karinne Saucedo Vence, Universidad Tecnológica del Valle de Toluca

ELABORACIÓN Y EVALUACIÓN DE UN MICROBICIDA DE ORIGEN VEGETAL PARA ALIMENTOS A PARTIR DE LA ESPECIE DE ARBUSTO ARGEMONE PLATYCERAS

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ELABORACIÓN Y EVALUACIÓN DE UN MICROBICIDA DE ORIGEN VEGETAL PARA ALIMENTOS A PARTIR DE LA ESPECIE DE ARBUSTO ARGEMONE PLATYCERAS

Durán Vega Luisa Fernanda, Universidad Autónoma de Ciudad Juárez. Asesor: Dr. Karinne Saucedo Vence, Universidad Tecnológica del Valle de Toluca

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El ¨chicalote¨ o Argemone platyceras pertenece a la misma familia de la amapola (Papaveraceae), es una especie de arbusto nativo y endémico de México, con distribución en varios estados, incluido el Edo. de México. Florece casi todo el año, resiste la sequía y crece aún en terrenos pobres. Se han reportado los usos medicinales de la especie A. mexicana, ya que brinda efecto analgésico, alivia tos, conjuntivitis, cataras, es purgante e incluso posee propiedades antivirales y antibacterianas. A. platyceras podría ser rescatada para la elaboración de un microbicida como una alternativa natural para la desinfección de alimentos.

METODOLOGÍA

Se escarificaron semillas con 3 tratamientos; ácido, calor y frío. En medios Murashige-Skoog se cultivó callo in vitro con éstas. Partes de hojas frescas se sometieron a desdiferenciación celular añadiendo los reguladores 6-N-bencilaminopurina y 2,4-diclorofenoxiacético. Se dejaron incubar a temperatura ambiente durante varias semanas, con 12 h de luz y 12 de oscuridad (siguen en germinación). Se deshidrataron tallos y hojas de la planta para realizar una extracción de 82 g de la planta pulverizada con 328 mL de etanol y se dejó reposar por 24 h para poder filtrar y utilizar un rotavapor. Se preparó el microbicida en una concentración de 100 μL/mL. Finalmente se realizó un análisis microbiológico con tres tratamientos (1:100, 1:1000 y 1:10000 de cilantro) por triplicado para determinar la efectividad del bactericida comparando con un testigo (lavado únicamente con agua) y una muestra de comercial (Microdyn); sometidos a las mismas condiciones. Los tratamientos se inocularon por triplicado con el método de vaciado en placa utilizando agar para métodos estándar, se incubaron por 33 h a 37°C.

CONCLUSIONES

El microbicida con extracto de A. platyceras tuvo una mayor eficacia desde la dilución 1:100, reportándose 5.96x104 UFC/mL;33 h;37°C, a diferencia de Microdyn con 1.29x104 UFC/mL;37°C/33 h. En la dilución final (1:10000) los valores fueron cercanos, siendo 2.66x105 y 2.96x105 UFC/mL;37°C/33 h para el microbicida elaborado y Microdyn. Los resultados mostraron que esta especie de planta puede ser aprovechada para la elaboración de un microbicida natural sin residuos de plata.

Asesor: Dr. Luisa Alondra Rascón Valenzuela, Universidad de Sonora

ACTIVIDAD ANTIPROLIFERATIVA EN LíNEA CELULAR DE CáNCER CERVICOUTERINO, ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE IN VITRO Y PERFIL FITOQUíMICO DE BOERHAVIA COCCINEA

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ACTIVIDAD ANTIPROLIFERATIVA EN LíNEA CELULAR DE CáNCER CERVICOUTERINO, ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE IN VITRO Y PERFIL FITOQUíMICO DE BOERHAVIA COCCINEA

Durón Avila Carlos Gabriel, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Luisa Alondra Rascón Valenzuela, Universidad de Sonora

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las enfermedades crónicas degenerativas pueden presentarse como consecuencia de un estrés oxidativo a las células causado por especies reactivas de oxígeno; por lo cual se han buscado desarrollar tratamientos o generar dietas a base de compuestos antioxidantes como prevención de ellas. El estrés oxidativo causado por ERO’s puede desencadenar gran cantidad de enfermedades y padecimientos como, insuficiencias renales o hepáticas e incluso cáncer. El cáncer es una enfermedad que se presenta cada vez con mayor frecuencia y de las más problemática, por lo cual se buscan alternativas más específicas en el tratamientot de pacientes oncológicos, siendo una gran opción para ello los productos naturales o metabolitos secundarios, de los cuales algunos han mostrado resultados satisfactorios como tratamiento al retardar y ayudar en la eliminación de tumores y células malignas. Especies del género Boerhavia han sido usados como medicinales y se han podido aislar metabolitos con actividad biológica como antioxidantes, por lo que la especie B. coccinea es una potencial productora de metabolitos con acción antioxidante y/o antiproliferativa, que le ayudan a resistir condiciones extremas, siendo esta una planta nativa de México y con extensión al extranjero norte y sur.

METODOLOGÍA

Se trabajó con la especie Boerhavia coccinea la cual fue recolectada en áreas de la ciudad de Hermosillo del estado de Sonora, buscando un ejemplar que pudiera estar enfrentando condiciones extremas o adversas con la finalidad de esta estuviera produciendo metabolitos secundarios (compuestos de interés). Después de colectarla se mantuvo en un ambiente sin humedad para lograr secarla completamente y poder trabajar con ella. Al tener el ejemplar en las condiciones adecuadas se prepara un compuesto etanólico con la finalidad de extraer los compuestos de interés a partir de la planta macerada. Se deposita la planta macerada en un matraz con etanol y pasa por un proceso agitación por sonicación para extraer lo más posible en menor tiempo. El compuesto se filtra y se deja evaporar para concentrar los compuestos, obteniendo así un extracto en seco. Durante la preparación del extracto se realizan cultivos celulares con los que se realizan las pruebas para medir la actividad antiproliferativa de los compuestos del extracto, para la cual primero se prepararon las soluciones y reactivos de trabajo para el manejo de líneas celulares y posteriormente se descongelan líneas celulares HeLa provenientes de cáncer cervicouterino y se pasan a cajas de cultivo con medio DMEM para permitir que crezcan. Posteriormente se realiza el ensayo de reducción del MTT en las líneas celulares cancerosas HeLa, buscando una inhibición del crecimiento de las células cancerosas o muerte de las mismas, ya que este ensayo permite determinar el posible efecto citotóxico de un agente sobre líneas celulares tumorales ó cultivos primarios de células normales y se basa en la reducción metabólica del Bromuro de 3-(4,5- dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol (MTT) realizada por la enzima mitocondrial succinato-deshidrogenasa en un compuesto coloreado de color azul (formazan), permitiendo determinar la funcionabilidad mitocondrial de las células tratadas. Este método ha sido muy utilizado para medir supervivencia y proliferación celular. La cantidad de células vivas es proporcional a la cantidad de formazán producido. Además de evaluar las propiedades antiproliferativas de B. coccinea, se evalúa la actividad antioxidante por los métodos de extinción de radical DPPH y poder antioxidante reductor del hierro (FRAP). El DPPH es un radical libre susceptible de reaccionar con compuestos antioxidantes a través de un proceso caracterizado por la cesión de un átomo de hidrógeno proporcionado por el agente antioxidante. El método de FRAP, se basa en la reducción del complejo Fe3+-TPTZ (hierro-tripiridiltriazina), a Fe2+-TPTZ es decir, lo que mide es la capacidad de un compuesto presente en el alimento de reducir Fe3+ a Fe2+. Para conocer los metabolitos secundarios presentes en el extracto etanólico se realiza un perfil fitoquímico el cual es una herramienta en la investigación del potencial biológico y farmacológico que poseen las plantas, la fitoquímica comprende el estudio de metabolitos secundarios presentes en especies vegetales, los cuales pueden ser fenoles y polifenoles, quinonas, flavonas y flavonoides, taninos, cumarinas, terpenoides y aceites esenciales, alcaloides, lectinas y polipéptidos, glucósidos y saponinas, así como esteroides y xantonas, por los cual este estudio es de gran ayuda para conocer que tipo de compuestos le confieren las propiedades antioxidantes o antiproliferativas a la planta.

CONCLUSIONES

En el perfil fitoquímico se demostró la presencia de compuestos fenólicos, flavonoides y antraquinonas, estos metabolitos presentes en B. coccinea, principalmente los compuestos fenólicos, presentan potencial antioxidante por el método FRAP ya que utiliza el mecanismo SET para estabilizar radicales libres. El extracto no mostró actividad antiproliferativa, debido a que no hubo cambios aparentes en la morfología celular de las células HeLa y la prueba de MTT mostró sólo una reducción de 0 al 5% en el porcentaje de inhibición de crecimiento. Sin embargo, con estudios a otras líneas celulares podría mostrar efectos por la presencia de estos mismos metabolitos. El uso de estudios adicionales permitiría conocer más sobre las propiedades antioxidantes de B. coccinea.

Asesor: Dr. Samuel Hernández Anzaldo, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

SíNTESIS DE COMPUESTOS DE COORDINACIóN CON DISPROSIO(III) Y CROMO(III)

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SíNTESIS DE COMPUESTOS DE COORDINACIóN CON DISPROSIO(III) Y CROMO(III)

Ecobedo Marquez Jossmar Eluzai, Universidad Veracruzana. Asesor: Dr. Samuel Hernández Anzaldo, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los compuestos de coordinación son compuestos que contienen un átomo o ion central que generalmente es un metal rodeado por un grupo de iones o moléculas orgánicas llamadas ligantes. Tal es la importancia de estas moléculas en el área tecnológica que se pueden obtener moléculas con propiedades magnéticas que tengan la capacidad de almacenar información facilitando su uso y rapidez en dispositivos de almacenamiento.

METODOLOGÍA

Para la obtención de compuestos de coordinación de Dy(III) y Cr(III) se procede a disolver por separado  la sal metálica y el ligante, utilizando 10 mL de H2O para la sal del metal y 10 mL para el ligante 2-nitro-2-fenil[SC1] -propano-1,3-diol, después colocar la disolución del metal en un matraz de bola de 250 mL dejándolo en agitación y se añade el ligante gota a gota, cuando la disolución es homogénea se agregan 100 µL de  trietilamina colocando un tapón septa para evitar la pérdida de disolvente y trietilamina. Posteriormente, se coloca en baño de aceite a una temperatura de 80 °C durante una semana. Finalmente, se filtra la disolución por gravedad para eliminar impurezas y se deja evaporar lentamente a temperatura ambiente. Para la identificación del compuesto sintetizado se realizó la caracterización espectroscópica de UV-Visible, Infrarrojo y resonancia magnética nuclear (RMN). La espectroscopía de infrarrojo (IR) que consiste en la absorción de la radiación infrarroja causando una transición vibracional de un estado basal a uno excitado, permite ver los modos normales de vibración de las moléculas; el espectro abarca un intervalo de 400-4000.cm-1, Para obtener los espectros se utiliza una pequeña cantidad de muestra y se diluye con KBr, posterior a ello se pulveriza y compacta formando una pastilla transparente que se coloca en el espectrofotómetro y se le hace incidir radiación infrarroja. La espectroscopia de RMN se basa en medir la absorción de la radiación electromagnética en la región de radiofrecuencia (4 a 900 MHz) permitiendo ver el ambiente químico alrededor de núcleos con espín semientero. Los núcleos que se analizan con mayor frecuencia son el de protón [1H] y carbono [13C]. En el presente trabajo, se utilizó un equipo de 500 MHz de la universidad BUAP. Para medir la muestra se debe disolver en un disolvente deuterado. Se realizaron pruebas de RMN de protón [1H] y carbono [13C]. Además de un experimento HSQC que mide la relación protón-carbono en dos dimensiones. La espectroscopia de UV-visible permite el análisis y determinación de la estructura electrónica de las moléculas basándose en la cuantificación de la energía absorbida al interactuar con la radiación UV-Vis del espectro electromagnético con las moléculas, promocionando a los electrones de un estado basal a uno excitado. En este proyecto se utilizó agua como blanco. Se observaron las transiciones características de los iones de Dy(III) y Cr(III). También se realizó la caracterización fisicoquímica. Se midió la temperatura de fusión, en este experimento se calienta un compuesto hasta que ocurra un cambio del estado de agregación. Algunos compuestos carbonizan, es decir, no se llega a observar el cambio a estado líquido.  

CONCLUSIONES

En el tiempo de la estancia logré adquirir conocimiento sobre la realización de compuestos de coordinación y su composición. En la reacción de disprosio se observó que ocurrió una reacción de catálisis transformando el ligante en pirazol esto se repitió comprobando que se volvió a formar el pirazol comprobándolo con las espectroscopias de IR y RMN En la espectroscopia de UV-VIS para la reacción de Cr(III) se observaron las transiciones en 569 nm y 424 nm que corresponden a un ion de Cr(III) las cuales no se observan en el espectro de UV del ligante. En el IR el compuesto de Cr (III) se observa una señal en 518 cm-1 y las señales de amina se desplazó debido a la distribución de la densidad electrónica del ligante coordinado al Cr(III) Aprendí sobre las técnicas a utilizar para su síntesis y las mejores condiciones para llevar a cabo su realización. También adquirí conocimientos sobre las espectroscopias mas utilizadas en el campo de la química, sus fundamentos y la parte práctica, técnicas de separación y cristalización que me sirvieron para eliminar impurezas de mis reacciones y determinar mejor su estructura, como conclusión final entendí que los compuestos de disprosio y cromo forman magnetos unimoleculares capaces de almacenar información.

Asesor: Dr. Roberto Alejandro Arreguin Espinosa de los Monteros, Universidad Nacional Autónoma de México

DETERMINACIóN DE LOS GRUPOS FITOPLANCTóNICOS DURANTE LAS TEMPORADAS DE NORTES Y LLUVIAS DE 2018 POR HPLC DE LA LAGUNA DE TéRMINOS, CAMPECHE

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DETERMINACIóN DE LOS GRUPOS FITOPLANCTóNICOS DURANTE LAS TEMPORADAS DE NORTES Y LLUVIAS DE 2018 POR HPLC DE LA LAGUNA DE TéRMINOS, CAMPECHE

Egurrola Coronado Deyanira, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Roberto Alejandro Arreguin Espinosa de los Monteros, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las lagunas costeras son un ecosistema importante en cuestión de diversidad y alimento; el fitoplancton es el mayor productor primario en el planeta y se encuentra en grandes cantidades en las lagunas costeras, estas tienen entradas de agua dulce, las cuales traen consigo especies distintas a las marinas. El análisis y obtención de datos se hace mediante el uso de los pigmentos fotosintéticos y accesorios contenidos en los grupos determinados con el método de High Performance Liquid Chromatography (HPLC) y conteos en microscopio invertido, lo cual proporciona información importante acerca de la calidad del agua y el comportamiento de las comunidades fitoplanctónicas en diferentes temporadas (nortes y lluvias) y zonas. La principal problemática es la identificación de grupos taxonómicos no visibles en el microscopio óptico y por otro lado la aparicion de fitoplancton tóxico que afecta principalmente a peces o/y grupos fitoplanctónicos indicadores de agua en mala calidad.

METODOLOGÍA

Se concentraron muestras de fitoplancton de red, las muestras inicialmente se encontraban en botellas de 500mL, después con una pipeta pasteur se tomó del fondo el sedimento y se pasó a botellas de 20mL. Para la limpieza de formol se homogeneizó la muestra concentrada, se tomaron 3mL con una micropipeta y se colocaron en un tubo para centrifugar de 50mL, después se aforó con agua purificada hasta los 50mL y se centrifugó, el procedimiento se repitió hasta eliminar el olor a formol. En la limpieza de frústulas para diatomeas se tomaron 2mL de muestra limpia y se colocaron en tubos para centrifugar de 50mL, luego se agregaron 2mL de permanganato de potasio (cambió a color morado), se dejó reposar por 24hrs, después se agregaron 4mL de ácido clorhídrico y se calentó la muestra hasta que cambió a color verde claro, después se aforó el tubo hasta 50mL con agua purificada y se centrifugó, el procedimiento se repitió hasta que la muestra quedó limpia. Con las muestras ya limpias el siguiente paso fue el montaje de las laminillas permanentes de diatomeas con resina y semipermanentes de gelatina para dinoflagelados. Con un espectrofotómetro se hizo la cuantificación de nutrientes de columna de agua por el método de espectrofotometría: silicatos, ortofosfatos, nitritos, nitratos+nitritos y amonio. Para la extracción de pigmentos se maceraron los filtros con acetato de amonio al 2% con metanol, se centrifugaron y se dejaron reposar, por último se tomó con una aguja el sobrenadante y se colocó en un vial. Con el HPLC se cuantificaron los pigmentos de los organismos de la columna de agua, con ayuda de la bibliografía se identificaron los pigmentos y se capturó en una bases de datos. Para el conteo e identificación de fitoplancton, se utilizó un microscopio invertido de la marca ZEISS, los conteos se hicieron con el objetivo en 40X basado en el método de Utermöhl y con bibliografía se identificaron las especies.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se logró adquirir conocimientos teóricos sobre fitoplancton y se pusieron en práctica técnicas para la determinación e identificación de los grupos taxonómicos. Los resultados finales de los grupos fitoplanctónicos y su comportamiento aún no se han obtenido ya que sigue en proceso, pero parcialmente se ha encontrado que los organismos encontrados se ven influenciados según la temporada, la estación y las sustancias contenidas en las aguas dulces que desembocan en la Laguna. Se espera conocer la dinámica de la comunidad fitoplanctónica, así como la relación entre la abundancia y la biomasa de los grupos, y el estado trófico en el que se encuentra la Laguna.

Asesor: Dr. Esperanza Sepúlveda Rojas, Corporación Universitaria Minuto de Dios (Colombia)

CONSERVACIóN DE LA BIODIVERSIDAD Y RECURSOS EDUCATIVOS DIGITALES EN LA ZONA DE RESERVA FORESTAL, VEREDA YERBABUENA – CHíA (CUNDINAMARCA)

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CONSERVACIóN DE LA BIODIVERSIDAD Y RECURSOS EDUCATIVOS DIGITALES EN LA ZONA DE RESERVA FORESTAL, VEREDA YERBABUENA – CHíA (CUNDINAMARCA)

Enríquez Duarte Melisa, Universidad de Sonora. Ramos Rodriguez Arlin Gabriela, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Esperanza Sepúlveda Rojas, Corporación Universitaria Minuto de Dios (Colombia)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Describir los aportes de los recursos educativos digitales aplicados a la conservación de la biodiversidad en la Zona de Reserva Forestal, Vereda Yerbabuena - Chía (Cundinamarca). Debido a que el cambio del uso del suelo ha provocado la contaminación del agua por el mal manejo de residuos sólidos, escombros y distintos vertimientos; teniendo como consecuencia el desplazamiento o extinción de la fauna silvestre, entre las cuales estan presentes especies de importarncia entre ellas destacan el tigrillo lanudo (Leopardus tigrinus) y la  tingua de pico verde (Gallinula melanops). La disminución en la biodiversidad y degradación de los hábitats naturales del mundo, ha provocado que se comiencen a utilizar diferentes estrategias para la conservación de las especies. Una estrategias no invasiva que se ha popularizado en las últimas décadas son las cámaras trampa, o sea el fototrampeo, el cual permite estudiar el comportamiento y conducta de las especies, así como también con las imagenes y vídeos obtenidos se pueden realizar distintas actividades para la educación ambiental. Otra de las herramientas didacticas que nos permiten estimular la consevación de las especies involucrado a la educación ambiental es el uso de codigos QR, estos permiten que el estudiante pueda  complementar lo aprendiedo en clase como los nuevos contenidos que el docente aportará, generando valores que conlleven a la conservación de las especies.   

METODOLOGÍA

Investigación documental de acuerdo a Londoño, Maldonado & Calderon (2014) con el fin de revisar de manera detallada y cuidadosa los documentos que tratan sobre un tema específico. En donde se plantearon cuatro fases según Gómez - Luna., et al (2014): Definición del problema Búsqueda de la información Organización de la información Análisis de la información La búsqueda de información se realizó en bases datos como Scopus, Dialnet, Ebsco, Scielo, Google Scholar, posteriormente la literatura encontrada se organizó en primaria, segundaria y gris de acuerdo a su clasificación; por último, se elaboraron matrices de análisis y RAEs (Resúmenes analíticos estructurados).

CONCLUSIONES

Se elaboró el capítulo de libro Recursos educativos digitales para la conservación de la biodiversidad en la Zona de Reserva Forestal, Vereda Yerbabuena - Chía. Este capítulo hace parte del libro resultado de investigación del proyecto Decodificando la biodiversidad, uso de herramientas tecnológicas para la medición y divulgación de la fauna y flora en la Zona de Reserva Forestal, Vereda Yerbabuena - Chía (Cundinamarca) financiado por la VIII Convocatoria para el desarrollo y fortalecimiento de los Grupos de Investigación en la Corporación Universitaria Minuto de Dios. La educación ambiental es un concepto que por mucho tiempo ha sido mal transmitido en las instituciones educativas, ya que al ser un concepto difícil de sintetizar por las diferentes corrientes de pensamiento que lo engloban y el erróneo desarrollo de metodologías para su aplicación en los distintos niveles académicos, no debería extrañarnos el declive ecosistémico que se ha presentado durante las últimas décadas. El uso de este tipo de herramientas (cámaras trampa, códigos QR) son un elemento clave para el desarrollo de la conservación de la biodiversidad, en donde estas son instrumentos indispensables para la educación ambiental, la cual permite la construcción de una sociedad que busca estar en armonía con la naturaleza y genera nuevos valores para la formulación de cambios institucionales. 

Asesor: Dr. Julian Torres Jacome, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

ALTERACIONES ELéCTRICAS CARDíACAS EN UN MODELO DE RATóN POR CAMBIO EN LA MICROBIOTA.

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ALTERACIONES ELéCTRICAS CARDíACAS EN UN MODELO DE RATóN POR CAMBIO EN LA MICROBIOTA.

Enríquez Reyes Rafael de Jesús, Universidad Veracruzana. Asesor: Dr. Julian Torres Jacome, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

De acuerdo con proyecciones de la Organización Mundial de la Salud (OMS), la diabetes será la séptima causa de mortalidad en 2030. Según un estudio realizado en varios paises determina que 50 por cierto de los pacientes diabeticos muere de enfermedad cardiovacular.  Los cambios en el metabolismo de la glucosa, generan alteraciones en el electrocardiograma, por lo que en un diabetico el primer órgano dañado es el corazón, es por ello que el trabajo experimental asignado fue un modelo de ratón con obesidad, debido a una dieta alta en sacarosa, donde las variaciones de los datos medidos de los registros electrocardiograficos nos indicarian cambios electricos cardiacos por modificaciones de la microbiota, considerando a su vez, arritmias ventriculares y supraventriculares.

METODOLOGÍA

Las actividades que se realizaron consistieron en: a) mediciones del intervalos y segmentos de electrocardiogramas de ratones con tratamiento, b) detectar posibles arritmias (ventriculares y supraventriculares) en el modelo animal, b) colaboración en la toma de glicemia en ratones con diabetes mellitus tipo 2, c) apoyo en el procedimiento de curva de tolerancia a la glucosa, d) medición de compuestos químicos para la fabricación de soluciones específicas (Tyrode), e) observación de disecciones de corazón y extracción de órganos, f) participación en el registro electrocardiográfico y farmacología (Acetilcolina). Asimismo, se realizaron seminarios de temas especializados que permitieron una mayor obtención de conocimientos en el área de: enfermedades metabólicas, electromagnetismo, bases del electrocardiograma, campo eléctrico, electrofisiología cardiaca y bases fisiológicas de las arritmias.

CONCLUSIONES

Los aprendizajes que se obtuvieron fueron de tipo teórico y práctico: en los primeros encontramos como saber analizar y seleccionar información de calidad de temas específicos del área de fisiología y fisiopatología cardiovascular, la importancia de reconocer las normas para el trato digno de los animales de laboratorio, comprender un concepto en su totalidad y aprender a buscar información relevante y fidedigna respetando la autoría. En los prácticos encontramos la medición de registros electrocardiográficos, elaboración de diagramas Poincaré, modificación de las escalas en milisegundos y la obtención de resultados en los animales tratados. Cabe mencionar, que falta realizar el análisis y la cuantificación de los datos para conocer cambios y variaciones en los parámetros registrados. 

Asesor: Dr. Genaro Diarte Plata, Instituto Politécnico Nacional

DETERMINACIóN DE LA DL50 DE BACTERIAS DEL GENERO VIBRIO AISLADAS DE LA JAIBA CALLINECTES BELLICOSUS EN CAMARON BLANCO LITOPENEUS VANAMEII EN CONDICIONES DE LABORATORIO

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DETERMINACIóN DE LA DL50 DE BACTERIAS DEL GENERO VIBRIO AISLADAS DE LA JAIBA CALLINECTES BELLICOSUS EN CAMARON BLANCO LITOPENEUS VANAMEII EN CONDICIONES DE LABORATORIO

Escamilla Valle María Fernanda, Universidad Autónoma de Occidente. Asesor: Dr. Genaro Diarte Plata, Instituto Politécnico Nacional

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los cultivos acuícolas son de gran relevancia en la alimentación humana, pero crean un medio ambiente artificial que promueve el crecimiento de diferentes especies de bacterias. Las especies del género Vibrio son bacterias de la microflora normal de los camarones peneidos y son también agentes patógenos oportunistas que pueden tomar ventaja de éstos cambios ecológicos generados en los cultivos acuícolas causando diferentes enfermedades, sobrevivencias bajas y pérdidas económicas en la producción de camarón (Aguirre-Guzmán et al. 2013). Una de las  principales enfermedades que afectan a los cultivos de camarón es la siguiente: EMS (síndrome de mortalidad temprana) La enfermedad afecta a Penaeus monodon y Litopenaeus vannamei y se caracteriza por mortalidades masivas, alcanzando en algunos casos hasta un 100% en los estanques afectados, durante los primeros 10-30 días de cultivo (etapa de engorde) y pocos días después de los primeros signos de la enfermedad (Cuéllar-Anjel 2013). En el presente estudio se planteó la hipótesis Cepas del genero Vibrio en condiciones controladas tendrán un efecto patógeno en juveniles de camarón blanco Litopenaeus vannamei. Así mismo se tomó como objetivo determinar la concentración letal media de cepas de genero Vibrio en cultivo de camarón bajo condiciones de laboratorio, utilizando 5 cepas del genero Vibrio de las cuales se tomaría la que obtuviera el mayor porcentaje de mortalidad.

METODOLOGÍA

MONTAJE DEL SISTEMA DE CULTIVO Se preparó agua con 33% de salinidad en tinas de 120 litros, para aclimatar a los camarones MICROBIOLOGICO Se realizó un microbiológico inicial, para conocer la carga bacteriana del genero Vibrio al iniciar los bioensayos. BIOENSAYOS En el primer bioensayo se evaluó la mortalidad de un stock de cinco cepas del genero Vibrio la concentración letal media. Para el bioensayo 2 se eligió de un stock de dos cepas del genero Vibrio, la cepa que poseía mayor mortalidad. Para finalizar en el bioensayo 3 se determinó la concentración letal media de Vibrio harvery en camaron litopenaeus vannamei en condiciones de laboratorio.

CONCLUSIONES

De las cinco cepas de bacterias del genero Vibrio, predominaron con mayor mortalidad las bacterias del tratamiento I , III y IV. Se determinó como mejor cepa (con mayor porcentaje de mortalidad) a la cepa del tratamiento I. que pertenece a la especie de Vibrio harvery. Se determinó la dosis letal media de Vibrio harvery , donde se encontró mortalidad total a 250000 ufc/ ml , con tempertatura de 31.3 °C.

Asesor: Dr. Joel Luis Teran Vazquez, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

SÍNTESIS DE LA SAL DE SULFONIO OXAZOLIDÍNICA DERIVADA DE (R)-(-)-2-FENILGLICINOL

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SÍNTESIS DE LA SAL DE SULFONIO OXAZOLIDÍNICA DERIVADA DE (R)-(-)-2-FENILGLICINOL

Escobar Rivera Rolando, Instituto Tecnológico de Tuxtla Gutiérrez. Asesor: Dr. Joel Luis Teran Vazquez, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las sales de sulfonio son intermediarios sintéticos empleados en la síntesis de epoxidos, específicamente, las sales de sulfonio amídicas han sido empleadas en la síntesis específica de epoxidos trans. Si esta sal de sulfonio es quiral es posible acceder a epoxiamidas trans con una elevada diastereoselectividad. Es por ello que en este trabajo nos enfocamos en sintetizar la sal de sulfonio quiral oxazolidinica derivada de (R)-(-)-2-Fenilglicinol, para después emplearla en la síntesis específica y altamente diastereoselectiva en epoxiamidas trans.

METODOLOGÍA

Partiendo del (R)-(-)-2-fenilglicinol lo hacemos reaccionar con  CH2Cl2 (Diclorometano) y le agregamos 0.97 mL de butiraldehido, a una temperatura de 0 grados, por lo cual se prepara un baño de hielo. Obtenemos la Oxazolidina y lo hacemos reaccionar con Bromuro de bromo acetilo, CH2Cl2/H2O y carbonato de potasio (K2CO3) y así obtendremos nuestra haloamida-Cis.Para realizar lo anterior, en un matriz de 100 mL agregamos 1 g de fenilglicinol  y una cantidad de CH2CL2, agregándole 0.97 mL de butiraldehido, a una temp de 0 grados, por lo cual se monta sobre un baño de hielo.Llevamos a ebullir y obtenemos pizcas del butiraldehido, a las cuales se le agregó CH2CL2, y se monta una columna para realizar cromatografía en columna (CC) y se preparan sistemas en distintas proporciones de Bencina/Acetato (93mL B/7mL A, hasta llegar a 85mL B/15mL A). En la columna agregamos nuestro butiraldehido + CH2CL2+los eluyentes. Se plaquean los tubos 1,2,6,9 y 12, para posteriormente plaquear de 2 en 2, hasta llegar al tubo 58(Eluyente Ben/Acet proporciona 7/3). Partiendo de la haloamida-cis obtenida, la hacemos reaccionar con sulfuro de dimetilo (-S-) y CH2CL2 a temp ambiente, y así obtuvimos nuestra sal de sulfonio.Para realizar lo anterior, montamos una columna para realizar una CC, se prepara un crudo conteniendola sal de sulfonio agregándole una pequeña cantidad de sílice,ebullimos a una temp de 44 y una velo. de 280 rpm, observamos fragmentos del crudo en el matraz y se agrega CH2CL2, y este fue introducida a nuestra columna. Se realizan sist y se introducen a la columna (Sist. Preparados 99 mL Benz/ 1mL Acet hasta 85mL Benc/15mL Acet).Plaqueamos los tubos 1,3,6,9 y 12,observamos en luz ultravioleta (UV),se procede a realizar una cromatografí en capa fina (CCF),(eluyente: Benc/Acet en una proporción 7/3), ya eluida la placa observamos en UV y señalaremos lo que se observa,utilizaremos el revelador (Permanganato de potasio), para determinar con presición. Se repitió el mismo procedimiento anterior, los tubos fueron seleccionados de 2 en 2 hasta llegar a la cantidad de tubos  totales, que en este caso fueron 72 tubos muestra.Los tubos con producto fueron del 28 al 66. Los tubos en los cuales cuenta con producto se junta en una pera y llevamos a ebullir,ya ebullido pesamos nuestro producto, para  determinar la cantidad del producto obtenido.Realizamos cálculos para determinar los rendimientos: 2.27 100% Rendimento Teórico: 1.81 ——- Cis 80% 0.46———Trans 20% Rendimiento Experimental: 1.45 312.2——62.13 x 6   1.45—— x x=1.73 g / 0.845 g/mL = 2.048 mL A los 1.45 mL le agregamos una mínima cantidad de CH2CL2 y la llevamos a agitación, posteriormente agregamos 2.04 mL de sulfuro de dimetilo ((CH30)2 SO2), se dejo que se completara la reacción. Nos percatamos que los tubos en los cuales se encontraba la haloamida-trans eran del 18 al 25.Se juntaron los tubos con la hal-trans y llevamos a ebullir, posteriormente se procede a realizar una placa con 3 puntos de referencia:1 Haloamida-trans (materia prima),2 Punto mixto y 3 Reacción. Observamos en UV y procedemos a eluir la placa en un sistema Ben/Acet en proporción 7/3,llevamos nuevamente a UV y marcamos los puntos obtenidos, se revela en Dragendorff,determinamos que la reacción aun no se había completado.Se realiza el procedimientoanterior y obtuvimos los resultados esperado. Se le agrega un exceso de Bencina y se aprecia que se empieza a precipitar, ya habiéndose precipitado llevamos a decantar. Lo llevamos a ebullir y posteriormente a evaporar y se pesa lo obtenido.Nuevamente realizamos cálculos para determinar los rendimientos: Cálculo de rendimientos de la sal de sulfonio 312.2——-373.07  1.45 ——- x=1.73 100% Rendimiento experimental: 1.7247 gr Porcentaje total: 1.73——100% 1.7247— x=99.69 Partiendo de la sal de sulfonio obtenida, se hace reaccionar con el 2-piridin carbaldehido, Tetrahidrofurano (THF)/H2O, hidróxido de potasio (KOH) a una temperatura de 0 grados, hasta llegar a temperatura ambiente, para asi poder obtener nuestra epoxiamida oxazolidinica.Para lleva acabo lo anterior, se realizaron cálculos estequiométricos.Llevamos nuestro producto a la campana de extracción, en donde se le agrega el THF y al igual se le agregan 10 mL de H2O, y lo ponemos a en agitación, se pesan 0.52 g de KOH, al cual se le agregara una pequeña cantidad de agua. Se agrega el KOH+H2O en forma de goteo a nuestro matriz con el producto. Se deja en agitación durante 24 h. Se procede a prepara una placa con 3 puntos de referencia: 1 Materia prima (Sal de sulfonio),2 Punto mixto y 3 Reacción  Ya habiendo realizado el procedimiento de plaquear, se procede a realizar una extracción, para lo cual se agrega una pequeña cantidad de acetato de etilo y así separar las fases que se encuentran presentes (Fase orgánica y fase acuosa). Partiendo de la Epoxiamida-Oxazolidinica,se hace reaccionar con ácido bromihidrico (HBr), Cloroformo (CHCl3) a t.a., para así poder obtener la apertura del grupo oxirano.Para realizar lo anterior, a nuestra materia prima(MP) obtenida, le agregamos 2mL de CHCl3 en forma de goteo,se agita y agregan 16 gotas de HBr.Se realiza una placa, a nuestra MP lo hacemos reaccionar con bicarbonato de sodio (NaHCO3) hasta alcanzar un pH de 6-7.  

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano logre adquirir conocimientos tanto teóricos como prácticos, que me fueron de gran apoyo para posteriormente ponerlas en practica en la realización del proyecto, sin embargo, el ser un proyecto extenso, aún nos encontramos en la etapa de la apertura del grupo Oxirano. Se espera que en el lapso de la semana se logre completar la reacción, para así poder obtener nuestro producto esperado.

Asesor: M.C. Luis Eugenio Rivera Cervantes, Universidad de Guadalajara

RESCATE Y AUXILIO DE LA FAUNA SILVESTRE DEL SUROESTE DE JALISCO EN EL C.U.COSTA SUR.

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RESCATE Y AUXILIO DE LA FAUNA SILVESTRE DEL SUROESTE DE JALISCO EN EL C.U.COSTA SUR.

Escobar Tapias Cecyan Maria, Universidad de la Guajira (Colombia). Asesor: M.C. Luis Eugenio Rivera Cervantes, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Desde hace mucho tiempo el hombre ha explotado los recursos disponibles bridando por la naturaleza, ha generado fuertes impactos ambientales que progresivamente han afectado negativamente  los procesos naturales del planeta. Esta problemática ambiental incluye aspectos económicos, sociales y ecológicos. Logrado así la pérdida de biodiversidad y extinción de especies más devastadora de la tierra (Ojasti, 2000). La fauna silvestre además de ser fundamental para el hombre, es uno de los recursos naturales renovables y componente importante de la diversidad biológica, siendo sobreexplotado, y amenazado; para el sustento alimenticio, protección, costumbres religiosas e interés económico.   México es considerado un país megadiverso por reunir características geográficas que permite albergar el 10% de la fauna mundial, ocupando el cuarto lugar a nivel mundial (Groombridge y Jenkins, 2002). Y el estado de Jalisco en particular ocupa el quinto lugar a nivel nacional en riqueza de animales, mucho de ellos endémicos, algunos amenazados y en peligro de extinción. Una de las problemáticas  que  afectada la fauna silvestre  del suroeste de Jalisco es que está siendo fuertemente intervenida por la falta de conocimiento y concientización de la población, siendo encontrada herida, atropellada, envenenada, etc. Y no se cuenta con un centro especializado de atención, auxilio y rehabilitación, donde se le puede brindar un mejor manejo para mantener la vida que cada animal.

METODOLOGÍA

La realización proyecto de investigación contó con metodología estandarizada dividida en  dos fases: Reporte y rescate de fauna silvestre: Se responde mediante el llamado de emergencia de reporte de fauna de la comunidad o de protección civil de cada municipio. Se procede recibir oa dirigirse al lugar donde se encontró el animal, analizando características morfológicas y recolectando datos de la procedencia del espécimen. Se trasladó hasta la Unidad de rescate de fauna silvestre de la Costa Sur de Jal, en el Centro Universitario de la Costa Sur de la Universidad de Guadalajara. Auxilio y rehabilitación de la Fauna silvestre rescatada: Se realizó la primera inspección del animal (golpes, fractura, comportamiento,enfermedad, paracitos, etc). Dependiendo del estado del animal se remite a un veterinario o se mantiene en recuperación y observación por 24 o 48h, y se decide si se libera o se mantienen por un periodo considerable de rehabilitación para una futura liberación, cuando se en cuentre en condiciones aptas para que se enfrente a una vida silvestre. Cabe resaltar que cada grupo animal requiere de una manipulación y cuidados específicos. Finalmente se reportó cada espécimen a los entes de protección de fauna del estado.

CONCLUSIONES

Durante la estancia y ejecución de la investigación, se logró conocer mediante revisión bibliográfica y manipulación, la diversidad faunística con  que cuenta la costa sur de Jalisco, y a identificar los principales factores de amenaza para la fauna, a su vez se aprendió a manipular, realizar diagnósticos y mejorar las condiciones de la fauna rescatada y requiera auxilio. Se capacitó en la educación sobre organismos vivos, para aportar a la concientización y respeto sobre la fauna silvestre a las comunidades en particular a las nuevas generaciones. 

Asesor: Dr. Alejandro Salinas Melgoza, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

DIFERENCIA DE LA BIODIVERSIDAD DE ARTRóPODOS EN LAS HUERTAS DE AGUACATE TRADICIONALES CON RESPECTO A LAS HUERTAS ORGáNICAS

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DIFERENCIA DE LA BIODIVERSIDAD DE ARTRóPODOS EN LAS HUERTAS DE AGUACATE TRADICIONALES CON RESPECTO A LAS HUERTAS ORGáNICAS

Escobedo Murillo Francisco Javier, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Alejandro Salinas Melgoza, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Durante estos últimos años, en el estado de Michoacán ha ido en aumento el establecimiento de huertas aguacateras. Esta modificación en el uso de suelo ocasiona un efecto importante en sistema debido a que involucra la tala de árboles, ocasiona desecación de los mantos freáticos, pérdida de especies, entre otros. Un problema adicional es que muchas de las huertas utilizan productos químicos para repeler a las plagas de los árboles y para cambiar las composiciones de los suelos, este tipo de sustancias químicas no sólo afecta a las plagas de los árboles, también se pueden alterar las poblaciones de otras especies de animales. Un ejemplo muy importante son los insectos polinizadores, los cuales pueden morir si se acercan mucho o simplemente no se acercan, lo que trae graves problemas para los ecosistemas que ocupan las huertas aguacateras.

METODOLOGÍA

Para evaluar la diversidad de artrópodos de las comunidades aguacateras, se colocaron quince trampas pitfall en tres transeptos de 25 metros (una trampa pitfall cada 5 metros). Cada transepto se separó por 5 metros de distancia, todas las trampas contenían 100ml. de alcohol. Se dejaron colocadas toda la noche y se revisaron al amanecer. Todos los individuos que cayeron en las trampas fueron colectados en frascos con alcohol al 75%. También se realizó la búsqueda activa de individuos nocturnos y diurnos. Para determinar la comunidad de artrópodos nocturnos, se colocó una trampa de luz de color blanca con una manta del mismo color. La trampa se encendió sólo una noche por sitio y se colocó durante tres horas, una vez trascurrido el tiempo se realizó la colecta de todos los artrópodos sobre la manta. Los individuos colectados fueron preservados en frascos con alcohol. Las muestras de ambos tipos de trampa fueron revisadas empleando un microscopio esteroscópico. Se realizó un inventario de los órdenes y familias presentes, además se calcularon los índices de diversidad de Shannon y el de dominancia de Simpson. Para la diversidad betha se calcularon los índices de Jaccard y de Bray-Curtis.

CONCLUSIONES

Los resultados indican que: Se muestra una mayor abundancia de organismos en las huertas tradicionales. Una mayor biodiversidad en las huertas orgánicas. La gran cantidad de organismos en las huertas tradicionales se debe a la gran población de un sólo grupo de artrópodos los colémbolos. La presencia de una mayor biodiversidad en las huertas orgánicas se puede deber al hecho de que no presenta compuestos químicos que alejen o maten a los artrópodos y se pueda dar una cadena alimenticia más completa y equilibrada.

Asesor: Dr. Luisa Alondra Rascón Valenzuela, Universidad de Sonora

INVESTIGACIóN EN PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD ANTIPROLIFERATIVA Y ANTIOXIDANTE

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INVESTIGACIóN EN PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD ANTIPROLIFERATIVA Y ANTIOXIDANTE

Espinosa Espiritu Victor Alfonso, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Luisa Alondra Rascón Valenzuela, Universidad de Sonora

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

A lo largo de estos años, en todo el mundo han aumentado considerablemente los casos de pacientes con cáncer, los cuales tiene que vivir con una constante medicación con un costo elevado, con probabilidades muy bajas de que sean realimente eficaces, por lo que la mayor problemática que se presenta en el campo de la medicina actualmente es la escasez en la fabricación de tratamientos a base de compuestos naturales con actividades biologías para inhibir el avance progresivo de esta enfermedad crónica. Con este trabajo se busca identificar estos compuestos para la disminución del crecimiento y división de células anómalas usando extractos de plantas con estas características para así sacar beneficio de la gran diversidad de flora que existe dentro del territorio mexicano y poder aumentar la esperanza de vida de millones de personas alrededor del mundo.

METODOLOGÍA

Para la realización de este trabajo fueron utilizadas células HeLa las cuales provenían de un linaje de cáncer cervicouterino, estas fueron proporcionadas por la investigadora las cuales guardaba en un refrigerador especial a -80º c. Para su aplicación se tuvo que hacer una activación y congelación de la línea celular. Los reactivos que se utilizaron fueron el DF5 y el MTT,  Determinación de viabilidad celular por análisis de MTT Dia 1: Montaje en placa.  Una vez esterilizado el material necesario para realizar el ensayo de reducción de MTT se comenzó a realizar el montaje en placa. Consistió en colocar dentro de la campana la gradilla, la tripsina descongelada, un tubo de 50mL, el medio de cultivo D5F, pipetas y pipetor, para después llevar la caja dentro de la campana y abrir el tubo de 50 ml y vaciar el contenido al mismo. Se agregó 7 ml de tripsina a la caja de cultivo con ayuda de una pipeta y se prosiguió a meter en la incubadora, cada 2 minutos se golpearon y se observó si se desprendían, cuando se notó que ya se habían desprendido de la caja, se decantó el contenido en el tubo de 50 ml. Continuando con la caja del medio, se le agrego un poco de medio, se enjuagó, y se puso a incubar. Rápidamente se llevó el tubo de células y tripsina a centrifugar (1500 rpm, 4º, 7 m) y en un recipiente se vació el sobrenadante del tubo (todo dentro de la campana cuidando la esterilidad). Dependiendo del tamaño del pellet celular, se colocó aproximadamente 5 ml y con una pipeta estéril se resuspendió subiendo y bajando el contenido con el pipetor, conservando un poco de la suspensión celular y colocándola en un microtubo. Con la alícuota tomada, se realizó la cuenta celular 20 ml de suspensión + 20 ml de azul de tripano, sacando el promedio utilizando la formula (?) x 2 x 10,000 = #células / ml. Realizando los cálculos para tener 10,000 células en cada 50 ml de cada pozo Después de haber ajustado el volumen a 10,000 células/50 ml, con el multicanal se prosiguió a llenar la placa de 96 pozos con los 50 ml de suspensión (agitando la placa de Petri cada 3 líneas con la finalidad de tener suspendidas las células) y una vez terminado de llenar la placa se le rotuló poniendo el nombre de la línea celular, la fecha y el nombre de quien lo hizo para continuar metiéndola a la incubadora. Dia 2: Diluciones.  Dentro de la campana de flujo laminar, se colocaron placas Petri, puntas, pipetas automáticas, placa de 48 pozos, medio de cultivo D5F. Todo previamente esterilizado, se agregó medio D5F dentro de la placa Petri y con la ayuda de la micropipeta se añadió 495 ml de D5F en la primera línea horizontal de los pozos, y en el resto de los pozos se añadió 250 ml de D5F. Se utilizaron los extractos de las especies de plantas Heliopsis longipes(EC) , Tributus terrestris (Tt), Baerhauia coccinea (BC) y Mimosa Tenuiflora (DMT) los cuales se agregó 5 ML y se resuspendió la solución de la 1º fila, para después tomar 250 ml y pasarlas al pozo siguiente. Una vez que se terminó de hacer las diluciones se colocó 50 ml a cada pozo de la placa de 96 con células, empezando por las concentraciones más diluidas. Después se guardó la placa en la incubadora para dejarla 44 horas. Día 3: Fotografías.  A las 24 horas de haber colocado el estímulo se fotografió el estado de las células, eligiendo 1 pozo del triplicado de las concentraciones que se hizo. Aplicación del MTT. Al siguiente día se quitó el extracto con ayuda del multicanal y se le adicionó 100 ML de PBS 1X estéril, agitando un poco la placa y después se retiró el PBS. Entonces se le agregó 100 ml de D5F fresco con el multicanal y fue añadido el MTT (5mg/ml) 10 µL para cada pozo de la placa que contiene las células a cuantificar. Se incubó la placa durante 4 horas para después añadirle isopropanol acidificado (0.05N) 100 ML a cada pozo, mezclando hasta disolver los cristales de color azul obscuro formados. Una vez hecho eso se incubó la placa durante 10 minutos a temperatura ambiente para asegurar la disolución total de los cristales, y se obtuvo la absorbancia en un lector ELISA con filtros a 570 nm-630 nm y después con el programa PRISMA 5 se graficó el porcentaje de absorbancia en proporción a la concentración.

CONCLUSIONES

Al haber finalizado la determinación de viabilidad celular por análisis de MTT, se observaron las gráficas obtenidas y se llegó a la conclusión de que los extractos solo tuvieron actividad anti proliferativa a mayor concentración (200 y 100 µg/ml) donde el extracto Heliopsis longipes(EC) fue el que tuvo los valores más bajos, teniendo entre 7-10% en sus valores de absorbancia, seguido del extracto Mimosa Tenuiflora (DMT) con 17-30% y Tributus terrestris (Tt) con 25-40%. El que no tuvo resultados favorables aun en las concentraciones más altas fue Baerhauia coccinea (BC) con un 85%. Esto quiere decir que el extracto más eficaz para la activad anti proliferante en células cancerígenas es el Heliopsis longipes(EC), el cual se podría utilizar para realizar investigaciones enfocadas en esta planta con estas características para generar compuestos que ayuden con tratamientos en contra de la evolución de esta enfermedad crónica.

Asesor: Dr. Salvador Sánchez Carrillo, Consejo Superior de Investigaciones Científicas (España)

EFECTOS DEL INCREMENTO DEL DIóXIDO DE CARBONO ATMOSFéRICO EN LOS HUMEDALES

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EFECTOS DEL INCREMENTO DEL DIóXIDO DE CARBONO ATMOSFéRICO EN LOS HUMEDALES

Espinoza Cano Mónica, Instituto Tecnológico de Morelia. Gómez García Maria Jimena, Instituto Politécnico Nacional. Martinez Castaño Maria Alicia Esther, Universidad Simón Bolivar (Colombia). Romero Martinez Brenda Lizbeth, Universidad Autónoma de Baja California Sur. Villasenor Cortez Yanet, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Asesor: Dr. Salvador Sánchez Carrillo, Consejo Superior de Investigaciones Científicas (España)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El incremento del CO2 atmosférico provocado por el aumento de las emisiones derivadas de la actividad humana desde la revolución industrial es el principal motor de climático a escala global. Desde finales del siglo XX se vienen realizando estudios para evaluar los efectos que estos cambios atmosféricos producen sobre los diferentes ecosistemas, incluyendo los humedales. Los humedales son los principales emisores naturales de metano a la atmósfera pero también tienen una gran capacidad de sumidero de carbono al retener grandes cantidades de materia orgánica sin descomponer en sus suelos a largo plazo (hasta 830 Tg C/año). Su rol ante el aumento del CO2 atmosférico precisa ser evaluado para plantear estrategias ambientales que permitan incrementar su capacidad mitigadora del cambio climático. En este estudio se ha utilizado un sistema de enriquecimiento de CO2 al aire libre o FACE, por sus siglas en inglés (free-air CO2 enrichment facility), para elevar la concentración de CO2 hasta 580 ppm -la concentración esperable para 2050 en uno de los escenarios IPCC- durante el ciclo vegetativo (abril-septiembre) sin alterar el ambiente natural, en un humedal ubicado en el centro de España (Parque Nacional Las Tablas de Daimiel). Es este un experimento a largo plazo que se viene desarrollando desde el año 2012 y en el que se está evaluando la respuesta del macrófito Phragmites autralis y su entorno biogeoquímico a esta exposición prolongada. En este caso se determinaron los efectos en el crecimiento vegetativo, la fotosíntesis, la transpiración, la clorofila (a+b), el contenido de C y N foliar y la cantidad de exudación radicular de compuestos de carbono y la actividad de la exoenzima catalasa.

METODOLOGÍA

Una descripción detallada del área experimental y de las medidas de rutina pueden consultarse en Sánchez-Carrillo et al. (2015) y en Sánchez-Carrillo et al. (2018). El área consiste de 6 parcelas enriquecidas con CO2 y otras 6 con concentración ambiental, más otras 3 parcelas control ubicadas en el exterior del recinto. Semanalmente se midió in situ el área foliar (LAI) con la ayuda de un ceptómetro (AccuPAR LP-80, Decagon Devices Inc.), previamente calibrado para la especie y el lugar en cuestión (Sánchez-Carrillo et al. 2018), las alturas mínima y máxima de las hojas, con cinta métrica y la actividad fotosintética y la transpiración con un analizador de gases por infrarrojo portátil (IRGA model 225 MK3, ADC BioScientific). Cada dos semanas se recolectaron muestras de hojas por triplicado en todas las parcelas citadas y se analizó el contenido de clorofilas a y b (Chl (a+b); discos de 10 mm de diámetro) según las ecuaciones de Porra et al. (1989) tras la extracción con metanol. Estas muestras foliares fueron secadas y trituradas para analizar el contenido de C y N con un analizador elemental Perkin Series II 2400 CHNS/O. En una ocasión, que es la inicial del ciclo vegetativo, se tomaron muestras de suelo (0-20 cm) por triplicado con la ayuda de un sacatestigos en cada una de las parcelas y se procedió en el laboratorio a la extracción de los exudados de carbono para determinar la cantidad generada por las raíces como respuesta a la exposición al CO2 elevado. Cada muestra se separó en una réplica bruta de aproximadamente 5 g (intacta) y otra del suelo sin raíces, determinando la masa correspondiente de estas. Estas muestras se mezclaron con 100 ml de agua destilada y se mantuvieron en agitación durante 2 horas a 25º C y, posteriormente, fueron filtradas con un filtro GF/F de Whatman, para finalmente analizar el contenido de carbono orgánico disuelto del filtrado con un analizador TOC-V/TNM-1 de Shimazdu. De igual manera, en una ocasión, se tomaron muestras de suelo por triplicado en cada una de las parcelas experimentales para medir en el laboratorio la actividad de la enzima catalasa según el método de Johnson y Temple (1964). En todos los casos, las muestras fueron mantenidas en frío (< 4º C) durante su transporte al laboratorio.

CONCLUSIONES

Las diferencias observadas entre los carrizos expuestos al enriquecimiento de CO2 y los que crecen bajo concentración ambiental no resultaron significativas. Los cambios en las alturas de las plantas no fueron diferentes en el tiempo entre tratamientos (ANOVA p=0.57). Tampoco el LAI fue significativamente mayor en los carrizos de las parcelas FACE (ANOVA p=0.21). Las tasas de fotosíntesis y transpiración medidas en los Phragmites que crecen en la atmósfera enriquecida en CO2 fueron similares a las registradas en los controles (ANOVA p=0.16 y p=0.12, respectivamente). Las concentraciones de las Chl (a+b) fueron significativamente inferiores en las parcelas del recinto FACE frente a los controles externos (ANOVA y test post-hoc de Tukey p=0.009), aunque sólo durante la última fecha de muestreo. El estudio no abarca el ciclo vegetativo completo y los resultados representan la tendencia en las variables fisiológicas hasta la mitad del periodo. Sin embargo, en años anteriores se ha observado la misma tendencia y los macrófitos expuestos al aumento de CO2 presentan una mayor exudación del carbono asimilado en la zona radicular.

Asesor: Dr. Elith Yazmin Valencia Villalvazo, Universidad de Guadalajara

CARACTERIZACIóN DE LOS CAMBIOS ADAPTATIVOS, FíSICOS, FISIOLóGICOS Y GENéTICOS COMO RESPUESTA AL EJERCICIO

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CARACTERIZACIóN DE LOS CAMBIOS ADAPTATIVOS, FíSICOS, FISIOLóGICOS Y GENéTICOS COMO RESPUESTA AL EJERCICIO

Bravo Patiño Sebastian Luis, Instituto Tecnológico de La Piedad. Carachure Muñoz Zayra Jocelyn, Universidad Autónoma de Guerrero. Espinoza Ramírez Jassel, Universidad de Guadalajara. Penagos Castellanos Nathan, Universidad Autónoma de Chiapas. Saldivar Castro Eduardo Raúl, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Elith Yazmin Valencia Villalvazo, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Introducción Las características físicas de un deportista son por lo general muy distintivas, además de reflejar un estado de salud óptimo. Desde que una persona comienza a realizar ejercicio de manera rutinaria o incursiona en la practica de un deporte en carácter formal, experimenta una serie de cambios no solo físicos, si no también fisiológicos o inclusive genéticos. El presente estudio pretende describir los rasgos característicos de cada cambio experimentado por un individuo en el proceso adaptativo al entrenamiento deportivo, que se espera sean diferentes cuando el deporte involucre la fuerza, la resistencia o la velocidad. Planteamiento del problema En las últimas dos décadas diversas investigaciones se han enfocado en dilucidar cuales son las características que debe presentar un deportista para considerarse como tal, es bien sabido que en el proceso formativo un atleta experimenta múltiples cambios que le ayudan a adaptarse a las cargas de entrenamiento demandadas por el deporte que practica, sin embargo, son pocos los reportes que existen respecto a los cambios en la expresión de los genes que se han visto asociados con las adaptaciones físicas o fisiológicas en respuesta al ejercicio. La principal pregunta que esta investigación pretende contestar es si ¿las variaciones en el genoma que se han visto asociadas a fenotipos de un mejor rendimiento físico se expresan diferente en las etapas de formación de un atleta o según el deporte que se practica? Objetivos Establecer si la expresión de genes candidatos del desarrollo de fenotipos deportivos es diferente cuando el individuo inicia en un programa de entrenamiento en comparación a cuando se consolida como un atleta de élite. Definir como es la expresión de genes en diferentes deportes, según las características fenotípicas que deba tener el atleta de la disciplina particular. Objetivos particulares Enunciar las características físicas y fisiológicas que tienen particularidad en atletas de diferentes deportes.  Distinguir las variantes en los genes que se asocian a rasgos de un mejor desempeño en el deporte. Estimar como es la expresión de genes candidatos del rendimiento atlético y fitnes. Justificación La estructura genética define las particularidades de cada individuo, sin embargo muchas veces aunque en el genoma no haya diferencias significativas la expresión de los genes puede influenciar al desarrollo de características singulares, en los deportes puede ser de especial interés conocer los mecanismos que llevan a que un gen se exprese de terminada manera pues dicho conocimiento puede mejorar los métodos de entrenamiento o incluso posibilitar un diagnostico del ejercicio mas adecuado.

METODOLOGÍA

Para realizar el proyecto Caracterización de los cambios adaptativos, físicos, fisiológicos y genéticos, como respuesta al ejercicio, se cuenta con dos tipos de poblaciones: Población testigo (población en general) y Población estudio (personas que practican natación, halterofilia, lucha y atletismo) Como desarrollo del proyecto se realiza lo siguiente: Cuestionario: nos permite conocer la clínica y los antecedentes familiares de cada participante del proyecto. Antropometría: se realiza una serie de mediciones corporales (talla, peso, diámetros corporales, perímetros y pliegues cutáneos) para saber la composición corporal y los cambios que se puedan producir en la población en estudio durante el desarrollo del proyecto. Posterior a esto, se realiza una toma de muestra sanguínea, de la cual se analiza: Fisiología, a través de la cuantificación de las pruebas bioquímicas, tales como Glucosa, Creatinina, Urea y Proteínas totales Estudio molecular: como parte de la variación genética se extrae ADN y como parte de la expresión genética se extrae ARN Obtenidos los resultados de todas las pruebas y cuestionarios realizados se lleva a cabo el Análisis Estadístico.

CONCLUSIONES

Proyecto sin concluir, en proceso... Se espera obtener variación genética entre las dos poblaciones (población testigo y población estudio), especificamente en el gen PPAR. a través de los diferentes análisis realizados. Tras la exposición a diferentes periodos de ejercicio, también se esperan observar cambios significativos manifestándose tanto en el metabolismo como en la expresión de genes de la población en estudio.

Asesor: Dr. Patricia Nayeli Alva Murillo, Universidad de Guanajuato

INMUNODETECCIóN DEL PéPTIDO KR-20 EN TRICHOMONAS VAGINALIS

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INMUNODETECCIóN DEL PéPTIDO KR-20 EN TRICHOMONAS VAGINALIS

Esquivel Cervantes Raquel Melissa, Universidad de Guanajuato. Asesor: Dr. Patricia Nayeli Alva Murillo, Universidad de Guanajuato

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El parásito Trichomonas vaginalis es el agente causal de la tricomoniasis; la cual es la infección de transmisión sexual no viral más común. De acuerdo con un estudio, se estima que anualmente a nivel mundial  alrededor de 270 millones de personas en edad reproductiva se infectan con dicho parásito. Tan solo en el año 2017, en México se reporton 170,000 casos de dicha infección. La tricomoniasis afecta tanto a hombres como a mujeres. La mayoría de los pacientes son asintomáticos, lo cual representa un problema de salud pública mundial, ya que, es una enfermedad desatendida, subestimada y que no se encuentra bajo vigilancia epidemiológica. Cerca del 50% de las mujeres que contraen la infección, no presentan síntomas, lo cual hace más difícil su diagnóstico. La infección con T. vaginalis se ha asociado con múltiples afecciones a la salud, ya que aumenta el riesgo de adquirir otras infecciones de transmisión sexual; vuelve más susceptibles a los pacientes a contraer el Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH) y Virus del Papiloma Humano (VHP). Las mujeres embarazadas que presentan tricomoniasis son más propensas a tener un parto prematuro y neonato de bajo peso, lo cual incrementa los costos hospitalarios. En los últimos años algunos aislados clínicos de T. vaginalis han mostrado resistencia contra los antiparasitarios de elección, es por ello que se han buscado nuevas alternativas para su control. Una de ellas son los péptidos antimicrobianos, los cuales se encuentran ampliamente distribuidos en animales, insectos y plantas, éstos son moléculas con menos de 100 aminoácidos, la mayoría de ellos de naturaleza catiónica, y que en estudios recientes han demostrado tener propiedades antimicrobianas e inmunomoduladoras. En humanos podemos encontrar tres familias: las defensinas, histatinas y catelicidinas. De esta última familia solo se conoce el hCAP18/LL-37, aunque este tiene varios derivados. Uno de ellos es el péptido antimicrobiano KR-20, que fue encontrado por primera vez en sudor. De acuerdo con un estudio realizado por nuestro grupo de trabajo en Tricomonas vaginalis; en el que se probó el péptido antimicrobiano LL-37 y su derivado KR-20. El KR-20 presentó una mayor actividad antimicrobiana en comparación con el péptido LL-37. Debido a e ello, el objetivo de este estudio es determinar mediante inmunolocaización la interacción entre el péptido antimicrobiano KR-20 y el parásito Trichomonas vaginalis.

METODOLOGÍA

Para el estudio se utilizó la cepa GT13 de Trichomonas vaginalis aislada y donada por los doctores Felipe Padilla Vaca y Fernando Anaya Velázquez. De un cultivo confluente de 24 horas, se contaron las células y se ajustaron a concentración de 400,000 trofozoitos/mL en medio TYI-S-33 6% de suero bovino. En una placa de cultivo de 24 pozos se colocaron cubreobjetos previamente tratados con poli-L-lisina; y se realizaron las interacciones con sus respectivos controles.  Los cuales se mencionan a continuación:  T. vaginalis con péptido KR-20 con anticuerpo primario y secundario. (Problema) T. vaginalis con péptido KR-20 con el segundo anticuerpo. (Control) T. vaginalis sin péptido KR-20 con ambos anticuerpos. (Control) T. vaginalis sin péptido KR-20 con el segundo anticuerpo. (Control) Se permitió la interacción entre el péptido antimicrobiano KR-20 y Trichomonas vaginalis por 30 minutos, a 37°C en condiciones de anaerobiosis. Transcurrido el tiempo de incubación se realizaron dos lavados con PBS. Posteriormente se fijaron las muestras con paraformaldehído al 2%, se incubó por 15 minutos con agitación constante y a temperatura ambiente. Se realizaron dos lavados con PBS 0.05% Tween 20. Se incubaron con una solución de glicina 100mM 1 hora a temperatura ambiente y se realizaron dos lavados más con PBS 0.05% Tween 20. A continuación, se les agregó una solución de bloqueo que contenía 0.1% de gelatina de piel de cerdo y 10% de plasma humano descomplementado. Se incubó durante toda la noche a  4°C. Al día siguiente se realizaron dos lavados con PBS 0.5% Tween 20. Se añadió el anticuerpo primario anti-LL-37 a los pozos de la placa de las condiciones indicadas; en una dilución 1:500 con PBS 0.05% Tween 20 con 10% de plasma humano descomplementado y se dejó en incubación por 1 hora a temperatura ambiente. Después de la incubación, se realizaron dos lavados con PBS 0.05% Tween 20. A todos los pozos se les añadió el anticuerpo secundario; anti-IgG de conejo conjugado a Alexa Fluor 594, el cual se diluyó 1:1500 en PBS 0.05% Tween 20 y  se dejó en incubación durante 1 hora. Se realizaron lavados en las condiciones anteriormente mencionadas. Posteriormente, se realizó una tinción con el colorante Hoechst 33342 15 μg/mL, se incubó por 15 minutos a temperatura ambiente y se realizaron dos lavados con las condiciones establecidas anteriormente. A continuación, se realizó el montaje de las muestras con ProLong Gold en portaobjetos limpios. Finalmente, las muestras se observaron en el microscopio confocal.

CONCLUSIONES

Al examinar las muestras en el microscopio confocal, se observó que el péptido antimicrobiano KR-20 interaccionó con la membrana celular y nuclear del trofozoíto de Trichomonas vaginalis. Demostrando, que el péptido antimicrobiano KR-20 tiene propiedades antimicrobianas contra el parásito.    Cabe mencionar que gracias a la estancia del verano de investigación me fue posible fortalecer mis conocimientos académicos, así como adquirir nuevas habilidades y destrezas teórico-prácticas, que me serán de gran utilidad durante el desarrollo de mi carrera profesional.

Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

DIVERSIDAD MORFOLóGICA DE CRUSTáCEOS DECáPODOS EN ARROYOS Y CUEVAS DE BELICE

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DIVERSIDAD MORFOLóGICA DE CRUSTáCEOS DECáPODOS EN ARROYOS Y CUEVAS DE BELICE

Carreon Moreno Maria Fernanda, Instituto Tecnológico de Colima. Estrada Peña Luz Cristina, Instituto Tecnológico de Colima. Puente Castellanos Luz Beatriz, Instituto Tecnológico de Colima. Asesor: Dr. Luis Manuel Mejia Ortiz, Universidad de Quintana Roo

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los crustáceos son organismos que constituyen uno de los principales grupos zoológicos de mayor éxito del mar tanto por las especies vivientes registradas tanto como por la diversidad de hábitat que colonizan. Existe una gran variedad de estos organismos tanto en ambientes costeros, como en cuevas, cenotes, ríos y algunos arroyos presentando alguna serie de adaptaciones durante su desarrollo y modificaciones en su metabolismo, desarrollo, morfología taxonómica y pigmentación. El objetivo del presente trabajo es analizar la diversidad morfológica de los crustáceos decápodos recolectados en arroyos y cuevas de Belice de las distintas zonas estudiadas. Hay pocas especies registradas en Belice de decápodos de agua dulce, las principales especies son del género Macrobrachium encontradas en algunas cuevas. De los sitios muestreados se encontraron cinco poblaciones de camarones de agua dulce de este género con desarrollo larvario.  Los datos fueron obtenidos de cuevas y arroyos de Belice un pequeño país situado en América Central, con costas en el Mar Caribe.  Los sitios de las poblaciones recolectadas fueron: ·         AGUADA CREEK: Arroyo, población exterior sin adaptaciones.  ·         ST. HERMANN: Cueva, población sin adaptaciones. ·         ACTUN CHAPAT: Población ya descrita, especie Macrobrachium catonium con adaptaciones. ·         CAMPUS, UB: Arroyo Central Farm, población sin adaptaciones. ·         STATION LAS CUEVAS: Cueva, población con adaptaciones.

METODOLOGÍA

De acuerdo a los datos, se realizaron una serie de cálculos en el Software Microsoft Excel para obtener las proporciones de cada población. Posteriormente se analizaron dichas proporciones con un análisis de varianza (ANOVA) del primer y segundo pereiópodos mediante el Software Statgraphics, en donde se obtuvieron como resultado un gráfico, una tabla, así como una medida de confianza de Fischer LSD, en donde se muestran las diferencias significativas entre las poblaciones. Además de obtener una tabla de homogeneización entre los cinco grupos, un gráfico de cajas y bigotes, estas indican mediante cuartiles valores mínimos y máximos de los datos así como la variabilidad fuera de los cuartiles superior e inferior. Dentro de este Software se generaron métodos jerárgicos de análisis de Cluster que tiene como objetivo agrupar Clusters para formar un nuevo o bien separar alguno ya existente  para dar origen a otros dos, de tal forma que, sucesivamente se va efectuando este proceso de aglomeración o división, se minimice alguna distancia o bien se maximice alguna medida de similitud.

CONCLUSIONES

Dentro de los resultados se obtuvo que la población recolectada de la cueva Actun Chapat es la población que muestra mayor diferencia significativa en relación con las otras especies estudiadas. Esta población se encuentra actualmente ya descrita, recibiendo el nombre de Macrobachium catonium, la cueva se encuentra en el extremo norte de la meseta de vaca y aunque no ha sido completamente explorada, se estima que tiene unos 2 km de longitud. Esta especie se destaca por presentar adaptaciones, una de sus características morfológicas es su falta de pigmento, excepto la mancha ocular que puede ser de color púrpura a negro.   La población del arroyo Aguada Creek muestra una similitud en sus proporciones morfológicas con la población encontrada en la cueva Station Las Cuevas. La población recolectada del arroyo Aguada Creek, es una población que no muestra adaptaciones en sus características morfológicas, de lo contrario, la población encontrada en Las Cuevas, son camarones que si presentan dichas adaptaciones. En similitud, estas poblaciones viven con una diferencia de temperatura de 0.2°C entre ellas. En ubicación, estas dos poblaciones se encuentran relativamente cerca una con la otra, por lo que se podría explicar que debido a los cambios esporádicos que ha sufrido Belice por medio de las precipitaciones y el tipo de suelo kárstico estas poblaciones en algún tiempo estuvieron juntas y debido a su separación geológica una parte tendió a adaptarse para poder vivir en el nuevo lugar situado.    Otra relación que se encuentra debido a las características de proporciones morfológicas es entre la población de la cueva St. Hermann y la población del arroyo Campus UB. Una característica entre ellas es que poseen una semejanza en su pigmentación y tamaño. Además, la distancia entre una y otra población es relativamente cerca, por lo que de igual manera que la relación Aguada Creek-Las Cuevas, se presenta la hipótesis de que estas poblaciones fueron separadas por cambios geológicos esporádicos en el suelo, por medio de cuencas que al fraccionarse en micro cuencas se realizó una distribución de poblaciones.   Como muestra el dendograma del segundo pereiópodo, existe una aglomeración entre las relaciones Aguada Creek-Las Cuevas y St. Hermann-Campus UB, por lo que se explica que estas cuatro poblaciones muestran similitudes entre sí, sin embargo, la población de Station Las Cuevas, muestra mayor diferencia morfológica entre el resto de esta aglomeración, pero no lo suficiente como para no formar parte de esta, a pesar de que es la única que presenta adaptaciones morfológicas.    En general, la población Macrobachium catonium es la que presenta mayor diferencia significativa al resto de las poblaciones, por lo que la relación entre las demás puede ser debida a la ubicación en la que se encuentran.    

Asesor: Dr. Adrián Ochoa Terán, Instituto Tecnológico de Tijuana

SíNTESIS DE ANáLOGOS DE LINEZóLIDA CON ACTIVIDAD BIOLóGICA POTENCIAL

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SíNTESIS DE ANáLOGOS DE LINEZóLIDA CON ACTIVIDAD BIOLóGICA POTENCIAL

Estrada Zavala Edgar Alonso, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Adrián Ochoa Terán, Instituto Tecnológico de Tijuana

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las enfermedades infecciosas son un estado patológico, que representan causas importantes de morbilidad y mortalidad a nivel mundial, siendo  causadas mayormente por bacterias debido a medidas insuficientes de higiene sanitaria. A día de hoy la resistencia bacteriana es un fenómeno creciente caracterizado por una refractariedad parcial o total de los microorganismos al efecto del antibiótico al que anteriormente era sensible, de modo que tratamientos habituales se vuelven ineficientes y las infecciones persisten y pueden trasmitirse con facilidad mayor provocando una amenaza importante en salud pública. Entre las bacterias que han presentado resistencia se encuentran Staphylococcus aureus, Escherichia coli, entre otras. Una alternativa para dichas bacterias resistentes es Linezólida que fue el primer antibiótico comercial que contiene el anillo 1,3-oxazolidin-2-ona, sintetizada en 1990 en los laboratorios Pharmacia. Es utilizada principalmente contra bacterias Gram (+) multirresistentes como Staphylococcus aureus meticilina resistente, Staphylococcus entre otras, sin embargo algunas de estas ya están presentando resistencia a dicho antibioltico por esto se plantea hacer análogos de estos con la finalidad de evaluarlos contra diferentes microorganismos patógenos.

METODOLOGÍA

  Síntesis de α-(N,N-dibencilamino)trimetilsililoxicianhidrinas  par diasteromérico (S,S = sin y S,R = anti) En un matraz bola de 250 mL a 0°C con atmosfera de argón se añadieron 1.5 eq de MgBr2, posteriormente se adicionaron 125 mL de DCM seco,  se agregaron 3 g de (S)-2-(N,N-dibencilamino)-1-propanal y por último se añadieron 2 eq de TMSCN y se retiró el flujo de argón y se dejó en agitación durante 2 h. Posteriormente se hicieron extracciones en un embudo de separación con solución salina. Síntesis de α-(N,N-dibencilamino)aminoalcoholes En un matraz bola de 250 mL, a 0°C, se adiciono 2.2 eq de LiAlH4, posteriormente se añadió 125 mL de THF seco, por último se añadieron 4 g de α-(N,N-dibencilamino)trimetilsililoxicianhidrinas  y se dejó por 8 h; la reacción se detuvo mediante la adición gota a gota  de KOH al 10%, y posteriormente se filtró. Síntesis de 1,3-oxazolidin-2-ona En un matraz bola de 250 mL con atmosfera inerte a 0°C, se colocaron los α-(N,N-dibencilamino)aminoalcoholes  en 100 mL de DCM y se agitó durante 8 h. Finalmente, se añadió una solución de 20 mL de NaHCO3 y 20 mL de DCM. La fase orgánica se lavó con H2O, una solución saturada de NaCl. Se secó con Na2SO4, se filtró y concentró el solvente a presión reducida para obtener el producto crudo que se purificó por cromatografía en columna. Síntesis de 4-(2-flúor-4-nitrofenil)morfolina En un matraz bola de 250 mL se pusieron 150 mL de AcOEt, posteriormente se añadieron 1.1 eq de morfolina, después se adicionó 1 eq de  DIPEA y por último se añadieron 4.87 mL de 3,4-difluornitrobenceno y se dejó en agitación durante 7 días. Síntesis de 3-fluoro-4-morfolinanilina En un matraz bola de 250 mL se pusieron 100 mg de Pd/C posteriormente se adiciono 150 ml de THF seco, y se puso en  un ambiente  de Hidrogeno, dicha reacción se dejó durante 12 h. Posteriormente se purifico por columna. Síntesis de 4-(4-bromo-2-fluorofenil)morfolina En un matraz de 2 bocas de 250 mL se adicionó 0.55 eq  de CuBr posteriormente se agregaron 10 mL HBr y se puso en reflujo, enseguida se puso en un vaso de precipitado que estaba sobre un baño de hielo 1 eq de NaNO2 ,disuelta en  H2O posteriormente se añadió 5 mL de HBr esto se vertió en otro vaso de precipitado que  contenía 3-fluoro-4-morfolinanilina y se esperó hasta que se disolviera, esto se añadió al matraz de 2 bocas que contenía CuBr con HBr, se dejó en agitación y  reflujo durante 3 h. Se añadió NaOH 3M para parar la reacción, se filtró con zeolita, y se le hicieron lavados con AcOEt y DCM. Síntesis de análogos de Linezólida: ((S)-5-((S)-1-(dibencillamino)etil)-3-(3-fluoro-4-morfolinofenil)oxazoli-din-2-ona y R)-5-((S)-1-(dibencillamino)etil)-3-(3-fluoro-4-morfolinofenil)oxazoli-din-2-ona En un matraz de 2 bocas  de 100 mL, con atmosfera de argón,  se pusieron 0.6 g de 1,3-oxazolidin-2-ona, 1.1 eq de 4-(4-bromo-2-fluorofenil)morfolina, 1.7 eq de K2CO3 y 0.05 eq de CuI, se  añadieron 125 mL de Tolueno seco, enseguida se puso en agitación y a reflujo y se le añadió 1.1 eq de EDTA, se quitó la atmosfera de argón y se dejó por 3 días. Posteriormente se filtró con zeolita. Síntesis de amino oxazolidinonas: (S)-5-((S)-1-aminoetil)-3-(3-fluoro-4-morfolinfenil)oxazolidin-2-ona  y  (R)-5-((S)-1-aminoetil)-3-(3-fluoro-4-morfolinfenil)oxazolidin-2-ona En un matraz bola de 250 mL con atmosfera de argón se colocó ((S)-5-((S)-1-(dibencillamino)etil)-3-(3-fluoro-4-morfolinofenil)oxazoli-din-2-ona (0.47g) y 100 mg de Pd/C en 150 mL de metanol. Después se agregaron cuatro gotas de ácido acético y se cambió la atmosfera inerte por hidrogeno dejando la mezcla de reacción por 6 h. Al término del tiempo indicado se filtró, se secó con sulfato de sodio. Acetilación de los amino oxazolidinonas N-((S)-1-((R)-3-(3-fluro-4-morfolinofenil)-2-oxooxazolidin-5-il)etil) acetamida y N-((S)-1-((S)-3-(3-fluro-4-morfolinofenil)-2-oxooxazolidin-5-il)etil) acetamida En un matraz bola de 250 mL con atmosfera de argón a -78°C se colocó cloruro de acetilo 5 mL en 5 mL de DCM después se agregó gota a gota (S)-5-((S)-1-aminoetil)-3-(3-fluoro-4-morfolinfenil)oxazolidin-2-ona (0.02 g) y se dejó en agitación constante por 30 min. Posteriormente se añadieron 4 mL de TEA en 70 mL de DCM a temperatura ambiente por 30 min. Finalmente se agregaron 30 mL de H2O de DCM.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano adquirí conocimiento mayor en área de la química orgánica, además de una mayor práctica en el uso de equipos y materiales en el laboratorio. También se  obtuvieron 6 análogos de linezólida los cuales fueron caracterizados por Resonancia Magnética Nuclear 1H y 13C, estos serán evaluados en un futuro contra microorganismos patógenos de interés biológico.

Asesor: Dr. Luisa Alondra Rascón Valenzuela, Universidad de Sonora

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE, ANTIPROLIFERATIVA Y FRACCIONAMIENTO DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE STEPHANOMERIA PAUCIFLORA

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ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE, ANTIPROLIFERATIVA Y FRACCIONAMIENTO DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE STEPHANOMERIA PAUCIFLORA

Estrella Verdugo José Isaac, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Luisa Alondra Rascón Valenzuela, Universidad de Sonora

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El cáncer es uno de los principales problemas que aquejan a la salud humana, y a pesar de que existen una gran cantidad de terapias químicas y físicas un inconveniente permanece en la mayoría, la inespecificidad de las terapias hace que sea menos efectivas y en muchos casos no funcionen en algunos pacientes. así pues los metabolitos secundarios presentan una fuente alterna de medicamentos en los cuales se podría encontrar este fármaco que sea lo suficientemente específico como para lograr combatir el cáncer de manera eficaz.  Si bien los compuestos naturales no son necesariamente menos tóxicos o más efectivos que sus contrapartes sintéticas. La investigación de las propiedades anticancerígenas de diversos extractos y metabolitos, ha rendido frutos en el pasado; ejemplo de ello es el fármaco paclitaxel, muy utilizado en el tratamiento de varios tipos de cáncer. Stephanomeria pauciflora una especie endémica de Sonora que se postula como una planta con posible actividad antiproliferativa y potencial antioxidante, esto se puede deber a que pertenece a la familia Asteraceae , la cual tiene una gran cantidad de especies medicinales comprobadas

METODOLOGÍA

Se realizó la colecta de la planta Stephanomeria pauciflora en la localidad de Hermosillo, Sonora, Mexico. se tomaron las partes aéreas de dicha planta y se dejó secar, posteriormente se trituraron estas partes aéreas. del triturado se obtuvo un extracto a partir de etanol al 70%. El extracto fue filtrado y secado, a partir del extracto ya seco se realizaron alícuotas con dimetilsulfóxido a diluciones seriadas de concentraciones 200, 100, 50, 25 µg/mL.   Por otra parte a la par se prepararon células de la línea HeLa ( Células de cáncer cérvico uterino humano); Las células fueron descongeladas  e incubadas en un medio DMEM enriquecido con suero bovino al 5% durante 24 horas. A partir de estas células se realizaron los procedimientos necesarios para llevar a cabo el ensayo MTT que nos permite determinar el posible efecto citotóxico de una sustancia determinada en una línea celular cancerosa. Este ensayo se basa en la reducción metabólica del reactivo MTT, reacción enzimática llevada a cabo por la enzima succinato deshidrogenasa, permitiendo determinar la funcionalidad mitocondrial de las células tratadas.    Así mismo se llevaron a cabo ensayos para medir la actividad antioxidante como el FRAP y DPPH que fueron llevados a cabo con diluciones del extracto etanólico, estos ensayos permitieron evaluar el comportamiento de los metabolitos secundarios presentes frente a los radicales libres, por medio de los mecanismos SET y HAT; los cuales son los principales mecanismos de reducción de radicales. Juntamente se llevaron a cabo pruebas fitoquímicas sencillas para determinar el perfil del extracto así como sus principales metabolitos, se realizaron pruebas para Fenoles, Flavonoides, Cumarinas, Taninos, Saponinas, Alcaloides, Esteroides y Terpenos. Los resultados obtenidos en los distintos ensayos fueron correlacionados y analizados junto con imágenes de la morfología de las células HeLa estimuladas con extracto.  

CONCLUSIONES

Los resultados obtenidos en actividad antiproliferativa en células de carcinoma humano de cérvix HeLa y junto con el perfil fitoquímico nos permiten concluir que los metabolitos presentes en Stephanomeria pauciflora pertenecen a los compuestos fenólicos, lo que se complementa con una moderada actividad antioxidante. Sin embargo, es necesario realizar más estudios que nos permitan identificar de una manera más específica los metabolitos , que serían de utilidad en la búsqueda de nuevas moléculas contra el cáncer.

Asesor: Dr. Osvaldo Eric Ramírez Bravo, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PRESENCIA DE PARáSITOS EN ANIMALES DE VIDA SILVESTRE

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PRESENCIA DE PARáSITOS EN ANIMALES DE VIDA SILVESTRE

Eutimio Rodriguez Noel, Universidad Autónoma de Guerrero. Asesor: Dr. Osvaldo Eric Ramírez Bravo, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El aumento de los asentamientos de la población humana y la ganadería intensiva, están generando importantes consecuencias en términos de pérdida de hábitat en los animales de vida silvestre nativos de la región además de contaminación con agentes patógenos en los ecosistemas con potencial para generar impactos negativos en la biodiversidad. Debido en gran parte a esto, desde hace algunos unos años hay cada vez mayor interés y estudios sobre los parásitos que afectan a los animales silvestres, ya que  la aparición de parásitos y enfermedades nuevas pueden afectar a los animales silvestres; además de que la salud de los animales domésticos y del humano, así como la calidad de los alimentos de origen animal pueden verse afectados de forma negativa por este intercambio de parásitos.   Una de las mayores problemáticas que se presentan hoy en día es el intercambio de endoparásitos y ectoparásitos entre animales de vida silvestre y animales domésticos ya que debido a la urbanización y ganadería intensiva, empiezan a compartir lugares en común por lo que pueden transmitirse parásitos entre ellos, debido a esto en el verano de investigación se pretende estudiar la presencia de diversos parásitos en las excretas de animales de vida silvestre  y compararlos con los parásitos, ya identificados en diversos estudios, de anímales domésticos.

METODOLOGÍA

Se realizaron transectos en zonas semiáridas del centro de México conocido como cerro colorado  y es adyacente a la Reserva de la Biosfera de Tehuacán-Cuicatlán, esto con la finalidad  de llevar a cabo la recolección de diversas muestras de heces de animales de vida silvestre como coyotes (Canis latrans), gato montés (Lynx rufus) y zorra gris (Urocyon cinereorgenteus) para después llevar a cabo su estudio microscópico a 10X en el ecocampus valsequillo de la BUAP, para ello se utiliza el método de Willis que consistente en la flotación con una solución de cloruro de sodio con una densidad de 1.2, esto con la finalidad de observar de manera directa al microscopio para detectar huevos y oocitos.

CONCLUSIONES

Durante mi estancia en el verano he logrado adquirir conocimientos teóricos y prácticos sobre  la importancia de la biodiversidad así como también sobre la conservación de la misma, además de acuerdo con los resultados obtenidos hasta el momento, se han encontrado diversos huevecillos de especies como trichuris trichiura, Oxyuris equi, Strongylus spp y algunos parásitos en fase larval todavía por identificar.

Asesor: Dr. Lorena Martínez de la Cruz, Centro de Investigación en Ciencia Aplicada y Tecnología Avanzada (IPN)

ACTIVACIóN Y CARACTERIZACIóN DE CARBóN RESIDUAL PARA APLICACIóN EN SUPERCAPACITORES.

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ACTIVACIóN Y CARACTERIZACIóN DE CARBóN RESIDUAL PARA APLICACIóN EN SUPERCAPACITORES.

Falcón Sánchez Guillermo Antonio, Instituto Politécnico Nacional. Asesor: Dr. Lorena Martínez de la Cruz, Centro de Investigación en Ciencia Aplicada y Tecnología Avanzada (IPN)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El alto consumo de energía proveniente de combustibles fósiles, en México más del 73% de la energía eléctrica proviene de estos, ha ocasionado severos problemas medioambientales, por lo que se ha implementado el uso de energías renovables, como la energía eólica, solar o hidráulica, en busca de la implementación de dichas energías el desarrollo tecnológico mundial nos exige con mayor frecuencia, componentes electrónicos de mayor eficiencia, mejor rendimiento y menor consumo de energía. La minería, es el tercer factor en importancia económica en México, tan solo en 2018 hubo una producción de 6,971,434 toneladas de carbón mineral en todo el país, por eso es importante que se aprovechen todos los recursos que de ella se obtiene para la búsqueda de las necesidades a la que nos enfrenamos día con día. Dadas estas circunstancias, se buscará implementar material residual de minas carboníferas del norte del país en dispositivos que permitan el avance en circuitos electrónicos. Para dicha activación se usó como agente químico; hidróxido de potasio (KOH) diluido, en una proporción de 3 a 1. La mezcla obtenida se colocó en la estufa a 110 grados Celsius por una hora. Posteriormente se mantuvo en un desecador por veinticuatro horas. La activación continúo un tratamiento térmico de la muestra en un horno tubular a 750 grados Celsius con un flujo de 500 mililitros por minuto de Nitrógeno, por dos horas.

METODOLOGÍA

Se activaron químicamente muestras de carbón residual de dos fases diferentes y posteriormente se caracterizaron. Para la activación de las muestras se usó como agente químico; hidróxido de potasio (KOH) diluido. Después de la activación química continúo un tratamiento térmico de la muestra a 750 °C en una atmósfera de nitrógeno. Las muestras se caracterizaron por medio de las técnicas de difracción de rayos X (DRX), espectroscopia infrarroja (IR) y análisis termogravimétrico (TGA); previamente se consultó literatura para conocer los posibles parámetros a obtener en las caracterizaciones

CONCLUSIONES

Se logró obtener muestras activadas de carbón residual, las cuáles se caracterizaron por medio de DRX, IR y TGA. Los resultados obtenidos son comparables con los reportados en la literatura. Al ser un trabajo extenso y por las complicaciones de la activación se necesitó llevar a cabo más de un ensayo de activación

Asesor: Dr. Antonio Gonzalez Rodriguez, Universidad Nacional Autónoma de México

VARIACIONES DEL GEN 2T14 Y 2T33 DE LAS ESPECIES DE ENCINOS EN UN GRADIENTE ALTITUDINAL DEL VOLCáN DE TEQUILA, JALISCO

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VARIACIONES DEL GEN 2T14 Y 2T33 DE LAS ESPECIES DE ENCINOS EN UN GRADIENTE ALTITUDINAL DEL VOLCáN DE TEQUILA, JALISCO

Felix Berumen Reyna Dayhana, Universidad de Sonora. Asesor: Dr. Antonio Gonzalez Rodriguez, Universidad Nacional Autónoma de México

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los encinos (género Quercus) son un clado modelo importante, dado su dominio ecológico, notable diversidad y por el crecimiento de los recursos de datos filogenéticos, genómicos y ecológicos. Los encinos estudiados en este proyecto se ubican en el volcán de Tequila, Jalisco, los cuales se distribuyen desde los 1,530 hasta los 2,730 msnm, presentando distintas variaciones a nivel molecular y observables fenotípicamente debido a los diferentes factores abióticos en los que se encuentran, uno de los cuales es la diferencia en temperatura y precipitación de acuerdo a la altitud, experimentando condiciones más estresantes los encinos que se encuentran en bajas altitudes. La diversidad de especies de encinos en un mismo lugar incrementa el fenómeno de hibridación, esta tiene como ventaja el aumento de la variación genética, por lo tanto, enfocados a los dos genes expresados ante el estrés hídrico (2T14 y 2T33), se sabe que al compartir esa información genética entre las especies de encinos se aumenta una resistencia a ambientes más secos que les beneficiará a futuro. La capacidad de las especies para hacer frente al cambio climático depende de las características propias de la especie y de las del territorio, por lo cual el conocer las variaciones que están sufriendo estos individuos ayuda a predecir si estas tendrán la capacidad para enfrentarse a nuevos cambios de temperatura y escasez de agua, además de comprender la importancia de la hibridación e intercambio genético que se da entre los individuos que habitan a lo largo de un gradiente altitudinal así como observar el efecto de la selección natural en los individuos de las altitudes más bajas.

METODOLOGÍA

Se colectaron un total de 96 muestras de encinos en 7 transectos diferentes cada 200 m de altitud a lo largo del gradiente altitudinal en el volcán de Tequila. El muestreo incluía 9 especies, de las cuales se colectaron 2 individuos por especie encontrada en cada transecto. Además, se realizó una estimación de la estructura poblacional de las especies representadas con gráficas. Las muestras colectadas se llevaron al laboratorio para la extracción de ADN, donde después se llevó cada una al NanoDrop para analizar la cantidad, pureza y calidad del ADN que se extrajo. Para verificar la extracción del ADN se realizó una electroforesis. Posteriormente se hicieron diluciones de los Primers de ambos genes (6+ y 7+) a 5pmol, y las muestras de ADN se diluyeron a 10ng/μl. Los primers son de dos genes expresados ante estrés hídrico 2T14 con 827pb que codifica para un precursor enzimático que es el Tiazol biosintético y 2T33 de 824pb que codifica para una proteína 80 de choque térmico, que ayudan a proteger las células del estrés al que se enfrentan. Después se realizaron varios PCR para amplificar dichas regiones de interés, el gradiente al que se sometieron las muestras fueron diferentes para varios grupos ya que había presencia de bandas inespecíficas que podrían afectar al momento de secuenciarlas. Se realizaron electroforesis de todas las muestras para verificar que se hayan amplificado. Una vez que las muestras se observaron claramente en la electroforesis se llenó la placa para mandar a secuenciar con 95 muestras de 20μl de cada primer para ambos genes y 50μl de ADN en otra placa, finalmente se mandaron a secuenciar 95 muestras a la empresa Macrogen USA. Después se recibieron los resultados de las secuencias donde se pudo observar que muestras serán las elegidas para realizar el análisis, se tomaron en cuenta solo las que tenían buena calidad en la lectura de pares de bases, así como la cantidad de bases secuenciadas. Para realizar los análisis se utilizaron diferentes programas como MEGA (Molecular Evolutionary Genetics Analysis), Clustal X2 y PhyDE. Con los cuales se observaron cambios y similitudes entre las secuencias que después se pudieron visualizar mediante arboles filogenéticos.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se lograron adquirir conocimientos teóricos y prácticos de ecología molecular la cual se aplicó en evolución de encinos, poniendo en práctica técnicas comúnmente utilizadas en laboratorios de biología molecular como extracción de ADN, PCR, electroforesis y secuenciación de las muestras colectadas en campo. En los análisis mediante un árbol filogenético se observaron dos grandes clados que exhiben una baja diferenciación entre especies debido a la alta compatibilidad e intercambio genético que hay entre los individuos del grupo, estos se dividen en encinos rojos y encinos blancos, además se observaron diferencias en las secuencias, como compatibilidad entre cambios de bases en los individuos. Sin embargo, al ser un extenso trabajo aún se encuentra en avances preliminares ya que para profundizar más en los resultados obtenidos en este proyecto se necesitan hacer mayores análisis con programas más avanzados, los cuales se harán más adelante. Se espera encontrar mayores resultados que efectivamente muestren ese intercambio genético que les permitirá tener una mayor adaptación ante factores abióticos como lo es el cambio climático.

Asesor: Dr. Juan Carlos Fierro Gonzalez, Instituto Tecnológico de Celaya

SíNTESIS Y CARACTERIZACIóN DE NIO/ZRO2

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SíNTESIS Y CARACTERIZACIóN DE NIO/ZRO2

Félix Monzón Martín David, Universidad Autónoma de Sinaloa. Asesor: Dr. Juan Carlos Fierro Gonzalez, Instituto Tecnológico de Celaya

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La zirconia es un material cerámico el cual ha sido usado en catálisis, estructuras cerámicas, técnicas de atomización térmicas y de plasma. Es conocida por su estabilidad térmica, resistencia a choques térmicos y un coeficiente de expansión térmica convenible. En catálisis la zirconia es usualmente utilizada como soporte en conjunto con una fase activa, por general metales de transición entre los cuales destaca el níquel que puede ser preparado en condiciones que no requieren cuidados especiales de síntesis y de reducción. Pueden obtenerse fácilmente a través de la reducción del óxido de níquel. Estas facilidades y su relativo bajo costo convierten este elemento en una de las alternativas más viables para catalizar las reacciones.

METODOLOGÍA

Para la síntesis de ZrO2 se usó el método de precipitación. El procedimiento consistió en adicionar una solución acuosa 1 M de NH4OH (Karal) a otra solución 0.3 M de ZrO(NO3)₂(Sigma-Aldrich) gota a gota a temperatura ambiente hasta alcanzar el pH de 10.0. En ese punto se formó un precipitado blanco, el cual se dejó envejecer por 1 hora, posteriormente fue filtrado y lavado con agua desionizada. El sólido obtenido fue secado a 100 °C durante 5 horas y calcinado en aire a 500 °C por 5 horas. Las muestras de níquel soportado en ZrO2 fueron preparadas por el método de impregnación húmeda. En la síntesis el soporte se puso en contacto con una solución acuosa de Ni(NO3)₂•6H₂O (Sigma-Aldrich) a temperatura ambiente. La mezcla se dejó bajo constante agitación por 1 hora. La concentración de la solución fue calculada para obtener muestras con 1 % p/p de carga de níquel. Las muestras impregnadas fueron secadas a 100 °C por 5 horas y calcinadas a 500°C durante 5 horas. Las muestras de NiO/ZrO2 y ZrO2 se caracterizaron con un espectrofotómetro de UV Vis Evolution™ 300 utilizando la celda harricks Praying Mantis de reflectancia difusa y un ChemBET TPR/TPO 3000 de Quantachrome instruments.

CONCLUSIONES

Los resultados obtenidos mediante UV-Vis muestran la presencia de ZrO2 monoclínica y tetragonal, la cual después de ser impregnada con Ni muestra pequeños cambios en su estructura, los que se confirman con los resultados obtenidos en BET, presentándose en un cambio de una mayor área superficial a una menor del ZrO2 al NiO/ZrO2 pasando de 70.37 a 67.5 m2/g. respectivamente. Finalmente con la prueba de reducción a temperatura programada (TPR) se encontraron dos picos a 331 y 449 °C la cual sugiere la presencia de Ni+2 y Ni+3 . Los datos sugieren que la síntesis de los materiales fue exitosa.  Sin embargo, aún hace falta caracterizarlos mediante difracción de rayos-X.

Asesor: Dr. Eulogio Orozco Guareño, Universidad de Guadalajara

CAPTACIóN DE IONES METáLICOS PB (II), CD (II) Y NI (II) EN SOLUCIóN ACUOSA A TRAVéS DE UN HIDROGEL TERPOLIMéRICO ENTRECRUZADO CON LIGNINA MODIFICADA.

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CAPTACIóN DE IONES METáLICOS PB (II), CD (II) Y NI (II) EN SOLUCIóN ACUOSA A TRAVéS DE UN HIDROGEL TERPOLIMéRICO ENTRECRUZADO CON LIGNINA MODIFICADA.

Fernández Lam Sukey Haydeé, Instituto Tecnológico de Sonora. Asesor: Dr. Eulogio Orozco Guareño, Universidad de Guadalajara

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los metales pesados a través de tiempo se han considerado como tóxicos, esto es debido a que son materiales no biodegradables y son bioacumulativos en los seres vivos. Uno de los problemas ambientales que más preocupa a la sociedad es la contaminación del agua por metales pesados. Por lo cual, se han empleado distintos métodos para remover estos metales del agua, uno de ellos es el uso de los hidrogeles. Los hidrogeles son materiales de cadenas poliméricas entrecruzada que al entrar en contacto con el agua tiene la capacidad de aumentar cientos de veces su tamaño hasta llegar a un equilibrio. Estos materiales tienen distintos usos como tejidos para tratamientos de quemaduras, pañales, agricultura, dosificación de fármacos, adsorción de iones metálicos, etc. Debido a sus propiedades, estos materiales han llamado la atención para la remoción de iones metálicos en aguas residuales, siendo utilizados como método de remediación, por lo que durante el verano de investigación se evaluó la capacidad de remoción de un hidrogel ya sintetizado, para los iones metálicos Pb (II), Cd (II) y Ni (II) con un tamaño de partícula definida.

METODOLOGÍA

Para la modificación del entrecruzante del hidrogel se realizó una solución de lignina en agua destilada, la cual se agitó para después tomar una alícuota y ser colocada en un baño de agua fría (0 - 4°C). Este se agitó y se agregó cloruro de acriloílo en agitación. Posteriormente, se le adicionó THF y se agitó hasta estar la solución homogénea; se dejó en reposo y se introdujo el precipitado a un horno a 55°C. Al tener la lignina modificada, se procedió a la síntesis de los hidrogeles. Esta se disolvió en agua bidestilada, agregando los monómeros AM/AAc/AMPS. La solución se transfirió a tubos de ensayo, los cuales se agitaron mientras se agregaron los iniciadores (persulfato de potasio y bisulfito de sodio) y la adición de N2(g). Después, se ingresaron en un termoagitador, para posteriormente extraerlos y colocarlos en un horno. Ya seco el material, se lavaron varias veces con agua destilada; estos se vuelven a ingresar al horno. Por último, se molieron en un mortero y se pasaron través de un tamiz hasta obtener un tamaño de partícula de 1000 - 600 µm. Se realizó una cinética de hinchamiento en agua destilada utilizando 0.1 g de xerogel, en la cual, se pesó a distintos intervalos de tiempo hasta llegar al equilibrio fisicoquímico. Después, se realizaron las cinéticas de hinchamiento en soluciones metálicas acuosas de Pb (II), Ni (II), y Cd (II) (concentración de 1000 ppm) de forma individual con pH 4, 5 y 6. En un tiempo determinado el hidrogel se recogió del recipiente y se tomó su peso. Posteriormente, el hidrogel fue devuelto a su recipiente con la solución metálica y se repitió por los lapsos de tiempo establecidos. Posteriormente, para analizar la captación máxima de los iones metálicos se preparó una solución madre para cada metal (1000 ppm), y a partir de esta solución madre se prepararon  soluciones iniciales con un pH 4,5 y 6. Cada solución se puso en contacto con 0.1 g de xerogel en 50 mL de solución metálica, con agitación de 120 rpm por 2 horas a 25°C. Las muestras resultantes fueron filtradas y diluidas para después ser analizadas por espectroscopia de absorción atómica de flama (AAS), para así, obtener las concentraciones finales de las soluciones.

CONCLUSIONES

Durante la estancia de verano se adquirieron los conocimientos teórico - prácticos para la síntesis de un hidrogel y sus aplicaciones, así como el uso de material, equipo y software para el análisis de resultados e interpretación de los datos obtenidos. Este hidrogel utilizado, no solo tiene como finalidad el remover metales, sino también el ser degradado bioquímicamente, por lo que aún no se ha finalizado dicho proyecto. Se comprendió el impacto ambiental que representan los metales pesados presentes en el ambiente, así como la importancia de buscar métodos y nuevas tecnologías que contribuyan a la solución de la problemática ambiental de nuestro país. Como resultados se obtuvo el comportamiento del hinchamiento en agua y soluciones metálicas, en el que se observó un descenso importante al estar en contacto con los iones metálicos Pb (II), Cd (II) y Ni (II); a su vez, se logró obtener el tiempo de equilibrio del hidrogel, para así, establecer el tiempo aproximado en el cual el hidrogel lograría remover la mayor cantidad de iones metálicos posibles, además de establecer la cantidad máxima de remoción por gramo de xerogel.

Asesor: Dr. Magdalena Elizabeth Bergés Tiznado, Universidad Politécnica de Sinaloa

MONITOREO DE PARÁMETROS FISICO-QUÍMICOS DEL AGUA PARA ALIMENTAR UN SISTEMA ACUAPÓNICO PARA LA PRODUCCIÓN DE PECES Y HORTALIZAS

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MONITOREO DE PARÁMETROS FISICO-QUÍMICOS DEL AGUA PARA ALIMENTAR UN SISTEMA ACUAPÓNICO PARA LA PRODUCCIÓN DE PECES Y HORTALIZAS

Figueroa Careaga Aries Berenice, Universidad Politécnica de Sinaloa. Machuca Pérez Mariana Guadalupe, Universidad Politécnica de Sinaloa. Verdugo Méndez Itzel del Rocío, Universidad Politécnica de Sinaloa. Asesor: Dr. Magdalena Elizabeth Bergés Tiznado, Universidad Politécnica de Sinaloa

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La acuaponía es un sistema agrícola sin suelo que combina de forma sinérgica la acuicultura y la hidroponía . El agua es el elemento vital de un sistema acuapónico, es el medio por el cual todos los macro y micronutrientes esenciales se transportan a las plantas, y el medio a través del cual los peces reciben oxígeno. Por lo tanto, es un elemento clave en el cual se deben de tener controlada su calidad mediante parámetros como: oxígeno disuelto (OD), pH, temperatura, salinidad, micro y macronutrientes, cloruros, dureza y alcalinidad del agua. Cada parámetro tiene un impacto en los tres organismos en la unidad (peces, plantas y bacterias), y entender los efectos de cada parámetro es crucial. En el presente trabajo se medirán los parámetros de pH, temperatura, salinidad, cloruros, dureza y alcalinidad en 4 tipos de aguas naturales para evaluar su viabilidad para alimentar un sistema acuapónico.

METODOLOGÍA

Las muestras de agua se tomaron de dos pozos salobres, la red de agua municipal y de una cisterna en el sitio de estudio. Los parámetros de pH, temperatura y conductividad se obtuvieron in situ. Para la determinación de cloruros se utilizó el método de Mohr, el cual utiliza cromato de potasio para indicar el punto final de la titulación de cloruros con nitrato de plata. Para la determinación de alcalinidad se utilizó la norma NMX-AA-036-SCFI-2001, que se basa en la medición de alcalinidad por medio de una valoración de la muestra empleando como disolución un ácido mineral de una fuerte concentración conveniente. Para el análisis de dureza se empleó la norma NMX-AA-072-SCFI-2001, por medio de una valoración de negro de Eriocromo T y ácido etilendiaminotetra-acético para la desaparición de los iones de calcio y magnesio.

CONCLUSIONES

De la presente investigación se concluye que el pozo 2 es el que ha tenido una mayor cantidad de cloruros. El agua de la cisterna un pH mayor a los otros puntos de muestreo. Las temperaturas en los sitios de muestreo no variaron mucho en las semanas de investigación. La salinidad fue distinta en los puntos de muestreo, pero con poca variabilidad entre semanas. De acuerdo a los parámetros medidos se concluye que el agua más viable a utilizar es la de la red municipal.